葡萄球菌,金黄色

摘要： 感染性骨缺损是高能量创伤、骨髓炎及内置物感染后出现的严重并发症,成为骨科最难治疗的疾病之一,而生物膜的形成是感染性骨缺损的重要因素.随着富血小板血浆(PRP)在骨科及其他领域的广泛应用并取得成功,PRP具有的抗菌和促愈合能力使其能够作为新型生物材料负载抗生素并成为感染性疾病包括感染性骨缺损的新治疗手段.笔者从PRP负载抗生素联合Masquelet技术的优势、手术方式、适应证及操作要点等方面进行阐述,为临床治疗感染性骨缺损提供参考.

摘要： 目的 探讨金黄色葡萄球菌超抗原与人耳部瘢痕疙瘩形成的相关性. 方法 采用回顾性病例对照研究方法.2017年6月-2018年3月,取南通大学附属医院收治的10例(女9例、男1例,年龄19～59岁)耳部瘢痕疙瘩患者行耳部瘢痕疙瘩核心切除术后弃用瘢痕组织及3例(均为女性,年龄20～24岁)色素痣患者手术后弃用正常皮肤组织.取耳部瘢痕疙瘩表面分泌物,培养细菌并进行鉴定.取瘢痕疙瘩和正常皮肤组织,采用蛋白质印迹法检测金黄色葡萄球菌肠毒素A+肠毒素B+毒性休克综合征毒素1(TSST-1)的蛋白表达,并根据蛋白表达情况将瘢痕疙瘩分为超抗原阳性组和超抗原阴性组.蛋白质印迹法检测2组瘢痕疙瘩T细胞受体(TCR) Vβ蛋白表达.Masson、苏木精-伊红(HE)染色观察2组瘢痕疙瘩真皮内胶原纤维形成和炎症细胞浸润情况.酶联免疫吸附测定法检测超抗原阳性瘢痕疙瘩中金黄色葡萄球菌肠毒素A、肠毒素B、TSST-1表达.对数据行配对样本t检验. 结果 耳部瘢痕疙瘩表面分泌物培养出细菌,优势菌培养24 h可见细菌周围出现溶血现象,菌落呈白色或金黄色,鉴定为金黄色葡萄球菌.3例患者正常皮肤肠毒素A+肠毒素B+TSST-1蛋白表达阴性,蛋白表达量为0.267±0.016.4例患者瘢痕疙瘩金黄色葡萄球菌肠毒素A+肠毒素B+TSST-1蛋白表达阳性,蛋白表达量为0.472±0.016,纳入超抗原阳性组;6例患者瘢痕疙瘩金黄色葡萄球菌肠毒素A+肠毒素B+TSST-1蛋白表达阴性,蛋白表达量为0.255±0.004,纳入超抗原阴性组.超抗原阳性组瘢痕疙瘩金黄色葡萄球菌肠毒素A+肠毒素B+TSST-1蛋白表达量明显高于超抗原阴性组瘢痕疙瘩和正常皮肤(t=15.22、8.63,P＜0.01).超抗原阳性组瘢痕疙瘩TCR Vβ蛋白表达量为0.389±0.023,明显高于超抗原阴性组的0.169±0.014(t=8.62,P＜0.01).Masson染色显示,2组瘢痕疙瘩真皮内均见大量胶原纤维增生.HE染色显示,超抗原阴性组瘢痕疙瘩真皮可见血管周围少量炎症细胞浸润,超抗原阳性组瘢痕疙瘩血管周围可见大量炎症细胞浸润.4例超抗原阳性瘢痕疙瘩患者中金黄色葡萄球菌肠毒素A阳性2例、金黄色葡萄球菌肠毒素B阳性2例,其中1例患者检测出肠毒素A和肠毒素B双阳性,未有患者检出金黄色葡萄球菌TSST-1. 结论 金黄色葡萄球菌分泌的超抗原是耳部瘢痕疙瘩众多发病原因中的一种,可能与金黄色葡萄球菌超抗原激活瘢痕疙瘩信号通路有关.

摘要： 化脓性骨髓炎是病原体侵犯骨髓所致的一类感染性疾病,感染途径包括血流播散、邻近组织感染的直接蔓延、手术或创伤致骨髓直接感染.肾衰竭患者需要接受血液透析、腹膜透析等肾脏替代治疗.感染是血液透析患者严重的并发症,但发生化脓性骨髓炎者罕见.复旦大学附属华山医院收治了一例耐甲氧西林金黄色葡萄球菌致化脓性骨髓炎的血液透析患者,表现为低热伴右侧大腿疼痛、C反应蛋白和血常规均正常,万古霉素治疗有效.

摘要： 目的 探讨广州地区就诊患儿粪便分离金黄色葡萄球菌毒素基因的分布状况和临床诊断及各分子分型的关系.方法 收集2018年8至11月广州市妇女儿童医疗中心3所院区就诊儿童2 059份非重复粪便标本所分离的412株金黄色葡萄球菌,采集相关临床信息.提取菌株DNA后用PCR的方法检测相关的毒素基因,其中包括葡萄球菌肠毒素(SE)基因(sea、seb、sec、sed、see)以及杀白细胞毒素基因(pvl),采用多位点序列分型(MLST)的方法对菌株进行分子分型,最后采用x2检验对数据进行比较.结果 从所分离的412株金黄色葡萄球菌中检测到256株(256/412,62.1％)至少含有1种肠毒素基因,携带率较高的依次为sec(125/412,30.3％)、seb(98/412,23.8％)和sea(66/412,16.0％),并且金黄色葡萄球菌pvl基因的携带率为18.7％(77/412).其中分离自胃肠炎患者粪便的金黄色葡萄球菌sea基因检出率(58/319,18.2％)明显高于非胃肠炎组(8/93,8.6％)(x2=4.912,P=0.027),而在住院肺炎患者粪便中的金黄色葡萄球菌pvl基因检出率(8/21,38.1％)高于非肺炎组(6/47,12.8％)(X2=4.252,P=0.039).并且金黄色葡萄球菌的毒素基因与特定的ST型密切相关,82.4％(28/34)的ST6携带sea基因,所有的ST338和ST59均携带seb基因,96％(48/50)的ST45携带sec基因,ST338的pvl基因携带率高达5/5.结论 ST6型金黄色葡萄球菌产生的SEA毒素可能与儿童患者胃肠炎诊断呈密切相关.PVL毒力基因在社区获得性肺炎住院患儿金黄色葡萄球菌中的携带率高于非肺炎组,且与CC59克隆群密切相关.

摘要： 目的 探讨苦连肤康洗剂中抑菌剂的合理加入量.方法 以铜绿假单胞菌、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和黑曲霉为试验菌株,依照《中国药典》四部通则1 121抑菌效力检查法,对含不同抑菌剂的苦连肤康洗剂进行抑菌效力测定.结果 0.1％羟苯乙酯-0.4％苯甲酸钠的组合添加量可使苦连康肤洗剂抑菌效力达到《中国药典》2015年版中皮肤给药制剂的相关规定.结论0.1％羟苯乙酯-0.4％苯甲酸钠作为苦连康肤洗剂的抑菌剂,安全有效.

摘要： 目的 探讨替加环素治疗血液透析并发万古霉素不敏感的播散性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)败血症的临床效果.方法 分析2020年确诊为血液透析并发播散性金黄色葡萄球菌败血症的1例患者的临床资料,其对万古霉素治疗不敏感,结合相关文献复习,观察替加环素对该病的临床效果.结果 本例患者长期维持血液透析,因发热3d入院,确诊后经万古霉素、替考拉宁治疗无效,利奈唑胺治疗后双手出现多发出血性皮疹,经替加环素治疗有效.结合相关文献显示,在治疗MRSA致血流感染(BSI)方面,替加环素和万古霉素疗效相当,替加环素在肾功能不全或血液透析患者中无须进行剂量调整.结论 替加环素治疗播散性MRSA败血症安全有效.

摘要： 目的 探讨Halicin对金黄色葡萄球菌的抗菌作用.方法 采用微量肉汤稀释法检测Halicin对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度;通过摇菌培养和稀释菌落计数法检测Halicin对金黄色葡萄球菌的时间-杀菌曲线;通过微量棋盘稀释法检测Halicin与常用抗菌药物的联合抗菌作用;通过结晶紫染色法测定Halicin对金黄色葡萄球菌生物膜的抑制和清除作用;通过红细胞溶血试验初步检测Halicin对红细胞的毒性;最后,通过小鼠皮肤脓肿模型,取脓肿周围皮肤组织研磨稀释菌落计数.采用t检验比较Halicin的体内抗菌效果.结果 Halicin对金黄色葡萄球菌具有抑菌作用,其最低抑菌浓度为2～4 mg/L.Halicin 16 mg/L处理8h后,金黄色葡萄球菌平均菌落数下降5.5×106 CFU/ml(t=73,P＜0.05),且呈现浓度依赖性.Halicin和氨苄西林联用时,表现为协同抗菌作用,其分级抑菌浓度指数为0.5.Halicin的浓度为4倍最低抑菌浓度时,可以有效抑制金黄色葡萄球菌生物膜形成,使其生物膜总量(A570)从(2.89±0.09)减少到(1.35±0.17)(t=11.12,P＜0.05),但对已形成的生物膜无显著清除效果.Halicin对红细胞几乎无溶血活性,即使当Halicin的浓度为128 mg/L,其溶血率仍低于10％.体内实验表明,20 mg/kg Halicin可使细菌数量下降3.0×107 CFU/ml.结论 Halicin对金黄色葡萄球具有较强的抑菌作用且无明显的溶血毒性.

摘要： 目的 探讨新生儿化脓性腮腺炎(NSP)患儿的临床表现、治疗策略及预后.方法 选择2017年5月14日,成都市妇女儿童中心医院收治的1例于生后24 d被诊断为NSP的女性患儿为研究对象.以"化脓性腮腺炎""新生儿""腮腺感染"为关键词,在中国知网、维普、万方数据库中,检索NSP相关文献.文献检索时间设定为1980年1月1日至2019年6月30日.对本例NSP患儿及文献纳入研究NSP患儿的临床表现、并发症、治疗及预后进行分析.本研究遵循的程序符合2013年新修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求.结果 本例NSP患儿因生后24 d"发热伴吸允困难,右侧耳前肿胀8 h"被诊断为NSP后收入院,入院对其采取哌拉西林钠舒巴坦钠250 mg/(kg·d)×10 d治疗后,腮腺肿胀消失,痊愈出院.对其出院后随访1个月的结果 提示,NSP未复发.根据本研究设定的文献检索策略,共计筛选30篇国内NSP相关文献,纳入71例NSP患儿进行研究.对包括本例患儿在内的这72例NSP患儿的临床资料进行分析的结果 如下.①一般临床资料:男性患儿为44例(61.1％),足月儿为51例(70.8％);临床诊断NSP时,日龄为生后1～26 d.②临床表现:72例(100.0％)患儿均有以耳垂为中心出现肿胀、肿胀腮腺导管脓性分泌物溢出,患儿不明原因哭闹为52例(72.2％),吸吮困难为51例(70.8％),发热为49例(68.1％).③ 相关并发症发生率为9.7％(7/72),并发NSP患侧外耳道瘘、患侧面神经麻痹、化脓性脑膜炎分别为4例(5.6％)、2例(4.2％)及1例(1.4％).④对腮腺导管脓性分泌物进行细菌培养结果 呈阳性为43例(59.7％),其中金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、链球菌、表皮葡萄球菌、溶血性葡萄球菌呈阳性者分别32例(44.4％)、4例(5.6％)、3例(4.2％)、2例(2.8％)、1例(1.4％)与1例(1.4％);细菌培养结果 呈阴性为27例(37.5％);结果 不详为2例(2.8％).同时完善血样标本细菌培养者为17例,其中6例(35.3％,6/17)结果 呈阳性.⑤治疗及预后:72例患儿中,59例(81.9％)接受保持口腔清洁及足量、足疗程抗菌药物治疗有效,13例(18.1％)接受上述方案联合腮腺脓肿处穿刺术或外科切开引流术治疗.其中,70例(97.2％)治愈出院患儿中,随访期内69例(95.8％)无复发,1例(1.4％)于出院后1个月内复发,再次入院治疗后治愈出院;2例(2.8％)死亡.结论 NSP是新生儿期较少见感染性疾病.该病起病急,临床表现特异,金黄色葡萄球菌是导致该病的常见致病菌,患儿接受早期、积极抗感染治疗后,预后良好,并发症少.

摘要： 目的 探讨碘伏对金黄色葡萄球菌生物膜(BBF)的抗菌作用.方法 体外培养金黄色葡萄球菌,选取480枚钛合金板,分别在钛板表面建立7,14,21,28 d金黄色葡萄球菌生物膜体外模型,每个时相点120枚.再将每个时相点生物膜按随机数字表法分为无碘伏浸泡组(PBS组)、碘伏浸泡5 min组(5 min组)和碘伏浸泡10 min组(10 min组).PBS组分别采用异硫氰酸荧光素标记的刀豆蛋白(FITC-C onA)与碘化丙啶(PI)、PI与SYT09染料将金黄色葡萄球菌染色,染色后使用激光共聚焦显微镜和扫描电镜观察细菌生物膜的形态结构,并采用活菌计数法(CFU计数)清点菌落数;5 min组、10 min组采用PI和SYT09染色,染色后使用激光共聚焦显微镜观察碘伏浸泡后的生物膜变化及细菌活力,采用活菌计数法评估碘伏的抗菌效果.结果 PBS组采用FITC-ConA和PI染色后,通过激光共聚焦显微镜观察可见,随着培养时间的延长,细菌胞外多聚物逐渐增多,生物膜空间结构逐渐成熟,到21 d时生物膜空间结构变化明显,28 d时成熟;PI和SYT09染色后通过激光共聚焦显微镜观察可见细菌数量增多,外形呈山峰状.扫描电镜观察可见,随着培养时间的延长,细菌胞外多聚物逐渐增多,形成了结构化的微环境并逐渐成熟.5 min组、10 min组中培养7 d[0(0,0)CFU/ml]及14 d[0(0,0) CFU/ml]时细菌被全部杀灭,21 d时5 min组及10 min组抗菌作用均减弱,但10 min组[100(100,125) CFU/ml]较5 min组[300(275,425) CFU/ml]的抗菌效果好(P＜0.05),28 d时碘伏浸泡5min组[500(375,700) CFU/ml]和10 min组[250(175,400) CFU/ml]的抗菌效果差异无统计学意义(P＞0.05).结论 生物膜的成熟是细菌和胞外多聚物的整体成熟并形成空间化的微环境,生物膜以21 d为界分成年轻生物膜和成熟生物膜,二者的主要区别在于胞外多聚物及微环境的成熟;对于培养时间≤21 d的细菌生物膜,碘伏浸泡10 min较5 min抗菌效果好,而对培养时间＞21 d的细菌生物膜延长碘伏浸泡时间对于抗菌效果没有明显差别.

摘要： 目的 建立红色荧光标记金黄色葡萄球菌(金葡菌)假体感染(PJI)临床株,探究工具菌的生物学特性及和初步应用可行性.方法 通过分子克隆手段构建mCherry红色荧光表达质粒,通过电转化和噬菌体转导构建红色荧光标记金葡菌PJI临床株.通过生长曲线检测,体外成膜和生物量分析和荧光强度测量鉴定工具菌生物学特性.采用RAW264.7细胞株、工具菌建立共培养模型.采用该模型示踪不同锌离子浓度处理的巨噬细胞对于荧光PJI金葡菌吞噬能力.使用独立样本t检验、重复测量方差分析对定量数据进行统计.结果 使用Gibson系统成功构建了荧光表达质粒pRMC2-pts-mCherry,并且使用噬菌体Phage11将该质粒成功导入金葡菌假体感染临床株ST1792.较之于野生株ST1792,荧光金葡菌ST1792-pRMC2-pts-mCherry两者的生长曲线没有统计学差异(F=0.012,P>0.05).在0.5％葡萄糖胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSBG)内,两者的生物膜光密度(OD)值分别为(3.700±0.003)和(3.715±0.042)(t=0.6056,P>0.05);10％滑液中生物膜OD值为(3.682±0.084)和(3.648±0.095)(t=0.474,P>0.05).使用动物活体成像系统(IVIS)检测荧光强度,24 h荧光强度为(1.95±0.04)、48 h荧光为(1.94±0.13)、72 h荧光强度为(1.95±0.04),荧光强度72 h稳定(F=2.944,P>0.05).通过荧光显微镜观察以及菌落形成单位(CFU)计数评价发现,使用锌离子浓度30～60μmol/L不含抗生素的培养基处理RAW264.724 h,可以促进其吞噬金葡菌,其中30μmol/L吞噬率为(44±4)％(t=4.75,P<0.01)、45μmol/L吞噬率为(45±6)％(t=4.086,P<0.05)、60μmol/L离子处理的巨噬细胞,其吞噬率为(38±4)％(t=4.786,P<0.01).结论 本研究成功构建红色荧光临床PJI金葡菌,并验证其用于PJI相关体外吞噬研究的可行性.

摘要： 本发明的目的在于提供能够高精度地鉴定金黄色葡萄球菌的检测手段。本发明的一个方式涉及一种用于检测金黄色葡萄球菌的培养基，其包含1种以上的营养成分、在α‑葡萄糖苷酶的存在下显色的显色剂、在磷酸酶的存在下显色的显色剂、以及0.5mg/cm3以上的粘菌素甲磺酸钠。本发明的另一方式还涉及具有所述培养基的金黄色葡萄球菌检测片、以及使用它们的金黄色葡萄球菌的检测方法。

摘要： 本发明涉及医药微生物化学技术领域，具体公开了从一株毛韧革菌（Stereum hirsutum）的发酵产物中分离获得的一类、四种异戊烯基取代的苯酚类化合物用于制备抗菌药物的医药用途，具体是在制备用于抑制金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生长的药物中的应用。本发明的抗细菌活性试验证实本发明的异戊烯基取代的苯酚类化合物及其衍生物能够显著抑制金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin‑resistant Staphylococcus aureus，MRSA）的生长，具有作为制备新的农用或医用抗菌和耐药细菌药物的用途。

摘要： 提供用于治疗或预防金黄色葡萄球菌感染的组合物和方法。所述组合物可以配制成药物组合物或配制成杀菌剂、消毒剂、洗涤剂或防腐剂，并可用于根除或减少金黄色葡萄球菌群体并因此治疗或预防金黄色葡萄球菌感染。所述组合物包含一种或多种消化酶，例如，一种或多种蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶。也提供所述组合物的使用方法。

摘要： 提供用于治疗或预防金黄色葡萄球菌感染的组合物和方法。所述组合物可以配制成药物组合物或配制成杀菌剂、消毒剂、洗涤剂或防腐剂，并可用于根除或减少金黄色葡萄球菌群体并因此治疗或预防金黄色葡萄球菌感染。所述组合物包含一种或多种消化酶，例如，一种或多种蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶。也提供所述组合物的使用方法。

摘要： 本发明的目的在于提供能够高精度地鉴定金黄色葡萄球菌的检测手段。本发明的一个方式涉及一种用于检测金黄色葡萄球菌的培养基，其包含1种以上的营养成分、在α‑葡萄糖苷酶的存在下显色的显色剂、在磷酸酶的存在下显色的显色剂、以及0.5mg/cm

摘要： 本发明提供一种金黄色葡萄球菌抗原的提取方法，其特征在于，使用含有选自盐酸、乙酸、柠檬酸、磷酸、硫酸及硝酸中的1种以上的酸的、pH5.0以下的提取试剂从被检体中的金黄色葡萄球菌中提取包含甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌抗原及/或甲氧西林敏感性金黄色葡萄球菌抗原的金黄色葡萄球菌抗原。本发明还提供一种金黄色葡萄球菌的判定方法。

摘要： 本发明公开了一种金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌核酸快速检测方法及试剂盒，该方法包括以下步骤：1)待测样品核酸提取；2)核酸恒温扩增：对金黄色葡萄球菌特有的nuc1基因或耐甲氧西林金黄色葡萄球菌特有的mecA基因的核酸进行环介导核酸恒温扩增；3)扩增产物检测：利用CRISPR‑Cas12a体系检测扩增后的nuc1基因或mecA基因。本发明首次采用CRISPR‑Cas12a荧光探针法检测金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌核酸，具有灵敏度高、特异性强、耗时短、高通量、不依赖大型实验设备等优势；能方便用于基层实验和临床一线对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌核酸的基层快速检测。

摘要： 本发明涉及医药微生物化学技术领域，具体公开了从一株毛韧革菌（Stereum hirsutum）的发酵产物中分离获得的一类、四种异戊烯基取代的苯酚类化合物用于制备抗菌药物的医药用途，具体是在制备用于抑制金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生长的药物中的应用。本发明的抗细菌活性试验证实本发明的异戊烯基取代的苯酚类化合物及其衍生物能够显著抑制金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin‑resistant Staphylococcus aureus，MRSA）的生长，具有作为制备新的农用或医用抗菌和耐药细菌药物的用途。

摘要： 本发明公开了金黄色葡萄球菌及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因mecA检测试剂盒及其应用。该试剂盒通过将采集的样本经细胞裂解液裂解后释放病原体核酸，然后在逆转录酶和7RNA聚合酶的作用下，经过逆转录和转录过程，实现病原体核酸片段的扩增。扩增后的RNA产物被检测液中的特异探针识别捕获，形成RNA扩增产物‑‑‑特异探针‑‑‑金探针复合物，该复合物通过侧向流层析在NC膜上被固定形成可见的条带，实现病原体核酸的检测。本发明没有RNA的提取过程，不需要特殊仪器，基于RNA恒温扩增，在实际检测中不易污染，灵敏度高、特异性强以及操作简单，使金黄色葡萄球菌及耐药基因mecA核酸检测得到广泛应用成为一种可能。

摘要： 提供用于治疗或预防金黄色葡萄球菌感染的组合物和方法。所述组合物可以配制成药物组合物或配制成杀菌剂、消毒剂、洗涤剂或防腐剂，并可用于根除或减少金黄色葡萄球菌群体并因此治疗或预防金黄色葡萄球菌感染。所述组合物包含一种或多种消化酶，例如，一种或多种蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶。也提供所述组合物的使用方法。