细胞迁移分析

摘要： 目的 探讨上皮膜蛋白1(epithelial membrane protein 1,EMP1)对人鼻咽癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法 通过脂质体介导,对人鼻咽癌细胞CNE-1(简称CNE-1)分别进行pcDNA3.1(+)空载体质粒和pcDNA3.1(+)-EMP1过表达重组质粒转染。采用实时荧光定量PCR、免疫印记技术检测转染CNE-1与人鼻黏膜上皮细胞HNEpC(简称HNEpC)中EMP1的表达水平。后续实验分3组,分别为CNE-1组(对照组)、pcDNA3.1(+)空载体质粒转染CNE-1(空载体组)和pcDNA3.1(+)-EMP1过表达重组质粒转染CNE-1(过表达组),进行CCK8、集落形成实验、Transwell迁移与侵袭实验,比较3组中EMP1的表达对肿瘤细胞活力、细胞增殖、细胞迁移与侵袭的影响。结果EMP1 mRNA和EMP1在对照组中的相对表达量均显著低于过表达组和HNEpC组,差异均有统计学意义(P均0.05)。细胞活力、集落形成率、细胞迁移及侵袭数,对照组均显著高于过表达组,差异均有统计学意义(P均0.05)。结论 EMP1在CNE-1和HNEpC中表达有差异,体外实验证实了上调EMP1表达可抑制肿瘤细胞增殖、迁移与侵袭的生物学行为。

摘要： 目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)KCNIP4-IT1/miR-181c-5p分子轴对喉癌TU177细胞增殖和迁移的调控作用。方法 采用qPCR检测30对喉癌组织和癌旁组织、喉癌细胞系(TU159、TU686、AMC-NH-8、TU177、TU138)和支气管上皮细胞系(16HBE)中KCNIP4-IT1表达水平。通过RNA干扰技术将KCNIP4-IT1的小干扰RNA转染到TU177细胞(si-KCNIP4-IT1组),建立KCNIP4-IT1低表达细胞系,另设置阴性Ctrl组(Ctrl组,转染阴性对照序列)。MTT法、划痕愈合实验检测敲低KCNIP4-IT1后TU177细胞增殖和迁移的变化。双荧光素酶报告基因实验验证KCNIP4-IT1与miR-181c-5p之间的靶向调控关系。qPCR检测细胞中miR-181c-5p和人纤溶酶原激活物抑制剂1(SERPINE1)mRNA的表达水平。Western blotting检测细胞迁移蛋白(β-catenin、N-Cadherin)和增殖蛋白(CDK3、PCNA)的表达水平。结果 KCNIP4-IT1在喉癌组织中表达水平高于癌旁组织(t=9.297,P<0.01)。KCNIP4-IT1在喉癌细胞系中表达水平高于16HBE细胞(t分别为4.620、7.502、4.944、8.665、9.139,P均<0.01),以TU177细胞中KCNIP4-IT1表达水平最高(F=17.819,P <0.01)。与Ctrl组相比,敲低KCNIP4-IT1显著抑制TU177细胞增殖(P均<0.05)和迁移(t=3.740,P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实KCNIP4-IT1靶向调控miR-181c-5p(t=5.838,P<0.01)。与Ctrl组相比,敲低KCNIP4-IT1明显上调miR-181c-5p的表达水平(t=6.214,P <0.01),下调SE R P I N E1基因的表达水平(t=8.19 0,P<0.01)。与Ctrl组相比,敲低KCNIP4-IT1明显下调细胞迁移蛋白(β-catenin、N-Cadherin)和增殖蛋白(CDK3、PCNA)的表达水平。结论 KCNIP4-IT1在喉癌组织和细胞系中呈高表达状态,敲低KCNIP4-IT1抑制喉癌TU177细胞的增殖和迁移,其分子机制可能与靶向调控miR-181c-5p并抑制SERPINE1表达有关。

摘要： 目的 探讨甘草甜素对鼻咽癌细胞的影响及分子机制。方法 鼻咽癌细胞C666-1随机分为对照组,不同浓度甘草甜素(25、50、100 μmol/L)组,si-NC组,si-HOXD-AS1组,甘草甜素+pcDNA-HOXD-AS1组,甘草甜素+anti-miR-30a-3p组;MTT法检测细胞增殖抑制率;平板克隆实验检测集落形成数;划痕实验检测细胞迁移距离;Transwell小室检测细胞侵袭数;蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白表达;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测同源框基因D(homeobox D,HOXD)簇反义RNA 1(cluster antisense RNA1,HOXD-AS1)和微小RNA(microRNA,miRNA/miR)-30a-3p的表达水平;双荧光素酶报告实验检测HOXD-AS1和miR-30a-3p的靶向关系。结果 与对照组相比,不同浓度甘草甜素组C666-1细胞增殖抑制率升高,集落形成数减少,迁移距离缩短,侵袭细胞数减少,E-cadherin表达水平升高,N-cadherin表达水平降低,HOXD-AS1表达水平降低,miR-30a-3p表达水平升高,且呈浓度依赖性(P<0.05)。干扰HOXD-AS1后,细胞增殖抑制率升高,集落形成数减少,迁移距离缩短,侵袭细胞数减少,E-cadherin表达水平升高,N-cadherin表达水平降低(P<0.05)。HOXD-AS1靶向调控miR-30a-3p,过表达HOXD-AS1或抑制miR-30a-3p减弱了甘草甜素对C666-1细胞增殖、迁移侵袭的影响。结论 甘草甜素可能通过调控HOXD-AS1/miR-30a-3p轴抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

摘要： 目的探讨家蝇抗真菌肽-1A(MAF-1A)对人肝癌细胞Hep G2的作用。方法取人肝癌细胞Hep G2和人正常肝细胞LO2进行传代培养;采用原核串联表达及镍柱亲和层析法制备MAF-1A,采用显微观察法检测0、50及100 mg/L MAF-1A作用Hep G2细胞24 h后的细胞形态变化,采用噻唑蓝(MTT)法检测0、25、50、100、200、400及800 mg/L MAF-1A分别作用于Hep G2和LO2细胞24 h后的细胞生存率,采用乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测0、25、50、100、200及400 mg/L MAF-1A作用Hep G2细胞24 h后对细胞的破坏性,采用细胞划痕愈合试验检测0、100及200 mg/L MAF-1A作用Hep G2细胞12和24 h后细胞迁移能力的变化;用磷酸盐缓冲液(PBS)将抗凝的人红细胞浓度调节为1%体积分数,以1%Triton X-100为阳性对照组,PBS为阴性对照组,采用红细胞体外溶解试验检测100、200、400、800、1200、1 800及2 400 mg/L MAF-1A作用人红细胞1 h后的溶血活性。结果 MAF-1A作用24 h后,镜下可见Hep G2细胞出现表面皱褶、坏死脱落等细胞病变效应(CPE),且浓度越高、CPE越明显;与0 mg/L组比较,各浓度组MAF-1A均对Hep G2细胞有抑制作用(P<0.05或P<0.01),并呈浓度依赖性,但对LO2细胞的抑制作用不明显;MAF-1A使细胞释放LDH的量增多,且LDH释放率随着MAF-1A浓度的升高而增大(P<0.01);各浓度组MAF-1A均能抑制Hep G2细胞的迁移运动,高浓度组抑制作用更为明显(P<0.05);MAF-1A浓度达2 400 mg/L时,溶血率<1%。结论 MAF-1A能抑制Hep G2细胞的增殖及迁移,但对人正常肝细胞LO2和红细胞无明显毒性作用。

摘要： 目的 探讨抑制素Beta A(INHBA)在胃癌组织中表达与临床病理资料相关性及对胃癌细胞增殖、侵袭转移能力的影响及机制.方法 利用GEPIA公共数据库验证INHBA在胃癌及癌旁组织中mRNA表达情况及与患者病理分期及预后的关系,利用Kaplan-Meier Plotter在线数据库分析INHBA与患者临床预后的关系;病理标本行免疫组化验证INHBA在胃癌与癌旁组织中蛋白表达水平及其表达水平与患者临床病理分期相关性;体外实验中,利用四唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖能力,利用划痕实验检测细胞迁移能力,利用transwell小室实验检测细胞侵袭转移能力,利用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测INHBA表达与上皮-间质样转化(EMT)相关蛋白的表达相关性.结果 GEPIA数据库及Kaplan-Meier Plotter在线数据库分析显示,与正常组织相比,INHBA mRNA在多种癌症组织中高表达,在胃癌组织中显著高表达(P＜0.05);INHBA mRNA的高表达与胃癌临床分期及不良预后相关(P＜0.05);免疫组化结果显示,胃癌组织中INHBA的染色评分显著高于癌旁组织(P＜0.05),并且其表达水平与患者临床TNM分期有关(P＜0.05);MTT、划痕实验、transwell小室结果显示,INHBA过表达可以促进胃癌细胞增殖、迁移和侵袭转移能力,而干扰INHBA的表达可以抑制细胞增殖、迁移和侵袭转移能力;Western blot结果显示,INHBA过表达后CDH1的表达量明显下调,而CDH2的表达量上调;抑制INHBA表达后CDH1的表达量明显上调,而CDH2的表达量下调.结论 INHBA在胃癌组织中较癌旁组织高表达,其表达水平与患者肿瘤进展及不良预后相关,INHBA可以促进胃癌MGC-803细胞系的增殖、迁移及侵袭能力,其机制可能与INHBA促进细胞EMT有关.

摘要： 目的 探讨低剂量多壁碳纳米管(MWCNT)长期慢性染毒对人胸膜间皮细胞的毒性效应及可能机制.方法 于2016年,使用10 μg/cm2 MWCNT对人胸膜间皮细胞MeT-5A反复持续染毒1年作为染毒组,每4周收集1次细胞并观察细胞形态和计数增殖情况.对照组细胞同期培养但不进行染毒处理.染毒后细胞经流式细胞仪测量细胞周期和细胞凋亡的改变;用Transwell小室测量细胞侵袭和迁移能力的改变;用Affymetrix clariom D芯片分析染毒后MeT-5A细胞基因表达谱的改变.部分差异表达基因经实时定量荧光PCR进一步验证其表达变化.结果 与对照组比较,染毒1年组细胞增殖能力明显增强,增殖速度约为对照组2～3倍(F=481.32,P＜0.05).MWCNT染毒1年和6个月组MeT-5A细胞均呈现细胞周期阻滞效应,表现为G1期增加,S期、G2期减少(F=14.94,P＜0.05).染毒6个月组细胞凋亡率较对照组明显增加(F=15.12,P＜0.05),染毒1年组细胞的早期凋亡率和总凋亡率较对照组细胞均差异无统计学意义(F=3.97,P＞0.05).对染毒1年组细胞进行基因芯片检测,差异倍数2倍、平均信号值＞7的差异基因共2 878个,其中上调基因986个,下调基因为1 892个.表达变化的基因主要参与Wnt信号通路、VEGF信号通路和mTOR信号通路等途径,功能主要涉及细胞增殖、细胞迁移和细胞骨架调节等过程.其中与上述细胞表型改变密切相关的PIK3R3、WNT2B、VANGL2和ANXA1基因的表达改变经RT-PCR验证,结果与基因芯片趋势一致.结论 长期反复染毒后MWCNT对MeT-5A细胞可能存在潜在恶性转化能力.

摘要： 目的 探讨低氧条件下B淋巴细胞瘤-2/腺病毒E1B 19 000相互作用蛋白3(BNIP3)对人真皮微血管内皮细胞(HDMEC)迁移和运动性的影响及其机制.方法 采用实验研究方法 .(1)取HDMEC,采用随机数字表法(下同)分成行常规培养的常氧组及采用体积分数2％氧气低氧处理相应时间点的低氧6、12、24 h组,采用蛋1质印迹法检测细胞中BNIP3及微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3 Ⅱ)的蛋白表达.(2)取HDMEC,分成常氧+空载组、常氧+BNIP3敲减组、低氧+空载组、低氧+BNIP3敲减组,分别转染空载病毒或BNIP3敲减病毒并进行常氧或低氧处理6 h,采用蛋白质印迹法和免疫荧光染色法检测BNIP3的蛋白表达;采用划痕试验检测划痕后24 h的划痕面积,并计算划痕愈合率;在活细胞工作站测算3h内细胞运动的曲线距离,计算运动速度.(3)取HDMEC,同实验(2)分组及处理,采用蛋白质印迹法和免疫荧光染色法检测LC3 Ⅱ的蛋白表达.以上实验样本数均为3.对数据行单因素方差分析及LSD检验.结果 (1)与常氧组比较,低氧6、12、24 h组细胞BNP3及LC3 Ⅱ的蛋白表达量显著增加(P ＜0.01).(2)培养6 h,与低氧+空载组比较,常氧+空载组和低氧+BNIP3敲减组细胞BNIP3的蛋白表达量显著下降(P ＜0.05或P ＜0.01).常氧+空载组和常氧+BNIP3敲减组细胞中表示BNIP3蛋白表达的红色荧光较弱,低氧+空载组细胞红色荧光较强,低氧+BNIP3敲减组细胞中红色荧光较低氧+空载组明显减弱.划痕后24 h,低氧+空载组细胞划痕基本愈合,其他3组细胞剩余划痕面积较大.常氧+空载组、常氧+BNIP3敲减组、低氧+空载组、低氧+BNIP3敲减组细胞划痕愈合率分别为(61 ±4)％、(58 ±4)％、(88 ±4)％、(57 ±4)％.低氧+空载组细胞划痕愈合率明显高于常氧+空载组(P ＜0.01)和低氧+BNIP3敲减组(P ＜0.05).观察3h内,低氧+空载组细胞运动范围较常氧+空载组显著增大,低氧+BNIP3敲减组细胞运动范围较低氧+空载组明显缩小;低氧+空载组细胞曲线运动速度较常氧+空载组和低氧+BNIP3敲减组明显增加(P ＜0.01).(3)培养6 h,与低氧+空载组比较,常氧+空载组和低氧+BNIP3敲减组细胞LC3 Ⅱ的蛋白表达量显著下降(P ＜0.05或P ＜0.01).培养6 h,常氧+空载组和常氧+BNIP3敲减组细胞中表示LC3蛋白表达的红色荧光较弱,低氧+空载组细胞红色荧光明显增强,低氧+BNIP3敲减组细胞红色荧光被显著抑制.结论 低氧条件下BNIP3可促进HDMEC的迁移和运动性,且自噬可能参与BNIP3对HDMEC迁移和运动性的调节.

摘要： 目的 探讨黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)对肝星状细胞(HSCs)活化及迁移功能的影响.方法 2019年3-9月,收集贵州医科大学附属医院肝胆外科9例肝纤维化患者肝组织标本.人体肝组织分为健康对照组与纤维化组.C57BL/6实验小鼠分为野生型(WT)、FRNK基因敲除型(FRNK-/-)两组,以四氯化碳(CCl4)进行肝纤维化造模,完成后使用腺病毒载体构建FRNK基因过表达型(Ad-FRNK).通过HE、Masson染色观察肝组织病理改变,Western蛋白印迹法检测磷酸化黏着斑激酶(PY397-FAK)与α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达;提取小鼠原代HSCs,细胞划痕实验检测FRNK对HSCs迁移功能的影响,及对Rac、Rho活化的影响.结果 肝纤维化人体肝组织PY397-FAK蛋白表达量显著高于健康对照组(0.88±0.09比0.73±0.09),FRNK低于健康对照组(0.68±0.09比0.79±0.11),P值均＜0.01.CCl4造模后,FRNK-/-组小鼠肝纤维化(153±13)％较WT组(100％)程度更明显,PY397-FAK 与 α-SMA 蛋白表达量高于 WT 组(2.50±0.23比0.75±0.09,1.46±0.20比0.92±0.10),P值均＜0.01.在FRNK-/-组小鼠体内重新导入FRNK基因(100％)后,小鼠肝纤维化程度减轻(74±6)％,PY397-FAK 与 α-SMA蛋白表达量减少(0.68±0.11 比 1.12±0.19,0.68±0.10比0.85±0.06),P值均＜0.01.体外实验显示,FRNK可抑制 HSCs 的迁移功能WT:FRNK-/-:Ad-FRNK为(339±49)％:(580±53)％:(259％±33)％,并抑制 Rac和Rho蛋白的活化(Rac为0.54±0.07比0.91±0.10比0.77±0.12,Rho为0.45±0.05比0.64±0.06比0.53±0.07),P值均＜0.01.结论 FRNK可通过抑制HSCs的活化及迁移功能改善肝纤维化,其机制可能与下调PY397-FAK、抑制Rac和Rho的活化有关.

摘要： 目的 检测miR-4698在肝癌组织及细胞系中的相对表达,分析其对肝癌细胞增殖和迁移的影响及分子作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测肝癌组织和肝癌细胞系中miR-4698的相对表达.在表达最低的肝癌细胞系中,采用脂质体转染法分别转染miR-4698模拟物和对照模拟物,命名为实验组和对照组.qRT-PCR检测转染效率.细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell迁移实验分别检测过表达miR-4698对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响.采用生物信息学和双荧光素酶报告基因实验预测并验证miR-4698与靶基因的结合.qRT-PCR和Western blot分别检测靶基因在mRNA水平和蛋白水平的相对表达.结果 与癌旁组织相比,miR-4698在肝癌组织的表达明显降低(P＜0.01).与正常肝细胞系相比,miR-4698在肝癌细胞系的表达明显降低(P＜0.05),在Huh7细胞的表达最低(P＜0.01).转染后,与对照组相比,实验组Huh7细胞中miR-4698的表达明显增加(P＜0.01).过表达miR-4698可抑制肝癌Huh7细胞的增殖能力(P＜0.05)和迁移能力(P＜0.05).生物信息学显示miR-4698的靶基因是多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶4(GALNT4),双荧光素酶报告基因证实miR-4698可互补结合GALNT4(P＜0.01).qRT-PCR结果显示,过表达miR-4698可抑制GALNT4基因的表达(P＜0.01).Western blot实验显示,miR-4698过表达后,Huh7细胞中GALNT4蛋白表达降低,细胞增殖相关蛋白Cyclin B和CDK1表达降低,细胞转移相关蛋白N-cadherin和ZEB-2表达降低.结论 miR-4698在肝癌组织和细胞系中表达明显下降,过表达miR-4698可通过抑制GALNT4基因的表达,降低肝癌Huh7细胞的增殖和迁移能力.

摘要： 目的 探讨长链非编码RNALINC00630在膀胱癌细胞中的表达,以及体外干扰其表达对膀胱癌细胞增殖和迁移的影响.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测膀胱癌细胞株5637、BIU-87、T24、J82和正常膀胱上皮细胞株SV-HUC-1中LINC00630的表达.选择LINC0063表达量最高的膀胱癌细胞株进行后续实验;采用对照慢病毒感染细胞作为对照组,干扰LINC00630表达的慢病毒感染细胞为实验组.qRT-PCR检测两组细胞中LINC00630的表达,分别采用MTS法和细胞划痕实验检测两组细胞的增殖和迁移能力.qRT-PCR检测两组细胞中神经调节蛋白1(NRG1)mRNA的表达,蛋白质印迹法检测两组细胞中NRG1蛋白、细胞增殖相关蛋白(cyclin D3、CDK2)及细胞转移相关蛋白(Vimentin、N-cadherin)的表达情况.结果 与SV-HUC-1细胞比较(1.05±0.17),LINC00630在各膀胱癌细胞株中表达量均增加(均P＜0.01),在J82细胞中的表达最高(相对表达量5.83±0.42).与对照组J82细胞相比,实验组J82细胞中LINC00630表达降低(0.18±0.02 比 1.00±0.05,t=14.36,P＜0.01);转染第2天起,实验组细胞增殖活力均低于对照组(均P＜0.05).实验组细胞划痕闭合率低于对照组[(27.4±7.1)％比(66.0±5.4)％,t = 4.31,P＜0.01].实验组 NRG1 mRNA 的相对表达量较对照组降低(0.34±0.03比1.07±0.24,t = 2.99,P＜0.05).与对照组相比,实验组细胞中NRG1蛋白、细胞增殖相关蛋白及细胞转移相关蛋白均降低.结论 LINC00630在膀胱癌细胞株中表达上调;干扰LINC00630可能通过下调NRG1基因的表达,抑制J82细胞增殖和迁移能力.LINC00630可能是膀胱癌治疗新的分子靶标.

摘要： 本发明公开了一种用于高通量细胞迁移研究的方法和细胞迁移研究系统，采用细胞布置器件中的细胞群体限制腔室培养贴壁生长的细胞，得到贴壁生长的细胞群。将贴壁生长的细胞群放在迁移测试器件中的迁移测试腔室中培养，获取细胞生长过程中的图片，以通过图片记录的细胞群的生长所覆盖的区域，计算细胞迁移的迁移距离。采用本发明提供的细胞迁移研究系统进行细胞迁移研究，通过细胞群体限制腔室得到贴壁生长的细胞群，再通过对迁移测试腔室中细胞生长的图片的获取，这种研究方法具有极高的可重复性，并能通过图像处理将细胞的迁移能力定量化。

摘要： 本发明公开了一种细胞流动迁移分析装置，包括底座、盖板、密封圈和滤膜，所述底座上设有螺栓孔Ⅰ，所述盖板上与螺栓孔Ⅰ对应设有螺栓孔Ⅱ，所述盖板通过螺栓与底座固定连接，所述密封圈位于盖板与底座之间，所述盖板、底座和密封圈围成流动迁移腔，所述底座上位于流动迁移腔内设有用于盛装趋化剂的趋化小孔阵列和两个培养介质缓冲腔，两个培养介质缓冲腔分别位于趋化小孔阵列两侧，所述底座侧面设有分别与两个培养介质缓冲腔连通的蠕动泵管路接口，所述滤膜铺设在趋化小孔阵列表面。本发明既能研究剪切应力作用下细胞与细胞/基质的粘附特性，又能模拟体内血液流动条件，研究剪切应力作用下细胞跨内皮/基质的迁移行为特征。

摘要： 本发明公开了一种实时无标记细胞分析仪在食管癌细胞增殖和迁移能力检测中的应用，1)增殖实验：将干预后的细胞消化，计数，接种至增殖检测板，增殖检测板中每孔接种若干个细胞，利用实时无标记细胞分析仪监测细胞增殖；2)迁移实验：将干预后的细胞消化，计数，接种至实时无标记细胞分析仪的细胞迁移检测板的上室，上室培养液含0‑5％胎牛血清，细胞迁移检测板中每孔接种若干个细胞，下室培养液含5％‑10％胎牛血清，监测由上室迁移至下室的细胞数量。本发明无需对食管癌细胞标记、固定、染色或者其他处理步骤，操作简便；细胞密度和胞外基质浓度等实验条件快速优化，大大节省时间；非侵入方法，检测后的细胞均可用于后续的实验分析。

摘要： 本发明公开了一种用于高通量细胞迁移研究的方法和细胞迁移研究系统，采用细胞布置器件中的细胞群体限制腔室培养贴壁生长的细胞，得到贴壁生长的细胞群。将贴壁生长的细胞群放在迁移测试器件中的迁移测试腔室中培养，获取细胞生长过程中的图片，以通过图片记录的细胞群的生长所覆盖的区域，计算细胞迁移的迁移距离。采用本发明提供的细胞迁移研究系统进行细胞迁移研究，通过细胞群体限制腔室得到贴壁生长的细胞群，再通过对迁移测试腔室中细胞生长的图片的获取，这种研究方法具有极高的可重复性，并能通过图像处理将细胞的迁移能力定量化。

摘要： 本发明提出了一种细胞迁移特性分析用多通道微流控芯片及方法，所述微流控芯片包括玻璃基板及紧密贴合设置在玻璃基板上的PDMS芯片主体；所述PDMS芯片主体上并列设置有若干组用于生成不同趋化因子浓度梯度环境的细胞迁移运动分析单元；每一个细胞迁移运动分析单元均包括：细胞加载单元，用于注入细胞和确定细胞初始位置；细胞趋化迁移单元，用于加入细胞培养液和趋化因子，并能够形成趋化因子浓度梯度，吸引细胞发生迁移运动；以及细胞阻拦单元，用于在浓度梯度未形成时，阻拦细胞越过细胞初始位置定位区域。本发明在注入中性粒细胞之后，可以模拟人体毛细血管中的中性粒细胞受到趋化因子刺激后发生的定向迁移现象，具有一定的检测通量。

摘要： 本发明公开了肿瘤细胞迁移能力的分析、分选的微流控芯片，包括细胞进样通道、化学浓度梯度通道、迁移通道和微型钩子，所述细胞进样通道的两个分支通过迁移通道连接化学浓度梯度通道，所述细胞进样通道与迁移通道的连接处设置有微型钩子，所述细胞进样通道的顶端具有细胞进样入口，所述化学浓度梯度通道的底端具有化合物进样入口，化学浓度梯度通道的中部具有细胞进样出口，化学浓度梯度通道的顶端具有化合物进样出口。可以实时对细胞的迁移路径和迁移形态进行数据收集，并对其进行分析得到每个细胞的迁移能力、迁移能力之间的个体差异和强/弱迁移细胞亚群比率。另外，通过微流体操作可以分别富集特定迁移能力的细胞亚群，以用作后续的分子生物学发明。

摘要： 本实用新型提出了一种细胞迁移特性分析用多通道微流控芯片，所述微流控芯片包括玻璃基板及紧密贴合设置在玻璃基板上的PDMS芯片主体；所述PDMS芯片主体上并列设置有若干组用于生成不同趋化因子浓度梯度环境的细胞迁移运动分析单元；每一个细胞迁移运动分析单元均包括：细胞加载单元，用于注入细胞和确定细胞初始位置；细胞趋化迁移单元，用于加入细胞培养液和趋化因子，并能够形成趋化因子浓度梯度，吸引细胞发生迁移运动；以及细胞阻拦单元，用于在浓度梯度未形成时，阻拦细胞越过细胞初始位置定位区域。本实用新型在注入中性粒细胞之后，可以模拟人体毛细血管中的中性粒细胞受到趋化因子刺激后发生的定向迁移现象，具有一定的检测通量。

摘要： 本发明公开了一种用于细胞迁移分析实验的微流控液滴芯片装置，包括：用于承载液滴的多孔膜；用于保证多孔膜处于铺展状态的多孔膜支撑组件；包围在多孔膜外围用于防止液滴蒸发的防液体蒸发组件。本发明同时公开了一种利用上述装置进行细胞迁移的方法。该装置结合微流控芯片和液滴技术的优势，利用液滴在多孔膜上下表面的相对位置变化，构建灵活的微型细胞实验装置，用于多种细胞迁移模式的研究，如竞争性细胞迁移、细胞趋化迁移、多细胞共同作用的细胞迁移等。适用于高通量药物筛选、细胞迁移行为的病理生理学机制的研究，以及周围细胞或物质对细胞迁移行为的影响的研究等。

摘要： 本发明公开一种适用于细胞迁移分析的多通道微流控芯片，涉及微流控芯片技术领域，包括玻璃基板及紧密贴合设置在玻璃基板上的芯片主体，芯片主体上刻蚀呈环形阵列分布的多组独立设置的细胞迁移运动分析单元。所述细胞迁移运动分析单元包括细胞加载单元、趋化迁移单元、细胞隔离单元。本发明还提供采用适用于细胞迁移分析的多通道微流控芯片的细胞迁移分析方法。本发明的有益效果在于：本发明有多个独立细胞迁移运动单元，可以同时观测多组通道，极大地提高了检测通量，突破了常规的单浓度趋化因子对细胞迁移作用的研究模式。

摘要： 本发明涉及微流控技术领域，具体提供一种微流控芯片装置及其在癌细胞迁移分析中的应用。该微流控芯片装置开设有若干进样口、第一汇流腔室、若干细胞捕获室、若干并排的迁移直线通道、第二汇流腔室、若干出样口；每个进样口均与第一汇流腔室连通；第一汇流腔室上开设有若干与细胞捕获室相对应连通的捕获室进口；每个细胞捕获室底部开设有能使细胞进入迁移直线通道前端的贯通口；每条迁移直线通道的末端均与第二汇流腔室连通，同时每个出样口均与所述第二汇流腔室连通。本发明的微流控芯片装置具有通量高、捕获准确、追踪效果好等特点。