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核衣壳蛋白

核衣壳蛋白的相关文献在1993年到2023年内共计288篇,主要集中在畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂、基础医学、分子生物学 等领域,其中期刊论文191篇、会议论文32篇、专利文献113303篇;相关期刊104种,包括生物工程学报、生物技术通讯、微生物与感染等; 相关会议25种,包括上海市畜牧兽医学会2015年学术年会、中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十九次学术研讨会、中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会等;核衣壳蛋白的相关文献由1117位作者贡献,包括吴绍强、林祥梅、张永宁等。

核衣壳蛋白—发文量

期刊论文>

论文:191 占比:0.17%

会议论文>

论文:32 占比:0.03%

专利文献>

论文:113303 占比:99.80%

总计:113526篇

核衣壳蛋白—发文趋势图

核衣壳蛋白

-研究学者

  • 吴绍强
  • 林祥梅
  • 张永宁
  • 车小燕
  • 白雪帆
  • 丘立文
  • 冯力
  • 吕继洲
  • 廖志勇
  • 曹诚
  • 期刊论文
  • 会议论文
  • 专利文献

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排序:

年份

    • 刘江丽; 李盈盈; 王佳雯; 许喻鈞; 张艳; 黄江涛; 胡祖权; 曾柱
    • 摘要: 目的制备针对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(mAbs)并鉴定其生物学特性。方法利用大肠杆菌原核表达重组SARS-CoV-2 N蛋白,通过杂交瘤技术将小鼠骨髓瘤细胞SP2/0与经重组蛋白免疫的BALB/c小鼠的脾细胞进行融合,采用间接ELISA法和有限稀释法筛选出阳性杂交瘤细胞株,并鉴定其亚型,腹水法制备mAbs,Protein G亲和柱纯化后通过SDS-PAGE、间接ELISA和Western blot检测其纯度、效价及特异性。结果获得5株能稳定分泌抗SARS-CoV-2 N蛋白mAbs的杂交瘤细胞株,分别命名为N1~5。通过腹水法制备获得5个mAbs,亚型鉴定结果显示1个为IgG2a*κ型、4个为IgG1*κ型,其效价均达到2×10^(4)以上。Western blot结果表明5个mAbs都能与重组SARS-CoV-2 N蛋白结合。结论通过杂交瘤技术成功制备了5个能特异性识别重组SARS-CoV-2 N蛋白的mAbs,为开发免疫诊断试剂奠定了基础。
    • 刘庆庆; 吴鹏; 李培东; 张江伟; 陈创夫; 肖陈诚
    • 摘要: 【目的】利用腺病毒AdMax系统表达载体表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)核衣壳蛋白(nucleocapsid protein),并研究其免疫原性。【方法】参考GenBank中已公布的PRRSV N基因序列(登录号:KT945017.1),人工合成PRRSV N基因,并将其连接至腺病毒穿梭载体pDC316-mCMV-EGFP,转化大肠杆菌Top10感受态细胞,构建重组穿梭质粒pDC316-N。将重组穿梭质粒pDC316-N与AdMax腺病毒系统的骨架质粒PBHGLOX(delta)E1,3Cre共同转染293A细胞,获得重组腺病毒rAd-N,对获得的重组腺病毒液进行PCR和测序鉴定,用鉴定正确的rAd-N病毒液感染293A细胞,对该重组腺病毒进行扩大培养,检测病毒的TCID50,并用RT-PCR和Western blotting检测重组腺病毒的表达和反应原性。用重组腺病毒免疫小鼠,收集血清用PRRSV抗体检测试剂盒检测其抗体水平,初步评价其对小鼠的免疫效果。【结果】PCR扩增出1条大小为400 bp的PRRSV N基因条带,测序结果正确,表明重组腺病毒构建成功,浓缩后测得其半数组织培养感染剂量(TCID50)为10-10.239。RT-PCR和Western blotting检测结果证实目的基因在基因和蛋白水平上均可得到正确表达,蛋白分子质量约为14 ku。小鼠特异性抗体检测表明,重组腺病毒rAd-N免疫小鼠后可使小鼠快速产生PRRSV特异性抗体,与对照组差异显著(P<0.05),其中重组腺病毒与Gel佐剂配合使用时效果最好,最高可达7.84 U/L。【结论】本研究成功构建表达PRRSV N蛋白的重组腺病毒,其具有良好的免疫原性,为建立针对PRRSV抗体的间接ELISA检测方法和进一步研发PRRSV抗体检测试剂盒奠定基础。
    • 高珂星; 鲁非; 高竞溪; 胡志刚; 纪锋; 郭志刚
    • 摘要: 新型冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2,SARS-CoV-2)是最新发现的一种可侵染人体的β属冠状病毒,该病毒入侵机体可引发新型冠状病毒肺炎(Coronavirus Disease 2019,COVID-19),该疫情的暴发在国内甚至国际上造成了严重影响。核衣壳蛋白(Nucleocapsid phosphoprotein, Np)相较于病毒编码的其它三种结构蛋白保守性更强,在病原诊断、疫苗设计和治疗等方面占据重要地位。预测Wuhan-Hu-1 Np的空间结构及其B细胞抗原表位,为开发SARS-CoV-2的表位疫苗和相关单抗奠定基础。采用MEGA5.05中的Neighbor-joining法构建基于SARS-CoV-2 Np的碱基序列的系统发生树;以SARS-CoV-2 Wuhan-Hu-1株为研究对象,其柔性区段、亲水性指数、抗原指数和蛋白质表面可能性等参数由DNAStar软件中的Protean模块进行分析预测,结合Phyre2在线工具模拟的空间结构,综合预测Wuhan-Hu-1 Np的B细胞优势抗原表位。结果发现:不同地区SARS-CoV-2 Np的碱基序列高度相似(99.6%-100%),Wuhan-Hu-1 Np氨基酸序列长419 aa,其空间构型相对规则,仅含少量α-螺旋而多见β-折叠、β-转角和无规则卷曲结构;多参数综合分析结果指示,可能的B细胞抗原表位位于52~59、69~75、83~89、106~115、119~124、130~136、154~166、217~227、243~249、267~273、299~315、333~339、347~363、379~385、389~401、403~411氨基酸区段。本研究旨在为开发SARS-CoV-2表位疫苗、快速诊断试剂、单克隆抗体等提供理论信息,为医治COVID-19给予一些新策略。
    • H.M.Shifa ul Haq; Arnaud JohnKOMBE KOMBE; Ayesha Zahid; Momal Babar; 曾威红; 何宏亮; 金腾川
    • 摘要: 新型冠状病毒感染引起的新冠肺炎传播已经导致了全世界数百万人的死亡。因此,深入了解新冠病毒的生物学基础对研发控制其传播的新手段至关重要。新冠病毒的核衣壳蛋白(N蛋白)是一个重要的诊断和治疗靶点,它在病毒生命周期中具有多种重要功能。目前已有多个关于新冠病毒N蛋白的结构与功能方面的研究报道。本综述总结了这个进化上高度保守的N蛋白的最新数据,以期提供有关该蛋白的结构和多种功能特征的全面信息。
    • 范能全; 张玲; 任学毅; 杨辉; 杨黎; 范开; 彭兰
    • 摘要: 目的制备新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的刺突蛋白(S)和核衣壳蛋白(N)重组抗原。方法利用Blast程序检索目标序列SARS-CoV-2的S蛋白和N蛋白的同源序列,用SWISS-MODEL软件对目标序列进行结构建模,运用DISCO TOPE对S蛋白和N蛋白的B细胞抗原表位进行分析,选取抗原表位较多的序列进行合成;重组抗原分离纯化后制备兔抗新冠病毒蛋白多抗,用Western blot检测抗原SARS-CoV-2的S蛋白以及N蛋白免疫学活性;用ELISA法检测自制抗原与市售抗体的结合能力。结果重组质粒pET-22b-SA、pET-22b-SB、pET-22b-SC、pET-22b-NA、pET-22b-NB测序鉴定结果显示正确;Western blot结果显示,重组抗原与山羊抗兔IgG-HRP有特异性结合反应,表明具有良好的免疫学反应;ELISA法结果显示,重组抗原结合能力明显强于市售抗N蛋白抗原。结论制备的抗原与不同靶IgG和IgM结合能力强,特异性高,具有开发成检测血清SARS-CoV-2特异性IgG和IgM抗体的试剂盒的潜力。
    • 张翼华; 张志凌
    • 摘要: 新型冠状病毒传播速率快,且能导致严重呼吸综合征,危及生命安全。及时检测该病毒尤为重要。目前的检测手段各有优势,但仍需进一步提高。本文制备了一种比色荧光纳米球用于新冠病毒核衣壳蛋白(N protein)的侧向层析检测。该纳米球内有多个量子点可用于荧光定量检测,外有多个金纳米粒子用于比色定性检测。荧光检测限可达2.1 nmol/L。该方法重现性和特异性好,具有较强抗干扰能力。本研究为新冠病毒的快速检测提供了一种新方法。
    • 窦雪晨; 王冠; 张宁; 程智; 杜耀华; 田丰
    • 摘要: 电化学传感器因具有灵敏、便携、稳健性高、小型化、成本低、无需前处理、检测快速等优点,在严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)检测领域受到广泛关注。该文介绍了致病菌SARSCoV-2的组成部分,综述了基于病毒表面的刺突蛋白、病毒内部核衣壳蛋白和核糖核酸(RNA)3种可特异性检测SARS-CoV-2的电化学生物传感器的研究进展,并对比了3种类型电化学生物传感器的检出限、检测时间、动态监测范围等关键参数。同时与其他检测SARS-CoV-2的方法进行对比,分析了电化学生物传感器的优劣势;最后指出了未来可通过优化检测电极材料及反应条件、修饰检测探针等方面提升电化学生物传感器性能,以实现对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者的早发现、早隔离及早治疗,同时为设计现场快速诊断COVID-19设备提供有力支撑。
    • 冉皑; 凌洪权; 曾政; 骆璐; 吴胜昔; 董春霞; 李云; 陈娅
    • 摘要: 为了制备犬瘟热病毒(CDV)核衣壳蛋白(NP)的单克隆抗体,从而为建立CDV的诊断方法提供有效试剂。将纯化后的CDV核蛋白作为免疫原注射至BALB/c小鼠腹腔中,取经4次长程免疫和1次加强免疫并达到融合标准的小鼠脾脏刮制成悬液,与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合制备杂交瘤细胞,利用间接ELISA筛选,并对单抗进行生物特性鉴定。结果表明:经过筛选后共获得2株可持续分泌抗CDV NP的单克隆细胞株,以3-3G、1-10B命名。2株细胞株抗体经效价测定均可达到1∶2 048 000;经亚型鉴定,2株杂交瘤细胞均为IgG2型;经过protein A柱纯化,抗体纯度达到了90%以上;BCA法测得抗体浓度至少达2.78 mg/mL;通过Western blot鉴定,制备所得CDV NP单克隆抗体与纯化的CDV NP抗原在预期的60 kd处有蛋白免疫印迹条带。该研究制备的单克隆抗体为后续犬瘟热的检测方法的研究奠定了基础。
    • 张赛; 王刚; 刘仲明; 李辉军; 钱纯亘
    • 摘要: 目的:建立新型冠状病毒(SARS-CoV-2)抗原快速检测试剂的制备方法,并对检测试剂的性能指标进行评价。方法:以羧基荧光纳米粒子标记的羊抗SARS-CoV-2核衣壳蛋白(NP)多克隆抗体及鸡IgY为标记抗体,硝酸纤维素膜上分别包被鼠抗N蛋白单克隆抗体和羊抗鸡IgY抗体作为检测线和质控线制备免疫荧光试纸条,对试剂最低检出限、交叉反应性、重复性、临床诊断灵敏度和特异性进行性能评价。结果:检测N全长重组蛋白及热灭活培养物的最低检出限分别为13.8 pg/ml和1.6×10^(2) TCID_(50)/ml;测试16种常见呼吸道病原体高浓度样本均无交叉反应;高、低两个浓度参考品变异系数(CV)分别为7.68%和4.98%。临床鼻咽拭子样本及健康人群鼻拭子样本测试,诊断灵敏度为86.36%(19/22),特异度为99.16%(355/358),总符合率为98.42%(374/380);一致性检验Kappa值为0.8553(P<0.05)。结论:SARS-CoV-2荧光抗原检测试剂检测灵敏度和特异性高,检测速度快,操作便携,可作为现有核酸检测法的补充手段,用于新型冠状病毒的早期筛查。
    • 摘要: 六、实验室检测检测机构应选用针对开放读码框lab(ORF1ab)和核衣壳蛋白(N)基因的新冠病毒核酸检测试剂,人体标本检测原则上选用含内源性内参的检测试剂。标本采集、运送、存储和检测应严格按照规定执行。确诊病例、无症状感染者、入境人员、密切接触者和密接的密接在住院、隔离医学观察或健康监测期间应“单采单检”,即单独采集个体的标本,单管进行核酸检测,不得进行混采混检。
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