异种器官移植

摘要： 猪是重要的农业经济动物,也是生物医学研究的理想动物模型之一。自2013年首次将成簇的规律间隔短回文重复序列(CRISPR/Cas9)系统应用于哺乳动物以来,基因编辑猪在农业育种、医学研究、人源化器官生产和临床疾病治疗等多个领域取得突破性进展。文章围绕基因编辑猪的研究现状,对CRISPR/Cas9系统在猪遗传育种、人类疾病模型建立和异种器官移植等方面的应用进行综述,以期为我国养猪业健康发展和生物医药研究提供参考。

摘要： 2022年1月7日是一个值得载入人类器官移植史册的日子——美国马里兰大学医学院外科医生团队成功将一颗基因修饰猪的心脏移植到一名57岁男性心衰患者David Bennett的体内。这是全球首例基因修饰猪心脏移植到活人体内的手术。David Bennett接受移植的猪心脏来自一家美国公司,该公司对提供心脏的猪进行了10处的基因编辑,敲除了3个导致免疫排斥反应的相关基因和1个与猪心脏组织过度生长相关的基因,同时插入了6个人类免疫、凝血、炎症调节相关基因。

摘要： 在2020年至2021年新型冠状病毒肺炎(新冠肺炎)疫情流行期间,全球肺移植进入新发展阶段。全球范围内,上报国际心肺移植学会(ISHLT)的肺移植数据已经超过70000例。肺移植供者和受者特征、儿童肺移植受者的适应证随着时间和医疗技术的发展,发生了巨大的变化。肺移植在新冠肺炎相关急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者中的治疗也受到全球瞩目。肺移植外科技术不断发展,也将与更多的新技术融合,在人工肺脏和异种移植领域获得新的突破。本文总结了全球肺移植供、受者特征研究的最新进展,并进一步展望未来发展的趋势,以期终末期肺病患者能够从肺移植技术发展中得到更多获益。

摘要： 器官短缺是制约器官移植发展的重要因素,而异种器官移植是解决器官移植短缺的有效途径。猪作为异种器官移植研究的最佳供体动物已得到广泛认可,但要实现猪异种器官移植的临床应用需要克服多重免疫排斥反应。基因修饰猪的改造,为解决免疫排斥反应实现异种器官移植提供了理论支撑。本文以免疫排斥反应发生的时间先后为顺序,依次对基因修饰猪在克服超急性排斥反应、急性血管排斥反应、细胞排斥反应和慢性排斥反应的研究进展进行了综述。

摘要： 目的 探讨目前国际上基因改造程度最大的基因编辑猪在临床前异种器官移植中的应用前景.方法 将1只猪内源性逆转录病毒(PERV)敲除联合3种主要异种抗原基因敲除以及抑制补体活化、调节凝血紊乱、抗炎抗吞噬的9种人源化基因转入猪(PERV-KO/3-KO/9-TG)作为供体,获取其心脏、肝脏和肾脏,分别移植给3只恒河猴受体,建立猪-猴异种器官移植临床前研究模型.观察血流重建后各移植物的功能状态并总结受体存活情况;监测移植物的血流动力学情况;比较各器官移植受体的血液学指标变化;观察移植物组织病理学表现.结果 血流重建后各移植器官颜色红润、质地柔软、血流灌注状态良好.术后1 d,移植心脏、肝脏和肾脏均表现为动、静脉血流状态充盈,灌注情况良好.心脏、肝脏和肾脏移植受体的术后存活时间分别为7 d、26 d和1 d.心脏移植受体术后1 d肌酸激酶、肌酸激酶同工酶以及乳酸脱氢酶水平均升高,至术后6 d逐渐恢复至接近正常水平.术后7 d各项指标均急剧升高.肝脏移植受体术后2 d天冬氨酸转氨酶水平升高,术后10 d转氨酶基本恢复正常,但总胆红素持续升高.术后12 d天冬氨酸转氨酶和丙氨酸转氨酶水平均出现升高,至术后15 d达到高峰.肾脏移植受体术后1 d出现轻微蛋白尿,后因突发严重心律失常死亡.组织病理学显示心脏和肾脏移植物组织结构接近正常,移植肝脏表现为片状坏死,肝组织结构出现紊乱,并伴有炎症损伤、间质出血和血栓性微血管病形成.结论 PERV-KO/3-KO/9-TG猪在克服超急性排斥反应、缓解体液性排斥反应及凝血紊乱方面具有一定优势,但其能否作为临床异种器官移植潜在供体需进一步评估.

摘要： 采用不断发展的基因编辑技术,近年来对猪的基因组改造不仅构建出涵盖心血管疾病、神经退行性疾病、新陈代谢疾病、癌症、免疫缺陷等各方面的人类疾病模型,而且通过对猪进行基因编辑实现了降低异种移植免疫排斥、敲除猪内源性逆转录病毒以及生产嵌合体动物等,使猪异种器官移植的应用更前进了一步.综述梳理基因编辑技术,尤其是CRISPR/Cas9技术在异种器官移植及人疾病模型构建方面的研究进展.

摘要： 临床输血和输血相关免疫对移植物成活至关重要.随着移植技术的发展,实现了肝移植、肾移植、小肠移植、肺移植、子宫移植、造血干细胞移植,异种器官移植也在积极探索,研究者也逐步对移植相关输血有了新的认识.本文阐述了实体器官移植及造血干细胞移植相关血液免疫学、围术期移植输血管理和异种器官移植未来的关注方向三个方面的内容,以期为移植技术发展过程中临床输血提供新的思路.

摘要： 近期,一条轰动医学界的新闻引发关注:世界首例猪肾移植人体成功。据多家外媒报道,9月25日,在美国纽约大学朗格尼医学中心,外科医生进行了一场被称为异种器官移植的手术。移植器官肾脏来源于一头转基因猪,它被移植到一位脑死亡志愿者体内,移植后的肾脏工作了54小时。

摘要： 猪是重要的农业经济动物,其在遗传背景、解剖学、生理病理学、营养代谢和疾病特征等方面与人类高度相似,是农业生产性状改良、人类疾病动物模型和异种器官移植研究的重要对象.随着ZFN、TALEN和CRISPR等基因编辑技术的出现,转基因或基因编辑猪的研究取得快速发展.本文将结合当前我国转基因及基因编辑猪的研究现状,对基因编辑技术在农业生产性状改良如提高产肉量、改善肉质、提高抗病能力和建立人类疾病模型、动物生物反应器、异种器官移植等方面进行综述,以期为猪遗传改良和医学研究提供参考.

摘要： 一支德国研究团队的新研究中,将猪的心脏移入了一头狒狒体内,并让狒狒继续存活了195天之久。整个医学界和科学家都为之震惊。科学家们对此大作赞扬,称其为一次“里程碑式的突破”。将一种动物的健康心脏移入另一种动物体内,这一过程名叫异种器官移植。科学家一直认为,这种方法或可用于治疗严重限制或威胁患者生命的心脏疾病。

摘要： 异种器官移植是解决供体器官严重短缺的一种途径，而异种移植成功的最大障碍是异种免疫排斥反应，其中最严重的是超急性排斥反应(HAR)。本文就异种器官移植HAR的发生机理、克服免疫屏障的方法和发展趋势以及小型猪作为供体的研究等方面国内外的研究进展进行综述和讨论。

摘要： 本文阐述了比较医学的定义，并论述了研究的内容，包括比较生物学、比较解剖学、比较免疫学、比较流行病学以及比较呼吸系统病学等，然后探讨了小型猪在比较医学中的重要性，并分析了小型猪在心血管和糖尿病、免疫学和异种器官移植、遗传性和营养性疾病、皮肤病和外科以及肿瘤学方面的应用情况，最后展望了猪的比较医学的发展前景。

摘要： 目的：为探讨五指山小型猪(WZSP)近交系群体中SLAⅠ3(SLA-3)位点等位基因分布结构及其特性。rn 方法：利用四对引物采用RT-PCR成功扩增了32头WZSP SLA-3基田部分外显子1、外显子2和大部分外显子3序列。根据家系和扩增结果,选择8头个体的PCR产物克隆测序。rn 结果：获得9个不同的核苷酸序列。与GenBank中所用SLA-3基因的核秆酸序列及其编码的氨基酸序列进行比较分析,确定这9个序列均为SLA-3位点上的新等位基因,但这些等位基因间核苷酸变异很少；氨基酸序列比较发现猪和人之间有很高的保守性。同时,构建了23个SLA-3的等位基因和1个HLA-A等位基因核苷酸序列的系统树。rn 结论：表明WZSP在SLA-3位点和其它猪品种有明显的差异,拥有其独特的遗传资源。从分子水平为WZSP SLA-3基因的分子分型及特异单倍体猪的培育和异种器官移植实验用动物的研究提供理论依据。

摘要： 器官移植成为治疗终末期疾病的有效手段,但器官短缺成为器官移植的瓶颈,因此异种器官成为解决这一问题的重要方法,小型猪因为具有独特的解剖、生理及代谢等特点,而成为理想的异种器官来源。本文主要介绍小型猪尤其是基阅修饰小型猪在异种移植中的应用及异种移植的安全性。

摘要： 目的:研究西藏小型猪肾脏的组织结构,为其在生物医药领域中的应用提供形态学依据。rn 方法:取西藏小型猪肾脏标本投入10％中性福尔马林溶液固定24 h以上,修块,冲洗,脱水,透明,包埋,常规石蜡切片,HE染色,光镜观察拍照。rn 结果:西藏小型猪的肾与人肾一样呈长而扁的菜豆形,是表面光滑的多乳头肾,肾的表面有致密的结缔组织构成的被膜,肾实质可分为皮质和髓质,由数百万个肾单位和泌尿小管组成,其间由少量结缔组织、血管和神经等构成肾间质。rn 结论:西藏小型猪的肾脏结构比犬和猴更接近于人类,在异种器官移植、药物临床前安全性评价等生物医药领域中具有重要应用前景。

摘要： 目的：检测中国四种小型猪在PERV拷贝数上的差异,试图找出不含或含有较低拷贝数的一个个体或一个品种。rn 方法：采用半定量PCR方法检测了我国四种小型猪内源性逆转录病毒基因的拷贝数。rn 结果：贵州小型猪、五指山猪、西藏小型猪、巴马小型猪的 PERV 的拷贝数分别是34.12±16.96,29.38±13.83,28.71±14.11,27.12±14.43(F=0.614,P=0.609),EnvA 的拷贝数分别是9.78±5.48,10.06±5.34,10.23±5.71,10.51±6.23(F=0.044,P=0.988),EnvB的拷贝数分别是24.14±11.26,20.72±8.36,18.35±8.50,17.60±8.65(F=1.512,P=0.221)。尚不能认为四个猪种间PERV、EnvA、EnvB的拷贝数之间的差异具有统计学意义。rn 结论：与已报道的其它猪种相比,四种常用的小型猪内源病毒负载量较低,充分证明了其用于异种器官移植研究的可行性。

摘要： 体细胞克隆技术将转基因操作提前在体细胞阶段实施，可对外源基因在供体细胞上是否整合、整合状况及整合位点预先进行准确判定和评估;再结合基因打靶等技术，实现定位修饰，则能提高准确性，缩短生产周期，大大节省供体和受体动物的数量及费用。本文综述了国内外利用转基因克隆技术生产转基因猪的技术途径、研究状况以及发展趋势。

摘要： 体细胞克隆技术将转基因操作提前在体细胞阶段实施，可对外源基因在供体细胞上是否整合、整合状况及整合位点预先进行准确判定和评估;再结合基因打靶等技术，实现定位修饰，则能提高准确性，缩短生产周期，大大节省供体和受体动物的数量及费用。本文综述了国内外利用转基因克隆技术生产转基因猪的技术途径、研究状况以及发展趋势。

摘要： 体细胞克隆技术将转基因操作提前在体细胞阶段实施，可对外源基因在供体细胞上是否整合、整合状况及整合位点预先进行准确判定和评估;再结合基因打靶等技术，实现定位修饰，则能提高准确性，缩短生产周期，大大节省供体和受体动物的数量及费用。本文综述了国内外利用转基因克隆技术生产转基因猪的技术途径、研究状况以及发展趋势。

摘要： 体细胞克隆技术将转基因操作提前在体细胞阶段实施，可对外源基因在供体细胞上是否整合、整合状况及整合位点预先进行准确判定和评估;再结合基因打靶等技术，实现定位修饰，则能提高准确性，缩短生产周期，大大节省供体和受体动物的数量及费用。本文综述了国内外利用转基因克隆技术生产转基因猪的技术途径、研究状况以及发展趋势。

摘要： 本发明涉及器官存放转运技术领域，具体为一种器官移植中供体器官存放转运携带装置，包括移动组件，所述移动组件包括有移动底座、推杆、放置架、调节螺杆和减震座，所述移动底座的表面安装有推杆，所述移动底座的表面安装有放置架，保温组件，所述保温组件安装在移动组件的表面，所述保温组件包括有保温仓本体、转轴座、第二阻尼器和卡杆座，所述保温仓本体的表面安装有转轴座。本发明通过移动组件的设计，四组减震座的配合使用，使得减震座对推车产生的震动进行消减，从而避免移植器官进行转运时需要用到推车进行转运，推车移动时会产生震动，频繁震动会对移植器官造成损伤，导致无法使用。

摘要： 用于促进对实体器官移植受体的供体特异性耐受性和免疫活性的方法和组合物，所述方法通过在需要实体器官移植的受体中移植同种异体实体器官来进行并且进一步包括在接受来自供体的实体器官的受体中通过外科手术植入组织工程化的同种异体经培养的出生后胸腺组织产品。

摘要： 本发明提供用于诊断或预测接受移植的对象的移植状态或结果的方法、设备、组合物和试剂盒。所述方法包括确定是否存在一个或多个来自所述供体移植的核酸，其中，来自所述供体的所述一个或多个核酸是根据预定的标记分布鉴定，和根据是否存在所述一个或多个核酸来诊断或预测移植状态或结果。

摘要： 本实用新型公开了一种器官移植供体专用ECMO插管，涉及器官移植手术用ECMO动脉插管技术领域，为解决ECMO插管由于大量的血液输送需求，需要选用与血管匹配粗度的插管，但插管粗度大在插入作业时，容易对血管造成压迫的问题，所述插管本体的一端分别设置有动脉血接管、静脉血接管和生理盐水接管，所述插管本体的另一端设置有导管，所述导管中间位置处的外部密封套装有球囊，所述插管本体的外端环形设置有减压槽，所述导管的一端延伸至插管本体的内部，且导管的一端与插管本体内壁之间设置有不锈钢导管。

摘要： 本发明公开了一种抑制异种器官移植免疫排斥反应的五糖抗原的合成方法，该方法的特征在于采用“四组分一釜”的合成方法，即选择常用的保护基对四种糖结构单元进行合适的保护，然后将这些结构单元用“四组分一釜合成法”进行装配，快速、立体选择、高收率地得到了所需的五糖抗原系列，本发明相对于“三组分一釜”合成法，省去了一步糖基化偶联的分离纯化操作，具有更为高效、简捷的优点。

摘要： 本发明涉及动物基因工程领域，尤其涉及一种可用于异种器官移植的供体猪的构建方法。本发明的构建方法包括以下步骤：(1)在猪胎儿成纤维细胞的基础上，敲除GGTA1基因，同时转入基因HLA‑G5，得到GTKO/HLA‑G5+克隆细胞；(2)将GTKO/HLA‑G5+克隆细胞作为核供体进行体细胞核移植，培育得到重组胚，将重组胚移植入代孕母猪，妊娠后产仔得到供体猪。本发明构建了具有重要科研价值和应用前景的基因敲除和转基因GTKO/HLA‑G5+克隆猪，为异种器官移植提供重要的研究工具和新的研究途径。

摘要： 本发明涉及一种异种器官移植基础供体猪的构建方法，属动物生物技术领域。在胎儿成纤维细胞的基础上，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除GGTA1、CMAH、B4GalNT2三个基因，并定点插入hCD55、hCD59、hCD46三个人源化修饰基因，结合体细胞核移植技术构建GTKO/CMAHKO/B4GalNT2KO/hCD55/hCD59/hCD46多基因修饰的异种移植供体基础猪。本发明在一定程度上解决了异种器官移植中存在的抗原抗体免疫排斥反应及补体调节的共性问题，为在基础供体猪的基础上研究开发适合心脏、肾脏、肝脏等器官及胰岛、皮肤等组织特异性的异种器官移植供体猪的构建奠定了基础，对构建多基因修饰的异种移植供体猪具有重要的应用价值和应用前景。

摘要： 本发明公开了一种抑制人异种器官移植中免疫排斥反应的方法。本发明所提供的抑制人异种器官移植中免疫排斥反应的方法是将人α1，3－半乳糖苷酶基因，人α1，2岩藻糖转移酶基因和人A20基因导入猪体细胞，得到Gal－α1，3－Gal抗原和E－选择素表达量降低的猪体细胞。本发明的方法可使猪体细胞表面的末端α－半乳糖基团(Gal－α1，3－Gal抗原)减少90％，NF－κB下游分子E－选择素的表达量降低50％，且细胞染色体数量、形态未受影响，可显著抑制人异种器官移植中免疫排斥反应，特别是超急性排斥反应和延缓性排斥反应。本发明的方法将在抑制人异种器官移植中的免疫排斥反应中发挥重要作用。

摘要： 本发明涉及如下异种器官移植用转基因克隆猪及其制备方法：猪内源性逆转录病毒包膜C(PERV(Porcine Endogenous Retrovirus)EnvC)为阴性，α‑1,3半乳糖基转移酶(GGTA1，α‑1,3‑galactosyltransferase)、胞苷一磷酸‑N‑乙酰神经氨酸羟化酶(CMAH，CMP‑N‑acetylneuraminic acid hydroxylase)、异球三己糖神经酰胺合酶(iGb3s，Isoglobotrihexosylceramide synthase)及β‑1,4‑N‑乙酰基‑半乳糖胺转移酶2(β4GalNT2，Beta‑1,4‑N‑Acetyl‑Galactosaminyl Transferase2)被敲除，表达人类CD46及血栓调节蛋白(TBM，Thrombomodulin)基因。本发明的转基因克隆猪不发生在异种器官移植中发生的猪内源性逆转录病毒的转移的同时，还可以克服超急性及抗原‑抗体介导的免疫排斥反应、由血液凝固引起的免疫排斥反应、由补体活性引起的免疫排斥反应，从而可以将其有效用作用于异种间器官及细胞移植的供体动物。

摘要： 本发明公开了一种抑制异种器官移植免疫排斥反应的五糖抗原的合成方法，该方法的特征在于采用“四组分一釜”的合成方法，即选择常用的保护基对四种糖结构单元进行合适的保护，然后将这些结构单元用“四组分一釜合成法”进行装配，快速、立体选择、高收率地得到了所需的五糖抗原系列，本发明相对于“三组分一釜”合成法，省去了一步糖基化偶联的分离纯化操作，具有更为高效、简捷的优点。