摘要:
目的:研究和探讨天花粉水煎剂在体外对人黑色素瘤A375细胞的形态、增殖、周期和迁移的影响.方法:采用显微镜观察天花粉水煎剂作用后的A375细胞形态的改变;利用MTT法检测天花粉水煎剂对A375细胞生长和增殖的影响;采用流式细胞仪检测天花粉水煎剂对A375细胞周期的影响;利用划痕实验观察天花粉水煎剂对A375细胞迁移的影响.结果:显微镜下可观察到对照组A375细胞呈典型的上皮样细胞,细胞呈梭形,细胞膜比较光滑,可见典型的细胞核;不同质量浓度的天花粉水煎剂(160、320、640、1280、2560、5120μg/mL)实验组中,除160、320μμg/mL 天花粉水煎剂组外,均发现呈梭形的细胞数量明显减少,细胞变圆,细胞内出现空泡,细胞死亡的数量较多,且呈质量浓度依赖性.MTT分析结果显示,除160、320μg/mL天花粉水煎剂组外,其他实验组均对A375细胞增殖有不同程度的抑制.640、2560、5120μg/mL天花粉水煎剂作用24h后,实验组细胞抑制率分别为17.25%、19.33%、41.30%,且三组抑制率随天花粉水煎剂质量浓度的增加而增长.这些结果和显微镜下观察到的结果相符.流式细胞术分析结果显示,640、2560、5120μg/mL天花粉水煎剂作用48h后,随着质量浓度的增加细胞增殖周期中间期的三个时期G1期、S期、G2期中细胞所占百分数未见明显改变,即天花粉水煎剂不是通过影响细胞周期的G1期、S期、G2期导致细胞死亡的,而是通过其他途径.细胞划痕实验结果显示,对照组中A375细胞有明显的迁移,划痕愈合明显;而640和5120μg/mL天花粉水煎剂组划痕愈合率低,表明一定浓度的天花粉水煎剂可抑制A375细胞的迁移,这可有效的预防黑色素瘤的恶化和转移,有利于黑色素瘤的预后.结论:综合分析以上结果,可以确定天花粉水煎剂在体外可以改变人恶性黑色素瘤A375细胞的形态,导致细胞死亡;同时确定天花粉水煎剂对A375细胞的增殖具有抑制作用,但其不是通过改变细胞周期中的G1期、S期、G2期来完成的,具体机制需要进一步研究.此外,天花粉水煎剂对A375细胞的迁移具有抑制作用,可以有效地抑制黑色素瘤细胞的转移.