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BALB/c小鼠胶原诱导关节炎模型的建立方法及特征分析

         

摘要

目的:建立BALB/c小鼠胶原诱导关节炎CIA(Collagen~induced Arthritis)模型及主要特征评价方法.方法:鸡Ⅱ型胶原溶于0.1M冰醋酸中,使其终浓度2 mg/ml,4度过夜,次日,取鸡Ⅱ型胶原与等体积完全弗氏佐剂充分乳化,将乳化后浓度为1 mg/mlⅡ型胶原50μl注射于BLAB/c鼠足跖皮内进行初次免疫.第15天,在相同部位将1mg/mlⅡ型胶原25止进行再次免疫.采用临床症状评分评价小鼠关节肿胀外观,测量小鼠肿胀厚度和小鼠体重并计算脾脏指数.对踝关节进行病理切片,采用HE染色观察滑膜增生,炎性细胞浸润及血管翳形成情况,甲苯胺蓝染色观察软骨损伤状况并评分,TRAP染色观察破骨细胞对骨侵蚀的影响.免疫组化法检测踝关节CD68蛋白的表达并计算平均光密度.结果:初次免疫第3天关节出现轻微肿胀,第18天肿胀最为明显,模型组小鼠体重下降,脾脏指数增加.病理学结果显示:模型组出现滑膜增生,炎性细胞浸润,血管翳形成,软骨损伤等一系列典型RA特征,模型组CD68高表达.结论:采用BALB/c小鼠在其足趾皮内注射鸡Ⅱ型胶原可成功建立CIA模型,重现性好,周期短.病理学分析和临床症状评分评价了该模型具有典型的RA特征.

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