效价测定

摘要： 为了解和评估现有鸡马立克病(MD)疫苗的质量,采用间接免疫荧光试验(IFA)对2020—2021年市场销售的9家不同企业生产的11个批次MD疫苗产品进行病毒效价测定和对比分析,同时用ELISA试剂盒、胶体金试纸条或RT-PCR方法分别对禽白血病病毒(ALV)和禽网状内皮组织增生症病毒(REV)的污染状况进行检测。结果表明,在所检测的MD液氮苗中,3批进口或国产的CVI988单价液氮苗之间病毒效价无显著差异,2批不同品牌814单价液氮苗效价差异显著(P<0.05),2批不同品牌双价液氮苗(CVI988+HVT或814+HVT)病毒效价差异极显著(P<0.01),但上述全部类型液氮苗产品的病毒效价均大于5 500 PFU/羽份,达到国标规定值2倍以上。然而,4批不同品牌HVT冻干苗的病毒效价均远低于产品说明书标注的2 000 PFU/羽份,仅为83.90~109.50 PFU/羽份。全部MD疫苗产品的ALV和REV检测结果均为阴性,表明这些产品洁净无污染。

摘要： 数字PCR(digital PCR,dPCR)技术是基于“有限稀释”和“泊松分布”原理迅速发展的第三代PCR技术,无需标准品即可实现样品的绝对定量,灵敏度高、操作简单,在疫病检测、转基因鉴定、食品检测等方面得到快速发展,而在动物疫苗研究领域也被越来越多用于质控、筛查和定量。本文从动物疫苗研究的角度,阐述了数字PCR在动物疫苗基因变异检测、基因定量、效价测定、疫苗效果评价等方面的发展潜力。该技术将有助于解决动物疫苗研究过程中的病毒生长曲线和疫苗效价测定以及基因变异分析等重点难点问题,未来将成为疫苗研发的有力工具。

摘要： 为了制备犬瘟热病毒(CDV)核衣壳蛋白(NP)的单克隆抗体,从而为建立CDV的诊断方法提供有效试剂。将纯化后的CDV核蛋白作为免疫原注射至BALB/c小鼠腹腔中,取经4次长程免疫和1次加强免疫并达到融合标准的小鼠脾脏刮制成悬液,与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合制备杂交瘤细胞,利用间接ELISA筛选,并对单抗进行生物特性鉴定。结果表明:经过筛选后共获得2株可持续分泌抗CDV NP的单克隆细胞株,以3-3G、1-10B命名。2株细胞株抗体经效价测定均可达到1∶2 048 000;经亚型鉴定,2株杂交瘤细胞均为IgG2型;经过protein A柱纯化,抗体纯度达到了90%以上;BCA法测得抗体浓度至少达2.78 mg/mL;通过Western blot鉴定,制备所得CDV NP单克隆抗体与纯化的CDV NP抗原在预期的60 kd处有蛋白免疫印迹条带。该研究制备的单克隆抗体为后续犬瘟热的检测方法的研究奠定了基础。

摘要： 目的:建立生色底物法测定尿激酶和注射用尿激酶效价的新方法,对生色底物法的反应条件进行优化后,进行方法学验证,并在统计学意义上与现行的气泡上升法进行方法一致性评价.方法:对反应温度、pH、反应时间、底物浓度及酶反应浓度进行考察,确立0.3 mmol·L-1L-焦谷氨酰甘氨酰-L-精氨酸-对硝基苯胺盐酸盐溶液作为底物,水浴温度(35±-0.2)°C,准确反应30 min,加入40％醋酸溶液终止反应后,在405 nm波长处进行吸光度的测定.采用统计学软件对两种方法的测定结果进行Bland-Altman图分析.结果:尿激酶在6～50单位/L浓度范围内,吸光度呈良好线性关系(r=0.999 8),加样回收率在99.9％～101.5％之间,RSD为0.7％～1.5％(n=3),统计学分析结果表明与现行的气泡上升法测定结果具有一致性.结论:生色底物法操作简单方便,结果客观,重复性好,精密度高,生色底物法可以用作尿激酶与注射用尿激酶效价测定的现行气泡上升法的替代方法.

摘要： 目的 探讨不同因素对管碟法测定磷霉素效价中抑菌圈质量的影响,以提高测定结果的准确性.方法 按中国药典2020年版四部通则1201要求,逐一分析磷霉素效价测定过程中对抑菌圈质量产生影响的因素.结果 对影响抑菌圈质量的因素进行归纳分析,并提出了相应的控制方法.结论 使用管碟法测定磷霉素类品种时,将影响抑菌圈的质量的因素控制好,才能确保效价测定结果的准确可靠.

摘要： 目的:建立注射用尿促性素黄体生成素效价测定的不确定度评定方法.方法:通过建立评定注射用尿促性素黄体生成素效价测定不确定度的数学模型,分析其测定不确定的影响因素,并将各不确定度的分量进行量化分析,计算扩展不确定度.结果:注射用尿促性素黄体生成素效价测定的扩展不确定度为10.56％,其效价可表示为105.79％±10.56％(k=2).结论:该方法适用于注射用尿促性素黄体生成素效价测定的不确定度评定.

摘要： 青霉素从古至今在临床医学方面都有巨大的作用,而青霉素的发酵过程非常复杂,包括微生物学、化学、操作技术等全面性的理论知识与技能.此次实验是为了学习青霉素的发酵条件以及如何对青霉素进行效价测定.青桔霉是通过摇瓶浅层液态培养,从一级斜面菌株接种到液体培养基中,培养6～7 d来获取青霉素.通过青桔霉发酵生产获取青霉素,需要控制好pH、温度、营养成分等,梯度稀释配制青霉素标品,经过一系列的准备工作,接种培养,应用管碟法来测定效价.通过实验测量出抑菌圈的大小,计算获得青霉素的效价单位.实验数据表明:浓度越高的青霉素标品,抑菌圈直径越大,即青霉素能有效干扰细菌细胞壁的合成,干扰要素是青霉素所含青霉烷,能抑制细菌的生长.

摘要： 青霉素从古至今在临床医学方面都有巨大的作用,而青霉素的发酵过程非常复杂,包括微生物学、化学、操作技术等全面性的理论知识与技能。此次实验是为了学习青霉素的发酵条件以及如何对青霉素进行效价测定。青桔霉是通过摇瓶浅层液态培养,从一级斜面菌株接种到液体培养基中,培养6~7 d来获取青霉素。通过青桔霉发酵生产获取青霉素,需要控制好p H、温度、营养成分等,梯度稀释配制青霉素标品,经过一系列的准备工作,接种培养,应用管碟法来测定效价。通过实验测量出抑菌圈的大小,计算获得青霉素的效价单位。实验数据表明:浓度越高的青霉素标品,抑菌圈直径越大,即青霉素能有效干扰细菌细胞壁的合成,干扰要素是青霉素所含青霉烷,能抑制细菌的生长。

摘要： 目的 将HL60-IL6单核细胞活化反应测定法应用于细菌内毒素工作标准品的效价测定中.方法 将细菌内毒素国家标准品作为标准品,细菌内毒素工作标准品作为待标品,按《美国药典》生物检定方法验证指导原则进行方法学验证,验证指标包括专属性、相对准确度、精密度、线性和范围.采用经验证的HL60-IL6单核细胞活化反应测定法对细菌内毒素工作标准品进行效价测定,并比较与其标示量的一致性.结果 专属性考察结果符合可接受标准.相对偏差的置信区间均在-11％～12％内,直线回归方程斜率在0.8～1.25内,中间精密度均低于20％,线性相关系数为0.967,大于0.95,均符合可接受标准.相对效价水平范围为0.64～1.56.采用经验证的HL60-IL6法进行7次效价测定结果的平均值为每支81.9 EU,置信区间为每支75.04～ 89.36 EU,与标示值(每支80 EU)一致.结论 采用HL60-IL6法进行内毒素工作标准品效价测定的结果与其标示量一致,该法可用于细菌内毒素工作标准品的效价测定.

摘要： 为了有效预防鸭短喙侏儒综合征,采用新型鸭细小病毒毒株(SD03株)制备了一种鸭短喙侏儒综合征精制蛋黄抗体.采用琼脂扩散试验和中和试验进行蛋黄抗体效价的测定,分析蛋黄抗体的消长规律,确定最佳免疫程序、收蛋时间和临床应用效价标准,并对制备的3批供试品进行临床应用效果评价.结果表明:该研究成功制备了一种鸭短喙侏儒综合征精制蛋黄抗体,该抗体琼扩效价和中和效价均在三免15 d达到高峰,分别为1:64和1:640,由此确定高免蛋收集时间为三免15 d;基础免疫完成后,最佳加强免疫时间为每隔30 d进行一次加强免疫,可使抗体效价一直维持在较高水平;确定了抗体琼扩效价≥1:32或中和效价≥1:320为临床应用效价标准.3批供试品临床应用试验结果表明,该鸭短喙侏儒综合征精制蛋黄抗体安全性好,对鸭短喙侏儒综合征有良好的预防和紧急预防效果.

摘要： 对山东链霉菌所产三烯抗生素效价测定方法进行了探索,通过进行生物量法和浊度法实验,最终确定了浊度法作为山东链霉菌所产抗生素效价的测定方法.

摘要： 为评估市售商品化猪乙型脑炎(JE)弱毒活疫苗的质量以及实验室条件下疫苗的保存稳定性,采用TCID50效价测定和RT-PCR检测病毒的保守基因(E基因和C/prM基因)2种方法对2012年市场销售的主要国产疫苗产品进行了质量评估,同时将供试疫苗产品置-30°C保存3、6、9和12个月后分别取样测定乙脑病毒(JEV)TCID50效价.结果表明,市售的猪乙脑同类疫苗中不同品牌产品之间活病毒含量差异较大,最高可达104.33TCID50/头份,但部分产品含量极低,甚至难以检测到活病毒;E基因和C/prM基因的RT-PCR扩增产物丰度的差异与TCID50测定结果基本一致.多数疫苗产品在有效期内病毒效价基本稳定,同一厂家生产的疫苗保存期越短,其中相对活病毒越多,效价越高.

摘要： 目的:建立广地龙药材中蚓激酶效价测定方法.方法:用纤维蛋白平板法对蚓激酶活性进行测定,并采用生物检定统计法的量反应平行线测定法计算效价,并对该方法进行方法学研究.结果:效价测定范围为5000-25000U/mL(r=0.9 938),精密度RSD为12.23％;重复性RSD为12.38％;平均回收率(n=9)90.20％,RSD为13.9 6％;供试品溶液在4～9°C下48h内稳定.结论:用纤维蛋白平板法测定蚓激酶效价,专属性强、准确度高,用量反应平行线法可控制测定方法的误差,能有效控制广地龙药材质量.

摘要： 以我国、欧盟、日本等国家的药典及美国NIH曾推荐的方法为依据,对吸附破伤风疫苗效价测定方法进行分析、归纳和总结。指出，目前我国采用的方法是豚鼠或小鼠攻毒法。

摘要： 目的:探讨注射用降纤酶效价测定影响因素,并比较不同效价测定方法的相关性.方法:采用目测法、仪器法(光学法和磁珠法)分别测定注射用降纤酶效价,并比较其相关性.采用目测法,研究纤原、钠离子浓度和供试品浓度对注射用降纤酶效价测定的影响.结果:目测法结果可信度最高,磁珠法与目测法的结果相关性强(r=0.827),优于光学法.纤原、钠离子、供试品浓度对降纤酶效价测定的影响较大.结论:目测法测定注射用降纤酶效价的最佳方法,磁珠法有望成为替代方法.

摘要： 介绍了OOS(OOA)案例的案例，包括效价测定：高效液相色谱仪发生故障，QS后样品混合时间对分析结果（效价）的影响；杂质分析：样品容量瓶污染等两方面。

摘要： 目的:探讨大鼠离体子宫法与高效液相色谱法测定缩宫素效价的相关性.方法:采用中国药典2010年版二部附录缩宫素生物测定法和欧洲药典HPLC法,分别对合成缩宫素标准品溶液和国内不同生产厂家多批样品的缩宫素效价进行测定.结果:两法测定合成缩宫素标准品溶液的缩宫素效价结果吻合;国内4个厂家14批样品测定结果的Pearson相关性分析表明HPLC法与大鼠离体子宫法之间具有显著相关性(P＜0.01,r＝0.802),但HPLC法测定结果在部分厂家的样品存在明显超出生物检定可信限范围的偏差.结论:无干扰情况下两法结果吻合;HPLC法测定结果在国内部分厂家的样品明显超出生物检定本身允许的误差范围可能主要缘于样品中辅料和杂质的干扰或多肽生物活性的差异.本研究为缩宫素效价测定质量标准的提高提供了参考.

摘要： 目的：建立浊度法测定酒石酸泰乐菌素可溶性粉效价的方法。方法：以金黄色葡萄球菌为试验菌，抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基，制备菌悬液。采用浊度法和管碟法对酒石酸泰乐菌素可溶性粉的效价测定进行比较，并对浊度法进行方法学验证。结果：用浊度法测定酒石酸泰乐菌素可溶性粉的效价，泰乐菌素的浓度范围在0.6～2.0 μ/ml之间，其浓度的对数与吸收度成良好的线性关系，相关系数r为0.9990，平均回收率为100.3％，RSD为0.91％；用浊度法测定与管碟法测定的结果无明显差异，方法学验证说明浊度法测定酒石酸泰乐菌素可溶性粉效价的方法可行。结论：本方法具有可信限率低、灵敏度高、精密度高、快速、简便等优点，可用于泰乐菌素及其制剂的效价测定。

摘要： 目的:合成大黄酸(RHE)的人工抗原,制备敏感性高、特异性强的大黄酸兔源多克隆抗血清. 方法:采用碳二亚胺法(EDC)制备人工抗原,将RHE分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)相偶联.用紫外扫描法鉴定人工抗原是否偶联成功,免疫新西兰兔制备多抗血清,通过间接ELISA法测定抗血清效价,间接竞争ELISA鉴定敏感性和特异性. 结果:2只新西兰兔产生的多抗血清效价在1∶64000以上,其中,2号兔多抗血清敏感性最好,半数抑制浓度IC50为0.09ng/mL,且具有良好的特异性. 结论:成功制备了敏感性高、特异性强的大黄酸兔源多克隆抗体血清,为建立大黄酸免疫亲和色谱分析技术和快速检测方法奠定了基础.

摘要： 目的:合成大黄酸(RHE)的人工抗原,制备敏感性高、特异性强的大黄酸兔源多克隆抗血清. 方法:采用碳二亚胺法(EDC)制备人工抗原,将RHE分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)相偶联.用紫外扫描法鉴定人工抗原是否偶联成功,免疫新西兰兔制备多抗血清,通过间接ELISA法测定抗血清效价,间接竞争ELISA鉴定敏感性和特异性. 结果:2只新西兰兔产生的多抗血清效价在1∶64000以上,其中,2号兔多抗血清敏感性最好,半数抑制浓度IC50为0.09ng/mL,且具有良好的特异性. 结论:成功制备了敏感性高、特异性强的大黄酸兔源多克隆抗体血清,为建立大黄酸免疫亲和色谱分析技术和快速检测方法奠定了基础.

摘要： 在生物学的流体中循环的抗-DNA抗体是应用一种给定千碱基对的、适当限定的

摘要： 本发明涉及一种疫苗组合物，该组合物含有两种效价：(i)第一效价，它与氢氧化铝一起添加，(ii)含有细菌荚膜多糖的第二效价，其多糖含有一个或多个O－乙酰基基团，并且由于保护化合物的存在它不吸附在氢氧化铝上，该保护化合物可以是磷酸盐、柠檬酸盐或碳酸盐，并且它阻止这种吸附。第一效价可以是任何疫苗效价。根据一种特别方式，疫苗组合物含有(i)氢氧化铝吸附的甲型肝炎效价和(ii)由伤寒沙门氏菌荚膜的Vi多糖构成的伤寒效价。

摘要： 本发明公开了一种测定抗犬瘟热病毒血清效价的方法。测定步骤包括：将犬瘟热病毒与不同稀释度的待测血清孵育后，攻毒MDCK细胞，然后通过荧光抗体判定待测血清保护MDCK细胞的能力，得到保护率结果后，用Spear‑Karbar公式计算得到待测血清效价，得到的结果重复性好，精度高，可靠性好。

摘要： 本公开提供用于确定由重组病毒载体编码的有效载荷的效价的灵敏且稳健的测定。特别地，本公开提供确定由用于治疗脊髓性肌萎缩的重组病毒载体表达的SMN多肽的效价的测定。本说明书尤其包括用于确定重组病毒载体的效价(例如，生物活性)，例如相对效价的方法。

摘要： 本发明公开了一种人活化凝血因子VII浓制剂产品中微量凝血酶效价的测定方法，尤其是以人血浆Cohn组分III为原料制备的人活化凝血因子VII浓制剂产品中微量凝血酶效价的测定方法。本发明采用酶动力学测定法，使用可控温微孔板分光光度计，经过仪器、标曲线性范围、产品稀释线性范围、响应变量、反应时间等多方面优化，保证了产品检测的准确度、精密度。具有步骤简单、试验数据明晰、测定结果准确可靠的优点，适用于人凝血因子类生物制品中微量凝血酶效价的测定和质量控制。

摘要： 本申请提供了一种测定硫酸庆大霉素发酵液效价的方法，1)取庆大霉素发酵液，用浓硫酸酸化至pH=1.5‑2.0；2）过滤，用氢氧化钠溶液中和滤液至pH=7.3±0.5；3）量取中和后的溶液至离心管中，加雷氏盐溶液然后离心；4）水洗沉淀、离心；5）加入丙酮水溶液溶解沉淀物，离心，取上清液，采用紫外可见分光光度法测定吸光度；6)称取硫酸庆大霉素标准品，按上述相同处理方法制取上清液，得到溶液单位效价与吸光度关系的标准曲线和线性回归方程；7）根据待测溶液的吸光度和线性回归方程，计算得到庆大霉素发酵液的效价；准确度高，标准品效价回收率达到95.0%～105.0%，操作简易、成本低，适合大规模工业化生产检验。

摘要： 本发明公开了一种降纤酶的效价测定设备，包括培养箱、培养皿、净化机构、进气管、电加热板；培养箱内设置有用于放置培养皿的放置机构，培养箱的内壁上嵌设有电加热板，位于电加热板的培养箱的侧壁上设置有均匀加热组件，培养箱的顶面外壁上设置有净化机构，净化机构的出气端与进气管的进气端连接，进气管的出气端延伸至培养箱的内腔上方；第一框体、第二框体、第三框体、第四框体、第五框体和第六框体依次并排设置，且第一框体、第二框体、第三框体、第四框体、第五框体、第六框体、消毒液箱和第七框体上均设置有相适配的连接孔，连接孔内设置有连接螺栓；本发明具有提高了降纤酶培养的效率和效价测定的准确率的优点。

摘要： 本发明涉及化学测量领域，具体涉及一种低分子量肝素钙注射液抗Xa因子效价测定方法及其系统，包括：取低分子量肝素钙溶液100ul加抗凝血酶溶液100ul混匀，在37°C的温度条件下平衡1分钟，得到第一混合液；在第一混合液中加FXa溶液200ul,混匀，在37°C的温度条件下平衡1分钟，得到第二混合液；在第二混合液中加发色底物溶液500ul，混合，37°C平衡4分钟，得到测试液；用紫外分光光度计，以水为空白，在405nm的波长处，连续测定测试液的吸光度，每隔1分钟记录当前吸光度，共5分钟，计算吸光度变化率；取三羟甲基氨基甲烷‑氯化钠缓冲液与供试品溶液各100ul,代替低分子量肝素钙溶液按上述步骤操作，分别求出吸光度变化率，使得操作更加方便提高工作效率。

摘要： 本发明涉及一种猪传染性胃肠炎病毒N蛋白抗体效价测定方法，包括如下步骤：S1、实验动物免疫测试；包括N蛋白免疫双峰驼和N蛋白抗体效价的测定；S2、构建VHH噬菌体文库；包括扩增VHH基因及展示载体构建和纳米抗体文库的构建以及库容量测定；S3、淘选N特异性纳米抗体；包括文库救援及重组噬菌体滴度测定、淘选N蛋白特异性重组噬菌体、蛋白特异性重组噬菌体富集及粗提物制备和N蛋白重组纳米抗体的ELISA检测。

摘要： 本实用新型属于分析仪器校准领域，具体涉及一种抗生素效价测定仪校准用多用途标准盘，包含标准圆盘或方盘及四组不同直径的同心圆组，同心圆组的圆心以圆盘或方盘中心为中心呈星型分布；四组同心圆周与圆盘的圆心距或方盘的中心距呈均匀梯度排列，四组同心圆中各有一个圆周与其他组同心圆周的直径相等。本实用新型采用一块圆盘同时实现管碟法抗生素效价测定仪的示值误差、重复性、线性及边缘效应的校准，具有操作快捷、使用及携带方便等特点。