聚丙烯酰胺凝胶电泳

摘要： 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是分离、纯化蛋白质的常用技术.传统的基于Laemmli方法(Laemmli胶)制备的十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺电泳胶(SDS-PAGE)能够基于蛋白质分子量的不同分离蛋白质,蛋白质分离性能良好,但存在电泳时间长、保质期短等缺点,其应用有一定的局限性.本研究用三异丙醇胺、三乙醇胺等成分代替Laemmli胶中的三羟甲基氨基甲烷的盐酸盐(T ris-HCl)作为缓冲物质,获得I型和II型两种新型电泳胶.电泳实验的结果表明这两种新型电泳胶保持了Laemmli电泳胶优良的蛋白质分离性能,并能够耐受更高的电压,具有更快的电泳速度.加速寿命实验的结果表明这两种新型电泳胶具有比L aem m li胶和现在流行的商业预制胶更长的保质期.新型I电泳胶比新型II电泳胶分离性能更好,保质期更长,在37°C可储存15天,相当于在4°C的保质期15个月.

摘要： 以远东刺猬(Erinaceus amurensis Schrenk)为研究对象,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,比较分析了怀孕与非怀孕远东刺猬个体间血清蛋白的分布和活性.结果表明,非怀孕远东刺猬血清蛋白电泳分离出迁移率为0.009～0.590的20条谱带,怀孕远东北刺猬血清蛋白电泳分离出迁移率为0.005～0.590的25条谱带,怀孕与非怀孕个体间电泳谱带的分布、活性、数量存在明显差别.

摘要： 为在筛选用于肉制品发酵的有益葡萄球菌,通过划线分离,从发酵肉制品中筛选出54株菌,根据菌株耐盐性及16S DNA测序结果,选择8株耐盐葡萄球菌做血浆凝固酶试验。经鉴定,其中6株呈凝固酶阴性。将凝固酶阴性葡萄球菌胞外蛋白酶与肌肉蛋白孵育20 h,分析其对肌肉蛋白的降解性能。试验结果表明,6株葡萄球菌胞外蛋白酶对肌浆蛋白250 ku处的蛋白条带有一定的降解能力,然而对肌原纤维蛋白无明显降解作用。

摘要： 【目的】建立一种快速、准确的啤酒花品种真实性鉴定技术,为酒花种植、加工和酿造使用的品种区分提供技术支持。【方法】基于SSR分子标记技术,通过酒花DNA提取、PCR扩增、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,进行多态性引物筛选及品种指纹图谱构建。【结果】本研究从103对候选引物中筛选到多态性丰富、引物组合鉴定能力最佳的4对核心引物,在21个国内外酒花品种中共扩增出15个等位基因,每对引物的等位基因数量3~4个不等,平均每对引物产生3.75个等位基因。利用4对核心引物对国内外主要酒花品种进行指纹图谱构建及指纹编码,可实现21个酒花品种的快速区分。【结论】利用SSR标记结合聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,通过4对核心引物可实现国内外21个主要酒花品种的快速鉴定,方法快速准确、成本低,适合在酒花种植、加工和啤酒企业中推广应用。

摘要： [背景]溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)能够感染鱼、虾、贝等海洋经济动物,给海水养殖业带来了严重的经济损失,对公众健康及食品安全也构成较大威胁.[目的]通过研究乌梅(Fructus mume)对溶藻弧菌的抑菌效应及其机理,为乌梅在水产养殖中的进一步开发利用提供理论依据.[方法]采用试管二倍稀释法测定乌梅提取物(Fructus mume Extract,FME)对溶藻弧菌的最小抑菌浓度(Minimal Inhibitory Concentration,MIC)和最小杀菌浓度(Minimum Bactericidal Concentration,MBC),电导率仪检测溶藻弧菌的相对电导率,分光光度法分析溶藻弧菌的核酸泄露和呼吸链脱氢酶活性及生物膜抑制率,蛋白质电泳检测溶藻弧菌的蛋白质合成情况,扫描电子显微镜观察溶藻弧菌的亚显微结构.[结果]乌梅提取物对溶藻弧菌的MIC和MBC分别为1.953 mg/mL和3.906 mg/mL;乌梅提取物显著增加了溶藻弧菌的相对电导率和核酸泄露,明显降低了溶藻弧菌蛋白质的合成能力,对于弧菌的亚显微形态产生了较大影响.同时乌梅提取物显著抑制了溶藻弧菌生物膜的形成和呼吸链脱氢酶的活性.[结论]乌梅提取物通过增加溶藻弧菌细胞膜通透性及显著抑制生物膜的生成、呼吸链脱氢酶活性及蛋白质的合成,实现抑制及杀灭溶藻弧菌的目的.

摘要： 目的 构建适合铁棒锤种子蛋白质研究的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)体系,为铁棒锤种子纯度检测及鉴别研究提供技术支撑.方法 采用6种蛋白质提取法提取伏毛铁棒锤种子蛋白质,并筛选出最佳提取方法,在此基础上研究不同分离胶浓度、料液比、上样量对伏毛铁棒锤种子蛋白电泳分离效果的影响,并采用筛选出的蛋白质最佳提取分离方法对铁棒锤和伏毛铁棒锤种子进行鉴定.结果 巯基乙醇法提取的伏毛铁棒锤种子蛋白质电泳图谱效果较佳,电泳谱带数最多(14条)、最清晰,适合于其种子纯度检测;分离胶浓度为15％、料液比为1:10(M/V)、蛋白上样量稀释5倍时,其种子蛋白质电泳分离效果较好;铁棒锤和伏毛铁棒锤种子蛋白质电泳图谱在蛋白质谱带位置和强弱上有一定差异.结论 本研究建立的铁棒锤种子蛋白样品制备方法及SDS-PAGE技术可用于铁棒锤种子纯度检测,其蛋白质图谱可作为铁棒锤与伏毛铁棒锤种子的鉴别依据.

摘要： 本实验采用制备型电泳体系在高浓度的尿素存在下进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分离水溶性腐植酸中的不同成分.在聚丙烯酰胺凝胶电泳中,根据水溶性腐植酸中深色成分分子大小的不同能够将它们彼此分离开来,同时还可以通过酸沉淀的方法将这些深色物质重新回收.rn 水溶性腐植酸中大部分的荧光物质分子尺寸都很小,这使得它们可以溶于酸,并且被酸溶解的荧光物质可以通过吸附在DAX-8树脂上而重新获得.但是,水溶性腐植酸中的非荧光物质则会在电泳过程中丢失.而那些被认为是小分子的荧光物质则会通过氢键的断裂和7M尿素的疏水作用得到分离.漫反射傅里叶变换红外光谱的测量结果表明腐植酸中不同成分的化学性质是不同的.而实验结果表明在高浓度尿素存在下聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离和收集水溶性腐植酸中各组分的一种很有用的方法.

摘要： 目的：建立不同栽培品种玫瑰花药材的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)鉴别方法。rn 方法：蛋白质聚丙烯酰胺凝胶分析，电泳采用稳流控制，开始时电流15mA，当样品到达分离胶后，电流25mA。以泳道中各谱带所在位置Pos为横坐标，谱带透光率OD为纵坐标作图，绘制各谱带的透光率图并用EDAS软件分析谱带相似度。rn 结果：山东平阴的“丰花”与“重瓣”玫瑰花含有的蛋白质种类相似，含量相似;北京“金顶”玫瑰花与山东“丰花”相似度较低;山东定陶的“大红花”与“丰花”相似度较低，蛋白质种类有一定差异;阴干品与烘干品蛋白质电泳谱带透光位置有较大差异。rn 结论：玫瑰花蛋白质电泳的差异性表明了样品间蛋白质种类的差异，可作为玫瑰花栽培品种鉴别的依据;加工温度对蛋白质影响很大。

摘要： 应用同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术对国内外收集的双孢蘑菇野生菌株进行了检测分析,结果表明不同地区收集的野生菌株的酯酶(EST)同工酶表型有明显差异,国内外收集的大部分双孢蘑菇野生菌株的酯酶同工酶为传统菌株的G型、H型或HG1型等类型,但有部分野生菌株的同工酶电泳主要标记酶带介于G型与H型之间,有的比H型慢,为新发现的同工酶类型,国内外野生菌株新发现的同工酶类型之间存在着差异.

摘要： 目的：评价聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)联合血红蛋白电泳(Hb)检测HbWestmead的准确性.方法：收集在我院进行地贫检查、年龄大于或等于2岁、均经血液学分析、Hb分析、PAGE进行珠蛋白肽链分析以及WS基因型检测共634份样本;经PAGE联合Hb电泳发现GY位置(Gws)区带浓染而HbF在正常范围即为HbWestmead阳性,同时与PCR-反向点杂交金标准方法对照.结果：634份样本中按金标准方法共检出HbWS123例,金标准阴性511例.PAGE联合Hb电泳诊断HbWS阳性131例、阴性503例.PAGE联合Hb电泳诊断HbWS的准确性为97.79％、敏感度97.56％、特异度97.84％、阳性预测值0.9160、阴性预测值0.9940.结论：PAGE联合Hb电泳诊断HbWS特异性、敏感性和准确性高,达到或接近或可替代基因检测方法对HbWS进行普筛,值得在临床上推广.

摘要： 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)方法对16个离褶伞属菌株进行酯酶同工酶分析，分析其酶谱多态性，并采用聚类分析方法对菌株间的亲缘关系进行鉴定。结果表明，在16个离褶伞菌株酯酶同工酶酶谱中，共检测到了10条相对迁移率不同的酶带，多态性较高，并且在相似系数为0.56时，可将供试菌株分为3类，第一类包括5个菌株，第二类包括1个菌株，第三类包括10个菌株。

摘要： 为优化出提取鸡蛋黄中卵黄高磷蛋白的工艺参数,在单因素的基础上采用了二次通用旋转组合设计试验;考察了有机溶剂(正己烷/乙醇)比例和用量对卵黄高磷蛋白提取效果的影响,并基于遗传算法优化出提取卵黄高磷蛋白的最佳工艺参数;采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(简称SDS-PAGE)测定卵黄高磷蛋白的分子量。结果表明:有机溶剂(正己烷/乙醇)比例为3.4/1、有机溶剂用量为148mL时,卵黄高磷蛋白的纯度高达81.62%;根据SDS-PAGE凝胶电泳结果显示,提取出的卵黄高磷蛋白的分子量在35kD左右。

摘要： 初步分析黑龙江林蛙肝脏蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)上的分布及低温诱导下黑龙江林蛙肝脏蛋白质的适应性变化。结果表明：分离胶浓度为6％的肝脏蛋白质电泳图谱分辨率高、条带多，可分辨出15-19条谱带；-2°C条件下Rf为0.79的蛋白含量较室温条件下的蛋白含量有所增加(P<0.05)，而随机选取的两条保守蛋白带含量并无显著性差异。

摘要： APC基因杂合缺失在胃癌的早期发生过程中起重要作用，检测基因突变的方法学研究将有助于临床准确诊断胃癌。本实验采用PCR扩增胃癌及癌旁正常组织中APC基因易发生杂合缺失的第十一外显子的部分碱基序列，扩增样品分别经96°C变性和Rsa Ⅰ酶切处理，以CE-SSCP、CE-RFLP、PAGE-SSCP对其杂合缺失情况进行检测。PAGE凝胶浓度为15％;CE筛分介质PEO浓度3.0％，pH 8.2，电压15 KV温度15°C，λcx=488nm，λem=520nm荧光检测。检出率由高到低为:CE-SSCP(10/35)＞PAGE-SSCP(8/35)＞CE-RFLP(6/35)。rn CE-SSCP可作为大规模胃癌早期诊断的简便可靠的方法。

摘要： APC基因杂合缺失在胃癌的早期发生过程中起重要作用，检测基因突变的方法学研究将有助于临床准确诊断胃癌。本实验采用PCR扩增胃癌及癌旁正常组织中APC基因易发生杂合缺失的第十一外显子的部分碱基序列，扩增样品分别经96°C变性和Rsa Ⅰ酶切处理，以CE-SSCP、CE-RFLP、PAGE-SSCP对其杂合缺失情况进行检测。PAGE凝胶浓度为15％;CE筛分介质PEO浓度3.0％，pH 8.2，电压15 KV温度15°C，λcx=488nm，λem=520nm荧光检测。检出率由高到低为:CE-SSCP(10/35)＞PAGE-SSCP(8/35)＞CE-RFLP(6/35)。rn CE-SSCP可作为大规模胃癌早期诊断的简便可靠的方法。

摘要： APC基因杂合缺失在胃癌的早期发生过程中起重要作用，检测基因突变的方法学研究将有助于临床准确诊断胃癌。本实验采用PCR扩增胃癌及癌旁正常组织中APC基因易发生杂合缺失的第十一外显子的部分碱基序列，扩增样品分别经96°C变性和Rsa Ⅰ酶切处理，以CE-SSCP、CE-RFLP、PAGE-SSCP对其杂合缺失情况进行检测。PAGE凝胶浓度为15％;CE筛分介质PEO浓度3.0％，pH 8.2，电压15 KV温度15°C，λcx=488nm，λem=520nm荧光检测。检出率由高到低为:CE-SSCP(10/35)＞PAGE-SSCP(8/35)＞CE-RFLP(6/35)。rn CE-SSCP可作为大规模胃癌早期诊断的简便可靠的方法。

摘要： 本发明公开一种聚丙烯酰胺凝胶电泳显影仪及其显影方法，包括显影槽、试剂供给装置、双向齿轮泵以及控制装置；所述试剂供给装置包括蒸馏水桶和若干试剂桶，所述蒸馏水桶和若干所述试剂桶汇集连通到第一管路上，且所述蒸馏水桶和每个所述试剂桶分别与所述第一管路之间设置有电动阀，所述电动阀与所述控制装置电连接，所述第一管路的一端与所述双向齿轮泵连通，另一端连接有残液收集装置；所述显影槽上设置有与所述控制装置电连接的液面传感器；本发明通过设置双向齿轮泵与不同的试剂桶和蒸馏水桶进行连通，之间设置有电动阀，并利用控制装置进行控制，实现不同试剂的自动输出和回收，并能降低不同溶液通过同一管路造成的相互污染。

摘要： 本发明公开了一种钌金属配合物及其在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的应用。在聚丙烯酰胺凝胶电泳中，该钌金属配合物可以做蛋白染色又可以用于核酸染色的新的钌金属配合物，并且用于染色时，方法操作简便，无需脱色、节约、检测灵敏高、质谱兼容、不会对环境造成污染，并且可直接用紫外或蓝光激发观察。

摘要： 本发明属于蛋白质检测技术领域，公开了一种用于聚丙烯酰胺凝胶电泳的蛋白质染色试剂盒及其染色方法。该试剂盒包括A液和B液，A液包括金属离子，B液包括含还原性分子的水溶液，还原性分子中含有巯基，其中的试剂不易挥发，不产生废液，对实验操作人员和环境友好；对蛋白质染色的灵敏度高，综合成本低。该试剂盒的染色方法为：电泳结束，取聚丙烯酰胺凝胶置于A液中，孵育1min～60min，用水洗聚丙烯酰胺凝胶；将上述聚丙烯酰胺凝胶置于B液中，孵育1min～60min，用水洗聚丙烯酰胺凝胶。上述方法操作简便，仅使用水作为唯一溶剂，实现快速、无污染的聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白质染色分析。

摘要： 本发明公开了一种管状聚丙烯酰胺凝胶电泳槽，包括底桶、中桶、盖板、接线块和硅胶垫，中桶设置在底桶内，底桶和中桶上端外周上均设有外沿，中桶上的外沿位于底桶上的外沿上端，盖板设置在中桶上端，盖板上设有贯穿盖板、中桶外沿和底桶外沿的螺孔，螺孔内设有螺杆，接线块设置在盖板上端中部，中桶底上中部设有圆柱体，中桶底上圆柱体的周围均匀设有圆孔，硅胶垫设置在圆孔内，硅胶垫中部设有贯穿硅胶垫的插孔；中桶下端中部设有圆筒，圆筒壁上设有通孔；圆柱体上端设有两个电极安装孔，电极安装孔分布在圆柱体中部和一侧，电极安装孔内均设有电极接头，圆柱体上位于圆柱体中部的电极安装孔一侧设有孔洞，孔洞下端延伸至圆筒内。

摘要： 本发明公开一种聚丙烯酰胺凝胶电泳显影仪及其显影方法，包括显影槽、试剂供给装置、双向齿轮泵以及控制装置；所述试剂供给装置包括蒸馏水桶和若干试剂桶，所述蒸馏水桶和若干所述试剂桶汇集连通到第一管路上，且所述蒸馏水桶和每个所述试剂桶分别与所述第一管路之间设置有电动阀，所述电动阀与所述控制装置电连接，所述第一管路的一端与所述双向齿轮泵连通，另一端连接有残液收集装置；所述显影槽上设置有与所述控制装置电连接的液面传感器；本发明通过设置双向齿轮泵与不同的试剂桶和蒸馏水桶进行连通，之间设置有电动阀，并利用控制装置进行控制，实现不同试剂的自动输出和回收，并能降低不同溶液通过同一管路造成的相互污染。

摘要： 本发明涉及一体式聚丙烯酰胺凝胶电泳装置，其由上槽、下槽、边板、大板、小板、梳子和紧固件组成；上槽是一个长方容器，其中一个侧面有一个方形缺口和一个凸轨，容器里面有阴极电极，容器的底部有阳极电极；下槽是一个长方槽，上面有卡槽用于插拔式固定所述上槽；边板是一个挡板，用于抬高上槽液面；大板由大板架和大方玻璃组成，大方玻璃被固定在大板架的卡槽里，大板架的一侧有凹轨；小板由小板架和小方玻璃组成，小方玻璃被固定在小板架的卡槽里，小板架的一侧有凸轨；大板和小板在顶部由一对轴两点固定，下方可开合，大板和小板一起构成凝胶盒；紧固件用于将上槽与凝胶盒、凝胶盒与凝胶盒或凝胶盒与边板夹起来。电泳时，凝胶盒的数量可变。

摘要： 本发明公开了一种基于聚丙烯酰胺凝胶电泳的生物样品中炭黑定量的方法。该方法包括下述步骤：1)配制含不同浓度炭黑的BSA溶液，分别进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，使用UMAX Magic扫描仪对每条炭黑‑BSA复合物对应的电泳条带进行图像扫描，利用Gel‑pro图像软件测量所述电泳条带的光密度(IOD)，建立IOD与炭黑浓度的标准曲线；2)将待测生物样品进行前处理，再将处理后的生物样品采用步骤1)中的方法进行测定，得到所对应电泳条带的IOD，代入步骤1)的标准曲线，得到所述待测生物样品炭黑浓度。该方法所需的样品少，费用低廉，但具有很高的可靠性和准确性。

摘要： 一种聚丙烯酰胺凝胶电泳的垂直电泳胶床，涉及一种垂直电泳胶床。本实用新型是要解决现有的聚丙烯酰胺凝胶电泳玻璃板无法起到带型分析的参照作用的问题。垂直电泳胶床，包括前玻璃板、后玻璃板、齿梳和封边条，所述后玻璃板上设有多条水平刻度线和一条垂直校准线，所述垂直校准线与水平刻度线垂直。本实用新型通过在玻璃板上设置刻度线，在电泳时，很容易判断电泳位置，使相同的染料在不同胶内跑至相同的位置，这样增加了不同胶板之间的可比性，提高了带型分析的准确度。应用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。

摘要： 本实用新型涉及DNA相关技术辅助设备领域，具体公开了一种用于聚丙烯酰胺凝胶电泳自动补液的装置，包括电泳装置，所述电泳装置包括第一电泳槽和第二电泳槽，所述第一电泳槽与所述第二电泳槽共有四套；所述第一电泳槽与所述第二电泳槽之间设有电泳板，所述第一电泳槽上方设有电泳仪，相邻的第一电泳槽之间设有联通管，所述第二电泳槽下方设有排液管，最左侧的第一电泳槽上方设有自动补液装置。本实用新型主要解决补加电泳TBE的问题，把原来的人为手动定时补加改变成自动补加TBE，既省时省力，且不会产生因为遗忘导致漏加等问题。

摘要： 本实用新型公开了一种用于蛋白及核酸聚丙烯酰胺凝胶电泳的模架支撑盒，包括凹形板、矩形板、多孔上样成型器和指示梳孔。本实用新型不更改分离胶配方，只在外界结构上通过在特定区域内收缩蛋白及核酸聚丙烯酰胺凝胶电泳的模架支撑盒和内部空间，样品通过该区域的通道变得狭窄，从而提供样品压缩效果，为制胶过程的简化起到重要的作用，并且取消了不影响蛋白或核酸检测的浓缩胶，不仅简化了电泳实验制胶过程，同时也使得凝胶配置的成功率大大提高，解决浪费问题，通过在特定区域内收缩蛋白及核酸聚丙烯酰胺凝胶电泳的模架支撑盒和内部空间，使得样品通过该区域的通道变得狭窄，从而提供样品压缩效果，为制胶过程的简化起到非常重要的作用。