蛋白酶抑制剂

摘要： MLP2–2基因是存在于金柑中的一种H2B蛋白互作基因。对金柑MLP2–2基因进行生物信息学分析,发现MLP2–2蛋白序列中存在跨膜结构域,与Kunitz蛋白酶抑制剂具有同源性;对2年生金柑幼苗进行冷驯化,提取叶片RNA,反转录获得MLP2–2基因的cds序列,转入pBRT7质粒构建pBRT7–MLP2–2过表达载体后,侵染Rosetta(DE3)大肠杆菌工程菌,获得目的蛋白,并检测MLP2–2蛋白对金柑蛋白提取液的蛋白降解率。结果表明,MLP2–2抑制了16%的金柑蛋白质的降解,说明MLP2–2蛋白具有蛋白酶抑制剂活性。

摘要： (一)药理作用从人尿中提取精制的糖蛋白,属于蛋白酶抑制剂。具有抑制胰蛋白酶等各种胰酶活性的作用,常用于胰腺炎的治疗。此外,本药尚有稳定溶酶体膜、抑制溶酶体酶的释放和抑制心肌抑制因子产生等作用,故而可用于急性循环衰竭的抢救治疗当中。

摘要： 目的 观察不同剂量蛋白酶抑制因子(proteasome inhibitors I,PSI)对大鼠行为学及脑黑质酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH)、α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)表达的影响,探讨PSI致帕金森病(Parkinson’s disease, PD)大鼠慢性模型的最佳条件。方法 将30只SPF级雄性大鼠随机分为3组,每组10只,皮下注射PSI,给药剂量分别为模型组A 3 mg/kg、模型组B 6 mg/kg,对照组以相同方法注射二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)溶液,剂量为3 mg/kg。连续隔日(每周一、三、五)注射2周后,观察PD大鼠的行为学变化,同时常规HE染色,在光学显微镜下观察中脑黑质区细胞变化情况,Western blot及免疫组化染色法检测各组大鼠的脑内多巴胺能神经元黑质酪氨酸羟化酶(TH)、中脑黑质区α-syn的表达变化。结果 与对照组相比,PSI模型组两组大鼠运动能力明显下降,模型组A爬杆实验行为学评分低模型组B,悬挂实验行为学评分高于模型组B(P<0.05);HE染色结果显示:模型组大鼠中脑黑质细胞变性;Western blot法及免疫组化结果显示:大鼠均出现黑质TH表达明显降低、α-syn的表达显著增加。结论 PSI大鼠模型可以复制PD的行为学和中枢、外周神经退行性改变特征,是研究PD发病机制的有效模型。

摘要： 由严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)引起的2019冠状病毒疾病(COVID-19)在全球范围内的爆发,已成为一种全球性的大流行病。除了疫苗之外,抗病毒疗法也是应对COVID-19持续威胁的医疗响应的重要组成部分。最近,研究人员报告了一种口服生物利用的SARS-CoV-2主要蛋白酶抑制剂PF 07321332的发现和表征。

摘要： 目的研究蛋白酶抑制剂与依赖RNA的RNA聚合酶抑制剂两种抗新型冠状病毒药物。方法从作用机制、药代动力学、临床试验等方面对这两类小分子药物进行论述。结果在诸多抗新型冠状病毒药物中,小分子药物具有易吸收、分子体积小、能够穿透细胞膜、易于大规模工业化生产等优点,是药物研发的重点。在具有抗新型冠状病毒作用的小分子药物中,以病毒蛋白剪切步骤为作用靶点的蛋白酶抑制剂(如帕克洛维)与依赖RNA的RNA聚合酶抑制剂(如莫那匹韦)取得突破性进展。结论预期未来这类药物可在早期治疗中广泛应用,降低重症化率、降低病死率。

摘要： L-高苯丙氨酸(L-HPA)是一种代表性的非天然氨基酸,是包括血管紧张素转换酶抑制剂、蛋白酶抑制剂、乙酰胆碱酯酶抑制剂、中性内肽酶抑制剂和β-内酰胺类抗生素在内的许多手性药物的重要组成部分。L-HPA的化学生产主要使用N-邻苯二甲酰基-L-天冬氨酸(三步,产率82%)、N-苄氧甲酰-L-天冬氨酸(三步,产率13%)和1-氯-3-苯丙烷(六步,产率75%)等底物进行转化,但是存在加工成本高、环境污染、操作步骤繁琐、产率低等问题。

摘要： 多发性骨髓瘤是由于骨髓中的无性系浆细胞增生异常,所产生的单克隆抗体或M蛋白片段,会导致机体机能失调,从而导致相应的器官或组织损伤。多发性骨髓瘤的常见症状有:骨痛、病理性骨折、贫血、高钙血症、肾功能不全、免疫功能异常等。此外,还会出现淀粉样变性、高粘滞综合征、神经病变等。目前,关于多发性骨髓瘤的原因还不明确。本文就近年来有关多发性骨髓瘤的治疗进展进行综述。

摘要： 蛋白酶抑制剂(protease inhibitors, PIs)是一种小分子多肽或蛋白质,广泛存在于植物组织中。植物蛋白酶抑制剂可调控昆虫内源性蛋白酶活性,参与细胞程序性死亡等生理过程;能进入昆虫消化道,抑制蛋白酶水解活性,干扰昆虫正常生长发育,从而有助于相关植物抵御昆虫为害。相关研究虽然很多,但不少基本问题仍需要进一步深入探讨,如昆虫识别食物中PIs的模式和策略、昆虫防御PIs涉及的关键基因和相关机制调控元件等。对于刺吸式口器昆虫如蚜虫,寄主植物蛋白酶抑制剂的抗虫性除了抑制蛋白酶的水解活性,也表现在对其免疫系统和繁殖能力的调节功能上,但其作用涉及的独特生理生化机制目前仍不清楚。随着分子生物学和组学技术的快速发展,快速筛选新型、高效蛋白酶抑制剂已成为可能,这些新型、高效PIs与转基因技术、纳米技术、RNA干扰等新技术的结合使用,将在各种害虫包括蚜虫等刺吸式害虫的绿色防控中具有重要价值和广泛应用前景。本文综述了植物蛋白酶抑制剂近年来的研究进展,探讨了植物蛋白酶抑制剂的生理功能、昆虫的适应机制以及在蚜虫防治方面的最新研究成果,并展望了蛋白酶抑制剂研究的未来发展趋势及在害虫绿色防治方面的应用前景。

摘要： 许多植物在受到昆虫的啃食后,会合成蛋白酶抑制剂。蛋白酶抑制剂能高水平地抑制害虫体内的消化酶,被认为是植物抵御害虫的一种重要的天然防御手段。昆虫的啃食会快速激活植物体内的茉莉酸信号系统,且目前大多分离到的蛋白酶抑制剂基因均受到茉莉酸的调控,因此目前普遍的观点是茉莉酸信号是调控蛋白酶抑制剂合成的主要的信号分子。然而,植物体内是否存在别的信号调控的蛋白酶抑制剂仍然未知。

摘要： 蛋白酶广泛存在于生物体中,参与分解蛋白质,维持生物体正常的生命活动.蛋白酶抑制剂通过与蛋白酶活性位点结合调控靶蛋白酶活性,从而影响蛋白质代谢.蛋白酶及其抑制剂关键氨基酸的突变,可以影响其生理功能、稳定性、催化活性、抑制特异性等.通过挖掘自然界蛋白酶及其抑制剂的各种突变体,分析它们的关键活性位点,并运用蛋白质工程手段改造和设计活性更强、稳定性更高、特异性更好、环境更友好、成本更低的蛋白酶及其抑制剂,已成为当前的热点研究之一.文中对近年来蛋白酶及其抑制剂关键活性位点研究进行了简要综述,以期深化人们对蛋白酶及其抑制剂活性作用机制的认识,并为蛋白酶及其抑制剂的生物学活性改造研究提供理论参考.

摘要： 艾滋病被发现迄今已有三十年，然而这种致命的流行性疾病比以往更加肆虐。遏制艾滋病仍然是当今医药领域的最大的挑战之一。组合疗法（鸡尾酒疗法）的问世在控制获得性免疫缺乏综合症（AIDS）方面代表着一个重大的突破1～2。作为鸡尾酒疗法(HARRT)的关键组分之一，蛋白酶在抑制人类免疫缺陷病毒(HIV)的复制方面起着非常重要的作用。尽管已经有几个蛋白酶抑制剂在临床上使用，但是耐药性3和各种各样副作用4～7的不断涌现，以及昂贵的研发费用限制了他们的应用。研制新型的能够克服耐药性的蛋白酶抑制剂仍是当务之急。

摘要： 高效联合抗反转录病毒治疗(highly active anti-retroviral therapy,HAART)是艾滋病治疗的主要方法,但也是导致骨质疏松和骨量减少的重要因素之一,目前该治疗方法可能的发病机制尚不明确.其中,核苷类反转录酶抑制剂(nucleotide reverse transcriptase inhibitor,NRTI)和蛋白酶抑制剂(protease inhibitors,PI)在诱发骨质疏松症上具有重要作用.本文就NRTI和PI引发骨质疏松的流行病学、可能的相关机制做一综述.

摘要： 目的:随着聚乙二醇干扰素及利巴韦林(PR)联合丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶抑制剂三联(Triple)方案抗病毒治疗开始应用于基因1b亚型的慢性丙型肝炎(CHC)患者以来,关于HCV非结构蛋白3抗原(NS3Ag)检测联合HCV RNA用于预测其治疗应答的研究逐渐用于临床.拟探讨HCV NS3Ag预测基因1b亚型CHC患者予以PR及Triple方案抗病毒治疗疗效分析. 方法:入组300例基因1b亚型CHC患者,28例进行Triple治疗,272例进行PR治疗,治疗基线、2周、4周、12周、24周、48周及72周同时进行HCV RNA及NS3Ag检测,比较HCV RNA与NS3Ag之间的相关性,分析NS3Ag变化对治疗应答的预测价值. 结果:在全部患者中HCV RNA与HCV NS3Ag存在较好的线性相关性(r=0.67),这种相关性在Triple治疗组中更为显著(r=0.89).PR方案中获得RVR且4周HCV NS3Ag下降(dHCV NS3Ag)大于0.775患者获得SVR的阳性预测值(PPV)及阴性预测值(NPV)分别为96.31％和67.19％,12周获得cEVR且dHCV NS3Ag大于0.832患者获得SVR的PPV及NPV分别为94.16％,和87.26％.最为有趣的是,HCV RNA转阴后dHCV NS3Ag不足0.525患者出现复发及病毒学反弹的PPV为90.6％,NV76.7％. 结论:NS3Ag检测可作为一种有效检测方案,与HCV RNA共同早期预测PR或是Triple治疗的应答率,以及复发和病毒学反弹的几率,避免不良反应的增加以及过度医疗的产生.

摘要： 据世界卫生组织(WHO)估计,全球丙型肝炎病毒(HCV)携带者已经达到1.7亿,且每年有数百万的新增感染出现.HCV感染者经过数十年的病程,约20％可能发展成为肝硬化,而最终约有5％的感染者发展为肝癌.因此,中国等HCV高度流行的国家目前迫切需要能有效控制HCV传播的策略来减少这一疾病带来的危害.首先,必须对公众进行普及教育,避免HCV通过血液传播,例如杜绝使用不洁注射器和输液管,杜绝纹身或者打耳洞时使用不洁针具,杜绝一些可能造成病毒经血液传播的传统医学手段,杜绝其他一些可能的血液传播方式.其次,改善对患者的治疗,在北美新型HCV蛋白酶抑制剂已经于2011年获批上市,与干扰素和利巴韦林联合使用,可以治愈约70％的感染者,疗效显著.

摘要： 慢性丙型肝炎采用规范的治疗方案,遵循应答指导的个体化治疗策略(Response Guide Therapy,RGT),大多数患者可获得持续的病毒性应答(SVR).目前，我国临床上采用的HCV RNA定量检测技术尚未规范化，临床医师面临的主要挑战是各检测技术具有不同的可定量范围、RGT相对于SVR采用的临界值不同及判断HCV蛋白酶抑制剂治疗无效的临界值不同。欧洲指南提出为了确保可比较性，HCV RNA浓度单位应使用IU/mL。应选用标准化的商业试剂。为了确保一致性，应使用同一种试剂对单个病人进行抗病毒应答评估。HCV RNA检测应使用高灵敏度的试剂(最低检出限蕊50IU/mL)。

摘要： 继卵类黏蛋白和卵抑制剂之后,在蛋清中发现了第三种蛋白酶抑制剂--卵巨球蛋白(卵固蛋白)。卵巨球蛋白是由四个相同亚基组成的大分子量蛋白质,在蛋清中含量较少,但具有重要的生物活性。它是一种广谱蛋白酶抑制剂,因此具有多种重要的功能特性,在抑菌、蛋白酶特性研究及医学领域等方面具有重要的应用价值。本文在参考大量文献的基础上,对卵巨球蛋白的分离纯化、结构特征、理化特性、抑制机理及其与人血清a2-M蛋白的进化关系进行了概述。

摘要： 简单介绍国内外转基因作物的发展现状,对影响抗虫转基因植物作用的因子毒素蛋白、蛋白酶抑制剂、植物凝集素、次生物质的抗虫研究进展和优缺点进行了概述.研究表明，杀虫蛋白对鳞翅目等害虫有很强的特异性毒杀效果，杀虫能力很强，但杀虫谱窄，目前转Bt抗虫基因的研究日趋成熟，但它对同翅目昆虫效果还不是很理想，而且随着转Bt植物的种植面积的不断扩大，越来越多的地区的昆虫易对Bt基因产生抗性。Bt棉的大面积种植可引起非靶标害虫盲椿螺在其他作物上的暴发。蛋白酶抑制剂具有广谱的抗虫性且不易产生抗性，但是需要在植物体内的表达达到一定的量才能达到抗虫效果。次生物质和植物凝集素是植物源的，无残留，不污染环境，对人畜安全，能保持生态平衡，不易产生抗性，但是对害虫有生物活性的成分难以明确，并且害虫对次生物质有一定的抗性阈值。植物凝集素可以在一定程度上弥补了Bt杀虫谱窄的某些不足，而且不易产生抗性，它可以单独转入小麦、水稻、棉花等作物体内来防治飞虱、叶蝉、蚜虫等刺吸式口器害虫，也可以和Bt基因同时转入植物体内构建双抗的转基因植物。但有研究表明，低浓度的GNA有促进昆虫生长的作用，因而GNA必须在植物中有较高表达才能有较好的杀虫效果。大蒜凝集素对蚜虫的抗性也与剂量有关。

摘要： 目的:探讨乌司他丁对急性肝功能衰竭的保护作用及对血红素加氧酶-1(hemeoxygenase-1，HO-1)的影响。rn 方法:通过腹腔注射D-氨基半乳糖(D-Gal)及脂多糖(LPS)建立大鼠急性肝功能衰竭模型。大鼠分为对照组、模型组和乌司他丁干预组。动态观察(6、12、24、36和48h)大鼠血清ALT、AST和丙二醛(MDA)含量变化，反转录(RT)-PCR检测肝脏HO-1 mRNA变化，免疫组织化学方法检测HO-1蛋白表达。多组间差异比较采用单因素方差分析，两组间比较采用LSD法。rn 结果:D-Gal/LPS联合注射成功诱导大鼠急性肝功能衰竭模型，表现为造模6h后血清ALT、.AST水平以及肝组织MDA浓度均显著升高(F值分别为23.864，38.446，18.051，均P<0.01)，以12～24h之间最为显著。造模24h后，模型组与干预组ALT、AST、MDA分别达到8346.7±1363.1U/L，9766.7±1274.1U/L，8.34±1.13nmol/mg与4151.3±970.OU/L,4696.7±1476.9U/L，4.66±0.91nmol/mg，均较对照组24.0±2.0U/L，82.3±16.9U/L,2.55±0.22nmol/L高(F值分别为55.684，55.501，47.843，均P<0.01)，但干预组显著低于模型组(P<0.01)；与对照组相比，模型组HO-1 mRNA及其蛋白表达增加(P<0.01)，干预组上升更加显著(P<0.01)。rn 结论:乌司他丁能使HO-1mKNA和蛋白表达上调，提示乌司他丁可能通过HO-1通路发挥其在急性肝功能衰竭中抗炎抗氧化的保护作用。rn 血红素加氧酶(heine oxygenase，HO)是催化血红素生成一氧化碳(CO)、胆红素和铁离子的一种限速酶。HO有三种同工酶，其中HO-1为诱导型，在炎性反应、缺氧及内毒素血症等多种应激情况下大量表达。近年研究表明，HO-1的诱导表达具有抗氧化应激、抗炎性反应的作用[1，2]。乌司他丁是一种广谱蛋白酶抑制剂，具有清除氧自由基、抑制炎性反应介质释放等功能，多用于治疗急性胰竭的影响，检测HO-1 mRNA、蛋白，结合肝功能及氧化应激指标，探讨乌司他丁对急性肝功能衰竭的作用机制。

摘要： 目的：研究深圳市HAART治疗失败的艾滋病患者HIV-1基因型耐药变异的情况，为临床治疗提供试验室参考数据。rn 方法：采用RT-PCR和套式PCR从24例HAART治疗失败的艾滋病患者的血浆中提取病毒RNA，扩增目的基因片段，并对其进行序列测定和分析。rn 结果：共获得23例抗病毒治疗失败者的基因序列，其中有两条序列显示无变异位点，在其他出现耐药变异的序列中，100%治疗失败患者出现了对NVP或EFV的高中度耐药，超过50%的患者出现了对临床上目前常用的AZT、3TC、D4T及DDI的高中度耐药，未发现治疗失败患者对蛋白酶抑制剂的高中度耐药；D4T+DDI+NVP治疗方案是最容易出现耐药的治疗组合。rn 结论：HIV耐药变异株的出现是艾滋病患者临床上抗病毒治疗失败的主要原因，目前引起耐药突变主要是针对NNRTIs或NRTIs药物耐药，而对PIs的耐药在临床上尚比较少见，建议更换治疗组合时多考虑选用含有增强作用的PIs，从而达到更好地病毒抑制效果。

摘要： 目的：构建人uPA17-KPI基因及其真核表达载体在毕赤酵母中获得高效表达并进行活性鉴定。rn 方法：构建真核表达载体pPICZa/uPA17-KPI，经核酸测序确证后，电转化毕赤酵母菌株X-33。用PCR法筛选转染阳性克隆，SDS-PAGE法鉴定培养上清液中的uPA17-KPI的表达，筛选高表达工程菌，进行活性测定。rn 结果：真核表达载体pPICZa/uPA17-KPI序列与Gene Bank登录的cDNA序列一致。pPICZa/uPA17-KPI真核表达载体经电转化获得阳性克隆。SDS-PAGE分析显示了甲醇诱导的培养基上清中含有uPA17-KPI蛋白并具有胰蛋白酶的抑制活性。rn 结论：获得uPA17-KPI基因及其真核表达载体以及高表达、高活性的uPA17-KPI毕赤酵母工程菌。

摘要： 本发明涉及一种式I或式Ia化合物或其药学上可接受的盐，其抑制丝氨酸蛋白酶的活性，特别是抑制丙型肝炎病毒NS3-NS4A蛋白酶的活性。象这样，它们通过干扰丙型肝炎病毒的生活周期来起作用，可用作抗病毒剂。本发明还涉及包含所述化合物的药学可接受的组合物，其离体使用或对遭受HCV感染的患者给药，和制备这些化合物的方法。本发明还涉及通过给患者服用包含本发明化合物的药物组合物来治疗HCV感染的方法。

摘要： 本发明涉及一种式I或式Ia化合物或其药学上可接受的盐，其抑制丝氨酸蛋白酶的活性，特别是抑制丙型肝炎病毒NS3-NS4A蛋白酶的活性。象这样，它们通过干扰丙型肝炎病毒的生活周期来起作用，可用作抗病毒剂。本发明还涉及包含所述化合物的药学可接受的组合物，其离体使用或对遭受HCV感染的患者给药，和制备这些化合物的方法。本发明还涉及通过给患者服用包含本发明化合物的药物组合物来治疗HCV感染的方法。

摘要： 本发明涉及一种式I或式Ia化合物或其药学上可接受的盐，其抑制丝氨酸蛋白酶的活性，特别是抑制丙型肝炎病毒NS3-NS4A蛋白酶的活性。象这样，它们通过干扰丙型肝炎病毒的生活周期来起作用，可用作抗病毒剂。本发明还涉及包含所述化合物的药学可接受的组合物，其离体使用或对遭受HCV感染的患者给药，和制备这些化合物的方法。本发明还涉及通过给患者服用包含本发明化合物的药物组合物来治疗HCV感染的方法。

摘要： 本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种豇豆胰蛋白酶抑制剂基因、及其应用、大量制备豇豆胰蛋白酶抑制剂的方法。如上所述本发明的发明人首先利用PCR反应从豇豆基因组DNA中直接获得CPTI基因(CPTI基因不含有内含子)，然后优化改造所述CPTI序列，改造后的序列在大肠杆菌中的表达量和表达比活性都有显著改进。

摘要： 本发明提供了一种从中药中筛选SARS冠状病毒主蛋白酶抑制剂的方法以及由此方法筛选出的抑制剂。筛选方法包括如下：A.测定来自单味中药的多种提取物的SARS冠状病毒主蛋白酶体外抑制活性；B.选择具有最好的体外抑制活性的一种提取物；和C.对步骤B所选择的提取物进行至少一轮的分离和选择。本发明筛选出的化合物对SARS冠状病毒主蛋白酶具有体外抑制活性，是极佳的可能上市的药物或潜在的药物前体。

摘要： HIV蛋白酶抑制剂能够抑制或阻断HIV蛋白酶的生物活性，使HIV病毒的复制终止。通过本发明新方法用新发明的化合物和中间体制备这些化合物。

摘要： 提供一种用于抑制弹性蛋白酶的口服组合物及其应用、弹性蛋白酶抑制剂、以及口服摄入弹性蛋白酶抑制剂的弹性蛋白酶活性抑制方法，所述口服组合物用于使因紫外线、活性氧等外在因素、生物体的代谢功能降低等而产生的生物体组织中的弹性蛋白的降低恢复、改善皮肤的衰老症状等。一种用于抑制弹性蛋白酶的组合物，其特征在于，含有咖啡黄葵(Abelmoschusesculentus)的种子的加工物或来源于咖啡黄葵的种子的特定化合物作为有效成分。

摘要： 本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种豇豆胰蛋白酶抑制剂基因、及其应用、大量制备豇豆胰蛋白酶抑制剂的方法。如上所述本发明的发明人首先利用PCR反应从豇豆基因组DNA中直接获得CPTI基因(CPTI基因不含有内含子)，然后优化改造所述CPTI序列，改造后的序列在大肠杆菌中的表达量和表达比活性都有显著改进。

摘要： 本发明主要涉及菠萝蛋白酶，尤其涉及该复杂的蛋白质混合物所含有的活性化合物。本发明提供了重组表达的菠萝蛋白酶中含有的菠萝蛋白酶抑制剂前体和菠萝蛋白酶抑制剂。已经发现，重组表达的抑制剂在治疗疾病和状态上的效果优于来源于植物提取物的菠萝蛋白酶或者它的蛋白组分。

摘要： 本发明提供了一种从中药中筛选SARS冠状病毒主蛋白酶抑制剂的方法以及由此方法筛选出的抑制剂。筛选方法包括如下：A.测定来自单味中药的多种提取物的SARS冠状病毒主蛋白酶体外抑制活性；B.选择具有最好的体外抑制活性的一种提取物；和C.对步骤B所选择的提取物进行至少一轮的分离和选择。本发明筛选出的化合物对SARS冠状病毒主蛋白酶具有体外抑制活性，是极佳的可能上市的药物或潜在的药物前体。