成脂分化

摘要： 背景:骨髓间充质干细胞成骨-成脂分化平衡在骨代谢疾病中发挥关键作用,课题组前期研究证实TLN1可调控骨髓间充质干细胞成骨分化,但其对骨髓间充质干细胞成脂分化的作用仍未明确。目的:探讨TLN1在骨髓间充质干细胞成脂分化中的作用及机制。方法:诱导骨髓间充质干细胞成脂分化并使用Western blot及qRT-PCR检测TLN1的表达变化;采用CCK-8检测TLN1敲减后骨髓间充质干细胞增殖能力变化,成脂诱导后进行油红O染色及定量分析,qRT-PCR检测骨髓间充质干细胞成脂分化的关键分子PPAR-γ、C/EBP-α的基因表达水平;Western blot检测成脂经典通路蛋白的表达,同时在敲减TLN1的同时添加β-catenin激活剂后检测骨髓间充质干细胞的成脂分化能力,以探讨TLN1调节成脂分化的具体分子机制。结果与结论:TLN1在骨髓间充质干细胞的成脂分化过程中表达下调;敲减TLN1对骨髓间充质干细胞的增殖无明显影响,可显著增强骨髓间充质干细胞成脂诱导分化能力;敲减TLN1可抑制活性的β-catenin表达,而激活β-catenin信号通路可逆转TLN1敲减介导的成脂分化增强。结果表明,TLN1表达在骨髓间充质干细胞成脂分化过程中逐渐下调,敲减TLN1通过抑制β-catenin信号通路发挥促进骨髓间充质干细胞成脂分化的作用。

摘要： 背景:N-6甲基腺嘌呤是真核生物mRNA中最常见、含量最丰富的一种RNA修饰,其通过甲基化修饰基因片段上的碱基位点,从而影响RNA的翻译、剪切、表达与降解等生物学功能。骨髓间充质干细胞作为一种非造血干细胞,具有多向分化潜能,在各类骨相关疾病中具有良好的应用前景。目的:归纳总结各类N-6甲基腺嘌呤修饰酶在骨髓间充质干细胞成骨及成脂分化中的功能及相关作用机制,简要概括N-6甲基腺嘌呤的研究方法及研究展望,为基因靶向治疗骨代谢相关疾病提供重要参考。

摘要： 背景:激素性股骨头坏死是骨科常见的进行性难治性疾病,严重影响患者的正常生活和工作.骨髓间充质干细胞成骨成脂分化异常被证实参与了激素性股骨头坏死的发生发展及防治,但其作用机制尚不清楚.目的:观察补肾活血胶囊对糖皮质激素处理的骨髓间充质干细胞成骨-成脂分化及Hedgehog信号通路相关因子的影响.方法:分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,运用不同剂量的补肾活血胶囊含药血清及糖皮质激素干预,CCK-8法检测细胞增殖活性,茜素红染色和油红O染色观察骨髓间充质干细胞成骨和成脂分化情况,Western blot检测细胞中成骨、成脂及Hedgehog信号通路相关因子的蛋白表达变化.结果 与结论:①补肾活血胶囊含药血清不仅能促进正常大鼠骨髓间充质干细胞的增殖,而且能明显改善糖皮质激素对骨髓间充质干细胞增殖的抑制效应;②成骨诱导3周后,补肾活血胶囊含药血清组与空白对照组相比成骨诱导能力增强,尤其是补肾活血胶囊中剂量组表现出更高的成骨活性;③成脂诱导2周后,油红O染色显示补肾活血胶囊含药血清组与空白对照组相比阳性染色面积均明显减少,其中补肾活血胶囊中剂量组抑制程度最为明显;④各组干预3 d后,Western blot检测显示补肾活血胶囊含药血清均能增强骨髓间充质干细胞中成骨因子Runx2、Col1a1和Hedgehog信号通路相关因子Shh、Gli1的蛋白表达,减弱成脂因子PPARγ、C/EBPα的蛋白表达;⑤结果表明,补肾活血胶囊含药血清能介导Hedgehog信号通路促进骨髓间充质干细胞成骨分化、抑制其成脂分化.

摘要： 背景:激素性股骨头坏死是骨科常见的进行性难治性疾病,严重影响患者的正常生活和工作。骨髓间充质干细胞成骨成脂分化异常被证实参与了激素性股骨头坏死的发生发展及防治,但其作用机制尚不清楚。目的:观察补肾活血胶囊对糖皮质激素处理的骨髓间充质干细胞成骨-成脂分化及Hedgehog信号通路相关因子的影响。方法:分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,运用不同剂量的补肾活血胶囊含药血清及糖皮质激素干预,CCK-8法检测细胞增殖活性,茜素红染色和油红O染色观察骨髓间充质干细胞成骨和成脂分化情况,Western blot检测细胞中成骨、成脂及Hedgehog信号通路相关因子的蛋白表达变化。结果与结论:(1)补肾活血胶囊含药血清不仅能促进正常大鼠骨髓间充质干细胞的增殖,而且能明显改善糖皮质激素对骨髓间充质干细胞增殖的抑制效应;(2)成骨诱导3周后,补肾活血胶囊含药血清组与空白对照组相比成骨诱导能力增强,尤其是补肾活血胶囊中剂量组表现出更高的成骨活性;(3)成脂诱导2周后,油红O染色显示补肾活血胶囊含药血清组与空白对照组相比阳性染色面积均明显减少,其中补肾活血胶囊中剂量组抑制程度最为明显;(4)各组干预3 d后,Western blot检测显示补肾活血胶囊含药血清均能增强骨髓间充质干细胞中成骨因子Runx2、Col1a1和Hedgehog信号通路相关因子Shh、Gli1的蛋白表达,减弱成脂因子PPARγ、C/EBPα的蛋白表达;(5)结果表明,补肾活血胶囊含药血清能介导Hedgehog信号通路促进骨髓间充质干细胞成骨分化、抑制其成脂分化。

摘要： 背景:N-6甲基腺嘌呤是真核生物mRNA中最常见、含量最丰富的一种RNA修饰,其通过甲基化修饰基因片段上的碱基位点,从而影响RNA的翻译、剪切、表达与降解等生物学功能.骨髓间充质干细胞作为一种非造血干细胞,具有多向分化潜能,在各类骨相关疾病中具有良好的应用前景.目的:归纳总结各类N-6甲基腺嘌呤修饰酶在骨髓间充质干细胞成骨及成脂分化中的功能及相关作用机制,简要概括N-6甲基腺嘌呤的研究方法及研究展望,为基因靶向治疗骨代谢相关疾病提供重要参考.方法:通过检索PubMed、Web of Science、中国知网等数据库,英文关键词为"m6A,bone marrow mesenchyml stem cell",中文关键词为"m6A,骨髓间充质干细胞",最终纳入46篇文献进行综述.结果 与结论:①N-6甲基腺嘌呤修饰的发生主要由甲基转移酶复合物、去甲基化酶和识别N-6甲基腺嘌呤特定家族蛋白酶共同调节;②N-6甲基腺嘌呤各类修饰酶能从基因水平影响骨髓间充质干细胞的生物学特性;③N-6甲基腺嘌呤与骨髓间充质干细胞成骨及成脂相关信号传导通路存在调控机制关系;④N-6甲基腺嘌呤在骨髓间充质干细胞相关再生医学领域中具有较大的发展潜能.

摘要： 目的:探索三维培养条件下高糖环境对牙周膜干细胞(PDLSCs)成骨成脂分化潜能的影响。方法:利用明胶材料和谷氨酰胺转移酶构建三维培养条件,通过鬼笔环肽染色观察细胞形态特点;细胞在不同葡萄糖浓度(5.5 mmol/L和25 mmol/L)的培养基中孵育后,通过碱性磷酸酶(ALP)染色、茜素红染色和实时定量PCR检测细胞成骨分化潜能,油红O染色和实时定量PCR检测细胞成脂分化潜能。结果:高糖环境下,PDLSCs的ALP活性降低、矿化结节形成减少,成骨分化相关基因RUNX2、BMP2和OCN表达降低;脂滴形成增加,成脂分化相关基因Adiponectin表达升高。结论:三维培养条件下高糖可抑制PDLSCs的成骨分化,促进其成脂分化。

摘要： 脂肪组织与营养平衡和代谢性疾病密切相关,其中脂肪细胞的分化方式将直接影响脂肪组织的健康。前成脂细胞,是脂肪组织中一群能且仅能向成熟脂肪细胞分化的细胞,因其良好的成脂潜能,在再生医学和肥胖相关疾病的治疗中起着重要作用。本综述根据近年来前成脂细胞的相关研究成果,对前成脂细胞定义的不确定性进行了讨论,初步探讨了前成脂细胞的起源及终末分化,归纳总结了常见的前成脂细胞表面标志物,最后对前成脂细胞在软组织修复重建、肥胖相关代谢性疾病,以及肿瘤和伤口愈合方面的临床应用潜能进行了展望。

摘要： 目的检测成骨生长肽(osteogenic growth peptide,OGP)与低氧环境对小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成脂肪分化的影响。方法实验随机分为4组:A组(常氧组)、B组(1%O_(2)组)、C组(常氧+10^(-9)mol/L OGP组)、D组(1%O_(2)+10^(-9)mol/L OGP组)。ELISA法定量检测低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)蛋白的表达;14 d后,油红O染色观察BMSCs脂滴形成情况;实时荧光定量PCR和Western blotting检测成脂相关基因PPAR-γ和C/EBPα的mRNA和蛋白表达水平。结果与A组及C组相比,B组与D组HIF-1α表达明显上调(P<0.01);与A组相比,B组、C组、D组脂滴生成及PPAR-γ和C/EBPα的mRNA和蛋白表达降低(P<0.01);与B组及C组相比,D组中脂滴生成及PPAR-γ和C/EBPα的信使RNA和蛋白表达下调(P<0.01)。结论OGP及1%低氧环境均能抑制BMSCs成脂分化,且二者抑制BMSCs成脂分化具有协同效应。

摘要： 为了探索不同浓度葡萄糖对实验用小型猪前体脂肪细胞增殖和分化的影响,本文采用胶原酶消化法分离皮下前体脂肪细胞,采用高浓度葡萄糖(4500mg/L)和低浓度葡萄糖(1000mg/L)DMEM培养基对细胞进行培养和体外诱导成脂分化,结果表明,与低浓度组相比,高浓度葡萄糖可显著促进实验用小型猪前体脂肪细胞的增殖,体外诱导分化后脂滴数量和甘油三酯含量显著上升,成脂标志基因PPARγ、C/EBPα表达显著上调(P<0.05)。证明葡萄糖浓度对实验用小型猪前体脂肪细胞的增殖和分化具有显著影响。

摘要： 目的探讨小鼠羊水间充质干细胞(AF-MSC)的分离、培养及鉴定。方法在无菌条件下获取孕鼠子宫,收集羊水后进行过滤和离心,对沉淀细胞团进行培养并传代。观察AF-MSC的形态,分析AF-MSC的增殖特点,采用流式细胞术鉴定AF-MSC的表面标志物,检测AF-MSC的三系分化能力及冷冻复苏后的细胞活力。结果小鼠AF-MSC呈典型的梭形,融合度>80%时会出现典型的漩涡状结构。小鼠AF-MSC传代培养无明显潜伏期,培养2~3 d进入对数增长期,增长速度最快,之后增殖速度减慢,进入平台期。AF-MSC表达干细胞抗原(Sca)-1、CD29、CD44,不表达CD34、CD45。小鼠AF-MSC成骨分化后,矿化结晶被茜素红染成深红色的点状;成软骨分化后,分泌的酸性粘多糖被阿利新蓝染成淡蓝色;成脂分化后,胞质脂滴被油红O染成红色。细胞冷冻复苏后存活率>95%,生长状态良好,6 d时增殖能力高于冻存前(P0.05)。结论本实验成功分离了小鼠AF-MSC,过程简便、成本低,且分离的细胞可随传代次数的增加而纯化,冻存不影响其增殖能力。

摘要： 目的：观察兔脂肪干细胞(rASCs)表面标志物CD54与其成脂分化能力的关系,同时探讨同一诱导剂对两种rASCs成脂分化的影响,为构建工程化脂肪组织寻找理想的种子细胞及诱导方法. 方法：取新西兰大白兔(1.5～2.0kg,8～12周龄)腹股沟皮下脂肪垫3ml,采用贴壁法体外分离培养rASCs并行多向分化诱导及细胞表现标志物鉴定.取P3代细胞经免疫磁珠分选后,将rASCs分为两类,一类为CD54+rASCs,另一类为CD54rASCs;将通用的同一种成脂分化诱导剂处理这两类细胞,实验分为A、B两组进行,A组为CD54+rASCs+诱导剂,B组为CD54rASCs+常规诱导剂.细胞成脂诱导14d,分别行油红O染色,检测成熟脂肪细胞的密度及细胞内脂滴含量;比较分析两组rASCs成脂分化的能力. 结果：rASCs具有间充质干细胞特性,可向成熟脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞表型分化,细胞表面标志物CD29、CD44、CD49d、CD54、CD73、CD90和CD105表达均为阳性,而CD31、CD34和CD45表达阴性;成脂诱导第14d,A、B两组rASCs分化为成熟脂肪细胞的密度分别为21.7±3.3和9.2±1.1,细胞内脂滴含量分别为1.69±0.22和0.53±0.07;经统计分析,A、B两组比较,P值均小于0.05,差异均有显著性意义. 结论：CD54阳性的脂肪干细胞具有高成脂分化能力,为构建大体积组织工程化脂肪提供理论基础.

摘要： 目的：调控骨髓间充质干细胞(MSCs)的分化成为股骨头坏死治疗的重要靶点,观察健脾活骨方(HG)不同提取部位对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨以及成脂分化的影响,并探讨其可能的机制.rn 方法：分离培养大鼠MSCs,分别在成骨、成脂诱导分化的同时,给予HG水部位(HGA)、乙酸乙酯部位(HGE)、氯仿部位和正丁醇部位后,经ALP染色检测碱性磷酸酶的活性,油红O染色检测脂肪细胞的形成;ELISA方法检测上清液中BMP2和β-catenin含量,realtime-PCR和western方法检测成骨标志因子以及成脂分化标志因子的表达.rn 结果：HG不同提取部位均能不同程度促进MSCs的成骨分化、抑制成脂分化,其中HGA促成骨作用最强,而HGE抑成脂作用最佳.HGA可以剂量依赖性促进BMP2和β-catenin的分泌,提高LP、Runx2、BMP2、Osx和OCN的mRNA以及蛋白水平,DKK-1(Wnt的抑制剂)和Noggin(BMP的抑制剂)可阻止上述HGA作用;HGE可显著抑制PPARγ、LPL和AP2的表达,DKK-1可逆转其作用,相反Noggin可加强HGE上述作用.rn 结论：HGA促MSCs成骨分化作用最强,HGE抑制脂肪细胞形成作用最佳,有效调控Wnt和BMP信号通路是HG发挥促成骨和抑成脂作用的可能机制.

摘要： 目的:临床肿瘤幸存者可出现骨量丢失、骨质疏松及其骨折等放疗后遗症.本文探讨不同剂量137Csγ射线对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖能力及向成骨、成脂分化的影响作为,以及潜在的分子生物学机制,为临床放疗后骨损伤防治提供理论依据.rn 方法:密度梯度离心法结合贴壁培养法分离培养大鼠BMSCs;流式细胞术鉴定其表面标志CD29、CD34、CD44、CD45的表达;体外定向诱导BMSCs向成骨细胞及脂肪细胞分化,观察照射不同剂量(0、1、2、5、10、20Gy)137Csγ射线后进行磷酸酶(ALP)染色、油红0染色及ALP活性的变化,MTT法检测不同照射剂量下BMSCs的增殖活力;RT-PCR检测不同剂量照射下RUNX2、ALP、OC、PPAR-γ、C/EBPα表达;Western-Blot检测分化相关蛋白RUNX2、PPAR-γ的表达.rn 结果:成功建立了体外分离并稳定传代培养BMSCs,流式细胞术检测表面标志CD29+(95.76％),CD34-(12.70％)、CD44+(81.42％)、CD45-(26.56％);体外可诱导其向成骨细胞和脂肪细胞定向分化.照射后细胞增殖活力随照射剂量的增加而明显降低,ALP染色阳性率和ALP活性也随照射剂量的增加而下降(染色阳性率由82.7％降至24.6％,P＜0.05);照射0,1,2,5Gy后,成脂诱导能力随照射剂量增加而升高(由41.8％升高至82.1％),但照射10,20Gy后成骨和成脂分化能力均明显下降(成骨10Gy和20Gy时ALP染色阳性率分别下降至16.5％和24.6％;脂肪细胞染色阳性率分别下降至30.2％和5.7％).照射后RUNX2、ALP、OC基因表达均随照射剂量增加而降低,PPAR-γ,C/EBPα等随照射剂量变化趋势为先增高后降低;RUNX2、PPAR-γ蛋白表达也呈相同趋势.rn 结论:电离辐射可抑制BMSCs增殖能力及向成骨细胞分化能力,导致BMSC成骨能力下降;而成脂能力相对增加.可能是电离辐射致骨损伤的病理生理机制之一.

摘要： 骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)是一种具有自我更新、增殖和分化能力的多潜能干细胞,可以同时进行成骨和成脂分化.近年来国内外学者对BMSCs成脂分化已有较多的研究,本文通过阅读大量文献,对中药干预BMSCs成脂分化防治骨质疏松作进行.

摘要： 脂肪干细胞是一类具有多向分化潜能的成体间充质干细胞，来源广泛、取材容易、数量较多、容易培养、存活率高，不存在免疫反应和伦理问题，其用于脂肪等软组织的美容修复具有无可比拟的作用。脂肪干细胞分化形成成熟的脂肪细胞是多种蛋白因子相互作用的结果，其中正调节因子PPARγ和负调节因子β-catenin较为重要。PPAR是调节干细胞成脂分化的关键蛋白因子，其表达能够促进成脂相关蛋白的表达。负调节因子β-catenin在干细胞内处于活性状态，具有抑制PPARγ活性的作用，从而阻止了脂肪干细胞的成脂分化，使细胞维持在未分化的状态。RNA干扰(RNAi)是一种广泛存在于生物体内调节蛋白表达的生物学现象，通过小分子RNA片段与目标mRNA的相互作用，抑制或者降低了目标蛋白的表达。因此，提出运用RNAi技术来降低负调节因子β-catenin蛋白的表达，从而激活PPARγ的活性，促进成脂相关蛋白的表达，使脂肪干细胞定向分化为脂肪细胞，达到修复脂肪等软组织的目的，起到美容修复的效果。

摘要： 本文阐述了抗骨质疏松活性部位分离得到的来自补骨脂的香豆素类化合物不同程度地具有促进成骨rn分化、矿化，抑制破骨分化和抑制成脂分化活性，提示该类化合物是补骨脂抗骨质疏松活性的物质基rn础。

摘要： 纳米二氧化硅由于具有良好的生物相容性而广泛应用在纳米医学中,如:纳米二氧化硅通过磁性或荧光标记用作细胞示踪,可制备成多孔材料,用作药物或基因载体.间充质干细胞由于来源广泛、具有多分化潜能而广泛应用在组织工程的研究中.本文旨在研究不同尺寸的纳米二氧化硅颗粒对人骨髓间充质干细胞（hMSCs） 成骨和成脂分化的影响。首先通过改良的stober法完成不同尺寸（50、200、400nm）的纳米二氧化硅颗粒的制备及其表征，然后将不同浓度（0、10、100、250μg/mL）的纳米二氧化硅颗粒作用于hMSCs，通过相关检测方法检测二氧化硅对干细胞分化的影响。

摘要： 建立体外牛前体脂肪细胞培养的模型,探究Chemerin对牛前体脂肪细胞增殖与分化的影响.实验分Chemerin处理组与对照组,分别对其进行分化诱导处理,利用CCK-8检测细胞的增殖情况,油红O染色,超声波破碎细胞检测细胞TG、TCH含量的变化,RT-qPCR检测过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白(C/EBPα)和脂肪细胞分化和决定因子-1(ADD1)的基因表达.结果显示,Chemerin能够促进脂肪细胞的增殖,并呈一定的浓度依赖性;通过对TG、TCH含量变化的检测,Chmerin对脂肪细胞成脂分化具有显著促进作用(P＜0.05);RT-qPCR结果显示,在分化第8天,处理组的PPARγ、C/EBPα与ADD1基因表达量显著升高(P＜0.05).可见,Chemerin在动物脂肪细胞分化中起着非常重要的作用.

摘要： 促进骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨并抑制其成脂分化是目前探讨骨质疏松症发病机制的新途径.淫羊藿防治骨质疏松症的机理已成为近年来的研究热点,研究发现其具有促进成骨细胞增殖并抑制破骨细胞活性,促进BMSCs成骨并抑制其成脂分化等作用.本文以补肾代表中药淫羊藿促进BMSCs成骨并抑制其成脂分化进展作一综述,为骨质疏松症的干细胞治疗提供新的思路.

摘要： 背景:人抵抗素在产生胰岛素抵抗的过程中发挥重要作用,但其受体迄今为止没有明确.受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(,ROR1)是属于ROR家族具有1型糖基化的膜蛋白.最近在鼠前成脂细胞(3T3L1)研究模型上发现抵抗素通过与ROR1结合发挥对细胞糖脂代谢影响。但在人前体脂肪细胞抵抗素是否通过与ROR1相互作用，发挥对脂肪细胞糖脂代谢的影响，从而诱发胰岛素抵抗还未见报道。明确ROR1在人前脂肪细胞以及向成脂分化后的表达情况将为进一步研究抵抗素与RORI相互作用调控细胞的糖脂代谢分子机制提供实验基础。rn 目的：观察ROR1基因在人前体脂肪细胞以及向成脂分化前后的表达。rn 方法：从人脂肪组织内应用酶消化方法，分离并培养人前脂肪细胞。应用流式细胞术进行细胞表型鉴定，应用成脂肪诱导试剂盒进行人脂肪前体细胞向脂肪细胞诱导，诱导的成脂细胞应用油红O染色鉴定。应用RT-PCR进行RORI基因两个变异体表达。rn 结果：通过形态学观察以及流式细胞术表型鉴定，成功从人脂肪组织中分离并体外扩增前脂肪细胞，油红O染色观察显示分离培养人脂肪前体细胞能有效向脂肪细胞分化。RT-PCR结果显示RORl基因两个变异体在人脂肪前体细胞具有表达，在分化为脂肪细胞后，ROR1基因变异体1表达没有改变，而变异体2表达下降。rn 结论：RORl基因的两个变异体在人脂肪前体细胞均具有一定表达，但在向脂肪细胞分化后，变异体l的表达没有改变，而变异体2表达下降。

摘要： 本发明涉及一种成脂诱导培养液及成脂分化方法。该成脂诱导培养液包括：3‑异丁基‑1‑甲基黄嘌呤、胰岛素、地塞米松、三氟柳。本发明多种诱导因子联合应用作用于人脂肪干细胞，能有效的诱导脂肪干细胞成脂分化，缩短成脂时间，提高成脂的质量。其成脂分化效果显著优于现有常规的诱导方法。

摘要： 本发明涉及医学领域，公开了一种诱导骨骼肌肌源性干细胞成脂分化的培养基及其应用和成脂分化方法。本发明所述培养基在基础培养基中包含3‑异丁基‑1‑甲基黄嘌呤、胰岛素、吲哚美辛、地塞米松、吡格列酮和FBS。本发明优化诱导分化培养基组分，以吡格列酮替换现有间充质干细胞中的常用组分，实现了骨骼肌肌源性干细胞成脂分化率的显著提高效果。

摘要： 本发明提供了一种长链非编码RNA在干细胞成脂分化和成骨分化中的作用，属于干细胞技术领域。本发明通过实验证明，在骨髓间充质干细胞成脂分化的过程中，LINC02075的表达量显著升高，抑制LINC02075能够显著的抑制成脂分化相关基因PPARγ、C/EBPα和AP2的mRNA和蛋白表达来抑制骨髓间充质干细胞的成脂分化。同时，本发明证明抑制LINC02075能够显著的促进成骨分化相关基因RUNX2、ALP和OCN的mRNA和蛋白表达来促进骨髓间充质干细胞的成骨分化。

摘要： 本发明公开了一种采用Sema3A基因促进脂肪干细胞成骨分化、抑制成脂分化的方法，属于细胞生物学技术领域。本发明构建了含有Sema3A基因序列的重组质粒，通过将Sema3A重组质粒和辅助包装质粒转染进入293T细胞获得Sema3A慢病毒载体，慢病毒载体在polybrene的协助下将Sema3A基因导入脂肪干细胞，显著地促进了脂肪干细胞的成骨分化，同时也抑制了脂肪干细胞向成脂方向的分化，导入Sema3A基因可以更好地将脂肪干细胞应用于促进骨缺损愈合和种植体骨结合，充分发挥脂肪干细胞来源广泛，易于获取的优点。

摘要： 本发明涉及miR‑10b在体外促进间充质干细胞分化为成骨细胞和抑制其分化为成脂细胞的用途。具体地，本发明涉及体外诱导间充质干细胞分化为成骨细胞的方法，所述方法包括向间充质干细胞内转染miR‑10b的步骤，其中所述转染的miR‑10b促进间充质干细胞向成骨分化，抑制间充质干细胞向成脂分化。

摘要： 本发明涉及一种成脂诱导培养液及成脂分化方法。该成脂诱导培养液包括：3‑异丁基‑1‑甲基黄嘌呤、胰岛素、地塞米松、三氟柳。本发明多种诱导因子联合应用作用于人脂肪干细胞，能有效的诱导脂肪干细胞成脂分化，缩短成脂时间，提高成脂的质量。其成脂分化效果显著优于现有常规的诱导方法。

摘要： 本发明涉及医学领域，公开了一种诱导骨骼肌肌源性干细胞成脂分化的培养基及其应用和成脂分化方法。本发明所述培养基在基础培养基中包含3‑异丁基‑1‑甲基黄嘌呤、胰岛素、吲哚美辛、地塞米松、吡格列酮和FBS。本发明优化诱导分化培养基组分，以吡格列酮替换现有间充质干细胞中的常用组分，实现了骨骼肌肌源性干细胞成脂分化率的显著提高效果。

摘要： 本发明提供了一种长链非编码RNA在干细胞成脂分化和成骨分化中的作用，属于干细胞技术领域。本发明通过实验证明，在骨髓间充质干细胞成脂分化的过程中，LINC02075的表达量显著升高，抑制LINC02075能够显著的抑制成脂分化相关基因PPARγ、C/EBPα和AP2的mRNA和蛋白表达来抑制骨髓间充质干细胞的成脂分化。同时，本发明证明抑制LINC02075能够显著的促进成骨分化相关基因RUNX2、ALP和OCN的mRNA和蛋白表达来促进骨髓间充质干细胞的成骨分化。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种成脂诱导培养基及成脂分化方法。该成脂诱导培养基包括3‑异丁基‑1‑甲基黄嘌呤、胰岛素、吲哚美辛、地塞米松、罗格列酮、PRP和基础培养基。本发明提供一种由多种诱导因子联合应用作用于GMSCs等间充质干细胞，具有协同作用，能有效的诱导间充质干细胞成脂分化，其成脂分化效果显著优于现有常规的诱导方法。GMSCs自体取材方便、易于体外扩增，可以用于自体移植，从而避免了免疫排斥反应。

摘要： 本发明涉及miR‑10b在体外促进间充质干细胞分化为成骨细胞和抑制其分化为成脂细胞的用途。具体地，本发明涉及体外诱导间充质干细胞分化为成骨细胞的方法，所述方法包括向间充质干细胞内转染miR‑10b的步骤，其中所述转染的miR‑10b促进间充质干细胞向成骨分化，抑制间充质干细胞向成脂分化。