离体培养

摘要： 牧医所研究发现短链脂肪酸对离体培养胎鼠空肠和未成熟小肠细胞具有抗炎作用近日,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所奶产品质量与风险评估科技创新团队研究发现短链脂肪酸(SCFAs)对离体培养胎鼠的空肠和未成熟小肠细胞具有炎症保护作用,并探明了相关调节信号通路,为预防早产儿坏死性小肠结肠炎的发生提供了一种新的方法。相关研究成果发表在《食品科学与营养(Food Science & Nutrition)》上。

摘要： 以牛奶草莓茎尖为外植体进行离体培养,通过不同植物生长调节剂浓度配比试验,进行芽诱导、继代增殖、生根培养及炼苗移栽试验,研究植物激素对牛奶草莓离体再生的影响。研究结果表明:适宜芽诱导培养基为改良MS+2.0mg/L 6-BA+0.4mg/L IBA,芽诱导率高达91.25%;适宜继代增殖的培养基为改良MS+0.5mg/L CPPU+0.2mg/L IBA,增殖系数为10.24;适宜生根诱导培养基为1/2MS+0.5mg/L NAA,生根率高达100%;炼苗移栽最佳方式为闭盖10d、半开盖2d,移栽在草炭土和蛭石比例为3∶1的基质中,成活率高达96.25%。该研究结果为牛奶草莓工厂化育苗提供了技术支持。

摘要： 为明确七姊妹蔷薇花粉萌发、花粉管生长及花粉形态特征,采用扫描电镜观察花粉形态特征,花粉离体培养法探究蔗糖、硼酸、IAA、NAA和GA_(3)对七姊妹蔷薇花粉萌发及花粉管生长的影响。结果显示:七姊妹蔷薇的花粉为长球形,具3个萌发沟,93.2%的花粉生长饱满,为正常发育花粉,仅有6.8%的花粉为发育异常的干瘪花粉;蔗糖及蔗糖与硼酸组合对花粉萌发和花粉管生长具有极显著的影响,硼酸对花粉萌发有显著影响,对花粉管生长影响不显著,150 g/L的蔗糖和150 mg/L的硼酸下七姊妹蔷薇花粉的萌发率最高,花粉管的生长最快,萌发率可达72%,花粉管长度838.7μm;IAA、NAA、GA_(3)三种植物生长调节剂对花粉萌发有明显的促进作用,但对花粉管生长促进作用不显著,在NAA浓度为10 mg/L、GA_(3)浓度为60 mg/L、IAA浓度为1 mg/L时花粉萌发率最高。研究表明:硼酸、蔗糖、萘乙酸、赤霉素和吲哚乙酸能促进七姊妹蔷薇花粉萌发和花粉管生长,其最佳浓度分别为150 mg/L、150 g/L、10 mg/L、60 mg/L、1 mg/L。

摘要： 收集具有推广前景的12个单季茭白品种(系),采用室内叶片离体培养方式进行胡麻叶斑病的抗病性评价。结果表明,本地八月茭、大洋茭、余茭1号B和金茭1号的叶片相对病斑面积较小,对胡麻叶斑病表现出较高抗性;杭州一点红的叶片相对病斑面积最大,抗病性最弱。田间抗病性调查的结果与室内评价的抗性高度一致。

摘要： 在北方寒冷地区的绿化公司建立耐寒美国红枫的快繁体系,以增加北方寒冷地区尤其是东北地区的彩叶树种的种类。该试验以美国红枫‘秋火焰’(Acer rubrum‘Autumn Blaze’)为研究对象,以腋芽茎段为外植体进行离体培养,对外植体消毒方式、启动培养、继代增殖培养、壮苗培养,以及生根培养的培养基配方进行正交试验以及双因素方差分析。通过初代培养、继代增殖培养、壮苗培养和生根培养4个阶段建立快繁体系。结果表明,当消毒组合为5%NaClO+0.1%HgCl_(2)时,平均污染率为33.15%,平均存活率为60.98%,死亡率为5.87%;最佳增殖培养基为改良MS+0.4 mg/L CPPU+0.1 mg/L IBA+1.0 mg/L 6-BA,增殖系数为6.45;最佳壮苗培养基为改良MS+1.0 mg/L ZT+0.5 mg/L IBA,平均株高为6.15 cm,茎粗为21.41 mm;最佳生根诱导培养基为1/2 MS+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/L IBA,生根率达100%。此快繁体系效率高并适合应用于生产。

摘要： 【目的】为油茶的单倍体育种提供参考。【方法】以普通油茶‘华硕’为试材,对其未授粉子房进行离体培养,诱导愈伤组织,研究消毒处理对油茶子房褐化和染菌的影响,及激素的种类和浓度、子房切割方式、子房发育时期、子房预处理方式等因素对愈伤组织诱导的影响,并使用筛选出的2种激素和蔗糖进行L9(33)正交试验,将正交试验结果进行极差分析和方差分析,进一步筛选油茶子房愈伤组织诱导的最佳培养基。【结果】选择开花当天的油茶未授粉花蕾,热激(35°C)预处理1 d后,剥出子房部分,采用75%乙醇溶液浸泡60 s、0.1%升汞溶液浸泡5 min的方式进行消毒处理,纵切后,接种到MS+60 g/L蔗糖+7 g/L琼脂+0.3 mg/L NAA+2 mg/L TDZ培养基上,愈伤组织诱导率最高,为72.34%。诱导出的愈伤组织呈浅绿色,质地紧密。TDZ和NAA显著影响了油茶子房的愈伤组织诱导率,且TDZ的影响大于NAA,蔗糖对诱导率的影响不显著。【结论】在各影响因素中,对油茶未授粉子房愈伤组织诱导率影响最明显的是激素的种类和浓度,适宜激素为NAA和TDZ,适宜的质量浓度分别为0.3、2.0 mg/L。子房的发育时期、切割方式、预处理方式等均会影响其愈伤组织诱导率,选择开花当天的子房,热激(35°C)预处理1 d并纵切,可以提高愈伤组织的诱导率。

摘要： 以耐寒美国红枫为材料,对叶片、叶柄、茎段、带芽茎段不同外植体进行消毒处理、愈伤组织的诱导及分化筛选,以期获得离体快繁的最佳外植体类型。结果表明,叶片、叶柄、茎段在WPM及MS 2种基本培养基及不同激素配比组合中,愈伤组织均未能成功分化诱导出芽。带腋芽的茎段为最佳外植体,可直接诱导腋芽萌发形成再生植株,从而为耐寒美国红枫工厂化育苗提供技术支持。

摘要： 【目的】为测定生菜花粉的活力,优化生菜花粉离体萌发培养基,筛选最适的培养时间、温度及转速。【方法】以生菜品种‘S39’为材料,使用BK培养基和ME_(3)培养基测定生菜花粉的萌发率,并在这两种培养基的基础上添加不同质量浓度聚乙二醇1500和聚乙二醇4000,测定不同培养温度、时间及转速下的花粉萌发率。【结果】生菜花粉在BK培养基和ME_(3)培养基中萌发率均极低,添加300 g/L聚乙二醇4000能极显著提高生菜花粉的萌发率。最适的培养条件为33°C100 r/min摇床中避光培养12 h。【结论】采集生菜‘S39’完全开放时期的花粉,使用优化后的培养基:200 g/L蔗糖+0.1 g/L H_(3)BO_(3)+0.236 g/L Ca(NO_(3))_(2)·4H_(2)O+0.04 g/L CaCl 2·H_(2)O+0.12 g/L MgSO_(4)·7H_(2)O+300 g/L聚乙二醇4000在33°C,100 r/min摇床中避光培养12 h,花粉萌发率最大能达到67.30%。该研究对生菜新品种的选育具有重要的意义。

摘要： [目的]加速杜鹃花新品种种苗繁殖与推广。[方法]以‘古田红’杜鹃花带有顶芽的茎段为材料,通过无菌体系建立、不定芽诱导及增殖、试管苗生根、驯化移栽等一系列过程,建立杜鹃花离体快繁体系。[结果]使用0.1%HgCl2消毒12 min消毒效果最好,WPM+3.0 mg/L ZT+0.5 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂粉有利于不定芽诱导,WPM+1.0 mg/L ZT+0.1 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂粉有利于杜鹃花增殖,WPM+1.0 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂粉有利于生根,草炭土∶珍珠岩(2∶1)基质可以作为驯化移栽基质。[结论]该研究建立了‘古田红’杜鹃花新品种离体快繁体系。

摘要： 为探明朱砂根种胚离体快繁的适宜培养条件,以不同胚龄朱砂根种子为试验材料,开展朱砂根种胚离体快繁生长成苗调控技术研究。结果表明,朱砂根种胚在1/2 MS培养基中萌发快,培养5 d萌发率达100%,显著高于MS和WPM培养基(p<0.05);种胚萌发率随胚龄增加先升后降;大量元素水平适当减少有利于幼苗生长,于1/4 MS培养基中生长的长势最佳;相关性分析表明,移栽存活率与幼苗根条数呈显著正相关(p<0.05),与幼苗茎粗呈极显著负相关(p<0.01);正交试验结果表明,适宜的蔗糖浓度、基本培养基、植物激素配比,可获得根条数多,且根粗和茎粗适中的朱砂根理想株型,提高移栽成活率。因此,朱砂根种胚繁育技术为:47 d胚龄种胚,接种于1/2 MS培养基中萌发,继代于1/4 MS培养基中生长,于1/2 MS+0.5 mg/L 6-BA+2.5 mg/L NAA+20 g/L蔗糖(pH=5.8)培养基质中壮苗,移栽于质量比为1∶1(育苗基质∶腐殖土)的基质中。

摘要： 以不同基因型苦瓜组合作为供体,研究适合苦瓜未授粉子房离体培养产生胚状体的培养体系.结果表明,苦瓜未授粉子房切片在诱导培养基为CBM+0.04mg·L-1TDZ上,经过1～2周的暗培养,培养温度为25°C;之后25°C光照/黑暗16h/8h培养,可以诱导胚状体的发生.苦瓜未授粉子房切片在诱导培养基为CBM+0.5mg·L-1NAA上,进行35°C热激暗培养3d,之后25°C光照/黑暗16h/8h培养,子房切片出现5种表型,分别为芽、白化、黄绿松散型愈伤组织、褐化松散型和紧密型愈伤组织.

摘要： 为建立拟堇花兰离体培养与快繁技术体系,本研究以拟堇花兰幼嫩花梗为外植体,探索不同消毒方式对外植体表面灭菌效果以及不同浓度BA和NAA对丛生芽诱导、增殖分化和不同蔗糖与NAA浓度对生根的影响.结果表明:拟堇花兰外植体表面灭菌最佳处理方式为0.1％氯化汞溶液处理10min;最佳丛生芽诱导培养基为花宝1号+3mg·L-16-BA+0.5mg·L-1NAA;最佳增殖培养基为花宝1号+2mg·L-16-BA+0.5～1mg·L-1NAA;最佳生根培养基为花宝1号+1.5mg·L-1NAA+20g·L-1蔗糖.本研究建立了拟堇花兰离体培养和快繁体系,为资源保存及种苗育苗提供技术支持.

摘要： 以3种十二卷属植物为材料,研究了不同外植体及不同培养基对其离体培养及快速繁殖的影响.结果表明:愈伤组织诱导最佳外植体为花葶上部,诱导培养基为MS+6-BA2.0mg·L-1+KT1.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂6.0g·L-1;最佳分化培养基为MS+6-BA1.0mg·L-1+KT0.5mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂6.0g·L-1;最佳增殖培养基为MS+6-BA0.5mg·L-1+KT0.5mg·L-1+NAA0.2mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂6.0g·L-1.

摘要： 本研究以五星花带芽茎段为外植体,研究了外植体表面灭菌、激素种类及浓度配比、基本培养基种类及有机添加物等因素对五星花离体培养的影响.主要结论为:带芽茎段外植体最适的取材时间为春季(5月),最适灭菌方法为75％酒精30s+2％次氯酸钠10min;丛生芽诱导阶段适宜培养基为:MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.3mg·L-1;丛生芽增殖阶段适宜培养基为:MS+6-BA1.5mg·L-1+NAA0.3mg·L-1;壮苗阶段适宜培养基为:MS+IBA0.5mg·L-1.

摘要： 西葫芦新品种多为杂交种，选育过程中，采用连续自交获得纯合自交系，其工作量大、周期长、效率低。单倍体育种技术倍受育种家的重视。离体诱导未受精子房或胚珠内的雌核发育获得双单倍体再生植株便成了迅速纯化育种材料的理想途径。西葫芦大孢子离体培养过程中,培养体玻璃化是再生植株形成的主要障碍之一.为保障西葫芦大孢子培养过程中胚状体的正常产生,减少培养体玻璃化对再生植株形成的影响,提高试管苗成活率.本试验通过4种培养基诱导胚状体形成筛选优良诱导培养基,通过对组织培养过程中环境温度、湿度、GA浓度等因子调整来降低培养体玻璃化的发生.结果表明:4种培养基均能不同程度诱导胚状体形成,其中D号B5+40g/LSuc+gg/LAgar+0.5mg/LNAA+0.05m g/LTDZ+30mg/LAgNO3培养基最佳(诱导出胚达96％),且直接生成76％不定芽;在培养温度为25°C,湿度85％,生根培养基GA浓度0.5mg/L条件下西葫芦大孢子培养体玻璃化发生率最低.

摘要： 脂肪细胞的离体培养开始于20世纪60年代初,而且国内已经在小鼠、牛、羊等动物上获得了成功,但猪前体脂肪细胞培养还鲜有报道,对猪前体脂肪细胞进行长期离体培养研究脂肪代谢还需要解决细胞培养技术上的难题.我国地方品种猪的主要缺点是沉积脂肪能力强,瘦肉率低,严重影响其经济价值和肉用品质.因此,摸索建立猪前体脂肪细胞培养体系,研究其脂肪沉积与组织发育机理,具有重要的理论与实践意义.成功分离培养前体脂肪细胞涉及的因素较多，各个实验室选用的方法各不相同，在消化时间上，本研究采用37°C消化1h，王竹晨等用的是37°C消化15h;离心力上，白亮等采用的是2000 r/min 5min，本研究采用1200 r/min 10 min，获得的细胞较多，贴壁良好。细胞汇合后(d0)进行诱导分化，本试验d0在完全培养基中添加0.5 mM异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX),1μM地塞米松(DEX),1μg/ml胰岛素(INS)进行诱导培养，d6换为只含1μg/ml胰岛素(INS)的完全培养基，每72h或48h换液，发现细胞在第3天开始有脂滴，10天后形成大脂滴，分化率高。

摘要： 以植株茎段为外植体,进行了甜樱桃矮化砧木品种吉塞拉6号离体快速繁殖技术研究.结果显示:外植体培养于改良MS+1mg/L ZT+0.5mg/L BA+0.2mg/L NAA+0.5g/L CH,30d后腋芽萌发率达81.3％;丛芽增殖的适宜培养基是:改良MS+0.5mg/L BA+0.5mg/L KT+0.1mg/L NAA+0.01mg/L TDZ,增殖系数达5.8;1/2MS+1.0mg/LIBA+0.2mg/LNAA是诱导甜樱桃试管苗生根的适宜培养基,生根率达98.3％;适宜试管苗移栽的基质是配比为1∶1∶1(v/v/v)的泥炭+椰糠+珍珠岩,试管苗移栽成活率达98％以上.

摘要： 以南瓜(Cucurbita moschata D.)未授粉子房为外植体,在离体条件下研究了激素种类、基因型、胚囊发育时期、消毒方式和热激处理时间对胚状体诱导效果的影响,旨在建立完善的南瓜未授粉子房离体诱导再生体系.结果表明,MS+4.0mg·L-12,4-D+0.5mg·L-1NAA+1.0mgL-16-BA和MS+0.04mgL-1TDZ两种培养基胚状体的诱导率都较高,分别为19.8％和20.1％,二者相比,使用TDZ诱导更加简单;在6个南瓜品种中,2个生长势较强的品种(雪峰蜜本和(鲤)鱼南瓜)胚状体诱导率较高,适合做离体雌核诱导的实验材料;开花当天的子房先切片后消毒可以有效降低愈伤组织的形成,提高胚状体的诱导率;在黑暗且35°C条件下热激5天有利于子房的转绿和出胚.将子叶胚转移至无激素的MS培养基上得到再生植株并移栽成活.经鉴定有7个再生植株的染色体数目n=x=22,气孔保卫细胞叶绿体数的平均值为4.28个,是单倍体植株.

摘要： 目的:通过试验确定不同部位嫩芽外植体与植物生长素及天然提取物诱导辣木不定芽的分化能力及不定根生长的最佳条件. 方法:以选择优良辣木主枝嫩芽的茎段为外植体,采用组织培养技术对嫩芽中部茎段诱导、增殖、生根等问题进行试验研究. 结果:不同部位的嫩芽是影响辣木诱导和增殖最关键的因素,嫩芽诱导效果:中部＞下端＞上端,辣木诱导最适宜培养基是MS+6-BA0.5mg.L-1+马铃薯水汁209.L-1+蔗糖259.L-1,诱导率为83％;增殖分化培养基为3/4MS+6-BA0.5mg.L-1+KT0.1mg.L-1+马铃薯水汁209.L-1+蔗糖309.L-1,增殖系数为3.63倍;生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg.L-1+NAA0.2mg.L-1+香蕉水汁20g.L-1+蔗糖20g.L-1,生根率达83％,不定根诱导效果:IBA＞IAA＞NAA. 结论:以主枝嫩芽中部为外植体可建立辣木嫩芽快繁体系,可提高增殖倍数和生根率.

摘要： 目的:通过试验确定不同部位嫩芽外植体与植物生长素及天然提取物诱导辣木不定芽的分化能力及不定根生长的最佳条件. 方法:以选择优良辣木主枝嫩芽的茎段为外植体,采用组织培养技术对嫩芽中部茎段诱导、增殖、生根等问题进行试验研究. 结果:不同部位的嫩芽是影响辣木诱导和增殖最关键的因素,嫩芽诱导效果:中部＞下端＞上端,辣木诱导最适宜培养基是MS+6-BA0.5mg.L-1+马铃薯水汁209.L-1+蔗糖259.L-1,诱导率为83％;增殖分化培养基为3/4MS+6-BA0.5mg.L-1+KT0.1mg.L-1+马铃薯水汁209.L-1+蔗糖309.L-1,增殖系数为3.63倍;生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg.L-1+NAA0.2mg.L-1+香蕉水汁20g.L-1+蔗糖20g.L-1,生根率达83％,不定根诱导效果:IBA＞IAA＞NAA. 结论:以主枝嫩芽中部为外植体可建立辣木嫩芽快繁体系,可提高增殖倍数和生根率.

摘要： 本发明公开了一种桑黄菌丝体培养用培养基及桑黄菌丝体的培养方法，所述培养基由营养料与水混合后装发酵瓶制成，其中营养料与水的质量比为1:0.05～0.2；所述营养料按重量份计由以下原料组分混合制成：燕麦30～50份，粳米15～30份，山药15～30份，土豆粉2～8份，大豆粉2～8份，VB

摘要： 本发明公开了一种桑黄菌丝体培养用培养基及桑黄菌丝体的培养方法，所述培养基由营养料与水混合后装发酵瓶制成，其中营养料与水的质量比为1:0.05～0.2；所述营养料按重量份计由以下原料组分混合制成：燕麦30～50份，粳米15～30份，山药15～30份，土豆粉2～8份，大豆粉2～8份，VB

摘要： 本发明属于植物与微生物技术交叉领域，具体涉及V8蔬菜汁在培养白块菌菌丝体中的应用、培养白块菌菌丝体及合成白块菌菌根的方法。本发明所述V8蔬菜汁购买自美国金宝公司(Campbell’s，USA)，富含碳源、钾素、钠素营养、维生素E和维生素C。利用V8蔬菜汁培养白块菌可快速、大量扩繁培养菌丝体，得到紧密、白色、菌落大和长势旺盛的白块菌菌丝，利用菌丝合成菌根，能够规避不成熟块菌孢子无法进行菌根合成的弊端，从根本上突破种源限制的瓶颈，合成白块菌菌根。

摘要： 本发明公开了一种外泌体分泌培养基及脐带间充质干细胞外泌体的培养分离方法，涉及外泌体富集和分离技术领域以无血清干细胞培养基为基础培养基，添加以下组分：100‑300ng/ml的EGF、50‑150ng/ml的TGF、10‑30μg/ml的辅酶Q10、300‑600μg/ml的钾盐、0.3‑0.9μg/ml的果糖二磷酸钠和100‑300μg/ml的组胺二盐酸盐。采用本发明提供的外泌体分泌培养基可以在相同数量的培养细胞条件下获得更多数量的外泌体。上述外泌体分泌培养基有利于大规模生产具有良好生物活性的脐带间充质干细胞外泌体，进而推动外泌体在医疗、抗衰老、美容等广泛应用，具有良好的经济效益。

摘要： 本发明提供一种用于细胞团培养的包含软包装材料的培养容器，在该培养容器的制造中，能够防止因培养容器的内面发生接触而使涂布于一个内面的细胞粘附抑制剂剥离、背蹭到另一个内面的情况。本发明采用如下的培养容器，是包含软包装材料的培养容器，具备相面对的第一侧面部和第二侧面部，在将接触角滞后定义为水滑落时的前进接触角－后退接触角的情况下，至少对第一侧面部的内面侧实施表面处理以使第一侧面部的内面侧的表面的接触角滞后大于第二侧面部的内面侧的表面的接触角滞后，并且在第一侧面部的内面侧形成有包含细胞粘附抑制剂的膜。

摘要： 本发明涉及细胞培养技术领域，尤其是涉及一种共培养体的建立方法及建立得到共培养体及其应用。本发明的共培养体的建立方法至少包括以下步骤：培养得到树突细胞或树突细胞的外泌体；培养得到肠道类器官；在培养有肠道类器官的孔板上放置transwell小室，将树突细胞的悬液或树突细胞的外泌体加入到transwell小室的上室内进行共培养，建立得到共培养体。

摘要： 本发明提供了一种大花红景天的离体培养联合用培养基，它包括愈伤组织诱导培养基、愈伤组织继代培养基、芽分化培养基、芽增殖培养基和生根培养基。本发明还提供一种大花红景天的离体培养方法。本发明的联合用培养基及离体培养方法，能够用于大花红景天高效离体再生，应用前景良好。

摘要： 本发明公开了一种植物离体开放培养方法及离体开放专用培养基，所述的方法，配制植物离体培养基和接种芽苗之后，将氧气缓释颗粒投放瓶内，摁压埋入培养基，随后在培养基表面灌注一层非挥发性油性液体，厚0.2‑0.5cm，培养瓶不加瓶盖,敞口培养；所述的氧气缓释颗粒材料包括吸水缓释材料和释氧剂过氧化钙粉，吸水缓释材料粉与过氧化钙粉无菌条件混合造粒，粒径0.3‑0.8cm。发明有效缓解了容器内湿度过高、CO2亏缺，瓶内有害气体积累的问题，降低瓶苗蒸腾强度，有利瓶苗正常生长和提高移栽成活率。

摘要： 本发明提供了一种大花红景天的离体培养联合用培养基，它包括愈伤组织诱导培养基、愈伤组织继代培养基、芽分化培养基、芽增殖培养基和生根培养基。本发明还提供一种大花红景天的离体培养方法。本发明的联合用培养基及离体培养方法，能够用于大花红景天高效离体再生，应用前景良好。

摘要： 本发明公开了一种植物离体开放培养方法及离体开放专用培养基，所述的方法，配制植物离体培养基和接种芽苗之后，将氧气缓释颗粒投放瓶内，摁压埋入培养基，随后在培养基表面灌注一层非挥发性油性液体，厚0.2‑0.5cm，培养瓶不加瓶盖,敞口培养；所述的氧气缓释颗粒材料包括吸水缓释材料和释氧剂过氧化钙粉，吸水缓释材料粉与过氧化钙粉无菌条件混合造粒，粒径0.3‑0.8cm。发明有效缓解了容器内湿度过高、CO2亏缺，瓶内有害气体积累的问题，降低瓶苗蒸腾强度，有利瓶苗正常生长和提高移栽成活率。