次生代谢物质

摘要： 叶片次生代谢物质含量是植物响应外界环境变异的重要性状,与植物适应策略与生态系统过程紧密相关。以往研究认为,物种内次生代谢物质含量的纬度变异受到叶片草食作用、气候和土壤因子的综合影响,但不同因素的相对贡献尚未得到一致性结论。为此,本研究对广泛分布于我国的药用植物虎杖(Reynoutria japonica Houtt.)进行了野外调查,探讨了虎杖叶片中两种酚类次生代谢物质含量的纬度变异格局,并结合草食作用与非生物环境因子分析了影响其含量变异的关键因素及相对重要性。结果表明,虎杖叶片中白藜芦醇含量随纬度增加而显著降低,总单宁含量随纬度变化未呈现显著变异。多元回归结果显示,两种次生代谢物的含量均与生境温度的季节性呈显著正相关,叶片白藜芦醇含量还与年降水量、太阳辐射年较差和叶片草食作用显著负相关。由此可见,虎杖叶片中两种酚类次生代谢物质的含量是以温度季节性为主的多种环境因子综合影响的结果,暗示不同次生代谢物质可能具有多种不同的生态功能。本研究结果加深了对植物叶片次生代谢物质的纬度变异格局及其成因的认识,同时对虎杖资源的开发利用也具有一定参考价值。

摘要： 连栽导致的外源因素改变打破了杉木在防御与生长间资源调配的平衡,从而严重限制了杉木的生长和发育,成为我国南方杉木人工林经济最大化的重要制约因素。次生代谢调节是植物响应与抵御外部胁迫的重要措施,也是杉木响应和适应连栽障碍的生化基础。然而,针对杉木应对连栽障碍的次生代谢基础方面的研究依然薄弱,极大限制了对杉木响应和适应连栽障碍生化机制的认知。通过对连栽组和撂荒地对照组的杉木幼苗林进行土壤理化物质、幼苗生长量和幼苗代谢物的测定,分析连栽过程中杉木幼苗差异响应连栽障碍的生理与代谢基础。结果发现,相对于对照组(撂荒地),连栽组的土壤毛管孔隙度降低了23.05%,土壤总孔隙度降低了13.22%,有效磷含量降低了73.17%,全碳含量降低了30.23%、全氮含量降低了24.87%。各处理杉木幼苗中,总共测得147个代谢物。其中,差异代谢物87个,大多数隶属于类黄酮生物合成通路,该通路有抵抗生物和非生物胁迫的功能,说明连栽障碍会对杉木幼苗的生长形成明显的胁迫,且此胁迫可能由土壤毛管孔隙度、土壤总孔隙度、土壤有效磷含量、土壤全碳含量和土壤全氮含量差异导致,进而造成了苗高生长量降低了26.62%,地径生长率降低了30.74%,冠幅生长量降低了25.9%。本研究探究了连栽障碍影响杉木幼苗的代谢基础,可为生产中改善和缓解杉木的连栽障碍以及为杉木人工林地可持续经营和科学管理提供理论依据。

摘要： [目的]在对3.5年生青钱柳种质资源进行评价的基础上,初选适合南京及周边环境相似地区的优良家系及单株,为青钱柳定向培育提供理论依据。[方法]以青钱柳种质资源库31个家系为材料,测定其生长性状和叶总黄酮、总三萜、总多酚含量,分析各性状间的差异,并对青钱柳家系进行聚类分析,同时利用熵权法进行优良家系-单株配合选择。[结果]青钱柳树高、地径等生长性状及叶总黄酮、总三萜、总多酚含量在参试家系间存在显著差异;聚类分析将31个参试家系聚为4类,第1类推荐为高三萜积累家系,第2类推荐为高多酚积累家系,第3类推荐为高黄酮积累家系,第4类为叶次生代谢物综合含量表现较差家系。根据生长性状和叶主要次生代谢物含量的数据,采用熵权法初选出7个优良家系,分别为GXJZS7#、GZSQ12#、GXLS26#、HNYS2#、AHQLF13#、SCMC31#和GXJZS1#;针对优良家系内单株进一步进行综合评价,筛选出11株优良单株,在叶片总黄酮、总三萜和总多酚含量上综合表现较优。[结论]青钱柳生长和次生代谢物含量在家系间存在显著差异,为青钱柳良种选育提供了极大的空间;基于优良家系-单株配合选择,初步筛选出7个优良家系和11株优良单株可用于进一步试验和应用。

摘要： 黄宽条跳甲是内蒙古西部地区春油菜苗期最重要的害虫。本研究测定了2个抗虫油菜品种‘太空蒙Ⅳ’和‘大黄油菜’及1个感虫品种‘青油14’的叶片性状、次生代谢物质及取食不同品种油菜后黄宽条跳甲解毒酶活性。结果表明,油菜叶片含水量高的抗虫性强。叶片茸毛短、密度低与‘太空蒙Ⅳ’抗虫性高度相关,蜡质含量高可能是‘大黄油菜’抗黄宽条跳甲的原因之一。油菜叶片总黄酮、总酚和总生物碱含量与抗虫性呈正相关;取食抗虫性高的油菜品种的黄宽条跳甲体内谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)活性极显著高于感虫品种。

摘要： [目的]了解桑天牛不同寄主植物间主要营养成分及次生代谢物质含量的差异,分析其在桑天牛成虫寄主选择行为中的作用,为桑天牛生态控制技术的应用提供参考依据.[方法]采用笼养法观察桑天牛对寄主和非寄主植物的选择行为,分析比较桑天牛取食与产卵寄主和非寄主树种枝条主要营养成分及次生代谢物质含量及其与桑天牛寄主选择的相关性.[结果]桑天牛雌雄成虫在24 h均能准确地找到取食寄主构树和桑树,且对桑科植物的选择比例显著高于杨树和苦楝,其中对构树的选择率一直保持较高比例.桑天牛产卵寄主杨树枝条木质部的可溶性糖、还原性糖、蛋白质、总酚、单宁和黄酮含量均低于非寄主苦楝.成虫取食寄主构树和桑树枝木质部的可溶性糖含量显著高于苦楝,还原性糖含量均低于苦楝;构树枝韧皮部可溶性蛋白含量显著高于苦楝,而桑树与苦楝则无显著差异;构树和桑树枝条韧皮部总酚、单宁和黄酮含量均高于苦楝.雌雄成虫取食选择比例与寄主植物可溶性糖含量呈正相关,与还原性糖、总酚和单宁含量呈负相关,可溶性蛋白质含量对成虫取食选择的影响不大.[结论]寄主植物营养物质含量对桑天牛成虫取食选择具有重要作用,而次生代谢物质含量对桑天牛产卵寄主选择更为重要.

摘要： [目的]研究明确外源喷施茉莉酸(JA)和水杨酸(SA)对胡椒抗瘟病的影响及生理生化变化.[方法]以中国主栽品种"热引1号"胡椒苗为实验材料,给胡椒苗单独和混合方式喷施5 mmol·L-1 SA、1 mmol·L-1 JA处理.[结果]处理第20天时,单独喷施SA和混合喷施JA/SA的试验苗幼嫩的茎叶出现了不同程度损伤.在此基础上采用连续15 d和间隔2d喷施处理"热引1号"胡椒苗,接种病原菌后经表型鉴定.间隔2d喷施5 mmol·L-1 SA、1 mmol·L-1 JA和JA/SA混合的3种方式抗病效果明显优于其它处理.与对照相比,这3种处理均使叶内源JA、SA增加,在接种病原菌后使叶片内源JA、SA、ETH含量达到了最高水平;随着接种后时间延长,胡椒叶片内的总黄酮、总多酚含量一直降低,对照下降程度较为明显;防御酶PPO、PAL活性都出现先升高后降低趋势,在较优处理中维持较高水平.[结论]1 mmol·L-1 JA和5 mmol·L-1 SA外源处理可通过调节防御酶活性等,减缓胡椒病斑面积的扩大,不同方式处理结果存在一定差异性.

摘要： 氮元素是烤烟生长发育不可缺少的重要元素之一,适当的氮肥用量对于提高烤烟产量和质量有重要作用。氮素主要参与烟株蛋白质、烟碱等含氮化合物的合成,能够明显促进烟株根系的发育,进而影响烟株的产量和烟碱等次生代谢物质的合成,是影响烟株生长发育和产量的关键因素。

摘要： 为研究不同砧木对赤霞珠(CS)干红葡萄酒花色苷及其抗氧化活性的影响,试验以赤霞珠4种砧穗组合(CS/Beta、CS/140Ru、CS/1103P、CS/5BB)所产果实酿造的葡萄酒为试材,测定不同砧穗组合下赤霞珠葡萄酒的花色苷单体组分与含量、其他次生代谢物质含量及葡萄酒抗氧化活性.结果 表明,CS/Beta葡萄酒花色苷单体组分最多(8种),单体总量分别比CS/5BB、CS/1103P、CS/140Ru葡萄酒提高23.11％、31.76％、53.13％,且其香豆酰化比例较高;CS/5BB葡萄酒单体组分为7种,酰化比例较高.CS/Beta葡萄酒的单宁含量比CS/5BB葡萄酒显著提高12.18％ (P＜ 0.05),CS/Beta与CS/5BB葡萄酒总酚、类黄酮、花色苷、单宁含量均显著高于CS/1103P、CS/140Ru葡萄酒(P＜0.05);CS/Beta、CS/1103P、CS/5BB葡萄酒色度无显著差异(P＞0.05),均显著高于CS/140Ru (P＜ 0.05):CS/Beta、CS/5BB葡萄酒抗氧化活性均显著高于CS/1103P、CS/140Ru (P＜ 0.05).因此,砧木Beta、5BB对于改善赤霞珠葡萄干红葡萄酒品质方面有重要作用,可考虑作为赤霞珠嫁接苗的首选砧木.

摘要： 为明确小白菜次生代谢物质对小菜蛾行为的调节作用,采用热回流法提取小白菜中不同极性物质,利用Y-型嗅觉仪评价这些物质对小菜蛾雌虫行为的调节效应,采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)鉴定提取物中各化合物的化学结构。结果显示:小白菜不同极性提取物对小菜蛾雌虫行为均有一定的调节作用,其中,低极性物质在高浓度时有引诱效果,高极性物质在中、低浓度时有引诱效果。对比小白菜无水乙醇提取物和蒸馏水提取物发现,低浓度时小白菜无水乙醇提取液对小菜蛾的活性低于蒸馏水提取液。GC-MS鉴定结果显示:小白菜蒸馏水提取液中含有异柠檬酸乙酯和9,12,15-十八碳三烯醛两种化合物,其中异柠檬酸乙酯含量较高;小白菜无水乙醇提取液中含有6种化合物,含量较高的为3,7,11,15-四甲基-2-十六烯-1-醇,其次为9,12,15-十八碳三烯酸,其中,9,12,15-十八碳三烯酸和9,12,15-十八碳三烯醛具有相同的母环结构。进一步研究表明,9,12,15-十八碳三烯酸和9,12,15-十八碳三烯醛可能是小白菜调节小菜蛾行为的潜在活性物质,可用于小菜蛾绿色防治产品的开发。

摘要： 以'140Ru''巨峰''达米娜'和'克瑞森'一年生盆栽苗为试材,测定根瘤蚜侵染后新根次生代谢相关酶活性及含量的响应.结果表明,根瘤蚜的侵染能诱导葡萄新根内次生代谢物质的积累和代谢相关酶活性的升高.抗性砧木'140Ru'被根瘤蚜侵染后,PAL、PPO和SOD的增加幅度明显高于敏感品种'巨峰''达米娜'和'克瑞森'.新根被侵染后总酚、木质素的积累量增加,'140Ru'中积累量显著高于栽培品种,与根瘤蚜抗性呈显著正相关,相关系数为0.987和0.841.

摘要： 为了快速高效地提取山核桃胚，胚乳的总RNA，满足后续实验的要求，本研究借鉴Jaakola等的总RNA提取方法，针对山核桃种仁富含油脂及次生代谢物质的特点，对适合于山核桃胚，胚乳总RNA提取的方法进行了探索。该方法(改良CTAB法)与TRIzol试剂盒法相比，虽然消耗时间较长，但得到的总RNA完整性好，纯度高，所提取的总RNA在体外能成功进行反转录。

摘要： 利用不同溶剂对花脸香蘑Lepista sordida发酵次生代谢物质进行了分级分离提取,以DPPH法检测各级分离物的抗氧化活性,结果发现固体发酵乙酸乙酯相活性最高,其次为发酵液乙酸乙酯相;以MTT法检测其体外抗肿瘤活性,发现发酵液乙酸乙酯相抗肿瘤活性最高,对人宫颈癌细胞Hela的IC50值为50 μg/mL;菌丝提取物也表现出较强的抗氧化、抗肿瘤活性。上述结果为进一步研究和开发利用花脸香蘑提供了新的科学依据.

摘要： 本文利用不同溶剂对白阿魏蘑次生代谢物质进行了分级分离提取。以DPPH.和ABTS.+法检测各部分抗氧化活性,结果发现乙酸乙酯相活性最高,进一步纯化得到4个较高的活性部分,暗示有较强的天然抗氧化剂存在。以MTT法检测体外抗肿瘤活性发现石油醚相抗肿瘤活性最高,对人卵巢癌细胞的IC50为175.28μg/ml。上述结果为白阿魏蘑进一步开发提供了理论与实验依据。

摘要： 由于获得大量新的微生物及从中分离到的生物活性化合物,历史上曾被称为"生物沙漠"的深海惊天逆转而成为一种"生物多样化的雨林".目前,关于从海洋微生物中提取崭新生物活性化合物的信息爆炸,人们进一步努力探寻更多的海洋微生物及其可能成为新药的次生代谢物质.通过常规和创新两条分离途径从海洋中复苏和纯化其中那些珍贵的被认为是难以培养的微生物.为了克服与培养技术相关的困难和限制,人们发展了几种基于DNA技术的分子生物学方法来突破培养技术的瓶颈.利用上述策略分离生物活性化合物不仅在生物技术和制药学应用中显现重要性,也增加了我们对海洋微生物的多样性、生态系统功能和开发生物学的理解.

摘要： 本发明提供臭七次生代谢物1‑7及其制备方法，以其为活性成分的药物组合物，及其在制备预防炎症性病变的药物中的应用，以及其在制备治疗炎症性疾病的药物中的应用。本发明主要是采用植物化学研究手段，从臭七中获得上述化合物1‑7，并制成固体、液体或膏状体剂型。本发明所得抗炎化合物为天然产物，对人体细胞无毒无害。

摘要： 本发明涉及植物栽培技术领域，提供了一种提高青钱柳叶中次生代谢物含量的青钱柳栽培方法，包括如下步骤：(1)于8月初，对青钱柳植株进行施肥，以促进青钱柳的生长；(2)施肥2周后，在青钱柳植株的基部用刀片环割，以切断韧皮部为准，不伤及木质部；(3)环割处理2周后，所述青钱柳植株的叶片即可用于叶片采集。本发明的优点在于：本发明通过对生长旺盛的青钱柳植株基部进行“环割”处理来平衡植株生长过程中的“产量”与“次生代谢物积累”之间的矛盾，可在不降低叶片产量的基础上，显著提高叶片中次生代谢物含量，从而大大提高青钱柳叶片的药用品质；本发明方法为高品质的青钱柳及其他木本药用植物的栽培和管理提供技术支撑。

摘要： 本发明提供一种GC‑MS检测新鲜烟叶中初生代谢物和次生代谢物的方法，所述方法步骤如下：快速采集新鲜烟叶并用液氮现场速冻，转移到干冰中低温运回实验室，采用冻干机低温冷冻干燥的方法除去水分，并用粉碎机对烟叶进行粉碎，过40目筛，用溶剂超声提取粉碎后的烟叶中初生次生代谢物，对提取液的上清液进行氮气吹干，然后对吹干的提取物进行肟化反应、硅烷衍生化反应，最后采用GC‑MS分析。其优点在于：烟叶采集方法可以真实反映采集烟叶所在的生长发育时期、采集部位、品种和产地。烟叶提取和检测方法可以涵盖新鲜烟叶中初生、次生代谢物，如糖、氨基酸、有机酸、甾醇、生物碱、多酚等，具有高通量检测特性，同时选择离子监测方法可以准确定性定量新鲜烟叶中初生代谢物和次生代谢物199个（标准品验证135个）。

摘要： 本发明涉及用于识别相对于其野生型具有提高的特定代谢物细胞内浓度的细胞的方法，其中通过重组工程实现细胞的修饰，以及用于制备相对于其野生型具有优化的特定代谢物产量的经基因修饰的生产细胞的方法，用于制备这些代谢物的方法，以及适合于此的核酸。根据本发明，编码重组酶的基因，其与已知的重组酶同源，经由载体转化到细胞中，并且将包含至少一个经修饰的基因G1-Gn或至少一个突变的DNA引入到该细胞中，并借助代谢物传感器识别具有最高代谢物产量的细胞。由这些细胞中分离出对升高的产量负责的突变，提取这些基因或突变并引入到生产菌株中，其由此表现出升高的代谢物产量。

摘要： 本发明公开了一种植物中病虫害介导的抗性相关次生代谢物的鉴定新方法。首先，基于先验知识收集病虫害相关次生代谢物作为诱饵代谢物，构建诱饵代谢物LC‑MS/MS质谱数据库；其次，采集基于超高效液相色谱‑高分辨质谱的非靶向代谢组数据；接着，基于诱饵数据库在实验数据中定性诱饵代谢物并获得其相应实验二级质谱；然后，利用诱饵代谢物的二级质谱与实验获取代谢物峰的二级质谱共建基于二级质谱相似性的分子网络，通过分子网络筛选并鉴定与诱饵抗性次生代谢物具有类似结构的代谢物峰；最后，应用于植物组织样品中，在病虫害前后与诱饵次生代谢物有一致变化趋势的结构类似物，作为可能的病虫害介导的抗性相关次生代谢物。

摘要： 一种通过培养龙牙楤木体细胞胚生产有用次生代谢物质的方法，其特征是：1)从无菌实生苗根段获得的胚性愈伤组织分别在分化培养条件和增殖培养条件下进行摇瓶悬浮培养；2)根据体细胞胚不同发育状况定期取材，并计算它们的生物生长量；3)分析体细胞胚各发育时期材料中楤木总皂苷、齐墩果酸、总黄酮的累积；4)体细胞胚苗中各成分含量最高，总皂苷占栽培植株根中含量的29.7％；齐墩果酸占栽培植株根中含量的29.9％；总黄酮占栽培植株叶中含量的42.8％，且体细胞胚苗中三种物质累积效率最高，分别为：总皂苷6.72mg/周、齐墩果酸3.42mg/周、总黄酮7.36mg/周。

摘要： 本发明是一种利用异硫氰酸胍-氯仿抽提、Tris饱和酚纯化植物RNA的抽提方法。本发明改良了传统的异硫氰酸胍法，采用裂解后氯仿抽提加酚纯化两步法，分别从红皮梨的叶片和果皮、葡萄的叶片和果肉、果皮组织以及草莓果实和新疆紫草愈伤组织中提取到了高质量的总RNA。该方法的抽提缓冲液中含有异硫氰酸胍、十二烷基肌氨酸钠、柠檬酸钠、可溶性聚乙烯吡咯烷酮和β-巯基乙醇，既能高效裂解植物细胞释放RNA，有效抑制RNA酶的活性，还能防止酚类物质的氧化和排除次生代谢物质的干扰。第二步用Tris饱和酚纯化粗提RNA溶液，能除去与RNA共沉淀的多糖和蛋白质。本发明操作步骤简单、经济实惠、稳定性好，适用于从富含多糖多酚及次生代谢物质的植物组织中提取高质量总RNA。

摘要： 一种通过培养龙牙楤木体细胞胚生产有用次生代谢物质的方法，其特征是：1)从无菌实生苗根段获得的胚性愈伤组织分别在分化培养条件和增殖培养条件下进行摇瓶悬浮培养；2)根据体细胞胚不同发育状况定期取材，并计算它们的生物生长量；3)分析体细胞胚各发育时期材料中楤木总皂苷、齐墩果酸、总黄酮的累积；4)体细胞胚苗中各成分含量最高，总皂苷占栽培植株根中含量的29.7％；齐墩果酸占栽培植株根中含量的29.9％；总黄酮占栽培植株叶中含量的42.8％，且体细胞胚苗中三种物质累积效率最高，分别为：总皂苷6.72mg/周、齐墩果酸3.42mg/周、总黄酮7.36mg/周。

摘要： 本发明公开一种泽漆次生代谢物质的乙醇溶液植物杀虫制剂及其制备方法。本发明将泽漆制成溶液制剂的方法为：将泽漆全草烘干，粉碎至30-100目；于搅拌容器中加入泽漆及4-6倍重量乙醇，在20-70°C下浸取6-72小时，间歇搅拌或全程持续搅拌，过滤得浸提液；向滤渣加入2-5倍原泽漆重量的乙醇，在20-70°C下浸取6-48小时，间歇搅拌或全程持续搅拌，过滤，该浸取和过滤过程重复1-3次；合并浸提液，浸提液减压蒸发得固形物5-20%的浓缩液并回收乙醇；分别加入0.002-0.15倍浓缩液重量的助溶剂、稳定剂、增效剂和乳化剂；搅拌0.2-3小时，过滤，得泽漆次生代谢物质的醇溶液制剂。

摘要： 本发明是一种利用异硫氰酸胍－氯仿抽提、Tris饱和酚纯化植物RNA的抽提方法。本发明改良了传统的异硫氰酸胍法，采用裂解后氯仿抽提加酚纯化两步法，分别从红皮梨的叶片和果皮、葡萄的叶片和果肉、果皮组织以及草莓果实和新疆紫草愈伤组织中提取到了高质量的总RNA。该方法的抽提缓冲液中含有异硫氰酸胍、十二烷基肌氨酸钠、柠檬酸钠、可溶性聚乙烯吡咯烷酮和β－巯基乙醇，既能高效裂解植物细胞释放RNA，有效抑制RNA酶的活性，还能防止酚类物质的氧化和排除次生代谢物质的干扰。第二步用Tris饱和酚纯化粗提RNA溶液，能除去与RNA共沉淀的多糖和蛋白质。本发明操作步骤简单、经济实惠、稳定性好，适用于从富含多糖多酚及次生代谢物质的植物组织中提取高质量总RNA。