体外细胞培养

摘要： 神经胶质瘤是颅内肿瘤中最常见的恶性肿瘤,因其侵袭程度高,目前治疗效果极差.其具有高度异质性,在肿瘤内部的不同细胞以及肿瘤微环境之间具有复杂的相互作用,因此,我们需要找到一个最佳的培养条件,保持分子基因型和表型以及原始肿瘤在体外和体内的异质性.细胞培养是细胞学研究的基本方法之一,因其独特的优势在各种肿瘤疾病研究中应用广泛.胶质瘤细胞培养方法已基本成熟,主要通过二维(two-dimensional,2D)细胞培养技术和三维(three-dimensional,3D)细胞培养.胶质瘤细胞体外培养主要用于研究胶质瘤的发病机制,同时在药物治疗、放射治疗、免疫治疗等角度为临床工作提供新的治疗思路.本文就胶质瘤细胞体外培养技术及细胞培养的应用进展作一综述.

摘要： 皮脂腺是皮肤的重要附属器官,其功能的异常与痤疮及其他皮脂腺相关疾病密切相关.人皮脂腺细胞体外培养模型的建立为研究皮脂腺功能及其相关疾病的研究提供了良好的平台.目前已经建立了永生化人皮脂腺细胞系:SZ95细胞、SEB-1细胞和Seb-E6E7细胞,并已成为研究皮脂腺功能和活性调节以及痤疮和其他皮脂腺相关疾病发病机制和治疗的工具.对人皮脂腺细胞体外培养实验方法的各个阶段、永生化人皮脂腺细胞系的建立及其在临床研究方面的应用进展作一综述.

摘要： 皮脂腺是皮肤的重要附属器官,其功能的异常与痤疮及其他皮脂腺相关疾病密切相关.人皮脂腺细胞体外培养模型的建立为研究皮脂腺功能及其相关疾病的研究提供了良好的平台.目前已经建立了永生化人皮脂腺细胞系：SZ95细胞、SEB-1细胞和Seb-E6E7细胞,并已成为研究皮脂腺功能和活性调节以及痤疮和其他皮脂腺相关疾病发病机制和治疗的工具.对人皮脂腺细胞体外培养实验方法的各个阶段、永生化人皮脂腺细胞系的建立及其在临床研究方面的应用进展作一综述.

摘要： 皮脂腺是皮肤的重要附属器官,其功能的异常与痤疮及其他皮脂腺相关疾病密切相关.人皮脂腺细胞体外培养模型的建立为研究皮脂腺功能及其相关疾病的研究提供了良好的平台.目前已经建立了永生化人皮脂腺细胞系:SZ95细胞、SEB-1细胞和Seb-E6E7细胞,并已成为研究皮脂腺功能和活性调节以及痤疮和其他皮脂腺相关疾病发病机制和治疗的工具.对人皮脂腺细胞体外培养实验方法的各个阶段、永生化人皮脂腺细胞系的建立及其在临床研究方面的应用进展作一综述.%Sebaceous gland is the vital appendix organ of skin,and the abnormal of its function is associated with the development of acne and other diseases involving the sebaceous gland.The establishment of human sebocytes culture models in vitro provides a good platform for the study of sebaceous gland function and related diseases.At present,there has been already developed the immortalized human sebaceous gland cell lines,like SZ95 sebocytes,SEB-1 sebocytes,Seb-E6E7 sebocytes,which become unique tools for research on functions and activity regulations of sebaceous gland,as well the pathogenesis and therapy of acne and other sebaceous gland-associated disorders.This article summarizes the foundation of human sebocytes culture models in vitro and the development of immortalized human sebaceous gland cell lines,also discusses its applications in clinic researches.

摘要： 【据《Hepatology》2017年4月报道】题：血源性HCV在人类胎肝干细胞中的高效复制（作者Guo X等） 由于缺乏可有效模拟HCV感染的细胞模型,使得HCV感染的机制研究、特异性抗病毒治疗药物筛选和预防性疫苗研制都受到了很大的限制。作者基于人类胎肝干细胞（hFLSC）建立了一套可以支持血液来源的HCV（bbHCV）感染的全生命周期体外细胞培养模型。

摘要： 随着生命科学研究进入后基因组时代，人类面临的主要挑战已成为解读基因组这本记载生命奥秘的天书，即了解基因在发育和疾病中的功能并研究基因调控的分子机制。在基因打靶技术诞生之前，人类对高等模式生物中基因功能的认识主要来自于对人类患者和实验动物中随机突变的连锁分析和相关性研究、少量的过表达转基因动物研究，以及大量的体外细胞培养实验。

摘要： 目的 研究孔石莼多糖(U)及其硫酸酯化衍生物(HU)对不同肿瘤细胞株生长的影响.方法 利用体外细胞培养模型,应用CCK-8法分析孔石莼多糖U及其硫酸酯化衍生物对不同肿瘤细胞生长的影响.结果 孔石莼多糖U及其硫酸酯化衍生物HU对人肝癌细胞HepG2、人肺癌细胞SPC-A-1、人胃癌细胞CDX2、人乳腺癌细胞MDA-MB-231均具有一定的抑制作用,但作用又有明显差异.对孔石莼多糖(U)进行硫酸酯化衍生化后增强了对HepG2、SPC-A-1、CDX2及MDA-MB-231肿瘤细胞的抑制作用.结论 孔石莼多糖(U)及其硫酸酯化衍生物(HU)对不同肿瘤细胞生长具有一定的抑制作用,硫酸酯化孔石莼多糖(HU)对肿瘤细胞的抑制作用强于孔石莼多糖(U).

摘要： 探讨壮通饮对体外培养大鼠大脑海马区内源性神经干细胞(neural stem cells,NSCS)分化作用的影响.利用无血清DMEM/F12(含20 ng/mL bFGF和EGF及2％B27)体外培养技术从新生Wistar大鼠大脑海马区中培养NSCS,在NSCS分化过程中添加不同剂量(20、40和80 mg/L)壮通饮进行干预,以免疫荧光及细胞化学方法对NSCS及其分化后的细胞进行鉴定.从大脑海马区分离培养的NSCS能够表达巢蛋白(Nestin),并具有分化为神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞的能力.在同一接种密度条件下,不同剂量壮通饮干预组的Nestin阳性细胞表达数分别为:20 mg/L组:21.5±2.9;40 mg/L组:18.6±2.4;80 mg/L组:16.7±2.2,与对照组(24.8±3.1)比较明显减少(P＜0.05).而壮通饮干预组表达神经元核心抗原(NeuN)、胶原纤维酸性蛋白(GFAP)、髓鞘碱性蛋白(MBP)的阳性细胞数较对照组明显增加(P＜0.05).通过本实验证实壮通饮能诱导大脑海马区NSCS分化,具有一定的促进神经再生的作用.

摘要： 斑马鱼作为模式生物越来越多地被用于评估药物的安全性、毒性及其疗效。多项研究证实斑马鱼与哺乳动物的毒理特性有着惊人的相似，可作为一种动物模型应用在细胞检测和常规动物实验中。虽然潜在的药效评价大多是通过体外细胞培养来进行的，但却不能预测出在动物实验中的药效和造成药物毒性的复杂代谢。所以，许多在体外实验结果中有效的药物在昂贵的动物实验中失败。然而，目前尚没有一种使用斑马鱼作为动物模型单独针对毒理测试的参考读物。本书通过斑马鱼作为模型详细阐述了评估药物毒性与安全性的方法，同时也为毒理学研究提供了一个实用指南。

摘要： 目的 探讨壮通饮对体外培养大鼠大脑海马区内源性神经干细胞(NSC)分化作用的影响.方法 利用无血清DMEM/F12(含20 ng/mL bFGF和EGF及2%B27)体外培养技术从新生Wistar大鼠大脑海马区中培养NSC,在NSC分化过程中添加不同剂量(20 mg/L、40 mg/L和80 mg/L)壮通饮进行干预,以免疫荧光及细胞化学方法对NSC及其分化后的细胞进行鉴定.结果 从大脑海马区分离培养的NSC能够表达巢蛋白(Nestin),并具有分化为神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞的能力.在同一接种密度条件下,不同剂量壮通饮干预组Nestin阳性细胞表达数分别为:20 mg/L组 (20.2±1.4);40 mg/L组 (23.6±1.9);80 mg/L组 (32.8±2.2),与对照组(16.7±1.5)比较明显增加(P＜0.05).壮通饮各剂量组表达神经元核心抗原(NeuN)、胶原纤维酸性蛋白(GFAP)、髓鞘碱性蛋白(MBP)的阳性细胞数较对照组明显增加(P＜0.05).结论 壮通饮能诱导大脑海马区NSC分化,具有一定的促进神经再生的作用.

摘要： 目的:通过采用不同血清浓度及体外培养时间对小鼠成纤维细胞L929细胞系生长曲线和细胞形态学的实验研究,了解不同实验条件下对成纤维细胞体外生存和生长情况的影响。rn 方法:采用体外细胞培养技术进行小鼠成纤维细胞L929细胞的培养,并用磺基罗丹明B (sulforhodamine B,SRB)酶标仪法(A490nm波长下)测量各孔的吸光值(OD值)并转化为小鼠成纤维细胞L929细胞系生长曲线。同时,分别采用HE(苏木精一伊红)染色法、吖啶橙荧光染色进行小鼠成纤维细胞L929细胞系形态学观察。rn 结果:小鼠成纤维细胞L929细胞系分别在不同浓度的血清中培养2天、4天、6天、8天,其表现出不同的生长和生存情况及细胞形态学改变。将该细胞系处于相同培养时间和不同血清浓度(0%、20%、40%、60%、80%、100%)时,在20%和40%血清浓度组中,成纤维细胞的生长基本表现为OD值呈现快速增加趋势、且对细胞生长促进作用较强；而血清浓度为0%和100%组对小鼠成纤维细胞L929细胞生长表现出明显抑制作用及OD值呈逐渐减小的趋势。当该细胞系处于不同培养时间、且相同血清浓度时,除0%组OD值呈现减弱趋势,其它浓度组随时间的延长OD值呈增加趋势,在4天之内OD值增长较快,4-6天增长趋势减弱,6-8天增长趋势回升,尤其是100%组。在这种实验条件下,小鼠成纤维细胞L929细胞的形态学也发生了相应改变。rn 结论:不同血清浓度及不同培养时间等体外培养环境对小鼠成纤维细胞L929细胞系生长和生存及细胞学形态均有明显影响,提示利用血清进行体外细胞培养时应充分考虑所添加血清的浓度以及细胞培养的时间,这将为未来皮肤衰老与抗衰老的细胞学研究提供一定的参考价值。

摘要： 目的：以解毒化瘀法立意，选取解毒化瘀中药复方，拟通过体外细胞培养证实其是否存在抗白血病细胞及多药耐药白血病细胞的作用。方法：采用MTT比色法，选择白血病细胞K562及阿霉素诱导的白血病多药耐药细胞株K562/A为靶细胞，观察不同浓度解毒化瘀含药兔血清对其细胞毒作用。结果：解毒化瘀含药兔血清对K562及K562/A均有明显的抑制作用，且其对K562/A的细胞毒作用呈剂量依赖性。结论：解毒化瘀中药在抑制白血病细胞生长及白血病多药耐药细胞生长方面具有深入研究的价值。

摘要： 目的:观察蟾蜍灵对结肠癌(HCT-8)细胞的生长抑制作用. 方法:运用体外细胞培养技术,以不同浓度蟾蜍灵(0.025 umol/L、0.050 umol/L、0.100 umol/L)作用于体外培养的结肠癌(HCT-8)细胞在24、48、72h,用MTT比色法检测细胞生长抑制率. 结果:蟾蜍灵可以抑制结肠癌(HCT-8)细胞生长,并以剂量依赖方式抑制HCT-8细胞的增殖.实验组与对照组比较,均有显著性差异(P＜0.01).给药剂量增加,抑制效率增强.在药物的作用时间上,在48 h以内,是随着作用时间增加,抑制效率增强,48 h到72h观察抑制效率有所增强,但两组间比较,抑制效率没有显著性差异. 结论:不同浓度蟾蜍灵对HCT-8细胞生长有明显的抑制效应.

摘要： 本研究利用体外细胞培养技术对重要、濒危畜禽成纤维体细胞库的构建中最佳培养方法的确立、研究材料的选择、样品储存时间对细胞生长的影响、不同保存温度对细胞生长的影响、血清和培养基对细胞生长的影响、无抗生素细胞体外培养、污染的预防、污染的消除、程序降温对细胞成活率的影响和体外细胞培养关键性用具的改进等决定细胞培养成败与否的关键技术进行了广泛深入的研究,高质量地保存了牛、羊、猪、马、鸡、鸭等47个畜禽品种体细胞22 600余份.此项研究不仅以体外培养细胞的形式为生命科学研究领域提供宝贵的研究材料,同时搭建了我国重要、濒危畜禽品种科学、系统、行之有效的体细胞库构建的技术平台,开辟了畜禽种质资源收集、整理、保存和利用的新途径.

摘要： 目的：采用体外细胞培养方法观察CdCl在不同时间、剂量作用下,诱发NRK细胞凋亡关系,以及CdCl染毒不同时间对bax基因表达的影响。 方法：以不同浓度(0μM、5μM、10μM、20μM、40μM、60μM)CdCl处理细胞12小时及20μM CdCl处理细胞不同时间(1/2、2、6、12、24h)后,应用MTT方法测定细胞生长抑制率,应用DNA凝胶电泳及流式细胞仪检测细胞凋亡,用逆转录-多聚酶链扩增反应(RT-PCR)的方法观察20μmol/L CdCl作用NRK细胞不同时间(0.5～6h)bax mRNA的表达情况。 结果：细胞存活力下降程度与CdCl浓度及染毒时间有相关关系；5μM、10μM、20μM、40μM、60μM浓度CdCl可以诱导NRK细胞凋亡,凋亡率随暴露时间的延长而提高:20μmol/L CdCl处理NRK细胞0.5h,2h,6h后,bax的相对表达量(β-actin为内参照)增加。 结论：CdCl可诱导NRK细胞凋亡,并可上调bax基因表达。

摘要： 本实验以猪-猴异种大动物为实验模型,同样以供体淋巴细胞注射进受体胸腺内为处理手段,通过体外细胞培养的方式,探讨胸腺修饰对自然杀伤细胞和T细胞功能的影响,以及对与这两种细胞相关的细胞因子IFN-γ及TNF-α分泌水平的影响,并探讨两种细胞间的相关作用,从而判断胸腺修饰是否能够在大动物模型中对主要免疫细胞诱导特异性的免疫耐受。

摘要： 本文利用体外细胞培养的方法,于成年和幼年兔体内手术取材,获得膀胱上皮组织,建立动物膀胱上皮细胞培养的方法,为将来临床应用提供参考资料和方法。

摘要： 本文采用成人骨髓基质干细胞,在体外诱导分化为成骨细胞后,种植于CHA上,植入裸鼠股部肌袋内,并对其导位成骨能力进行了观察和分析,为下一步临床应用提供实验依据.

摘要： 本文采用成人骨髓基质干细胞,在体外诱导分化为成骨细胞后,种植于CHA上,植入裸鼠股部肌袋内,并对其导位成骨能力进行了观察和分析,为下一步临床应用提供实验依据.

摘要： 本文采用成人骨髓基质干细胞,在体外诱导分化为成骨细胞后,种植于CHA上,植入裸鼠股部肌袋内,并对其导位成骨能力进行了观察和分析,为下一步临床应用提供实验依据.

摘要： 本发明提供细胞培养装置、细胞培养长期观察装置、细胞长期培养方法、细胞培养长期观察方法，不会产生随着培养细胞的老化而产生的生理状态的变化，而能够在均匀的环境条件下连续地培养、观察细胞，还能够追踪特定细胞的历史(谱系)。细胞培养装置具有细胞培养基板、半透膜、培养液的供给机构，细胞培养基板在表面具有用于保持培养细胞的细的培养用槽和用于将在该培养用槽内保持培养的细胞排出的粗的排出用槽，并且，所述培养用槽的两端与排出用槽连接，排出用槽比培养用槽粗且比培养用槽深，半透膜用于覆盖细胞培养基板的培养用槽以及排出用槽，培养液的供给机构能够对由半透膜覆盖的细胞培养基板连续地供给培养液。

摘要： 本发明公开了一种细胞培养基添加剂、细胞培养基及细胞体外扩增的方法。其中，所述细胞培养基添加剂包括：10‑40mg/mL人血清白蛋白、0.5‑10ng/mL EGF、0.5‑10ng/mL KGF、0.5‑10ng/mL FGF‑10、0.1‑1.0μg/mL氢化可的松、1‑10μg/mL胰岛素以及1‑10μg/mL转铁蛋白。此外，本发明还公开了一种上述的细胞培养基添加剂在细胞培养中的应用。本发明所述的技术方案可以提高人原代表皮角质细胞体外扩增效率，且所得到的细胞能支持构建结构和功能完好的三维重组人体皮肤模型。

摘要： 本发明提供具备适宜的亲水性和强度，细胞接种后的固定性较高，可高效进行细胞增殖的细胞培养用支架材料。本发明的细胞培养用支架材料为含有合成树脂的细胞培养用支架材料，其中，所述合成树脂的氮含量为0.1质量％以上10质量％以下。

摘要： 本发明提供一种降低污染的风险，并且也较好地在同一容器内效率良好地对细胞进行培养、分化诱导等处理的容器。此外，提供一种能够确保广范围且平坦的培养面等的细胞培养容器。容器的制造方法包含：将袋状膜容器载置于形成有凹部的载置台，向所载置的袋状膜容器的内部导入流体，一面对载置台及按压构件中的至少一个加热，一面利用按压构件对载置于载置台的袋状膜容器加压。另一方面，细胞培养容器包含：第1容器壁，其具有透气性，为底面，由平面状的膜构成；及第2容器壁，其具有鼓出形状，该鼓出形状接触于该第1容器壁的周缘部并且相对于第1容器壁而突出；第1容器壁至少于与埠口接触的区域以外呈平面状。

摘要： 本发明提供一种可以在减轻操作者的劳动的同时实现与细胞的培养状况对应的恰当的培养的细胞培养装置。该装置具有：用于增殖细胞的培养袋(18)；为了增殖而用诱导因子刺激细胞的细胞接种盒(19)(或作为抗体刺激及增殖用培养容器的培养袋(242))；储存向这些培养袋(18)、细胞接种盒(19)供给的培养基的培养基盒(20)；取得细胞接种盒内的细胞的图像的CCD照相机(88)；根据由该CCD照相机取得的细胞的图像判定该细胞的培养状况(细胞的增殖可能性和增殖能力)并基于该判定执行培养操作的图像处理用计算机及运转控制用计算机。

摘要： 本发明涉及一种红细胞除去装置(100)，具备：血液容器(10)，其容纳血液；以及红细胞除去器(11)，其从血液容器(10)接受血液，并从血液至少部分地除去红细胞。

摘要： 提供一种细胞的培养方法，在细胞培养器内向细胞导入因子，并在与上述细胞培养器相同的细胞培养器内培养导入了上述因子的细胞。另外，提供一种单核细胞的回收方法，其包括：对血液进行处理，制作至少部分地除去了红细胞而得到的处理血液；对处理血液进行稀释；使稀释后的处理血液中所含的单核细胞沉降；除去稀释后的处理血液的上清液；以及回收单核细胞。

摘要： 本发明提供具备适宜的亲水性和强度，细胞接种后的固定性较高，可高效进行细胞增殖的细胞培养用支架材料。本发明的细胞培养用支架材料中，表面自由能的色散成分γd为24.5mJ/m2以上并且不足45.0mJ/m2，表面自由能的偶极成分γp为1.0mJ/m2以上并且不足20.0mJ/m2。

摘要： 本发明提供细胞培养装置、细胞培养长期观察装置、细胞长期培养方法、细胞培养长期观察方法，不会产生随着培养细胞的老化而产生的生理状态的变化，而能够在均匀的环境条件下连续地培养、观察细胞，还能够追踪特定细胞的历史(谱系)。细胞培养装置具有细胞培养基板、半透膜、培养液的供给机构，细胞培养基板在表面具有用于保持培养细胞的细的培养用槽和用于将在该培养用槽内保持培养的细胞排出的粗的排出用槽，并且，所述培养用槽的两端与排出用槽连接，排出用槽比培养用槽粗且比培养用槽深，半透膜用于覆盖细胞培养基板的培养用槽以及排出用槽，培养液的供给机构能够对由半透膜覆盖的细胞培养基板连续地供给培养液。

摘要： 本发明的目的在于提供一种耐培养液性良好、细胞毒性低，且所培养细胞的黏着率和细胞存活率高、热稳定性良好，而且难以吸收紫外线的细胞培养基质。在包含由无机材料组成的基板的细胞培养基质中，细胞培养基质在培养面上具有多个凹凸结构，在依据JISB0601以及JISR1683并使用原子力显微镜测量凹凸结构时(测量区域为1μm四方，低通轮廓曲线滤波器的截断值为1nm，高通轮廓曲线滤波器的截断值为170nm)，至少在一个方向上的凹凸结构的轮廓曲线元素的平均长度是1～170nm(平均线是在根据最小二乘法将曲线修正为直线时，与其直线平行，且表示轮廓曲线中高度的累计相对频率分布为50％的线，其中，曲线表示被所述高通轮廓曲线滤波器阻断的长波长成分)。