河川沙塘鳢

摘要： 为了解溴氰菊酯对河川沙塘鳢的急性毒性效应及毒理机制,设置不同浓度梯度溴氰菊酯的处理组,采用静态测试法对平均质量为(30.0±5.0)g的河川沙塘鳢进行攻毒试验,并对其鳃、肝脏组织超氧化歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量进行测定及组织病理学观察。结果表明,溴氰菊酯对河川沙塘鳢96 h LC为5.29μg/L,安全浓度为0.53μg/L;鳃的Na^(+)/K^(+)-三磷酸腺苷(ATP)酶活性随着溴氰菊酯浓度增加和时间延长明显受到抑制;肝脏SOD活性在高浓度处理组(10μg/L、20μg/L)暴露72 h和96 h后均显著下降(P<0.05),而CAT活性在溴氰菊酯暴露24 h时显著降低(P<0.05),此后趋于正常。MDA含量随着溴氰菊酯浓度的升高和暴露时间的延长而增高。组织病理学观察显示,溴氰菊酯对鱼鳃、肝脏组织结构具有明显破坏作用。指出,溴氰菊酯对河川沙塘鳢而言是剧毒,其毒理机制可能是溴氰菊酯抑制了沙塘鳢鳃组织Na^(+)/K^(+)-ATP酶活性及肝脏细胞的抗氧化功能,进而影响其正常的生理机能,最终导致组织结构病变,引发毒性效应。

摘要： 河川沙塘鳢隶属于鲈形目、塘鳢科、沙塘鳢属,俗名土才鱼、土憨巴、虎头鲨、土蒲鱼等,广泛存在于长江中下游地区,是淡水底栖小型肉食性经济鱼,主要摄食虾和小型底层鱼,兼食水生昆虫幼虫和螺、蚬等底栖动物。本文针对沙塘鳢人工繁殖过程中的技术要点进行了简要归纳和总结,以期为今后沙塘鳢的苗种繁殖提供参考。

摘要： 利用长片段PCR、基因组步移法及T-A克隆技术,成功克隆出河川沙塘鳢(Odontobutis potamophila)GH基因全长序列,提交至GenBank获得登录号MH717101.河川沙塘鳢GH基因全序列长5120 bp,5′端和3′端侧翼序列长度分别为920、682 bp,经预测,上游区域含有MF3、GAGA factor、HNF-3alpha、C/EBP、R2、GA-TA-1等多种转录调控元件;转录单元长3518 bp,包含4个内含子和5个外显子,4个内含子大小分别为75、333、2070和121 bp,5个外显子长度分别为150、131、117、138和373 bp,第3内含子长达2070 bp,其长度是翘嘴鲌(Culter alburnus)第3内含子的4倍以上;开放阅读框区(open reading frame,ORF)为594 bp,编码由197个氨基酸残基组成的蛋白质多肽.河川沙塘鳢与鲈形目、鲉形目、鲤形目、鲇形目等13种鱼类的氨基酸序列同源性比较表明,其与彼氏冰鰕虎鱼(Leucopsarion petersii)同源性最高,为83.8％,与草鱼(Ctenopharyng-odon idella)同源性最低,为49.1％,在180～197氨基酸序列处,河川沙塘鳢表现出高度不保守性,与所列鱼类氨基酸排列均完全不一致.该研究结果为进一步研究河川沙塘鳢GH基因的表达、功能及其转录调控特征奠定了分子基础.

摘要： 生长激素/胰岛素样生长因子-轴(growth hormone/insulin-like growth-axis,GH/IGF-轴)是调控鱼类生长的主要内分泌轴线.为探讨生长相关基因GHR、IGF-2对河川沙塘鳢(Odontobutis potamophila)生长发育的调控机制,采用cDNA末端快速扩增(RACE)和实时荧光定量PCR等技术,对河川沙塘鳢的GHR、IGF-2基因进行了克隆和表达模式分析.研究结果显示:河川沙塘鳢GHR基因的cDNA全长序列为2 179 bp,开放阅读框为1 830 bp,共编码609个氨基酸,IGF-2基因的cDNA全长序列为1 586 bp,开放阅读框642 bp,共编码213个氨基酸.采用qRT-PCR方法检测了GHR、IGF-2基因在9个不同组织(脑、肝、心、肌肉、脾、肠、性腺、鳃、肾)和8个胚胎不同发育时期(受精卵期、桑椹胚期、原肠胚期、神经胚期、体节期、口裂期、出膜后1d、出膜后3d)的表达情况.结果 表明:IGF-2和GHR基因在所检测的9种组织中均有表达,其中以肝脏、肌肉、性腺、脑中的表达量较高,在胚胎发育阶段GHR和IGF-2基因表达呈先上升后下降的趋势,在原肠胚期表达量较高,表明其在胚胎发育过程中发挥重要作用.qRT-PCR进一步比较了雌、雄河川沙塘鳢GHR和IGF-2基因在不同生长发育阶段(90、150、210、270、330 d)脑、肝、肌肉mRNA的表达量,结果表明:各时期雄鱼GHR和IGF-2基因在肝组织中表达量均显著高于雌鱼,肌肉和脑GHR基因mRNA的表达量则无显著差异.而IGF-2基因则仅在雌、雄鱼210 d的脑和150、210 d的肌肉存在显著性差异,推测肝GHR和IGF-2基因mRNA表达的雌雄差异是河川沙塘鳢雌雄生长差异的主要原因之一.

摘要： 为研究河川沙塘鳢(Odontobutis potamophila)主要形态指标和雌雄个体的形态差异,对335尾河川沙塘鳢7项计量性状(包括全长、体长、体高、体厚、尾柄长、尾柄高和头长)及7项标准化性状(包括丰满度、体长/头长、体长/体高、体长/体厚、体长/尾柄长、体高/体厚、尾柄长/尾柄高)进行主成分分析、R-聚类分析和逐步判别分析,并建立了雌雄判别方程式.主成分分析和R-聚类分析结果显示,河川沙塘鳢的主要形态指标可分为整体框架结构指标、肥瘦程度指标、躯干及尾部指标和头部指标4个方面.散布图结果显示,雌雄个体在体厚形态上存在差异,同判别分析结果一致.通过逐步判别法从335尾河川沙塘鳢的体长、体质量连同7项标准化性状中筛选出体长、体质量、体长/体厚、体长/头长4个性状,建立性别判别方程,并将收集样品数据代入方程重新鉴定,其准确率为71.0％.经t检验显示,雌雄个体在体长、体质量和体长/体厚的差异极显著,在体长/头长的差异显著,雄性相较于雌性体型较宽、较丰满.上述差异性状及雌雄判别方程式可为河川沙塘鳢性别的鉴定提供方法和理论依据.

摘要： 为提高河川沙塘鳢繁殖技术及保存河川沙塘鳢优良种质资源,实验采集河川沙塘鳢精液后通过实验生态-显微观察方法对不同盐度、KC1浓度和pH条件下精子的质量进行研究,并用两步降温法超低温冷冻保存精子,并配制CCSE2、D-15、鱼用任氏液、Hank's液、HBSS(Hank's Balanced Salt Solution)5种稀释液,选取甲醇、乙二醇、二甲基亚砜和甘油4种抗冻剂,浓度梯度分别为5％、10％和15％,与5种稀释液混合共形成60组抗冻液配方,以筛选出适宜的稀释液与抗冻剂.结果表明:在盐度4‰或KCl浓度7‰～8‰时,激活后的精子质量最好;在pH为7.0～8.5时,精子质量较好;采用两步降温法超低温冷冻保存河川沙塘鳢精子,以HBSS为稀释液、10％甲醇为抗冻剂,解冻激活后的精子质量最好,其中运动时间及寿命分别为34.00 min和73.00 min,与鲜精无显著性差异(P＞0.05).综合分析,HBSS作为稀释液,10％甲醇作为抗冻剂,对河川沙塘鳢精子具有较好的抗冻保护效果.

摘要： 以河川沙塘鳢(Odontobutis potamophila)为研究对象,采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术对DMRT1的全长基因进行了克隆,并利用生物信息学技术分析其结构和功能;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测了河川沙塘鳢DMRT1基因在8种组织(鳃、肠、心、肌肉、脑、肝、脾、性腺)、胚胎发育的8个时期(受精卵期、桑椹胚期、原肠胚期、神经胚期、体节期、口裂期、出膜后1d和出膜后3d)以及性腺发育的4个时期(Ⅰ～Ⅳ期)中的表达变化.结果表明,河川沙塘鳢DMRT1基因cDNA序列的全长为2025 bp,编码297个氨基酸,其中包括894 bp的开放阅读框(ORF),73 bp的5 ′非编码区和1058 bp的3′非编码区.与已知物种的氨基酸序列比对后发现,河川沙塘鳢DMRT1的氨基酸序列与军曹鱼(Rachycentron canadum)、欧洲鲈鱼(Dicentrarchus labrax)的同源性最高.DMRT1基因在河川沙塘鳢的精巢组织大量表达,而在卵巢、肌肉、心以及肝4种组织中表达较少,在其它组织中几乎不表达;DMRT1基因在胚胎发育的各个时期都有表达,在原肠期的表达量最高;此外,DMRT1基因表达量在精巢发育的不同时期呈先下降后上升的趋势,在精子成熟期(Ⅳ期)达到最大值,而在卵巢发育的不同时期表达量较少且表达强度差异不明显,因而推测河川沙塘鳢DMRT1基因与精巢的发生和功能的维持有关.研究结果为解析河川沙塘鳢DMRT1基因的功能及其性别决定机制提供了基础资料,也为开展河川沙塘鳢单性育种奠定了基础.

摘要： 为研究河川沙塘鳢同工酶系统的组织特异性,丰富河川沙塘鳢种质资源资料,采用聚丙烯酰胺垂直凝胶电泳法,对河川沙塘鳢的腮、脑、肝、脾、心、肾及肌肉共7种新鲜组织中的酯酶(EST)、乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸酶(ME)、苹果酸脱氢酶(MDH)、6-磷酸葡萄糖脱氢酶(6-PDGH)及超氧化物歧化酶(SOD)共6种同工酶进行了分析.结果表明,河川沙塘鳢的6种同工酶系统具有不同程度的组织特异性.酯酶、苹果酸酶、苹果酸脱氢酶及6-磷酸葡萄糖脱氢酶在肝脏中表达活性较强,乳酸脱氢酶在脑、鳃、心脏及肌肉中表达活性强,超氧化物歧化酶在鳃、脑组织中活性较强,肝脏中具有特异性酶带.

摘要： 选取野生河川沙塘鳢40尾,分别测量全长(X1)、体长(X2)、体高(X3)、头长(X4)、吻长(X5)、眼后头长(X6)、眼径(X7)、眼间距(X8)、尾柄长(X9)、尾柄高(X10)和体质量(Y)共11个形态学指标.运用回归分析、相关分析和通径分析,确定影响体质量的主要形态性状,建立最优回归方程,并分别计算主要形态性状的相关系数和通径系数,分析形态性状对体质量的影响效果,结果表明体质量变异系数最大(48.15％).回归分析表明,建立的回归方程:Y=-29.78+1.87X1+14.68X7+7.21X8+7.58X10,其中截距、X1、X7和X10的偏回归系数均达到极显著水平.其复相关系数(R)为0.967,相关指数(R2)为0.935,校正相关指数(R2)为0.928.河川沙塘鳢全长的通径系数最大(0.30),其对体质量的影响也最大,头长的通径系数最小(0.03),眼后头长和尾柄长对体质量的影响较小,且为负向作用.

摘要： 本发明涉及一种河川沙塘鳢、鸭绿沙塘鳢及中华沙塘鳢的鉴别引物和方法，具体涉及应用微卫星标记对河川沙塘鳢、鸭绿沙塘鳢及中华沙塘鳢进行鉴别。本发明的一对引物命名为OP34a，序列如SEQ ID NO.1和2所示。鉴定时用该对引物对3种沙塘鳢DNA样品进行PCR扩增，再用1.5%琼脂糖凝胶(EB染色)电泳对PCR产物进行检测，221～251bp大小条带的为河川沙塘鳢，337～351bp大小条带的为鸭绿沙塘鳢，465～471bp大小条带的为中华沙塘鳢。本发明在不处死鱼种的基础上，只需剪取少量尾鳍或其它鱼体组织部分即可进行鉴别，具有稳定性高、操作简单重复性好、实用性强并可快速准确鉴别等优点。

摘要： 本发明涉及一种海丰沙塘鳢和河川沙塘鳢的特异性分子鉴别方法，步骤包括：1)分别提取海丰沙塘鳢和河川沙塘鳢基因组DNA；2)PCR扩增海丰沙塘鳢和河川沙塘鳢的线粒体控制区，得到目的片段的PCR产物；3)扩增产物纯化后，直接测序，海丰沙塘鳢和河川沙塘鳢扩增产物序列比对，序列的第253‑258位点碱基为GGGGGG的是海丰沙塘鳢，序列的第253‑258位点碱基为CCCCCC的则是河川沙塘鳢。本发明能够快速、简便、准确、有效地鉴别海丰沙塘鳢和河川沙塘鳢，结果稳定性好，重复率高，这种鉴定方法将在水产养殖和资源调查中发挥重要作用。

摘要： 一种河川沙塘鳢和鸭绿沙塘鳢杂交繁育方法，其特征是它包括亲本选择与培育、杂交繁殖和杂交鱼苗培育，受精卵脱膜完成后，及时取出PVC管，脱膜后3天，鱼苗卵黄囊消失，鱼苗能平游时，开始开口摄食小型浮游生物饵料，以轮虫、枝角类为主，水中至少保持10个/ml左右的适口饵料。出膜10天后，游动活跃，此时要补充一些桡足类、卤虫等大型浮游动物，并适当增加投喂量，水中要保持15个/ml以上的适口饵料。鱼苗达1公分时，按照每亩3～5万尾转入事先己培养好生物饵料的苗种培育池，并在池塘内设点增投小杂鱼浆或豆饼粉，日投饲量占鱼体重的5%左右。投喂次数为上下午各1次。本发明的杂交仔鱼培育成幼鱼的平均成活率达到85%以上，高于亲本自交的培苗成活率。

摘要： 本发明公开了一种河川沙塘鳢和鸭绿沙塘鳢杂交育种育苗的方法，包括亲本选择、培育和生殖调控、人工授精和孵化、仔稚幼鱼培育。杂交鱼具有父本和母本的优良特性，可实现杂交鱼苗规模化生产，有望杂交培育出沙塘鳢新品系（种），从而有效提高我国塘鳢鱼养殖经济效益。

摘要： 本发明公开了一种河川沙塘鳢与云斑尖塘鳢鱼类杂交育苗方法。包括亲鱼选择，人工催产方法，受精卵经消毒清冼的孵化，孵化水选择，仔鱼培育，后期放养，培育成规格鱼苗及养成，具有科学性和实践操作价值。本发明综合成本低，有望培育出一种适应养殖温度条件范围广，生长速度快的塘鳢鱼新品种，可促进我国长江流域地区塘鳢鱼养殖品种更新，有效提高塘鳢鱼养殖经济效益。

摘要： 本发明涉及一种河川沙塘鳢、鸭绿沙塘鳢及中华沙塘鳢的鉴别引物和方法，具体涉及应用微卫星标记对河川沙塘鳢、鸭绿沙塘鳢及中华沙塘鳢进行鉴别。本发明的一对引物命名为OP34a，序列如SEQ ID NO.1和2所示。鉴定时用该对引物对3种沙塘鳢DNA样品进行PCR扩增，再用1.5%琼脂糖凝胶(EB染色)电泳对PCR产物进行检测，221～251bp大小条带的为河川沙塘鳢，337～351bp大小条带的为鸭绿沙塘鳢，465～471bp大小条带的为中华沙塘鳢。本发明在不处死鱼种的基础上，只需剪取少量尾鳍或其它鱼体组织部分即可进行鉴别，具有稳定性高、操作简单重复性好、实用性强并可快速准确鉴别等优点。

摘要： 本发明涉及一种海丰沙塘鳢和河川沙塘鳢的特异性分子鉴别方法，步骤包括：1)分别提取海丰沙塘鳢和河川沙塘鳢基因组DNA；2)PCR扩增海丰沙塘鳢和河川沙塘鳢的线粒体控制区，得到目的片段的PCR产物；3)扩增产物纯化后，直接测序，海丰沙塘鳢和河川沙塘鳢扩增产物序列比对，序列的第253‑258位点碱基为GGGGGG的是海丰沙塘鳢，序列的第253‑258位点碱基为CCCCCC的则是河川沙塘鳢。本发明能够快速、简便、准确、有效地鉴别海丰沙塘鳢和河川沙塘鳢，结果稳定性好，重复率高，这种鉴定方法将在水产养殖和资源调查中发挥重要作用。

摘要： 一种河川沙塘鳢和鸭绿沙塘鳢杂交繁育方法，其特征是它包括亲本选择与培育、杂交繁殖和杂交鱼苗培育，受精卵脱膜完成后，及时取出PVC管，脱膜后3天，鱼苗卵黄囊消失，鱼苗能平游时，开始开口摄食小型浮游生物饵料，以轮虫、枝角类为主，水中至少保持10个/ml左右的适口饵料。出膜10天后，游动活跃，此时要补充一些桡足类、卤虫等大型浮游动物，并适当增加投喂量，水中要保持15个/ml以上的适口饵料。鱼苗达1公分时，按照每亩3～5万尾转入事先己培养好生物饵料的苗种培育池，并在池塘内设点增投小杂鱼浆或豆饼粉，日投饲量占鱼体重的5%左右。投喂次数为上下午各1次。本发明的杂交仔鱼培育成幼鱼的平均成活率达到85%以上，高于亲本自交的培苗成活率。

摘要： 本发明公开了一种河川沙塘鳢和鸭绿沙塘鳢杂交育种育苗的方法，包括亲本选择、培育和生殖调控、人工授精和孵化、仔稚幼鱼培育。杂交鱼具有父本和母本的优良特性，可实现杂交鱼苗规模化生产，有望杂交培育出沙塘鳢新品系（种），从而有效提高我国塘鳢鱼养殖经济效益。

摘要： 本发明公开了一种河川沙塘鳢与云斑尖塘鳢鱼类杂交育苗方法。包括亲鱼选择，人工催产方法，受精卵经消毒清冼的孵化，孵化水选择，仔鱼培育，后期放养，培育成规格鱼苗及养成，具有科学性和实践操作价值。本发明综合成本低，有望培育出一种适应养殖温度条件范围广，生长速度快的塘鳢鱼新品种，可促进我国长江流域地区塘鳢鱼养殖品种更新，有效提高塘鳢鱼养殖经济效益。