摘要:
滇杨(Populus yunnanensis Dode)是杨柳科(Salicaceae)杨属(Populus)青杨派(Tacamahaca)树种,主产于云南、四川和贵州海拔1300-3200m的山地.具有速生、耐寒、成材早,且易于无性繁殖等特点.滇杨为我国西南地区特有的乡土树种,也是全国乃至世界少有的分布于低纬度高海拔地区的杨树种质资源.然而,滇杨具有易感染杨树黑斑病、杨树溃疡病、易遭蛀干虫害且分枝多的弊端,致使其优良特性不能得到充分的利用.目前,滇杨群体基本以雄株为主,雌株稀缺,遗传资源相对较少,在一定程度上影响着对滇杨不良性状的遗传改良.因此,有必要利用现有的遗传育种手段,创育更多的滇杨种质新材料,对其进行有效的改良,充分利用其生产价值.多倍体育种是有效改良植物种质的方法之一.由于基因剂量的增加,林木多倍体较其二倍体通常表现出营养器官的巨大性,利用多倍体育种常能获得优质、速生、高产及抗性强的林木品种,可大幅缩短用材林等的培育周期,提高单位时间和用地效率.杨树多倍体育种在我国虽然已取得了较多的成果,但有关滇杨多倍体的诱导研究鲜见报道.试验利用已有的滇杨组织培养技术,将生长健壮、无病虫害的一年生滇杨枝条剪成50-60cm长的茎段,摘除全部叶片后置于室内水培,待其长出新叶后剪下叶柄作为外植体.然后通过预培养3-7d后再在附加有30%或40%秋水仙素的分化培养基上培养1-3d,再转入未加秋水仙素的分化培养基中继续培养,以诱导滇杨多倍体种质产生.结果表明:滇杨叶柄在分化培养基中预培养5d后,转接在附加有40%秋水仙素的分化培养基中诱导处理2d,再筛选变异明显的丛生芽,进行多次重复分化培养,可使滇杨多倍化性状得到固定.利用该法诱导滇杨多倍体种质,诱导效果良好,诱变率高达50.96%.由于多倍化滇杨植株在二倍体滇杨生根培养基中生根状况并不理想,因此,试验设计了不同的滇杨多倍化组培苗生根培养方案,筛选出MS+IBA0.10mg/L+NAA0.10mg/L为滇杨多倍化组培苗的最佳生根配方.在此条件下,滇杨多倍化组培苗有较高的生根率及生根数,根毛较多,且幼苗生长健康,叶色墨绿.将诱变后的材料炼苗移栽后,从表型变化上进行多次筛选,最终筛选出10株性状变异明显的多倍化滇杨植株进行染色体数目观察,并以二倍体材料为对照。结果显示,滇杨二倍体材料染色体数目为2n=2X=38;4株多倍化材料叶片近似圆形,染色体数目为2n=4X=76,可以判断其为滇杨四倍体;另6株材料具有较二倍体明显变大变厚的菱形叶,且在同一根尖中发现了38条和76条染色体两种细胞,初步判定其为嵌合体.该试验结果有望为滇杨乃至其他木本植物的多倍体育种工作提供理论参考和实践指导.