细胞转化

摘要： 近期,以色列科研人员利用人类材料和细胞设计出功能性3D人类脊髓组织,并首次将其植入长期慢性瘫痪的动物模型中。这项研究已发表在《先进科学》杂志上,该研究团队将人类脊髓植入物植入两组实验动物模型:一组为短期瘫痪的急性模型组;另一组为长期瘫痪的慢性模型组。实验结果表明,100%的急性瘫痪实验模型和80%的慢性瘫痪模型恢复了行走能力。特拉维夫大学Sagol再生生物技术中心塔尔·德维尔教授表示:此项技术是基于从患者腹部采集的脂肪组织,这种组织是由细胞和细胞外基质(包括胶原蛋白和糖等物质)组成。将细胞从细胞外基质中分离出来后,研究团队通过基因工程对细胞进行重新编程,将它们恢复到类似于胚胎干细胞的状态,利用细胞外基质,创造了一种个性化水凝胶,细胞转化为包含运动神经元的3D神经网络植入物,植入受试对象的体内后不会引起免疫反应或排斥反应。

摘要： 目的探究白介素(IL)-22对星形胶质细胞转化的促进作用及可能机制。方法本实验时间为2020-06-20至2021-09-23。根据研究目的将人星形胶质细胞进行分组,并给予相应处理。采用qPCR检测补体C3、FKBP5、GGTA1、Serping1、Srgn mRNA表达水平,采用Western blot法检测补体C3蛋白、磷酸化p38(p-p38)、磷酸化-丝裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2(p-MAPKAPK-2)表达水平。比较对照组、IL-22处理组、C1q+肿瘤坏死因子α(TNF-α)+IL-1α处理组、C1q+TNF-α+IL-1α+IL-22处理组补体C3 mRNA、蛋白表达水平,对照组和IL-22处理组FKBP5、GGTA1、Serping1、Srgn mRNA表达水平,对照组、IL-22处理组、丝裂原活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)抑制剂处理组、IL-22+p38 MAPK抑制剂处理组p-p38、p-MAPKAPK-2、补体C3蛋白表达水平。结果IL-22处理组、C1q+TNF-α+IL-1α处理组及C1q+TNF-α+IL-1α+IL-22处理组补体C3 mRNA、蛋白表达水平高于对照组,C1q+TNF-α+IL-1α处理组和C1q+TNF-α+IL-1α+IL-22处理组补体C3 mRNA、蛋白表达水平高于IL-22处理组(P<0.05)。IL-22处理组FKBP5、GGTA1、Serping1、Srgn mRNA表达水平高于对照组(P<0.05)。IL-22处理组p-p38、p-MAPKAPK-2、补体C3蛋白表达水平高于对照组,p38 MAPK抑制剂处理组p-p38、p-MAPKAPK-2、补体C3蛋白表达水平低于对照组(P<0.05);IL-22+p38 MAPK抑制剂处理组p-p38、p-MAPKAPK-2、补体C3蛋白表达水平低于IL-22处理组,但高于p38 MAPK抑制剂处理组(P<0.05)。结论IL-22可促进星形胶质细胞向A1型星形胶质细胞转化,其机制可能与IL-22促进丝裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2(MAPKAPK-2)磷酸化,进而激活p38-丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路有关。

摘要： 华中农业大学揭示细胞命运转变的染色质高级构象调控新机制细胞命运决定和转变是生物体发育和再生过程中自然发生的过程。通过人为调控某些重要因子的活性,可以将一种类型的体细胞,转分化为另外一种体细胞。但是这种细胞转化的效率较低,产生的目标细胞纯度和功能有限,无法完全替代原有细胞。如何提高细胞转分化效率,是研究细胞命运决定和转变的热点问题。

摘要： 目的 研究温石棉对人胸膜间皮细胞MeT-5A细胞毒性与诱导细胞恶性转化的能力.方法 于2016年6月,采用乳酸脱氢酶(LDH)法检测温石棉对MeT-5A细胞的细胞毒性;以5 μg/cm2温石棉间断染毒MeT-5A细胞,24 h/次,每周一次,共28次,待细胞呈现锚着不依赖性生长后,用软琼脂集落形成试验判断细胞恶性转化,并计算软琼脂集落形成率,紫外比色法测定糖代谢过程中的关键限速酶活性,包括丙酮酸激酶(PK)、磷酸果糖激酶(PFK)和己糖激酶(HK).结果 温石棉对MeT-5A细胞具有细胞毒性,细胞相对存活率呈浓度依赖性下降.与未染毒时相比,10、20、40、80 μg/cm2温石棉染毒后MeT-5A细胞相对存活率显著下降(P＜0.05).染毒28次后,温石棉转化组细胞生长速度加快、排列紊乱,失去接触抑制,出现叠层生长,并可在软琼脂上生长,细胞集落形成率为18.33‰±2.49‰,与对照组(0)比较,差异有统计学意义(P＜0.01);温石棉转化组细胞PK[(19.51±1.52)U/L]、PFK[(0.12±0.02)U/l04个细胞]和HK[(0.26±0.01)U/104个细胞]酶活性水平高于对照组细胞[(25.00±1.04)U/L、(0.15±0.01)U/104个细胞和(0.33±0.01)U/104个细胞](P＜0.01).结论 温石棉可诱导MeT-5A细胞发生恶性转化,并升高细胞糖酵解相关激酶PK、PFK、HK酶活性水平.

摘要： 目的 前期有关研究发现染料木素(genistein,GI)在一定条件下可促进Bhas42细胞转化,本文进一步研究GI促进细胞增殖及转化的潜在作用机制.方法 使用Bhas42细胞,检测GI在可导致细胞转化的浓度下(0.1、0.5、1μg/mL)对细胞周期、细胞凋亡、细胞毒性(ROS、内质网功能、脂蓄积、线粒体膜电位、细胞内钙离子浓度)、氧化应激相关指标(SOD、MDA、GSH、8-HdG和ODC)、干扰细胞间隙连接通讯(gap junctional intercellular communication,GJIC)相关mRNA(PKC、Cx26、Cx32和Cx43)表达水平及肿瘤相关细胞因子表达水平(1L-6、KC/CXCL1、MCP-1、VEGF-A、VEGF-C、TNF-α、1L-1β、L-17A、VEGF-D)的影响.结果 GI可干预细胞周期调控,促进细胞增殖与转化(ODC水平升高、VEGF-A水平升高),并干扰GJIC功能,而氧化应激不是GI导致Bhas42细胞增殖或转化的重要机制.结论 本研究初步发现细胞周期调控通路和GJIC可能为黄酮类化合物促进细胞增殖及转化的主要作用机制.

摘要： 目的 探讨三磷酸腺苷酶家族蛋白2(ATAD2)在不同病变肝组织中的表达意义及临床应用价值.方法 选取我院经肝穿刺活检取不同病变肝组织标本108例,对比不同病变肝组织ATAD2水平,分析ATAD2与肝细胞肝癌(HCC)临床病理特征关系.结果 HCC标本ATAD2平均表达量高于高级别肝脏异型增生结节标本(P<0.05);不同血清甲胎蛋白(AFP)水平、乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)性质、是否合并肝硬化ATAD2平均表达量存在显著差异(P<0.05).结论 ATAD2在HCC病情进展中具有显著促进作用,可加快细胞恶性转化进程,为临床早期诊断HCC提供循证数据支持.

摘要： 目的探讨三磷酸腺苷酶家族蛋白2(ATAD2)在不同病变肝组织中的表达意义及临床应用价值。方法选取我院经肝穿刺活检取不同病变肝组织标本108例,对比不同病变肝组织ATAD2水平,分析ATAD2与肝细胞肝癌(HCC)临床病理特征关系。结果 HCC标本ATAD2平均表达量高于高级别肝脏异型增生结节标本(P<0.05);不同血清甲胎蛋白(AFP)水平、乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)性质、是否合并肝硬化ATAD2平均表达量存在显著差异(P<0.05)。结论 ATAD2在HCC病情进展中具有显著促进作用,可加快细胞恶性转化进程,为临床早期诊断HCC提供循证数据支持。

摘要： 目的:探讨内皮前体细胞(endothelial precursor cells,EPCs)在间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向肝样细胞转化中的作用.方法:分离培养SD大鼠MSCs和EPCs,取第3代MSCs向肝样细胞转化培养,培养过EPCs的无血清及因子的培养基(endothelial progenitor cell-conditioned medium,EPCs-CM)、无血清的α-最低必需培养基(alpha minimal essential medium,α-MEM)分别与肝细胞转化培养基按1:1比例配置,作为实验组和模型对照组,正常α-MEM培养基为空白对照组,分别观察细胞形态及数量变化;在培养3、5、7、9 d时应用免疫荧光检测甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)、清蛋白(albumin,ALB)的表达.结果:空白对照组MSCs形态无明显变化;实验组与模型对照组细胞均出现肝样细胞形态.空白对照组未见AFP、ALB表达,模型对照组和实验组在3、5、7、9 d AFP、ALB表达水平均增高,其中实验组比模型对照组AFP、ALB水平增高明显.结论:EPCs在MSCs向肝样细胞转化中可能起一定的促进作用.

摘要： 目的:研究钙激活中性蛋白酶(Calpain)抑制剂Calpeptin对雌二醇(E2)诱导人乳腺上皮细胞MCF-10A转化及干性标志物表达的影响,并探讨其作用机制.方法:以人乳腺上皮细胞MCF-10A为研究对象,采用E2诱导制备转化细胞模型.将细胞分为对照组[0.1％二甲基亚砜(DMSO)]、E2转化组(50 nmol/L)、E2转化+Calpeptin组(50 nmol/L E2+1μmol/L Calpeptin),以相应含药培养基连续培养15代.然后采用MTT法检测细胞的增殖率(24、48 h),采用平板克隆试验检测细胞的克隆形成率,采用悬浮成球试验检测细胞的成球数;采用实时荧光定量-聚合酶链式反应法检测细胞中干性标志物(CD44、Nanog、OCT4)和细胞外信号调节激酶(ERK)mRNA表达水平,并采用Western blotting法检测细胞中CD44、Nanog、OCT4、ERK和磷酸化ERK(p-ERK)蛋白表达水平.另取E2转化细胞分为对照组(0.1％DMSO)和U0126(ERK抑制剂)组(10μmol/L),按上述方法测定细胞的克隆形成率、成球数以及细胞中CD44、Nanog、OCT4、p-ERK蛋白表达水平,以验证ERK表达抑制与转化细胞生物学行为及干性标志物表达之间的关系.结果:与对照组比较,E2转化组细胞的增殖率(24、48 h)、克隆形成率均显著升高(P<0.01),细胞成球数均显著增加(P<0.01),细胞中CD44、Nanog、OCT4、p-ERK mRNA表达水平及CD44、Nanog、OCT4、p-ERK蛋白表达水平均显著升高(P<0.01).与E2转化组比较,E2转化+Calpeptin组细胞的增殖率(24、48 h)、克隆形成率均显著降低(P<0.01),细胞成球数显著减少(P<0.05),细胞中CD44、Nanog、OCT4、ERK mRNA表达水平及CD44、Nanog、OCT4、p-ERK蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01).加入ERK抑制剂U0126后,E2转化细胞的克隆形成率、成球数以及细胞中p-ERK、CD44、Nanog、OCT4蛋白表达水平均显著增加或升高(P<0.05或P<0.01).结论:Calpeptin可抑制E2诱导的人乳腺上皮细胞MCF-10A转化及干性标志物表达,其机制可能与抑制Calpain-ERK信号通路的激活有关.

摘要： 毋庸置疑,吸烟是导致肺癌的首要危险因素。自上世纪五十年代以来,全球范围内已有大量流行病学研究证实了这一点。吸烟过程中可产生60多种致癌物质,其中与肺癌关系密切的主要有多环芳怪类化合物、苯、碑、丙烯、烟碱(尼古丁)、一氧化碳和烟焦油等,这些致癌物质可导致支气管上皮细胞基因损害,某些肿瘤基因的激活或失活,导致细胞转化癌变。

摘要： 探讨贝那普利在糖尿病大鼠肾小管上皮细胞转化中的作用.贝那普利显著减少了糖尿病大鼠肾小管上皮α-SMA的表达，抑制了肾小管上皮细胞的转化，在肾脏的保护中有着重要的作用。

摘要： 大自然，人类一切力量的源泉。在亿万年进化中大自然把人体塑造成一部精密的生物机器，赋予了这部生物机器最高的智慧、最强大的生命力以及最完美的自我修复力。人体强大的生命力和完美的自我修复力是治愈人体疾病的最佳医生和最好药物。郭林新气功疗法的高明和高妙就在于，让癌症患者走出家门，向大自然寻求力量，通过功法呼唤潜藏于人体强大的生命力和完美的自我修复力，用感召的方法呼唤癌细胞醒来，用支持的方法，伸出援手，给癌细胞提供充足的氧气和负氧离子，并提供生物电帮助癌细胞弥补缺失的碱基电子，修复癌细胞基因残缺片段，把癌细胞断裂的电子呼吸链连接起来，帮助癌细胞从无氧呼吸切换到有氧呼吸，使癌细胞由幼稚细胞转化为成熟细胞。一句话，郭林新气功疗法运用人体在亿万年进化中大自然所赋予的强大生命力，自我更正，自我修复，创造了癌症不治而愈、不翼而飞的奇迹。

摘要： 采用基因挖掘技术,从NCBI数据库发现来源于Glaciecola polaris的葡萄糖3-脱氢酶基因,该基因经密码子优化后合成,构建pET28b-GpG3DH重组表达载体,转入大肠杆菌E.coli BL21中进行重组表达,结果显示:GpG3DH实现了部分可溶表达,其分子量为5.5×104.随后,优化了GpG3DH的表达条件,结果发现,重组菌在TB培养基中37°C培养至OD600为0.8时,加入IPTG至终浓度为0.5mmol/L,16°C诱导表达10h,GpG3DH酶活为2.83×10－2U/mL.进一步将重组菌用于3-酮对硝基苯井冈霉胺的细胞转化法合成,细胞用10mmol/L的EDTA处理,在pH为7.5、25°C的条件下转化32h,3-酮对硝基苯井冈霉胺的产率(Y3-KpNPV)为0.54.

摘要： 研究探讨低氘水对免疫功能的调节作用.对不同氘含量低氘水(25 ppm,50 ppm,100 ppm),分别进行BALB/C小鼠脾细胞悬液体外经ConA诱导的淋巴细胞转化实验.25 ppm、50 ppm低氘水组的增值活力与对照组相比,增强率分别达到了13.3％和14％,可见低氘水对ConA诱导的淋巴细胞转化有一定的增强作用,对有机体具有一定的免疫调节作用.

摘要： 已有的研究表明转录因子snail在调节肺癌细胞EMT当中可能起到关键作用.本文旨在研究转录因子snail是否对于肿瘤转移抑制基因nm23-H1抑制肺腺癌细胞上皮细胞间质化的过程.采用Western blot分别检测了肺腺癌细胞株中nm23-H1沉默与过表达之后snail蛋白水平表达的变化，同时应用Real-time PCR检测肺腺癌细胞nm23-H1基因沉默后mRNA水平的变化。检测结果表明肿瘤抑制基因nm23-H1可以部分通过转录因子snail抑制肿瘤EMT的发生，进而抑制肿瘤的转移，但是nm23-H1基因还可能通过其他因子来起作用。

摘要： 目的:分析GMA诱导的16HBE恶性转化模型中相关基因通路表达的改变，探讨GMA致16HBE细胞恶性转化的分子机制。方法:采用“人类全基因组表达谱芯片”对转化前期细胞、转化细胞基因表达进行动态分析，绘制同／共基因表达谱，筛选GMA致16HBE细胞恶性转化过程中的相关信号通路改变。结果:转化前期细胞与同代龄对照组细胞相比有28个基因表达通路的基因表达存在统计学差异；而转化细胞与同代龄对照组细胞相比有7个基因表达通路的基因表达存在统计学差异。其中细胞通讯、TGF-β信号系统、霍乱感染和造血细胞家系四个通路在转化细胞中表达均与同代龄细胞存在统计学差异，转化前期无明显统计学差异。结论:TGF-beta信号通路可能在GMA诱导16HBE细胞转化过程中发挥作用。

摘要： 探讨长链非编码RNA(lncRNA)H19在人腹膜间皮细胞(HPMCs)高糖损伤导致的腹膜纤维化中的作用.结果表明:H19参与高糖刺激所引起的人腹膜间皮细胞的纤维化过程，并且可以促进腹膜纤维化的发生，抑制H19表达可抑制腹膜纤维化。

摘要： 探讨长链非编码RNA(lncRNA)H19在人腹膜间皮细胞(HPMCs)高糖损伤导致的腹膜纤维化中的作用.结果表明:H19参与高糖刺激所引起的人腹膜间皮细胞的纤维化过程，并且可以促进腹膜纤维化的发生，抑制H19表达可抑制腹膜纤维化。

摘要： 探讨长链非编码RNA(lncRNA)H19在人腹膜间皮细胞(HPMCs)高糖损伤导致的腹膜纤维化中的作用.结果表明:H19参与高糖刺激所引起的人腹膜间皮细胞的纤维化过程，并且可以促进腹膜纤维化的发生，抑制H19表达可抑制腹膜纤维化。

摘要： 探讨长链非编码RNA(lncRNA)H19在人腹膜间皮细胞(HPMCs)高糖损伤导致的腹膜纤维化中的作用.结果表明:H19参与高糖刺激所引起的人腹膜间皮细胞的纤维化过程，并且可以促进腹膜纤维化的发生，抑制H19表达可抑制腹膜纤维化。

摘要： 提供了用于转化植物、优选单子叶植物以及甚至更优选甘蔗的组合物和方法。转化方法涉及用土壤杆菌感染植物组织，以及使用包含高浓度胶凝剂的培养基对其进行共培养，这导致抑制细菌的加剧生长并且导致增加转化频率。本发明包括转化的植物的再生和实际的转化的植物。

摘要： 本发明提供了将悬浮细胞聚集体破碎成具有完整初生细胞壁的单细胞的简单且一致的方法。本发明部分地涉及含有果胶降解酶或微管蛋白解聚化合物(包括秋水仙素)的培养基中所培养的悬浮细胞聚集体的细胞分离。本发明还涉及化合物用于此类目的的新用途。本发明的另一方面涉及目的物(即分离的细胞)的转化。此类过程将基于单细胞的转化和选择过程简化并整合入转基因和转质体事件产生的工作过程。本发明还消除了技术约束，并以高通量方式产生无标志物的且均一表达的转基因系，以支持动物保健、生物制药、及性状和作物保护平台的各种需要。

摘要： 提供了用于转化植物、优选单子叶植物以及甚至更优选甘蔗的组合物和方法。转化方法涉及用土壤杆菌感染植物组织，以及使用包含高浓度胶凝剂的培养基对其进行共培养，这导致抑制细菌的加剧生长并且导致增加转化频率。本发明包括转化的植物的再生和实际的转化的植物。

摘要： 本发明涉及食品工业和医学，并描述了生产含有重组人碱性磷酸酶的转化植物细胞的方法。本方法包括构建具有人碱性磷酸酶基因的植物表达载体，将具有人碱性磷酸酶基因的植物表达载体导入农杆菌菌株，生产植物愈伤组织细胞，使用农杆菌菌株农杆菌转化愈伤组织细胞；从转化的愈伤组织细胞产生体细胞胚，并在悬浮培养中培养含有人碱性磷酸酶基因的体细胞胚。本发明的目的是调节胃肠道微生物群落以及保护和恢复人体免疫系统。

摘要： 本发明涉及基于以下基因序列的密码子优化的新的cry1Da核酸分子，所述基因序列从细菌苏云金芽孢杆菌中分离。这些分子用于制备核酸构建体、载体和宿主细胞，允许产生对无脊椎害虫抗性的转基因植物例如玉米，所述无脊椎害虫例如来自鳞翅目的昆虫，特别是草地贪夜蛾（夜蛾科，鳞翅目）和小蔗螟（草螟科，鳞翅目）。本发明还涉及包含根据本发明的分子或构建体的植物细胞和转基因植物。特别地，根据本发明的转基因植物可控制对含有cry1F基因的植物已变得抗性的上述物种的毛虫。本发明另外涉及用于转化细胞的方法、用于控制作物植物中的无脊椎害虫的方法、以及所述分子或核酸构建体用于生产转基因植物以及用于控制无脊椎害虫的用途。

摘要： 本发明涉及分化的体细胞，如来自胚胎中胚层的那些分化的细胞，向神经胶质细胞的重编程。从这种重编程产生的神经胶质细胞在功能上与来自外胚层来源的神经胶质细胞等同。

摘要： 本发明提供了一种诱导成体肝干细胞转化为高转移肝癌细胞的方法及以此方法筛选出的稳定肝癌细胞，方法包括如下步骤：S1：对大鼠成体肝干细胞进行扩增、培养并保存；S2：采用基因转染技术将含有Notch1基因的慢病毒载体转入大鼠成体肝干细胞，获得稳定过表达Notch1的大鼠成体肝干细胞；S3：利用稳定过表达Notch1的大鼠成体肝干细胞，采用选择性条件培养法进行培养，使其在体外进一步分化，筛选出致瘤能力强及稳定的肝癌细胞；S4：采用筛选出的肝癌细胞，通过同种属的原位肝脏移植瘤模型，可在肝脏形成肝癌，并伴自发形成双肺转移瘤，从而获得高转移肝癌细胞。采用本发明的方法筛选出的稳定肝癌细胞成瘤时间短、致瘤性好、具有肺转移能力。

摘要： 本发明公开了病毒巨噬细胞炎性蛋白vMIP‑II通过促进CD8+T细胞去磷酸化影响PI3K‑AKT‑mTOR信号通路从而诱导COVID‑19患者中的CD8+T细胞转化为TCM。本发明通过SARS‑CoV‑2的S蛋白刺激的外周血PBMC的T细胞亚群，发现vMIP‑II可使TCM依赖vMIP‑II剂量增殖，且该增殖细胞的差异基因主要富集于趋化因子受体和磷酸化通路，进一步发现该增殖是vMIP‑II封闭CD8+T趋化因子受体而低表达G蛋白，降低胞内Ca2+浓度和线粒体膜电位、抑制磷酸化通路的相关基因，抑制PI3K‑AKT‑mTOR通路破坏了线粒体网络结构，降低线粒体功能，将细胞能量代谢改变为糖酵解，还影响了甲基化酶Dnmt3a的活性。磷酸化水平的降低导致效应CD8+T细胞向干性转化，产生更多的CD8+TCM。这表明可以重建在急性SARS‑CoV‑2感染中丧失的细胞免疫能力，可用于病毒感染的新型治疗用药物中的应用。

摘要： 本发明涉及一种用于将神经干细胞有效地分化为星形胶质细胞的方法，并且更具体地涉及一种用于将人神经干细胞在短时间内更有效地分化为展现出免疫应答抑制能力的星形胶质细胞的基于细胞转化的方法。不同于常规方法，根据本发明的通过使用含有若干种细胞因子的组合的分化培养基将神经干细胞分化为星形胶质细胞的方法涉及缩短的分化时间，并且具有优异的分化效率，并且分化的星形胶质细胞展现出免疫应答抑制能力，因此可以用作治疗各种脑疾病如退行性神经系统疾病的药剂。

摘要： 本发明提供了一种诱导成体肝干细胞转化为高转移肝癌细胞的方法及以此方法筛选出的稳定肝癌细胞，方法包括如下步骤：S1：对大鼠成体肝干细胞进行扩增、培养并保存；S2：采用基因转染技术将含有Notch1基因的慢病毒载体转入大鼠成体肝干细胞，获得稳定过表达Notch1的大鼠成体肝干细胞；S3：利用稳定过表达Notch1的大鼠成体肝干细胞，采用选择性条件培养法进行培养，使其在体外进一步分化，筛选出致瘤能力强及稳定的肝癌细胞；S4：采用筛选出的肝癌细胞，通过同种属的原位肝脏移植瘤模型，可在肝脏形成肝癌，并伴自发形成双肺转移瘤，从而获得高转移肝癌细胞。采用本发明的方法筛选出的稳定肝癌细胞成瘤时间短、致瘤性好、具有肺转移能力。