体细胞胚胎

摘要： 以三叶木通成熟种子的幼胚为材料,探讨不同浓度2,4-D(1.0、2.0、4.0 mg/L)、NAA(0.05、0.1、0.2、0.5、1.0 mg/L)、6-BA(0.1、0.2、0.5、1.0 mg/L)、KT(0.2、0.5、1.0 mg/L)的植物生长调节剂对三叶木通愈伤组织的诱导及体细胞胚胎发生的影响,分别筛选出诱导愈伤组织、体细胞胚、次生胚增殖、植株再生的最适培养基,以此间接途径建立三叶木通体细胞胚胎发生及植株再生体系。结果表明:三叶木通种子最佳灭菌处理方式为0.1%HgCl2灭菌18 min,无菌水冲洗干净后接种在添加了0.05%PPM的愈伤诱导培养基上;三叶木通幼胚诱导愈伤组织的最佳培养基是MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA,愈伤诱导率为95.67%;胚性愈伤诱导三叶木通体胚发生的最佳培养基为MS+0.1 mg/L NAA+0.2 mg/L 6-BA,体胚诱导率为55%;次生胚增殖的最佳培养基为MS+0.05 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA,增殖倍数达19.84,体胚随继代次数增多逐渐分化,次生胚增殖活力变弱;成熟的体胚分化后一部分可再生成苗,在MS中能起到壮苗作用,再生植株转移至人工光照培养箱中炼苗3~5 d再转入V(泥炭土)∶V(蛭石)∶V(珍珠岩)为2∶1∶1的基质中能够稳定生根成活且形态正常。

摘要： 为建立蒙古栎体细胞胚胎发生体系,以蒙古栎未成熟合子胚为外植体,通过不同种源、外植体的取材时间、诱导培养基配比、培养条件等筛选得到胚性愈伤组织,进而进行体胚增殖.结果表明:7月上旬是最佳的取材时期(合子胚大小约10 mm),蒙古栎合子胚在培养基MS+2,4-D 1 mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1+水解酪蛋白0.5 g·L-1中胚性愈伤组织诱导率可达85.7％,光照条件对胚性愈伤组织的诱导率影响不显著.不同种源对胚性愈伤组织的诱导率有显著影响.在培养基MS+NAA 0.5 mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1+水解酪蛋白0.5 g·L-1中体胚增殖率最大72.3％,且培养4周时胚性愈伤组织状态最佳.

摘要： 体细胞胚胎发生技术是指植物体细胞在可控条件下不经过受精而发生与合子胚胎发生过程类似的途径培育新植物个体的再生技术.目前在园林绿化、造林工程、林木遗传育种、生理性研究等方面对于松科树种优质种质资源、实验材料的需求较大.与松科树种传统的繁殖手段相比,其体细胞胚胎发生技术不仅繁殖系数更高、遗传稳定性更强,还具有极高的同步萌发率,能在短期内提供大量高品质、遗传稳定、适应性强的再生植株.有发展为未来松科树种工厂化育苗的潜力,有利于进一步实现松科树种中繁殖系数低树种、遗传稳定性差树种遗传改良水平的提升,提高松科树种育种效率,对于解决目前松科树种优质种源稀缺问题具有重要意义.该文总结了目前国内外松科树种体胚发生的研究进展.针对体胚发生所经历的4个阶段,分别从品种与基因型、外植体、培养条件、继代培养方式、外源激素5个方面系统总结了其对于松科树种体细胞胚胎发生过程的影响;同时以体胚发生过程中外源激素施用情况的变化与植株合子胚成熟时体内的生理变化为切入点,创新性地将体胚发生过程与合子胚发育过程联系起来,并对未来松科树种体胚发生条件的探索提供了参考,有利于推动松科树种体细胞胚胎再生理论发展与技术创新.

摘要： 体细胞胚胎发生技术是指植物体细胞在可控条件下不经过受精而发生与合子胚胎发生过程类似的途径培育新植物个体的再生技术。目前在园林绿化、造林工程、林木遗传育种、生理性研究等方面对于松科树种优质种质资源、实验材料的需求较大。与松科树种传统的繁殖手段相比,其体细胞胚胎发生技术不仅繁殖系数更高、遗传稳定性更强,还具有极高的同步萌发率,能在短期内提供大量高品质、遗传稳定、适应性强的再生植株。有发展为未来松科树种工厂化育苗的潜力,有利于进一步实现松科树种中繁殖系数低树种、遗传稳定性差树种遗传改良水平的提升,提高松科树种育种效率,对于解决目前松科树种优质种源稀缺问题具有重要意义。该文总结了目前国内外松科树种体胚发生的研究进展。针对体胚发生所经历的4个阶段,分别从品种与基因型、外植体、培养条件、继代培养方式、外源激素5个方面系统总结了其对于松科树种体细胞胚胎发生过程的影响;同时以体胚发生过程中外源激素施用情况的变化与植株合子胚成熟时体内的生理变化为切入点,创新性地将体胚发生过程与合子胚发育过程联系起来,并对未来松科树种体胚发生条件的探索提供了参考,有利于推动松科树种体细胞胚胎再生理论发展与技术创新。

摘要： [目的]越南紫薯〔Ipomoea batatas(L.)Lam〕品质优良,薯块均匀,商品性好,但产量偏低,产量性状亟待遗传改良,体细胞胚胎发生是快速繁殖和保持种性稳定的基础,对紫薯的遗传改良有重要意义.采用激素处理越南小紫薯外植体,研究越南紫薯的体细胞胚胎再生途径,为通过体细胞无性系变异筛选紫薯高产优质新材料提供新方法.[方法]以市场销售的越南紫薯为材料,以叶片和茎段作外植体,探讨植物生长调节物质种类(6-BA、NAA、2,4-D、ABA)及配比对越南紫薯培养的影响,建立越南紫薯体细胞胚胎发生及再生植株体系.[结果]叶片和茎段诱导愈伤组织培养基相同,难易程度一致,诱导配方为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;在普通愈伤组织诱导形成胚性愈伤组织过程中,2,4-D起重要作用,其他激素起辅助作用,较好的诱导配方为MS+6-BA 0.1 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L;在胚性愈伤组织诱导产生体细胞胚过程中,ABA起着重要作用,并进一步发育和分化的适宜的培养基为MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.2 mg/L+ABA 0.5 mg/L.[结论]叶片和茎段愈伤组织诱导最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+0.2 mg/L NAA,愈伤组织转化为胚性愈伤最佳培养基为MS+6-BA 0.1 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L;胚性愈伤形成体细胞胚胎最佳培养基为MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.2 mg/L+ABA 0.5 mg/L.

摘要： 【目的】更全面地解析龙眼TMK(DlTMK)基因家族的生物学特性及其在龙眼体胚发生早期及不同激素处理下的表达模式。【方法】利用多种生物信息学分析软件预测DlTMK基因家族成员编码的蛋白基本理化性质、染色体定位、系统进化树、基因结构、启动子顺式作用元件等,并采用实时荧光定量PCR((quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术检测DlTMK在龙眼体胚发生早期3个阶段及在不同激素处理下的表达模式。【结果】共筛选出6个DlTMK基因家族成员,其编码的蛋白质均为具有跨膜结构不具有信号肽的亲水性蛋白,主要定位在质膜、细胞质和细胞核上。染色体定位结果显示,DlTMK基因家族存在串联重复序列。DlTMK基因家族在进化方式上与拟南芥、杨树相近。启动子顺式作用元件分析表明,DlTMK基因家族成员启动子中含有多种激素响应、逆境响应及光响应元件。qRT-PCR结果显示,DlTMK基因家族大多数成员在龙眼体胚发生早期各阶段的表达量变化趋势与转录组分析结果基本一致,但不同成员的表达模式存在差异,并且DlTMK基因家族各成员均响应生长素(auxin,IAA)、脱落酸(abscisic acid,ABA)及赤霉素(gibberellic acid,GA3)。【结论】DlTMK基因家族在进化上具有高度保守性,参与多种激素应答,通过推测发现可能以磷酸化的方式参与激素信号传递,调控龙眼体胚发育。

摘要： 本文主要论述目前芝麻组织培养的研究进展,主要包括以器官片段作为外植体的组织培养、体细胞胚胎发生、花药培养、幼胚及原生质培养等方面的研究,为今后芝麻组织培养工作的开展提供理论依据.

摘要： 为建立三红蜜柚体细胞胚胎途径的组培快繁技术体系,采用带腋芽的无菌茎段为外植体,利用正交设计的方法,研究不同的基本培养基与植物生长调节剂对体细胞胚胎的诱导、 分化、 增殖与生根等关键环节的影响.结果表明,胚性愈伤组织诱导的最适宜培养基为MS+2,4-D 1 mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1;在附加6-BA 0.1 mg·L-1的MS培养基上淡黄色的胚性愈伤组织块可诱导形成胚状体;胚状体试管苗在1/2 MS+NAA 0.5 mg·L-1培养基上生根率可达90％,移栽成活率达85％.

摘要： Developmental process of somatic embryogenesis from stem tip in Armeniaca sibirica and main influence factors were studied,to establishment regeneration system of somatic embryogenesis for A.sibirica.The results show that callus induction rate of stem tip in A.sibirica was 100% in the medium of MS+6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.2 mg/L),and the optimal medium for embryonic callus proliferation was MS+6-BA (0.5 mg/L)+2,4-D (0.2 mg/L) + CH (0.5 g/L). The processes of somatic embryogenesis in A.sibirica had obvious stages of global embryo,heart embryo,torpedo embryo and cotyledon embryo.%为了建立山杏体细胞胚胎发生再生体系,以山杏茎尖为外植体,研究山杏体细胞胚胎发生及其主要影响因子.结果表明:山杏茎尖在MS+6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.2 mg/L)培养基中愈伤组织诱导率达100%,胚性愈伤组织增殖的最佳培养基为MS+6-BA(0.5 mg/L)+2,4-D(0.2 mg/L)+水解酪蛋白(0.5 g/L).山杏体细胞胚胎发生过程中能明显看出球形胚、心形胚、鱼雷胚、子叶胚等阶段.

摘要： 目的从生理生化层面探讨瘤毛獐牙菜体细胞胚胎发生过程中生理生化指标与愈伤组织生长发育的关系,并确定愈伤组织最佳继代时间。方法自转接分化培养基起,每隔7 d测定愈伤组织内可溶性糖、可溶性蛋白含量;超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）活性。结果瘤毛獐牙菜体细胞胚胎发生过程中,愈伤组织内可溶性糖、可溶性蛋白含量在35 d左右达到最高值; SOD、POD活性整体呈上升趋势,PPO在14-35 d间活性相对较低。结论根据生理生化指标在体细胞胚胎发生过程中呈现出的变化趋势可推断愈伤组织的生长发育情况;愈伤组织最佳继代时间为28-35 d。

摘要： 以白鹤芋的花序为外植体,研究影响白鹤芋花序体细胞胚胎诱导、增殖、萌发和植株再生转化的主要因素.试验结果表明:体胎直接诱导的最适培养基为MS+6-BA5.0mg/L+KT1.0mg/L+NAA0.1mg/L,体胚增殖最适培养基为MS+6-BA5.0mg/L+ZT0.3mg/L+NAA0.2mg/L,体胚萌发最适培养基为MS+IBA0.1mg/L+GA30.4mg/L+蔗糖30g/L,植株再生转化的最佳激素配方为6-BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L+GA30.5mg/L.

摘要： 以3种不同类型的荔枝TREC为材料,通过优化其体胚发生条件,建立荔枝TREC体胚高频率发生再生系统.结果表明,附加适量的ZT的MS培养基适合作为荔枝TREC诱导体胚发生的培养基;同时附加低浓度2,4-D(0.2 mg·L-1)的MS培养基能诱导荔枝TREC高频率的体细胞胚胎发生,结合接种量控制.可部分替代ZT在荔枝TREC体胚发生中的作用.正常成熟后的体胚,在强光照下可以萌发成苗.

摘要： 研究了青蒿在培养过程中愈伤组织的诱导和体细胞胚胎的发生.主要结果如下:①MS+6-BA(1.0mg/L)是诱导愈伤组织的适宜培养基;②MS+2,4-D(0.5mg/L)是体细胞胚胎发生的适宜培养基;③通过MS+GA3(10mg/L)悬浮培养可大量产生体胚,然后经固体分化培养基产生成熟体胚;④固体培养时体细胞胚起源于愈伤组织的表皮或表皮下的单个启动细胞,然后分裂成体细胞胚.

摘要： 本文以沙地云杉成熟合子胚为材料,测定了沙地云杉体细胞胚胎发生过程中不同阶段,各类型愈伤组织蔗糖含量的变化.结果表明:在诱导和增殖阶段,蔗糖含量的变化趋势相同.在第0-6d蔗糖含量逐渐增加,到第6d时达到最高峰,第7-15d蔗糖含量逐渐下降,16d后比较稳定;分化培养基上的愈伤组织蔗糖含量变化稳定.

摘要： 香蕉是继水稻、小麦、玉米之后的世界第四大粮食作物和近四亿人口的主要粮食,香蕉产业的健康发展具有重要的经济和社会地位.然而大量的病毒、真菌病害、虫害、风害和冷害造成香蕉品质和产量的大幅度下降,严重威胁到香蕉的生存.因此,选育高产并具有高度抗性的优良新品种是香蕉产业持续发展的根本出路.由于香蕉主要栽培品种无种子,具不育性,难于采用传统的育种方法进行遗传改良.利用生物技术方法,如基因工程、体细胞突变和体细胞杂交等,有望达到改良香蕉种质的目的,而所有这些技术的应用都有赖于一个高效的植株再生体系.单细胞起源的体细胞胚胎发生体系为适合于基因操作的有效体系.尽管香蕉胚性细胞悬浮系(ECS)的研究和利用取得了重要的进展,但该培养体系的建立却取决于品种特性,而且常常存在胚性愈伤组织的诱导率低及其植株转换率低、周期过长(10-18个月)、胚性易丢失等问题.因此,建立香蕉和大蕉品种完善的ECS仍然是目前香蕉生物技术育种的瓶颈和有待取得突破的技术平台. 针对以上问题,本论文以我国香蕉的主栽品种和重要种质资源:阿宽蕉(Musa itinerans Cheesm.)、贡蕉(Musa AA Pisang Mas cv.Mas)、过山香(Musa AAB Silk cv.Guoshanxiang)和巴西(Musa AAA Cavendish cv.Baxi)等品种为材料,研究了由三种不同外植体建立胚性细胞悬浮系的方法,并对体细胞胚发生过程进行了组织学研究.

摘要： 本发明公开了一种胚胎培养液，其中含有200～400nM的如结构式(1)所示的化合物。该胚胎培养液效果明显，其克隆胚胎的囊胚率极显著提高，从而提高了克隆技术的效率。本发明还公开了一种体细胞克隆胚胎的处理方法，该体细胞克隆胚胎的处理方法操作简单，效果明显，可以极显著地提高包括但不局限于猪、牛、羊、鼠、人的克隆胚胎的体细胞核移植胚胎体外发育效率。

摘要： 本发明公开了通过核移植获得体细胞起源的胚胎干细胞(由体细胞核编码)，胚胎干细胞样细胞，或其它类型干细胞的方法，以及从这些干细胞诱导出各种分化细胞类型的方法。

摘要： 本发明提供一种改良的核移植方法,该方法包括将分化的供体细胞核移植至不同于供体细胞的物种的去核卵母细胞中。所获核移植单位用于制备等基因胚胎干细胞,尤其是人等基因胚胎细胞或干细胞。这些胚胎细胞或干样细胞对于制备目的分化细胞以及(例如通过同源重组在该细胞的基因组特异位点处)引入、除去或修饰目的基因是有用的。这些细胞可以含有异源基因,在细胞移植治疗和细胞分化的体外研究中尤其有用。本发明还提供了通过遗传改变供体细胞以抑制细胞凋亡,选择特定的细胞周期和/或增强胚胎生长和发育,从而提高核移植效率的方法。

摘要： 本发明公开了一种胚胎培养液，其中含有200～400nM的如结构式(1)所示的化合物。该胚胎培养液效果明显，其克隆胚胎的囊胚率极显著提高，从而提高了克隆技术的效率。本发明还公开了一种体细胞克隆胚胎的处理方法，该体细胞克隆胚胎的处理方法操作简单，效果明显，可以极显著地提高包括但不局限于猪、牛、羊、鼠、人的克隆胚胎的体细胞核移植胚胎体外发育效率。

摘要： 本申请提供从胚胎干细胞(ESCs)或诱导多能干细胞(iPSCs)生成神经前体细胞(NPCs)特别是人神经前体细胞(hNPCs)的方法、细胞培养基及其组合，其中所述NPCs特别适合于临床前和临床应用。

摘要： 包括与不同的患者群体相容的细胞或患者特异性细胞的免疫相容性多潜能干细胞(pSC)广泛应用于再生医学疗法。本文中描述了使用例如使细胞具有接合性减少，抗原性上与许多患者群体相容的所需单倍体的单性生殖或允许产生患者特异性细胞的核转移等技术产生的免疫相容性pSC。本文中描述的方法涉及单性生殖、核转移或pSC细胞系产生。本文中还描述了免疫相容性pSC和通过以上提及的技术产生的细胞系的组合物。

摘要： 包括与不同的患者群体相容的细胞或患者特异性细胞的免疫相容性多潜能干细胞(pSC)广泛应用于再生医学疗法。本文中描述了使用例如使细胞具有接合性减少，抗原性上与许多患者群体相容的所需单倍体的单性生殖或允许产生患者特异性细胞的核转移等技术产生的免疫相容性pSC。本文中描述的方法涉及单性生殖、核转移或pSC细胞系产生。本文中还描述了免疫相容性pSC和通过以上提及的技术产生的细胞系的组合物。

摘要： 本发明公开了通过核移植获得体细胞起源的胚胎干细胞(由体细胞核编码)，胚胎干细胞样细胞，或其它类型干细胞的方法，以及从这些干细胞诱导出各种分化细胞类型的方法。

摘要： 本发明提供了椰子体细胞胚性愈伤组织诱导培养基和椰子体细胞胚胎发生与植株再生的方法，属于椰子组培技术领域。椰子体细胞胚性愈伤组织的诱导培养基，以Y3培养基为基本培养基，每升基本培养基中还含有2,4‑D 20～100mg、TDZ 0～10mg、蔗糖20～30g和植物凝胶1～3g。本发明选用椰子幼嫩花序作为外植体，采用体细胞胚发生途径培养获得椰子再生植株，培养的后代具有与母树完全一致的遗传信息，具有繁殖数量多，稳定性高特点，解决了椰子种子苗后代性状分离，遗传性状不稳定的问题，将为开展优良椰子种苗快速繁殖提供育技术，也可为高效的基因转化提供再生途径。

摘要： 本发明提供了椰子体细胞胚性愈伤组织诱导培养基和椰子体细胞胚胎发生与植株再生的方法，属于椰子组培技术领域。椰子体细胞胚性愈伤组织的诱导培养基，以Y3培养基为基本培养基，每升基本培养基中还含有2,4‑D 20～100mg、TDZ 0～10mg、蔗糖20～30g和植物凝胶1～3g。本发明选用椰子幼嫩花序作为外植体，采用体细胞胚发生途径培养获得椰子再生植株，培养的后代具有与母树完全一致的遗传信息，具有繁殖数量多，稳定性高特点，解决了椰子种子苗后代性状分离，遗传性状不稳定的问题，将为开展优良椰子种苗快速繁殖提供育技术，也可为高效的基因转化提供再生途径。