猪轮状病毒

摘要： 在我国大型规模猪场或家庭农场养殖中,猪轮状病毒是引起猪病毒性腹泻的重要病原体之一。感染压力不大时,通常不表现临床症状,为隐性感染。如果饲养环境发生突变或由于猪病原体感染则可诱发该病的发生,一旦爆发将对猪场造成巨大的经济损失。

摘要： 本研究旨在探讨姜黄素对猪轮状病毒(PRV)感染猪肠上皮细胞(IPEC-J2细胞)的抗病毒作用。以IPEC-J2细胞为试验对象,分别设置阴性对照组、感染PRV(感染复数=0.1)组和感染PRV后姜黄素(20μmol/L)处理组。在感染PRV后观察细胞病变,利用流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)含量,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术和病毒滴度测定法检测PRV在IPEC-J2细胞内的复制与增殖。结果表明:与阴性对照组相比,1)PRV感染导致IPEC-J2细胞病变,显著降低细胞活力(P<0.05),极显著上调细胞内ROS含量(P<0.01);2)姜黄素可显著抑制PRV在细胞内的复制与增殖(P<0.05);3)在PRV吸附细胞阶段添加姜黄素显著抑制了病毒的复制与增殖(P<0.05);4)姜黄素在感染前与PRV直接孵育能显著降低感染后病毒的滴度(P<0.05);5)PRV感染显著提高了细胞内黑色素瘤分化相关基因5、干扰素诱导蛋白44样蛋白抗体和干扰素β的mRNA相对表达量(P<0.05),显著降低了细胞内Toll样受体适配器分子1、线粒体抗病毒信号蛋白和髓样分化因子88的mRNA相对表达量(P<0.05),而添加姜黄素能显著降低或提高这些受病毒影响的免疫相关因子的表达(P<0.05)。综上所述,本研究证实姜黄素可抑制PRV对IPEC-J2细胞的感染与复制,可为预防和治疗仔猪病毒性腹泻提供重要的参考。

摘要： 本试验的目的在于建立可同时检测猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪轮状病毒(RV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的多重PCR检测方法。试验设计并合成了4对特异性引物,对样品中的PRV,RV,TGEV和PEDV进行了多重PCR扩增。结果显示,该方法可同时扩增出PRV(497 bp),RV(1356 bp),TGEV(238 bp)和PEDV(610 bp)的特异性目的片段,而对PPV,PCV,PRRSV和HCV的PCR扩增结果均为阴性。利用建立的多重PCR检测方法和单项PCR对60份临床病料进行检测。结果显示,两者的总符合率为95.0%。表明建立的多重PCR检测方法具有特异、快速、准确的特点,可用于上述4种病毒的早期鉴别诊断及大规模的流行病学调查。

摘要： 2021年对猪场主要疾病进行抗原、抗体监测与检测,结果表明:猪流行性腹泻病毒、猪蓝耳病病毒、猪德尔塔病毒、猪圆环病毒3型、猪轮状病毒检出率在增加,有暴发的风险。主要疾病的整体抗体水平虽然相对较理想,但60~90日龄猪、120~160日龄猪、后备母猪阶段还有很大提高空间,此外猪蓝耳病、猪伪狂犬病、猪流行性腹泻等疾病的免疫控制仍需要加强。

摘要： 轮状病毒(rotavirus,RV)是婴儿和动物急性胃肠炎的主要病因。病毒通过粪口途径传播,破坏小肠肠细胞。RV介导的损伤以绒毛缩短、微绒毛稀疏、不规则及固有层单核细胞浸润为特征。有助于腹泻发展的几种机制,包括肠细胞破坏导致的吸收不良、绒毛缺血、受感染上皮细胞释放血管活性物质的神经调节。此外,RV非结构蛋白4(NSP4)作为肠毒素和分泌激动剂诱导年龄和剂量依赖性腹泻反应,表现为刺激钙依赖性细胞通透性,破坏上皮屏障的完整性。

摘要： 为研究佩兰对轮状病毒引起的仔猪腹泻的治疗效果,将40头仔猪平均随机分为4个处理组,分别为轮状病毒对照组、佩兰挥发油低剂量组、中剂量组和高剂量组.于32日龄时,对佩兰挥发油低、中、高剂量组仔猪分别饲喂25 mg/kg/d、50 mg/kg/d、100 mg/kg/d剂量的佩兰挥发油饲料.试验结果表明:使用低、中、高剂量的佩兰挥发油对轮状病毒引起的仔猪腹泻具有明显的保护作用.低、中、高剂量组与病毒感染对照组相比,人工感染轮状病毒后,仔猪腹泻指数均表现差异显著,这说明佩兰挥发油对仔猪感染轮状病毒引起的腹泻有较好的疗效.

摘要： 为了解猪轮状病毒(PoRV)VP7蛋白的生物信息学信息,运用Expasy-ProParam、YinOYang-1.2、TMHMM-2.0、ABCpred和IEDB等软件,预测分析PoRV临床分离株GZAS2020和疫苗株NX VP7蛋白的基本理化性质、结构功能和B细胞抗原表位差异。结果显示:两种VP7蛋白均属于稳定蛋白、亲水性蛋白、跨膜蛋白和非分泌性蛋白;分离株与疫苗株的O糖基化位点数分别为55和62,N糖基化位点数均为1,磷酸化位点数分别为29和30;亚细胞定位均位于质膜,均以α-螺旋和无规则卷曲为主要结构,延伸和β-转角贯穿其中;GZAS2020株的B细胞抗原表位位于67~72 aa(PYANSTT)、97~100 aa(KWTE)、176~179 aa(QQTD)、276~283 aa(TTAPQTER),NX株位于96~99 aa(TKWK)、176~182 aa(QQTDEAN)、274~279 aa(DPTTTP)、310~317 aa(MSKRSRSL),两者在97~100、176~179、276~279 aa处存在相同的B细胞抗原表位,但GZAS2020株在无规则卷曲位置(67~72 aa)存在独特的B细胞抗原表位。以上结果说明,疫苗株NX与贵州省流行株GZAS2020在主要抗原蛋白上存在差异。

摘要： 腹泻是猪养殖生产中经常出现的病状。诱发猪腹泻的病原较多,其中由病毒引起的腹泻对养殖场的威胁和造成的损失最大。诱发腹泻的病毒主要有猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(PoRV)等,这些病毒可以单独感染或者混合感染,其中PEDV引起的腹泻发病率最高,混合感染对猪群造成的危害最严重。该文根据定西市猪病毒性腹泻的发生情况,阐述了常见的几种病毒性腹泻的病状及防控措施,以期降低此类疫病的感染率。

摘要： 2022年4月初,河北石家庄某养殖合作社仔猪出现以腹泻和轻微神经症状为特征的临床表现,为确定发病原因,该场采集发病仔猪肠组织和脑组织样品送至河北铭诸生物科技有限公司进行病原诊断。结果发现,导致该场仔猪发病病原非流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪德塔冠状病毒、猪伪狂犬病病毒或猪圆环病毒等,而是轮状病毒。进一步采用RT-PCR扩增该毒株VP7基因序列并测序。结果表明,该毒株与G9型轮状病毒同源性最高,与其它基因型毒株同源性相对较低,因此判定该猪场仔猪发病是由猪轮状病毒G9型感染所致。对全场猪群紧急免疫腹泻病毒三联弱毒疫苗,对发病仔猪对症治疗,同时提高饲养管理水平,最终使该疫情得到有效控制。

摘要： 猪轮状病毒(porcine rotavirus,PoRV)可以导致仔猪流行性腹泻,严重影响养猪业的健康发展。该文介绍了PoRV的病原学特征及流行现状,并详细阐述了PoRV的鉴别诊断方法,包括病原学诊断方法、免疫学诊断方法和分子生物学诊断方法。随着检测技术的推陈出新,如今分子生物学诊断方法被广泛应用,为防控PoRV的流行提供参考。

摘要： 猪轮状病毒（Porcine rotavirus，PRV）属呼肠孤病毒科（Reoviridae）轮状病毒属（Rotavirus），VP7是PRV的外衣壳蛋白，也是一种糖基化蛋白，由326个氨基酸组成，因不同毒株而异，分别由7或8、9基因编码，为病毒外膜主要中和抗原，与病毒的毒力及免疫保护性相关。本研究将一株PRV贵州流行株进行了VP7基因的克隆及序列分析，为进一步了解贵州省猪轮状病毒的流行情况、开展轮状病毒疫苗、诊断预防等研究提供参考。猪轮状病毒阳性病料采集自贵州省某发生仔猪腹泻的猪场。参考GenBank发表的猪轮状病毒VP7基因序列设计一对特异性引物，扩增出阳性样本中VP7基因全序列，进行序列测定，并应用DNAStar、MEGA5等生物学软件进行序列比对及分析。研究表明，相同血清型RV间VP7序列高度保守，而不同血清型间则高度变异。本试验根据RCWG（Rotavirus Classification Working group）发布的轮状病毒基因型分类方法将贵州流行株血清型鉴定为G4型。氨基酸序列比较结果显示，贵州流行株与其它血清型毒株氨基酸同源性比较，除个别位点外，绝大部分氨基酸突变都发生在高变区，与GreenK与高秀春等报道一致，而贵州流行株VP7与G4型标准毒株Gottfried氨基酸序列在高变区高度保守。

摘要： 近年来,北京地区猪轮状病毒感染不仅严重威胁养殖业的发展,同时威胁到肉食品和人类的安全.本研究取胶体金抗原检测为阳性的两头哺乳仔猪病料用Marc—145细胞培养,分离到一株轮状病毒,连续盲传至4代出现细胞病变,用Marc—145细胞进行病毒噬斑纯化,挑取单克隆病毒株扩大培养,将病毒感染Marc—145细胞7d后,应用Reed-Muench法计算轮状病毒TCID50为106.6/0.1mL,用感染细胞超薄切片进行电镜观察,可见典型的晶格状排列的轮状病毒粒子.将获取的病毒对初生仔猪进行攻毒试验后,结果显示其临床症状及病理组织学变化特征为典型轮状病毒感染对病毒的相关生物学特性研究,为后续猪轮状病毒防治及疫苗的研制奠定基础.

摘要： 目的：建立一种检测猪A群轮状病毒IgA抗体的间接ELISA方法,用于开展对该病毒感染的抗体水平评估.方法:用纯化的猪轮状病毒VP6蛋白作为包被抗原,通过对条件优化,包被抗原浓度是1μg/mL,待检乳汁稀释倍数是1∶80倍,标记抗体的稀释倍数是1∶10000倍,建立了检测猪轮状病毒乳汁IgA抗体的间接ELISA方法。结果：用该方法检测临床乳汁样品119份,并与间接免疫荧光试验(IFA)对比,结果显示,两者阴性符合率90％,阳性符合率95.1％,总符合率96.6％,表明该方法有效可行.结论：本方法可用于猪轮状病毒猪群抗体水平评估.

摘要： 本实验中首次用IPEC-J2细胞成功分离到了一株猪A群轮状病毒ZZ-12，且能稳定传代，不仅丰富了猪轮状病毒的分离培养体系，而且为以后研究猪轮状病毒特性及其致病机理扩宽了新的思路。

摘要： 目的：原核表达猪轮状病毒(porcine rotavirus,PRV)Gottfried株和SB-1A株截短的VP8*基因,纯化重组蛋白并检测其免疫原性。方法：经PCR从含有全长VP4基因片段的重组质粒pCR4-Gottfried VP4和pCR4-SB-1A VP4中分别扩增截短的VP8*基因(△VP8*,64～223位氨基酸),分别插入原核表达载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET28a-Gottfried-△VP8*和pET28a-SB-1A-△VP8*,分别转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物。应用ProBondTM Resin纯化两种重组蛋白,重组蛋白与Al(OH)3佐剂混合后,经肌肉注射免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测免疫小鼠的血清抗体水平。结果：两种重组表达质粒经双酶切和测序证实构建正确;表达的两种目的蛋白相对分子质量约25000,均以包涵体和可溶性两种形式存在,均可与鼠源抗His tag单克隆抗体特异性结合;纯化的两种重组蛋白纯度均在95％以上,免疫BALB/c小鼠可产生较高的血清抗体水平。结论：成功在大肠埃希菌中表达了PRV Gottfried株和SB-1A株截短的VP8*基因,纯化的两种蛋白免疫原性较好,为进一步研制安全、高效的PRV亚单位疫苗奠定了基础。

摘要： 轮状病毒是威胁婴幼儿及幼畜生命的主要病原体。为了研究轮状病毒(Rotavirus)感染与小肠上皮细胞凋亡的关系，我们用猪轮状病毒AV55株感染猪小肠上皮细胞(SIEC-2)后进行了一系列与细胞凋亡相关指标的检测。TUNEL、ELISA和Annexin、V/PI双染检测凋亡，结果表明，猪轮状病毒AV55株可诱导猪小肠上皮细胞发生凋亡；线粒体跨膜电位升高及细胞色素C表达量的检测结果提示，猪轮状病毒引起的细胞凋亡与线粒体介导的凋亡途径没有直接关系，但是线粒体的反应有助于减少或者减缓细胞死亡。推测出现这一现象的原因可能与细胞耐受感染策略有关。

摘要： 用MA104细胞从仔猪腹泻粪便样品中分离到猪轮状病毒，并通过电子显微镜(EM)，基因组RNA电泳和间接免疫荧光方法(IFA)进行鉴定。分离到的猪轮状病毒(PoRV-1)分别用引物扩增完整的VP4，VP7和NSP4基因，再测定其核酸序列。每个基因的完整核酸序列用MegAlign程序的ClustalW方法与GenBank数据库中其他基因型轮状病毒进行比对。核酸序列和遗传进化树分析鉴定结果表明，分离到的PoRV-1是G9，P[23]和E1基因型，为研发的猪轮状病毒疫苗提供帮助。

摘要： 2012年1月下旬,北京某猪场1000多头1周龄以内哺乳仔猪发生腹泻死亡.为了查明引起仔猪腹泻病原,有针对性的采取防制措施,笔者对该场发病仔猪进行了病原诊断,诊断结果为猪轮状病毒和大肠杆菌混合感染,大肠杆菌为致病性较强的O157:H7.对发病的仔猪，控制其感染的首要措施是加强母猪的饲养管理，适当增加母猪的蛋白能量饲料；提早诱食，仔猪一般从出生后第5天开始试喂，每头仔猪日补料量不超过50g，并提供充足干净饮水。治疗时可采用支持疗法，通过改善管理措施和应用抗生素来降低由轮状病毒和继发细菌感染引起的死亡率。饲喂含葡萄糖甘氨酸的电解质溶液，以最大限度地减少由轮状病毒感染引起的脱水和体重减轻。口服L谷氨酰胺可促进空肠对钠离子和氯离子的吸收。通过猪场用药情况表明，口服鞣酸蛋白和阿司匹林对降低轮状病毒的发病率和死亡率有一定效果。

摘要： 为分析PoRV-A毒株G4谱系IV的NSPI-NSP5/6和VP6基因特征，使用根据轮状病毒新分类法设计的VP6和NSP1-NSP5/6引物进行RT-PCR扩增。RT-PCR产物用上下游引物测序。分别用MEGA 4.1和BioEdit软件进行遗传进化树和核酸同源性分析。结果表明：PoRV-A毒株具有人、牛、猪RV-A毒株的基因，人和动物轮状病毒可跨种传播。

摘要： 本文从4个不同的猪场采集粪便样品，分离到的4株RVA G9毒株，使用RNeasy mini kit试剂盒提取总RNA，对每个基因组序列使用ClustalX 2进行比较，然后用MEGA4编辑，再用MEGA4进行遗传进化树分析，研究腹泻仔猪轮状病毒分的11个基因组片段特征。

摘要： 本发明公开了一种用于猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒以及猪轮状病毒检测的DPO引物组及其应用。本发明针对TGEV‑N基因、PEDV‑N基因和PRoV‑VP7基因分别设计了一对DPO引物，建立了猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒的多重DPO real‑time RT‑PCR检测方法。结果显示，该方法的检测限为5.3×100copies/μL，在40°C‑65°C退火温度范围内均可高效扩增靶基因片段，表明该方法退火温度范围宽，同时DPO引物特异性强，PCR反应过程中未产生非特异性扩增。本发明多重DPO real‑time RT‑PCR检测方法设计简单、特异性强、灵敏度高，为TGEV、PEDV和PRoV三种致猪病毒性腹泻病病原的快速准确检测提供了新的技术手段。

摘要： 本发明公开了一套用于同时检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒以及猪轮状病毒的多重PCR引物组。本发明的引物组由三对引物组成，其中，用于猪流行性腹泻病毒检测的引物序列为SEQ？ID？NO：1和2所示；用于猪传染性胃肠炎病毒检测的引物序列为SEQ？ID？NO：3和4所示；用于猪轮状病毒检测的引物序列为SEQ？ID？NO：5和6所示。应用本发明引物序列通过多重PCR方法可同时对猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒以及猪轮状病毒的不同毒株进行检测，结果均为阳性，而对其他常见猪源病毒检测结果均为阴性，说明本发明的引物组特异性强、重复性好；对病毒cDNA梯度稀释后进行PCR检测，说明该引物灵敏度高。

摘要： 本发明公开了一种检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒的基因芯片和试剂盒。本发明基因芯片包括它包括固相载体以及固定在固相载体上的探针；所述探针包括SEQ ID NO：1或2所示任意一个或者两个寡核苷酸片段，SEQ ID NO：3或4所示任意一个或者两个寡核苷酸片段，以及SEQ ID NO：5或6所示任意一个或者两个寡核苷酸片段。本发明试剂盒包括前述基因芯片与扩增猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒的基因的试剂。本发明基因芯片和检测试剂盒可以准确、有效的检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒，且特异性强、灵敏度高、耗时短，检测快速，应用前景良好。

摘要： 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒的试剂盒。本发明基检测试剂盒可以准确、有效的检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒，且特异性强、灵敏度高、耗时短，检测快速，应用前景良好。

摘要： 本发明提供了一种猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒的三联活疫苗及其制备方法，其中，三种病毒的含量≥107.5TCID50/mL，体积比为1∶1∶1。本发明的三联活疫苗解决了目前市场上缺少的有效的防治猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻和猪轮状病毒三种疾病的多联疫苗的问题，尤其是对猪轮状病毒的防控。和现有的打三针单疫苗才能预防这三种传染病比较，该发明经济使用，简化了免疫程序，降低了防疫成本，为国内养殖场提供了一种简单方便的新的免疫途径。

摘要： 本发明公开了一种用于猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒以及猪轮状病毒检测的DPO引物组及其应用。本发明针对TGEV‑N基因、PEDV‑N基因和PRoV‑VP7基因分别设计了一对DPO引物，建立了猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒的多重DPO real‑time RT‑PCR检测方法。结果显示，该方法的检测限为5.3×100copies/μL，在40°C‑65°C退火温度范围内均可高效扩增靶基因片段，表明该方法退火温度范围宽，同时DPO引物特异性强，PCR反应过程中未产生非特异性扩增。本发明多重DPO real‑time RT‑PCR检测方法设计简单、特异性强、灵敏度高，为TGEV、PEDV和PRoV三种致猪病毒性腹泻病病原的快速准确检测提供了新的技术手段。

摘要： 本发明公开了一种检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒的基因芯片和试剂盒。本发明基因芯片包括它包括固相载体以及固定在固相载体上的探针；所述探针包括SEQ ID NO：1或2所示任意一个或者两个寡核苷酸片段，SEQ ID NO：3或4所示任意一个或者两个寡核苷酸片段，以及SEQ ID NO：5或6所示任意一个或者两个寡核苷酸片段。本发明试剂盒包括前述基因芯片与扩增猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒的基因的试剂。本发明基因芯片和检测试剂盒可以准确、有效的检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒，且特异性强、灵敏度高、耗时短，检测快速，应用前景良好。

摘要： 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒的试剂盒。本发明基检测试剂盒可以准确、有效的检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒，且特异性强、灵敏度高、耗时短，检测快速，应用前景良好。

摘要： 本发明提供了一种猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒的三联活疫苗及其制备方法，其中，三种病毒的含量≥107.5TCID50/mL，体积比为1∶1∶1。本发明的三联活疫苗解决了目前市场上缺少的有效的防治猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻和猪轮状病毒三种疾病的多联疫苗的问题，尤其是对猪轮状病毒的防控。和现有的打三针单疫苗才能预防这三种传染病比较，该发明经济使用，简化了免疫程序，降低了防疫成本，为国内养殖场提供了一种简单方便的新的免疫途径。

摘要： 本发明公开了一套用于同时检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒以及猪轮状病毒的多重PCR引物组，属于病毒检测领域。本发明的引物组由三对引物组成，其中，用于猪流行性腹泻病毒检测的引物序列分别为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；用于猪传染性胃肠炎病毒检测的引物序列分别为SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示；用于猪轮状病毒检测的引物序列分别为SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示。应用本发明引物序列通过多重PCR方法可同时对猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒以及猪轮状病毒的不同毒株进行检测，结果均为阳性，而对其他常见猪源病毒检测结果均为阴性，说明本发明的引物组特异性强、重复性好；对病毒cDNA梯度稀释后进行PCR检测，说明该引物灵敏度高。