摘要:
目的:提取和鉴定人血清中甘露聚糖结合凝集素.方法:用CNBr活化Sepharose 6B交联甘露聚糖,制备甘露聚糖-Sepharose 6B亲和层析柱,从人血清中分离纯化甘露聚糖结合凝集素.结果:提取的蛋白用巯基乙醇处理,经SDS-PAGE电泳证实为单一条带的29KD成份.该蛋白与甘露聚糖在含Ca2+条件下结合具有抗补体效应.结论:从人血清提取获得了甘露聚糖结合凝集素. 甘露聚糖结合凝集素(mannan binding protien,MBP)又称甘露糖结合凝集素(mannose bindinglecti protien,MBL)是由Kawasaki等于1978年首次从兔肝细胞质液中分离的一种蛋白质,鉴于此成份能与甘露糖特异结合,称之为甘露糖结合蛋白(mannose binding protien,MBP),嗣后,又从兔血清和人血清中相继提取了MBL.一些作者亦发现牛、猪、鼠等哺乳动物血清中也存在MBL.实验证实,MBL属凝集素超家族中胶凝素家族成员之一,是一种C型(Ca2+依赖型)凝集素,因此又命为甘露糖结合凝集素(mannose bindinglectin,MBL).MBL分子结构具有两个主要功能区,即糖识别域(carbohydrate-recognition domain,CRD)和胶原样区(collagen-1ike region,CLR),使其可选择性的与多种细菌、病毒、真菌以及某些肿瘤细胞表面的糖结构结合,进而通过凝集素途径活化补体系统或调理吞噬细胞功能,启动机体天然免疫功能,在免疫防御和免疫稳定中起重要作用.人体中MBL存在的质量与某些感染性疾病和自身免疫病等易感性增加有关,为进行对MBL的实验和临床应用研究,我们从人血清中提取了MBL并以此制备了抗MBL单克隆抗体.