尿激酶原

摘要： 目的探讨急诊冠状动脉介入治疗(PPCI)中血栓抽吸联合尿激酶原对老年高血栓负荷ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者的安全性及有效性。方法选择2017年2月至2019年2月于河北省人民医院行PPCI的老年高血栓负荷STEMI患者70例,按随机数字表法分为对照组和研究组(每组各35例)。对照组患者行血栓抽吸后常规经皮冠状动脉介入治疗(PCI),研究组血栓抽吸后,经冠脉给予尿激酶原20 mg。比较两组患者术后即刻靶血管校正的TIMI帧数(cTFC)、慢血流/无复流、肌酸激酶同工酶(CK-MB)峰值、左室射血分数(LVEF)及随访12个月期间主要不良心血管事件(MACE)及出血事件。MACE包括心源性死亡、再发心肌梗死、靶血管血运重建、心力衰竭。结果研究组患者PPCI术后出现慢血流/无复流的比率、cTFC及CK-MB峰值均低于对照组(P0.05)。结论老年高血栓负荷STEMI患者PPCI术中联合血栓抽吸与尿激酶原可改善心肌再灌注,保留心脏功能,且不增加MACE及出血风险。

摘要： 目的:探讨冠脉内应用尿激酶原溶栓联合直接经皮冠状动脉介入术(PPCI)对STEMI患者 ST段回落率及心肌灌注分级的影响。方法:选取2019年4月-2020年3月宜都市第一人民医院收治的STEMI患者84例,依据治疗方案的不同将其分为对照组和研究组,每组42例。对照组采用PPCI治疗,研究组应用尿激酶原溶栓联合PPCI治疗。对比两组心肌灌注分级、ST段回落率、TIMI血流、cTFC水平、心功能及心肌酶水平。结果:研究组心肌灌注分级中2、3级占比均高于对照组(P<0.05)。研究组患者的cTFC水平低于对照组,ST段回落率及TIMI血流3级患者占比均高于对照组(P<0.05)。干预后,研究组LVEDD水平低于对照组,LVEF及E/A值均高于对照组(P<0.05)。干预后,两组CK、LDH水平较干预前均下降,肌钙蛋白水平较干预前上升,研究组CK、LDH水平均低于对照组,肌钙蛋白水平高于对照组(P<0.05)。结论:STEMI患者应用尿激酶原溶栓联合PPCI治疗可提升ST段回落率,改善心肌灌注分级,提升心功能,改善心肌酶水平,可考虑推广。

摘要： 目的探讨尿激酶原对急性心肌梗死病人经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后血清和肽素、缺血修饰白蛋白(IMA)表达的影响。方法选取我院收治的130例行PCI手术的急性心肌梗死病人,按照病人入院顺序分为联合组与对照组,每组65例。对照组给予比伐卢定治疗,联合组在对照组的治疗基础上加用尿激酶原。比较两组心功能[左心室收缩末期内径(LVESD)、左室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期内径(LVEDD)]、心肌梗死溶栓试验(TIMI)血流分级、校正的TIMI血流帧数计数(CTFC)、血清和肽素、缺血修饰白蛋白(IMA)、肌钙蛋白I(cTnI)、氨基末端脑钠尿肽前体(NT-proBNP)水平、血小板最大凝聚率以及不良心血管事件发生情况。结果治疗后,两组LVESD、LVEDD、血清和肽素、cTnI、NT-proBNP水平、血小板最大凝聚率均较治疗前明显降低,且联合组明显低于对照组(P<0.05);两组LVEF、IMA水平均较治疗前明显升高,且联合组明显高于对照组(P<0.05);联合组TIMI血流分级≤2级病人比例及CTFC明显低于对照组(P<0.05);联合组不良心血管事件发生率明显低于对照组(P<0.05)。结论尿激酶原治疗急性心肌梗死行PCI术病人,能够降低血清和肽素水平,升高IMA水平,提高心功能及心肌灌注量,改善凝血功能,减少不良心血管事件发生。

摘要： 目的探究尿激酶原对急性心肌梗死(AMI)模型大鼠心功能的保护作用及可能机制。方法36只SD大鼠,采用随机数字法分为Sham组(n=12)、AMI组(n=12)和尿激酶原组(n=12)。采用结扎左冠状动脉前降支的方法建立大鼠AMI模型。建模后,尿激酶原组大鼠每天经尾静脉注射2.5 mg/kg尿激酶原,Sham组和AMI组予以等量生理盐水,持续4周,最终各纳入10只大鼠。采用超声心动图评价大鼠心功能,TTC染色观察心肌梗死面积,天狼星红染色观察心肌纤维化情况,Western blot法检测肌红蛋白(Mb)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(collagenⅠ)、转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3和Smad7蛋白表达水平。结果与Sham组比较,AMI组左心室射血分数(LVEF)降低(P<0.05),左心室收缩末期直径(LVESD)、左心室舒张末期直径(LVEDD)、左心室收缩末期容积(LVESV)和左心室舒张末期容积(LVEDV)升高(均为P<0.05);与AMI组比较,尿激酶原组LVEF升高(P<0.05),LVESD、LVEDD、LVESV和LVEDV明显降低(均为P<0.05)。Western blot检测显示,与Sham组比较,AMI组Mb、CK-MB、cTnI、α-SMA、collagenⅠ及TGF-β1、Smad3蛋白水平升高(均为P<0.05),Smad7蛋白水平降低(P<0.05);与AMI组比较,尿激酶原组Mb、CK-MB、cTnI、α-SMA、collagenⅠ及TGF-β1、Smad3蛋白水平降低(均为P<0.05),Smad7蛋白水平升高(P<0.05)。结论尿激酶原可能通过TGF-β1/Smad3信号通路对AMI大鼠心脏重构起到保护作用,从而减轻心肌纤维化,保护心功能。

摘要： 目的:探讨尿激酶原在急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)冠状动脉介入术(PCI)中的应用价值。方法:STEMI患者60例,随机分为观察组和对照组各30例。对照组实施常规PCI术,观察组在PCI术前经微导管于冠脉局部闭塞段注射重组人尿激酶原10 mg,比较两组患者术后即刻TIMI血流情况,术后血清CK-MB及cTnI水平以及hs-CRP、IL-6水平。结果:PCI术后即刻对照组TIMI血流0~Ⅰ级5例(16.7%),Ⅱ级5例(16.7%),Ⅲ级20例(66.7%);观察组TIMI血流0~I级2例(6.7%),Ⅱ级3例(10.0%),Ⅲ级25例(83.3%),观察组冠状动脉慢血流和无复流发生率明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);术后24 h CK-MB和cTnI水平对照组分别为20.14±3.54 ng/mL和22.76±5.87 ng/mL,观察组分别为16.72±4.11 ng/mL和18.98±6.13 ng/mL,两组CK-MB和cTnI水平较术前明显上升,但观察组低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05);术后12 h hs-CRP和IL-6水平对照组分别为10.14±1.37 mg/L和18.53±2.17 pg/mL,观察组分别为8.72±1.59 mg/L和14.04±2.23 pg/mL,术后两组hs-CRP和IL-6较术前明显降低,但观察组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:急诊PCI术联合尿激酶原能减少STEMI患者冠脉无复流和慢血流的发生,降低炎症因子水平。

摘要： 目的探讨急诊冠状动脉介入治疗(PCI)术中血栓抽吸联合尿激酶原治疗高血栓负荷ST段抬高型心肌梗死(STEMI)的安全性及有效性。方法采用回顾性研究方法,纳入2017年2月—2019年2月于河北省人民医院行急诊PCI且术中应用血栓抽吸的高血栓负荷STEMI病人175例。依据术中是否应用尿激酶原冠状动脉溶栓分为血栓抽吸组(111例)和血栓抽吸联合尿激酶原组(64例)。收集病人基线临床资料和急诊PCI术资料,并记录院内及术后12个月内主要不良心脑血管事件(MACCE)和出血事件发生情况。结果血栓抽吸联合尿激酶原组年龄小于血栓抽吸组(P0.05)。Kaplan-Meier分析显示,术后12个月,两组无MACCE生存率比较差异无统计学意义(P=0.206)。结论血栓抽吸联合尿激酶原可改善高血栓负荷STEMI病人急诊PCI术后心肌灌注,降低心源性死亡发生风险,且不增加出血风险。

摘要： 目的:研究高血栓负荷ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者应用尿激酶原联合血栓抽吸的治疗效果。方法:选取行经皮冠状动脉介入治疗术治疗的70例高血栓负荷STEMI患者的临床资料,按照不同的术中血栓治疗方案分为对照组(n=35)和观察组(n=35)。对照组应用病变近端注入替罗非班联合血栓抽吸治疗,观察组应用尿激酶原联合血栓抽吸治疗。比较两组患者心肌组织灌注情况、不良心血管事件发生情况、出血情况及治疗前后的心功能指标。结果:相比对照组,观察组的术后2 h心电图ST段回落>50%的比例明显更高;慢血流/无复流、心肌灌注不良发生率明显更低(P0.05)。结论:应用尿激酶原联合血栓抽吸治疗高血栓负荷STEMI患者,能够明显改善患者心肌组织灌注情况和患者心功能,减少不良心血管事件发生。

摘要： 目的:探讨高血栓负荷ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后接受血栓抽吸联合尿激酶原治疗的效果及对心肌再灌注、预后的影响。方法:选取医院2018年2月至2020年2月收治的92例行PCI治疗的高血栓负荷STEMI患者作为研究对象,按随机对照原则分为对照组与研究组。对照组(46例)接受单纯血栓抽吸治疗,研究组(46例)在对照组基础上联合尿激酶原治疗。对比两组肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)达峰时间,治疗前后两组TIMI血流分级、TMPG分级、心肌损伤相关指标、心功能相关指标,术后6个月主要心血管不良(MACE)事件发生率。结果:研究组CK-MB、hs-CRP、cTnⅠ达峰时间均短于对照组(P0.05)。结论:高血栓负荷STEMI患者PCI术后接受血栓抽吸联合尿激酶原治疗的效果明显,可增加心肌灌注,降低心功能损伤,且不会明显增加MACE发生率。

摘要： 目的:探究冠状动脉内应用尿激酶原(pro-UK)联合替罗非班(TIR)对ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者直接经皮冠状动脉介入治疗(PPCI)过程中心肌灌注保护作用的效果。方法:选取潮州市人民医院2019年7月至2021年6月期间收治的STEMI患者70例,将其随机均分为观察组和对照组,各35例。两组患者均接受常规双抗血小板治疗,即阿司匹林抗+氯吡格雷/替格瑞洛,对照组患者在此基础上应用PPCI+冠状动脉内推注TIR治疗,观察组患者则在对照组基础上应用pro-UK冠状动脉内靶向推注。观察两组患者术中再灌注心律失常不良事件发生率、梗死相关动脉手术前后心肌梗死溶栓试验(TIMI)分级、术后2 h内心电图(ST段抬高总回落率)、治疗1周后左心室射血分数(LVEF)指标、术后随访6个月主要心血管不良事件的发生情况。结果:观察组患者术中再灌注心律失常不良事件发生率相较于对照组,差异无统计学意义(P>0.05);治疗前2组患者TIMI血流分级差异无统计学意义(P>0.05),经治疗后,观察组患者TIMI血流分级相较于对照组患者部分提升,但组间差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者2 h内ST段抬高总回落发生率高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);术后随访6个月观察组相较于对照组心血管不良事件发生有一定减少,但组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:冠状动脉内应用pro-UK联合TIR可以有效改善STEMI患者心功能,保障心肌再灌注情况,患者预后效果良好,TIMI血流分级得到改善,ST段抬高总回落发生率改善、术中及术后不良心血管事件发生率较低。

摘要： 目的 探究尿激酶原(PRO)对冠脉结扎大鼠心肌缺血血流动力学的影响及对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用.方法 选取60 只雄性SD 大鼠,体质量为200～300 g,采用随机数字表法将其均分为对照组、模型组以及PRO 高、低剂量组(2,1 mg·kg-1),每组15只;除对照组外,各组大鼠均采用冠脉结扎手术法制备MIRI模型;检测各组大鼠的平均动脉压(MAP)、左室收缩压(LVSP)和左心室舒张末压(LVEDP)水平;采用Elisa 试剂盒检测血清中炎性因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1 β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;采用试剂盒检测大鼠血清氧化应激物质超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)水平;采用HE 染色观察大鼠心肌损伤情况;采用流式细胞仪检测大鼠心肌细胞凋亡情况;采用蛋白质印迹法检测大鼠c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(P-JNK)、凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)以及Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平.结果 与对照组比较,模型组大鼠M AP、LVSP、SOD 和Bcl-2 蛋白表达水平均显著降低;LVEDP、IL-6、IL-1β、TNF-α、MDA、ROS、心肌细胞凋亡率、Bax 蛋白和 P-JNK 蛋白表达水平均显著升高(P＜0.01),JNK 蛋白表达无显著改变(P＞0.05).与模型组比较,PRO 低剂量组大鼠M AP、LVSP、SOD 和Bcl-2 蛋白表达水平均显著升高;LVEDP、IL-6、IL-1β、TNF-α、MDA、ROS、心肌细胞凋亡率、Bax蛋白和P-JNK蛋白表达水平显著降低(P＜0.01),JNK蛋白表达无显著改变(P＞0.05).与PRO低剂量组比较,PRO高剂量组大鼠MAP、LVSP、SOD和Bcl-2蛋白表达水平均显著升高,LVEDP、IL-6、IL-1β、TNF-α、MDA、ROS、心肌细胞凋亡率、Bax蛋白和P-JNK蛋白表达水平显著降低(P＜0.01),JNK蛋白表达无显著改变(P＞0.05).结论 PRO可改善冠脉结扎大鼠心肌缺血的血流动力学,并通过抑制JNK信号通路的活化从而抑制MIRI大鼠的炎症反应及氧化应激反应.

摘要： 为了解利用毕赤酵母(Pichia pastoris)表达尿激酶原(Pro-UK)这个过程的特点,提高尿激酶原的表达量,本文利用摇瓶发酵对这个体系进行了研究,确定了中细胞生长和尿激酶原表达的规律及各物质的消耗情况,并对培养条件进行了研究.结果表明,在生长阶段,毕赤酵母的快速生长期为6-12h,18h后生长停止;甘油是细胞生长的限制性因素.在表达阶段,细胞密度变化很小.两个阶段中,细胞对PO的需求量都比较大,而对NH的利用比较少.不同培养时间的实验结果证明,将生长阶段缩至24h是可行的.

摘要： 本文通过摇瓶实验,对用毕赤酵母(Pichia pastoris)表达尿激酶原(Pro-UK)的发酵过程进行了初步研究,确定了毕赤酵母在生长和表达阶段的最佳pH、温度和初始碳源加入量,初步掌握了发酵过程的特点,为进一步深入研究打下了基础.实验表明生长阶段和表达阶段以pH为5-6,温度为28°C为好,生长阶段最初甘油加入量3℅(v/v),表达阶段甲醇最初加入量为2℅(v/v).

摘要： 在摇瓶实验确定了基本的发酵条件下,本文研究了在发酵过程中依次加入甘油、甲醇、甘油、甲醇这一调控碳源的方法,使发酵的细胞经历生长、表达、再生长、再表达过程,使产物表达水平提高.摇瓶实验表明:采用这一方法使表达量比对照高一倍以上.这个结果也在10升培养罐上得到证实,发酵罐表达的酶活性得到显著提高,表达的酶活达到了17220IU/ml,比对照提高50℅以上.

摘要： 本发明属于生物技术制药工业中的基因工程生产蛋白药物的技术领域，其目的是利用定点突变，获得尿激酶原变体基因，实现在大肠杆菌中的高效表达，经分离纯化后，在尿激酶或自身及二价金属离子的作用下转变为双链尿激酶变体，以解决目前临床上使用的尿源性尿激酶来源困难，成本高及可能带有病毒污染的缺点，从而降低临床用尿激酶的成本及提高用药安全性。

摘要： 本发明提供了一类新的可作为尿激酶原和尿激酶亲和配位体的化合物，该化合物的制备方法，以及这类新亲和配位体在纯化生产尿激酶原和尿激酶(尤其是人尿激酶原和尿激酶)的应用。本发明还提供了新的用于纯化尿激酶原和/或尿激酶的亲和介质和方法。本发明可高效率、低成本的大规模生产人尿激酶原和尿激酶，尤其是高纯度的医用级产品。

摘要： 本发明属于生物医药领域，公开了尿激酶原及尿激酶原变体在急性心肌梗塞易化经皮冠状动脉介入中的应用。该应用方法是当病人急性心肌梗塞发生后的6小时以内，首先采用尿激酶原或尿激酶原变体进行溶栓治疗，然后采用经皮冠状动脉介入手术，以尽快开通梗死相关的冠状动脉，重新建立起有效的前向血流，使缺血心肌得到再灌注。本发明将尿激酶原及尿激酶原变体用于急性心肌梗塞易化经皮冠状动脉介入，具有优于直接PCI的效果。

摘要： 本发明属于生物医药领域，公开了尿激酶原及尿激酶原变体在急性心肌梗塞易化经皮冠状动脉介入中的应用。该应用方法是当病人急性心肌梗塞发生后的6小时以内，首先采用尿激酶原或尿激酶原变体进行溶栓治疗，然后采用经皮冠状动脉介入手术，以尽快开通梗死相关的冠状动脉，重新建立起有效的前向血流，使缺血心肌得到再灌注。本发明将尿激酶原及尿激酶原变体用于急性心肌梗塞易化经皮冠状动脉介入，具有优于直接PCI的效果。

摘要： 本发明属于生物技术制药工业中的基因工程生产蛋白药物的技术领域,其目的是利用定点突变,获得尿激酶原变体基因,实现在大肠杆菌中的高效表达,经分离纯化后,在尿激酶或自身及二价金属离子的作用下转变为双链尿激酶变体,以解决目前临床上使用的尿源性尿激酶来源困难,成本高及可能带有病毒污染的缺点,从而降低临床用尿激酶的成本及提高用药安全性。

摘要： 本发明提供了一类新的可作为尿激酶原和尿激酶亲和配位体的化合物,该化合物的制备方法,以及这类新亲和配位体在纯化生产尿激酶原和尿激酶(尤其是人尿激酶原和尿激酶)的应用。本发明还提供了新的用于纯化尿激酶原和/或尿激酶的亲和介质和方法。本发明可高效率、低成本的大规模生产人尿激酶原和尿激酶,尤其是高纯度的医用级产品。

摘要： 本发明是以尿激酶原催化活性域的空间结构为基础,设计了尿激酶原催化活性域专一的亲和配位体的功能结构。具有该结构特征的功能基团固定在不同的分子骨架上构成有机小分子化合物。这类化合物固定于基础层析介质,藉此改进尿激酶原和尿激酶的亲和分离,可用于大规模生产尿激酶原和尿激酶。这类化合物固定也可作为尿激酶原和尿激酶的抑制剂,具有潜在基础研究和医疗用途。

摘要： 本发明提供了一种重组人尿激酶原注射液及其制备方法。所述重组人尿激酶原注射液包括重组人尿激酶原、保护剂和缓冲溶液；所述保护剂包括海藻糖。本发明所提供的重组人尿激酶原注射液稳定性良好，克服了重组人尿激酶原在液体制剂中不稳定的问题。本发明所述的重组人尿激酶原注射液在2～8°C避光储存条件下有良好的稳定性。本发明提供的重组人尿激酶原注射液使用方便快捷，能够改善医护人员的使用效率、提高顺应性、节约抢救时间。

摘要： 本发明属于生物医药技术领域，具体涉及尿激酶原及其变体在病毒引起的凝血疾病中的应用。研究发现，在病毒感染的患者中使用预防剂量的尿激酶原及其变体，在不增加出血风险的前提下，能够有效地阻止血栓凝块的形成，从而有效地预防病毒导致的弥散性血管内凝血、ST段抬高型心肌梗死、缺血性卒中、肺栓塞、深静脉血栓和静脉血栓栓塞症等凝血相关疾病。当病毒感染导致患者产生血栓形成后，利用治疗剂量的尿激酶原及其变体对患者进行溶栓治疗，能够有效地溶解血栓，降低其带来的致死致残风险。本发明从预防和治疗两方面，充分说明了尿激酶原及其变体在病毒感染中引起凝血疾病时，降低病毒对患者造成的损害以及可能的后遗症，并提高患者的生存率。

摘要： 本发明一种分析注射用重组人尿激酶原杂质的毛细管电泳检测方法及其应用。所述毛细管电泳检测方法包括如下步骤：(1)使用样品缓冲液稀释样品，所述样品包括非还原样品或还原样品，而后在所述还原样品中加入还原剂，或在所述非还原样品中加入烷基化试剂，混合；(2)将步骤(1)所述混合后得到的样品加热、冷却后离心，再转移至上样管中；(3)将所述上样管置于毛细管电泳仪上，运行所述毛细管电泳仪并开始进样，分离所述样品后得到毛细管电泳检测图谱，分析所述图谱得到检测结果。该方法能够将重组人尿激酶原中的杂质有效分离，且多批样品的重现性好，准确度高。