脑膜炎球菌

摘要： 本项目位于云南省昆明市新城高新技术产业基地标准工业厂房4号楼,由中国医学科学院医学生物学研究所投资建设,本项目拟将昆明新城高新技术产业基地标准工业厂房(马金铺水科技园)4号楼部分区域(一层及部分地下室)改造为生产人用细菌性疫苗的无菌厂房,主要建设用于细菌多糖结合疫苗生产的原液车间及分装车间,原液车间建筑面积约1500m~2,分装车间建筑面积约900m~2。以及配套的附属设施,包含空调机房、锅炉房、制水站、气体供应、冷库及污水处理设施等。主要为脑膜炎球菌等细菌性疫苗的生产,产品上市后,根据市场需求不同,设计年产量为500-2000万剂/年。

摘要： 目的 探索不同酸水解酪蛋白对W135群与Y群脑膜炎奈瑟菌(脑膜炎球菌)荚膜多糖产量的影响.方法 分别以NaCl质量分数为37％和14％的酸水解酪蛋白作为有机氮源配制改良半综合高盐培养基和低盐培养基,利用全自动细菌发酵罐分别在两种培养基里培养W135群和Y群脑膜炎球菌,比较这两种菌株在两种培养基中的生长时间、收获液菌密度(A600 nm值)、收获液去菌体后与去复合多糖后上清中的荚膜多糖含量,以及纯化后的精糖产量;比较高盐培养基收获液及其2倍稀释液中不同终含量的十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrimethylammonium bromide,CTAB)溶液对多糖沉淀效果的影响.结果 W135群与Y群脑膜炎球菌在两种培养基中的培养时间差异无统计学意义(P>0.05),但高盐培养基收获液的菌密度、收获液去菌体后上清液中的多糖含量均高于低盐培养基收获液,差异有统计学意义(P<0.05),而高盐培养基收获液纯化后的精糖产量低于低盐培养基,差异有统计学意义(P<0.05).高盐培养液2倍稀释后,在CTAB终体积分数为0.04％时,W135群与Y群脑膜炎球菌多糖全部沉淀,而未稀释高盐培养液即使CTAB终体积分数提高到0.14％,依然也不能完全沉淀W135群与Y群脑膜炎球菌多糖.结论 不同酸水解酪蛋白对W135群和Y群脑膜炎球菌的生长密度和荚膜多糖产量有影响,用CTAB溶液沉淀荚膜多糖时需控制收获液盐含量.

摘要： 目的 考察本公司生产的A、C脑膜炎球菌多糖疫苗在药品有效期内的稳定性,为提高该产品的质量可控性提供数据支持,对该产品进行稳定性考察.方法 按照中国药典方法检测该产品48个月内水份、PH、分子大小、回收率和多糖含量.结果 6批完成48个月稳定性考察的结果显示各指标变化均未有明显差异,在有效范围内,质量稳定,效期确定合理.

摘要： 化脓性脑膜炎（purulent meningitis,简称化脑）是各种化脓性细菌引起的脑膜炎症。部分患儿病变累及脑实质,是小儿尤其是婴幼儿时期常见的中枢神经系统感染性疾病。临床以急性发热、烦躁不安、意识障碍、惊厥、颅内压增高和脑膜刺激征以及脑脊液化脓性改变为特征。

摘要： 目的:建立检测酵母超滤液浓度的方法,并探索适合A、C群脑膜炎球菌生长的无动物源性培养基中酵母超滤液的浓度.方法:通过全波长扫描及不同波长吸光度值的比较确定检测酵母提取物浓度的最佳波长;用3000 Da超滤膜超滤酵母提取物溶液,制备酵母超滤液并检测其性质;观察脑膜炎球菌在含不同批次酵母超滤液的半综合培养基中的生长情况,验证不同批次标化的酵母超滤液的稳定性;配制含不同浓度酵母超滤液的半综合液体培养基,观察A、C群脑膜炎球菌的生长情况.结果:通过全波长扫描及不同波长吸光度值的比较,确定了检测酵母提取物浓度的最佳波长为405 nm;采用3000 Da超滤膜超滤后的酵母超滤液不与CTAB产生沉淀,通过检测其D405nm值,可以确定酵母超滤液的浓度;从生长情况考虑,A、C群脑膜炎球菌半综合培养基中最优酵母超滤液浓度分别为4、2 mg/L.结论:建立了制备酵母超滤液及分光光度法标定酵母超滤液浓度的方法,确定了培养A、C群脑膜炎球菌半综合培养基中最优酵母超滤液浓度.%Objective:To develop a method for determination of ultrafiltered yeast extract(UYE) content,and find the UYE in animal-free medium suitable for group A and group C Neisseria meningitidis.Methods:The optimum absorbance wavelength of yeast extract solution was determined by comparing different wavelength absorbance values out of full wavelength scanning.Yeast extracts(YE) were fractionated by ultrafiltration(UF) with 3000 Da molecular weight cutoff membranes to prepare UYE,and then the properties of UYE were tested,the stability of different batches of UYE was validated by observing the growth of N.meningitidis in the semi-synthetic medium containing different batches of UYE.The growth of A group and C group N.meningitidis was observed in the prepared semi-synthetic liquid medium containing different concentrations of UYE.Results:The optimum detection wavelength for YE concentration was 405 nm.There was no precipitant when CTAB was added into the UYE.The UYE could be determined at 405 nm.The best concentration of UYE was 4 g/L for group A N.meningitidis,and 2 g/L for group C N.meningitidis.Conclusion:We have developed the UYE preparation and UYE quantification spectrophotometry method,and also determined the best concentration of UYE in the semi-synthetic medium for group A and group C N.meningitidis.

摘要： 目的 简述脑膜炎球菌脑膜炎的西药治疗.方法 对脑膜炎球菌脑膜炎的患者进行西药治疗.结果 本病在各种化脓性脑膜炎的发病中占首位,有一定的病死率.结论 应根据当地细菌药敏情况尽早选用抗生素治疗.早期治疗可减轻病情,减少并发症和降低病死率.

摘要： 目的：分析脑膜炎球菌脑膜炎的临床治疗体会。方法随机选取从2014年5月至2016年1月期间我院诊治的37例脑膜炎球菌脑膜炎患者为这次研究对象，观察分析患者的临床表现及治疗效果。结果经临床针对性治疗，有效治愈29例，显效7例，无效1例，患者的总治疗有效率为97.3%(36/37)，并且临床症状均有显著改善。结论应及时依据患者的症状的个异性，采用针对性的检查手段降低误诊率，以提高脑膜炎球菌脑膜炎的检出率，应用高效治疗方法，提高疗效。

摘要： 目的：对脑膜炎球菌脑膜炎的临床特点和治疗方法进行分析。方法：随机从我院2013年5月～2014年5月收治的脑膜炎球菌脑膜炎患者中选取50例作为研究对象，随机分成对照组和观察组，每组各25例。其中对照组使用两性霉素B进行治疗，观察组在对照组的基础上使用氟康唑进行联合治疗，对所有患者的临床表现和2组的治疗效果进行分析。结果：脑膜炎球菌脑膜炎的临床表现以高热、颅压增高和阳性脑膜刺激为主；同时，对照组死亡2例，未愈8例，有效率为60％，观察组死亡1例，未愈5例，有效率为76％，经对比，观察组的疗效显著优于对照组，差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论：对于出现高热、颅压升高等的患者应及时采用其他方法检查脑膜炎球菌，提高脑膜炎的检出率，降低误诊率，并使用两性霉素B和氟康唑进行治疗，提高治疗效果。

摘要： It has been demonstrated that antibodies induced by Meningococcal polysaccharide, polysaccharide-protein con-jugate and outer-membrane protein vaccines can provide the protection against meningitis disease. This review will describe main methods of the specific antibody detection and related progress. In the process of the efficacy evaluation of Meningo-coccal vaccine, antibodies concentration and functional antibody activity are critical indicators for vaccine efficacy, and these researches will provide strong evidence for new Meningococcal vaccine candidates.%研究证明，脑膜炎球菌荚膜多糖、多糖蛋白结合物以及外膜蛋白等物质都能够诱导产生抗体，帮助保护机体抵御脑膜炎球菌疾病。阐述了脑膜炎球菌疫苗研制过程中特异性抗体的检测方法以及在疫苗效果评价中的意义，指出在脑膜炎球菌疫苗的效果评价中，抗体含量以及功能性抗体活性的检测是重要指标，为疫苗的市场应用提供了依据。

摘要： 目的:原核表达脑膜炎球菌表面蛋白fHBP,研究其免疫原性.rn 方法:筛选A和B两个亚家族的fHBP基因序列分别克隆至质粒pET-24b(+)和pET-28a(+),构建重组表达质粒pET-28a-/HBP-A和pET-24b fHBP-B.转化感受态细胞E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达.表达蛋白经镍柱亲和层析和凝胶过滤层析后免疫家兔,制备多克隆抗体.采用流式细胞术、血清杀菌力试验和被动免疫保护试验评估抗原的免疫原性.rn 结果:两个蛋白的重组表达质粒成功构建.fHBP-A以包涵体形式表达,fHBP-B以可溶形式表达,纯化后纯度均高于95％.重组蛋白免疫家兔制备抗血清,经流式细胞术检测可与靶菌发生特异性结合反应,血清杀菌力试验检测到明显的杀菌反应,被动免疫保护试验证明在NIH乳鼠体内抗血清能有效清除靶菌.各项试验均呈现显著的亚家族特异性.rn 结论:fHBP蛋白具有良好的免疫原性,可作为B群流脑疫苗的候选抗原.

摘要： 目的:建立层析法提纯A,C,Y,W135群脑膜炎球菌荚膜多糖的工艺,以替代传统苯酚抽提。方法:使用层析柱分别对A,C,Y,W135群荚膜多糖进行纯化,收集目的峰,脱盐、冻干后,进行检测。结果:按照2010年版《中华人民共和国药典》三部的检定要求,对提纯的A,C,Y,W135群多糖进行检测,各项指标均符合要求。结论:层析法提纯工艺,纯化获得了合格的荚膜多糖。与传统苯酚抽提工艺相比,操作简单,易于放大。

摘要： 目的：表达并纯化重组脑膜炎球菌P64K蛋白，并考察其载体作用。rn 方法：利用基因工程技术在大肠杆菌中表达P64K，用硫酸铵沉淀和两步层析纯化P64K；以重组P64K为载体蛋白，以ADH为连接剂，在EDAC的作用下，与活化的A群脑膜炎球菌多糖(GAMP)结合，制备GAMP-P64K结合物，免疫BALB/c小鼠，间接ELISA法测定血清中抗P64K特异性抗体和抗A群脑膜炎球菌多糖特异性IgG抗体，并分析其免疫原性。rn 结果:重组脑膜炎球菌P64K蛋白在大肠杆菌中主要以可溶性形式表达，表达量达35%左右；动物实验证明重组P64K蛋白具有较强的免疫原性，有载体蛋白的作用。rn 结论：成功表达了重组P64K蛋白，重组P64K蛋白作为载体制备的GAMP-P64K结合物具有良好的免疫原性，为以重组P64K蛋白为蛋白载体制备其他结合疫苗奠定了实验基础。

摘要： 疫苗是预防和控制脑膜炎球菌感染的有效途径,本文对A群脑膜炎球菌结合疫苗的临床安全性和免疫原性研究进行回顾综述。

摘要： MCV-AC/Hib作为一种新的联合疫苗符合WHO积极推荐的疫苗免疫发展方向，尽管目前暂不能确定MCV-AC/Hib上市后的应用前景，但是我国应参照美国的做法和WHO有关新疫苗引入国家免疫规划的基本原则，从疫苗接种的必要性、安全性、有效性和可行性等各个方面，积极开展相关的研究工作，以期为今后适时纳人到国家扩大免疫规划提前做好技术方面的准备。

摘要： 目的：建立一种用于A群、C群、W135群和Y群四价流脑结合疫苗制品中各血清群多糖蛋白结合物的定量检测方法.方法：制备了抗载体蛋白白喉毒素无毒变异体(CRM197)和流脑4个血清群多糖的特异性单克隆抗体,并建立了用CRM197特异性单抗为包被抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的流脑各血清群多糖的单抗为捕获抗体,可定量检测流脑各血清群结合物含量的双抗体夹心ELISA法.结果：定量检测A 群流脑结合物(GAMP-CRM197)的夹心ELISA法,线性范围为3.75～120ng/ml,检测限为3.75ng/ml,回收率为90％～120％.定量检测C群结合物(GCMP-CRM197)的夹心ELISA法,线性范围为1.875～30ng/ml,检测限为0.938ng/ml,回收率为85％～115％.定量检测W135群结合物(GWMP-CRM197)的夹心ELISA法,线性范围为7.5～240ng/ml,检测限为7.5ng/ml,回收率为80％～100％.定量检测Y群流脑结合物(GYMP-CRM197)的夹心ELISA法,线性范围为1.875～60ng/ml,检测限为0.938ng/ml,回收率为90％～120％.方法变异系数CV值均小于15％.结论：本研究建立的夹心ELISA法可以用于四价流脑结合疫苗成品中各血清群结合物的定量检测.

摘要： 目的：建立一种用于A群、C群、W135群和Y群四价流脑结合疫苗制品中各血清群多糖蛋白结合物的定量检测方法.方法：制备了抗载体蛋白白喉毒素无毒变异体(CRM197)和流脑4个血清群多糖的特异性单克隆抗体,并建立了用CRM197特异性单抗为包被抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的流脑各血清群多糖的单抗为捕获抗体,可定量检测流脑各血清群结合物含量的双抗体夹心ELISA法.结果：定量检测A 群流脑结合物(GAMP-CRM197)的夹心ELISA法,线性范围为3.75～120ng/ml,检测限为3.75ng/ml,回收率为90％～120％.定量检测C群结合物(GCMP-CRM197)的夹心ELISA法,线性范围为1.875～30ng/ml,检测限为0.938ng/ml,回收率为85％～115％.定量检测W135群结合物(GWMP-CRM197)的夹心ELISA法,线性范围为7.5～240ng/ml,检测限为7.5ng/ml,回收率为80％～100％.定量检测Y群流脑结合物(GYMP-CRM197)的夹心ELISA法,线性范围为1.875～60ng/ml,检测限为0.938ng/ml,回收率为90％～120％.方法变异系数CV值均小于15％.结论：本研究建立的夹心ELISA法可以用于四价流脑结合疫苗成品中各血清群结合物的定量检测.

摘要： 目的：建立一种用于A群、C群、W135群和Y群四价流脑结合疫苗制品中各血清群多糖蛋白结合物的定量检测方法.方法：制备了抗载体蛋白白喉毒素无毒变异体(CRM197)和流脑4个血清群多糖的特异性单克隆抗体,并建立了用CRM197特异性单抗为包被抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的流脑各血清群多糖的单抗为捕获抗体,可定量检测流脑各血清群结合物含量的双抗体夹心ELISA法.结果：定量检测A 群流脑结合物(GAMP-CRM197)的夹心ELISA法,线性范围为3.75～120ng/ml,检测限为3.75ng/ml,回收率为90％～120％.定量检测C群结合物(GCMP-CRM197)的夹心ELISA法,线性范围为1.875～30ng/ml,检测限为0.938ng/ml,回收率为85％～115％.定量检测W135群结合物(GWMP-CRM197)的夹心ELISA法,线性范围为7.5～240ng/ml,检测限为7.5ng/ml,回收率为80％～100％.定量检测Y群流脑结合物(GYMP-CRM197)的夹心ELISA法,线性范围为1.875～60ng/ml,检测限为0.938ng/ml,回收率为90％～120％.方法变异系数CV值均小于15％.结论：本研究建立的夹心ELISA法可以用于四价流脑结合疫苗成品中各血清群结合物的定量检测.

摘要： 目的：建立一种用于A群、C群、W135群和Y群四价流脑结合疫苗制品中各血清群多糖蛋白结合物的定量检测方法.方法：制备了抗载体蛋白白喉毒素无毒变异体(CRM197)和流脑4个血清群多糖的特异性单克隆抗体,并建立了用CRM197特异性单抗为包被抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的流脑各血清群多糖的单抗为捕获抗体,可定量检测流脑各血清群结合物含量的双抗体夹心ELISA法.结果：定量检测A 群流脑结合物(GAMP-CRM197)的夹心ELISA法,线性范围为3.75～120ng/ml,检测限为3.75ng/ml,回收率为90％～120％.定量检测C群结合物(GCMP-CRM197)的夹心ELISA法,线性范围为1.875～30ng/ml,检测限为0.938ng/ml,回收率为85％～115％.定量检测W135群结合物(GWMP-CRM197)的夹心ELISA法,线性范围为7.5～240ng/ml,检测限为7.5ng/ml,回收率为80％～100％.定量检测Y群流脑结合物(GYMP-CRM197)的夹心ELISA法,线性范围为1.875～60ng/ml,检测限为0.938ng/ml,回收率为90％～120％.方法变异系数CV值均小于15％.结论：本研究建立的夹心ELISA法可以用于四价流脑结合疫苗成品中各血清群结合物的定量检测.

摘要： 本发明涉及含有抗原混合物，例如肺炎球菌或脑膜炎球菌抗原，以及白细胞介素IL-12的疫苗组合物。该疫苗组合物可吸附到矿物悬液上。肺炎球菌或脑膜炎球菌抗原可以偶联于载体分子。这些疫苗组合物调节对抗原的保护性免疫应答。

摘要： 本发明提供了一种脑膜炎球菌fHbp蛋白的表达系统，所述的表达系统包含fHbp抗原基因和载体pCAMBIA1301，所述的表达系统为pCAMBIA‑fHbp，所述的启动子为β‑phaseolin启动子。通过设计合成了fHbp拟南芥密码子偏好的核苷酸序列全长，将其亚克隆入带有菜豆种子特异启动子的植物表达载体中，利用农杆菌介导将fHbp基因整合到拟南芥基因组中。使fHbp在种子中表达，简化了生产工序，降低了生产成本，使植物大量生产口服疫苗fHbp成为可能。

摘要： 本发明涉及微生物领域，具体而言，涉及一种适用于脑膜炎球菌及肺炎球菌的冻干保护剂，以质量百分数计，其在工作浓度下由如下活性成分组成的溶液：脱脂乳粉8％～13％、蔗糖8％～13％、抗环血酸和/或其盐0.3％～1％。上述成分互相配合，能够有效提高冷冻干燥后的脑膜炎球菌及肺炎球菌的活菌率。

摘要： 本发明公开了一种抗Hib‑RSV‑脑膜炎球菌‑肺炎球菌联合疫苗，所述联合疫苗包括：Hib‑肺炎球菌免疫中间体，脑膜炎球菌免疫中间体和呼吸道合胞病毒免疫中间体，所述Hib‑肺炎球菌免疫中间体以肺炎球菌表达的高保守性并具有免疫原性的蛋白为载体蛋白，缀合Hib荚膜多糖；所述脑膜炎球菌免疫中间体包括ΔfHbp，所述重组ΔfHbp包含fHbp可变体V1的VA、VB结构域以及fHbp可变体V3的VC、VD、VE结构域；所述呼吸道合胞病毒免疫中间体的抗原为可引起机体免疫反应的RSV膜表面融合蛋白F和/或附着蛋白G，其中表达蛋白抗原的核酸序列重组在核酸载体上，重组蛋白的核酸序列以减毒胞内细菌为细菌载体；上述组分的免疫中间体分别制备为冻干粉剂，临用复融混合。

摘要： 本发明提供了一种多价肺炎球菌‑ACYW135脑膜炎球菌联合疫苗，其中每剂量含肺炎球菌荚膜糖50～500μg/ml，A、C、Y、W135群脑膜炎球菌荚膜糖50～500μg/ml；肺炎球菌的血清型为以下血清型中的一种或多种：1、3、4、5、6A、6B、7F、8、9N、9V、12F、14、15B、18C、19A、19F、22F或23F。与现有技术相比，本发明提供的联合疫苗安全可靠，稳定性好，其应用前景十分广阔。

摘要： 一种免疫原性组合物，其包含：(i)结合型肺炎球菌荚膜糖；和(ii)脑膜炎球菌H因子结合蛋白(fHBP)抗原，但不包括脑膜炎球菌外膜囊泡，所述组合物用于免疫对象抵御细菌性脑膜炎。

摘要： 本发明涉及含有抗原混合物,例如肺炎球菌或脑膜炎球菌抗原,以及白细胞介素IL－12的疫苗组合物。该疫苗组合物可吸附到矿物悬液上。肺炎球菌或脑膜炎球菌抗原可以偶联于载体分子。这些疫苗组合物调节对抗原的保护性免疫应答。

摘要： 本申请涉及生物工程的领域，尤其是涉及一种脑膜炎球菌发酵培养方法、发酵液、荚膜多糖、应用。发酵培养方法，将脑膜炎球菌液体培养菌液接种于脑膜炎球菌液体培养基中发酵培养，根据发酵液的OD600值，判定发酵收获终点，所述OD600值是结合荚膜多糖收益曲线、细菌内毒素曲线以及有效荚膜多糖收益曲线得到。本申请具有的效果降低脑膜炎球菌的发酵的荚膜多糖内毒素含量以及提高荚膜多糖产量的效果。

摘要： 本申请涉及生物工程的领域，尤其是涉及一种脑膜炎球菌发酵培养方法、发酵液、精制多糖、应用。脑膜炎球菌发酵培养方法，包括以下步骤：S1、液体复苏培养开启菌种，接种于脑膜炎球菌培养基，OD600达到0.6～1.0时，结束培养；S2、液体摇瓶培养将一代液体培养菌液接种于脑膜炎球菌培养基中，OD600达到1.0～2.0时，结束培养；S3、发酵培养将二代液体培养菌液接种于脑膜炎球菌培养基中进行发酵，控制发酵环境为弱酸性，溶氧在20%～40%，菌种生长进入稳定期，结束培养。本申请通过液体复苏传代的模式，减少半综合培养基羊血成分的引入，提高了疫苗安全性；同时，减少了发酵培养时间，便于监测并控制传代菌液浓度。

摘要： 本申请涉及生物工程的领域，尤其是涉及一种脑膜炎球菌发酵培养方法、发酵液、荚膜多糖、应用。发酵培养方法，将脑膜炎球菌液体培养菌液接种于脑膜炎球菌培养基中发酵培养，根据不同OD600值的变化，调整培养条件以及判定发酵收获终点。本申请具有的效果降低脑膜炎球菌的发酵的荚膜多糖内毒素含量以及提高荚膜多糖产量的效果。