补料分批发酵

摘要： D-泛酸是一种B族维生素,广泛应用于饲料、食品、医药等行业。由于化学法合成D-泛酸的成本高、环境污染大,采用生物发酵法生产D-泛酸显得尤为重要。为了实现重组大肠杆菌DPA21/pBCST3D的高产,在5 L发酵罐水平进行了发酵参数的优化,并在补料分批发酵实验中对β-丙氨酸和葡萄糖的流加方式和浓度进行优化,进一步提高了D-泛酸的产量。通过优化确定了培养条件为温度30°C、pH 6.8、溶氧15%;β-丙氨酸补料方式为与葡萄糖混合且质量浓度为40 g/L,通过比较2种不同的葡萄糖流加方式,最终选择以脉冲式5~10 g/L的补料方式进行。在以上的发酵条件下,D-泛酸的产量达到41.5 g/L,较初始条件下提高了41.3%。研究结果为D-泛酸的工业化生产奠定了基础。

摘要： 目的 以诱变菌株SaccharopolysporaspinosaAEG3-1为试验株,研究山茶油对该菌株发酵生产多杀菌素的影响.方法 首先单因素实验筛选到最佳植物油脂,再利用响应面实验设计对发酵培养基中最佳植物油脂、葡萄糖、糊精、棉籽蛋白4种成分进行优化,最后在5L罐进行验证.结果 最佳植物油脂是山茶油,在0h添加15.0g/L效果最好.在此基础上,获得优化发酵培养基(g/L):山茶油15.1、葡萄糖51.6、糊精19.73、棉籽蛋白21.8,其产量达318.25mg/L,提高了55.61％.在5L罐中,利用优化培养基,分批和补料发酵产量分别达到361.97和512.36mg/L.结论 通过添加山茶油,诱变株的多杀菌素产量显著提高,说明该生产工艺确实可行,可为多杀菌素大规模生产提供可靠的依据.

摘要： 虫草素作为药用真菌蛹虫草的主要活性成分,具有抗肿瘤、抗病毒等多种生理功能.现阶段虫草素主要通过蛹虫草液体发酵生产,但发酵周期长、生产强度低,制约了其大规模开发利用.文中在酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae S288C中异源表达虫草素合成关键基因ScCNS1和ScCNS2,成功构建了产虫草素的酵母工程菌SHC16,发酵240 h虫草素产量可达67.32 mg/L;基因表达分析显示,发酵后期磷酸戊糖途径、嘌呤代谢及虫草素合成途径关键酶编码基因ZWF1、PRS4、ADE4、ScCNS1及ScCNS2表达水平显著上调.进一步地,通过优化发酵培养基组成,确定以50 g/L葡萄糖为初始底物结合一次补料、添加5 mmol/L Cu2+和1.0 g/L腺嘌呤为最适培养基组成.基于此在5L搅拌发酵罐中开展补料分批发酵,144 h虫草素产量达到137.27 mg/L,生产强度达0.95 mg/(L.h),较未优化发酵体系提高240％.

摘要： 为了降低液体发酵过程中高浓度虫草素积累对蛹虫草菌产生的反馈抑制,建立了补料分批发酵耦合盐析萃取系统,在发酵过程中及时移除部分虫草素,解除产物抑制,提高虫草素的终产量.为对发酵液中虫草素的进行分离,筛选出乙醇/(NH4)2 SO4及乙醇/K2 HPO4两种盐析萃取体系,当无机盐和乙醇分别为15％和27％时,虫草素回收率最高,达到98.73％和93.79％.将蛹虫草菌补料分批发酵与盐析萃取相耦合,虫草素发酵产量显著提高,在第6天进行补料,虫草素产量达793.85 mg/L,较对照组提高了25.83％,虫草素回收率达98.83％.

摘要： 菜油甾醇作为甾体药物(孕酮、雄烯二酮、氢化可的松等)的重要合成前体已受到国内外研究学者的广泛关注.首先通过生物信息学分析,筛选了10种不同来源的7-脱氢胆固醇还原酶DHCR7,并采用CRISPR/Cas9基因编辑技术将酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)内源的ERG5基因替换成不同来源的DHCR7基因,构建了菜油甾醇合成菌株.结果发现整合来源于Pangasianodon hypophthalmus DHCR7的菌株Zw507表现出最高的菜油甾醇的产量216.93 mg/L.进一步筛选了10种酵母内源启动强度较强的启动子来与PhDHCR7基因进行组合,结果显示以TEF1p为启动子时菜油甾醇的产量最高可达253.35 mg/L.为了进一步提高菜油甾醇产量,增加了DHCR7表达盒在酵母基因组上的拷贝数.当拷贝数为3个时,菜油甾醇的产量达到最高302.27 mg/L.最终,通过5 L发酵罐进行补料分批发酵,实现了916.88 mg/L菜油甾醇产量.该菌株可作为后续甾体药物生物合成的优良底盘细胞.

摘要： 利用组合优化方法,探讨了铵盐和硝酸盐对枯草芽孢杆菌生长和补料分批发酵核黄素的影响.结果表明铵盐可促进菌体生长,抑制核黄素积累;硝酸盐可以提高核黄素的产量,抑制菌体生长;而将铵盐和硝酸盐以物质的量之比为1:8混合使用时既有利于菌体生长又可以提高产物产量,相比单一利用硫酸铵时产量提高了30％,达到812 IU/mL;在补料分批发酵过程中,发酵后期采用NaOH调节pH,并严格控制铵离子的浓度低于10 mmol/L,相比对照组核黄素产量提高10％,达到5292 IU/mL.

摘要： α-酮戊二酸是微生物三羧酸循环中重要的中间产物,在生命代谢中起到重要的作用,具有广泛的应用价值.实验利用谷氨酸棒杆菌KGA-3发酵产α-KGA,确立了补料分批发酵最佳条件,即种子培养基pH控制为7.0,摇瓶种子培养温度32°C,接种时间为12h,发酵培养基装液量25mL/500mL圆底三角瓶,接种量为20‰最适初始糖浓度为90g/L,发酵周期为32h.发酵采取初期补氨水,转型后添加0.75moL/L NaOH溶液调节pH的工艺.在优化条件下,α-KGA产量和糖酸转化率分别为25.8g/L和35.1％,比初始条件下分别提高了45.5％和11.5％.

摘要： 补料分批发酵具有生产效率高、不易染菌以及可操作性强等优点,是目前工业生产L-苏氨酸的主要方式.补料过程控制是L-苏氨酸补料分批发酵的关键,本实验通过恒速补料的方法,考察了碳源、磷源、硫源以及缺陷型氨基酸补料对大肠杆菌分批发酵生产L-苏氨酸的影响;发现碳源、磷源、硫源以及必需氨基酸补料非别不同程度的提高了L-苏氨酸产量,与非补料分批发酵相比,L-苏氨酸产量分别提高了2.4、2.7、0.3、3.2倍.本实验为进一步的补料过程控制优化奠定基础,对于L-苏氨酸补料分批发酵具有重要的参考价值.

摘要： 本文首先评述了生化反应过程模型化、监控与优化控制等研究领域的现有成果,并结合一类补料分批发酵过程的特点提出了混合建模和先进控制策略,最后对该领域未来的发展方向进行了展望.

摘要： 利用自动控制发酵设备,首先进行分批发酵实验摸索恶臭假单胞菌Pseudomonassp JS-01的生长与代谢的基本规律,然后采用补料分批发酵的方法限制生长基质的浓度,测定了一系列(C,μ),(μ,q)数据,获得了K、μ、α、β等参数的值,并且推导出了细胞生长与产物合成的动力学公式,从而证明了用Monod方程描述恶臭假单胞菌Pseudomonas sp JS-01生长速率与基质浓度关系的合理性,并推导出此菌产酶的类型属于生长关联型.

摘要： 本发明提供用于生产重组蛋白质的高细胞密度补料-分批发酵方法。本发明提供生产蛋白质(例如，重组脑膜炎球菌2086蛋白质)的方法、以及高密度蛋白质组合物和用于本发明方法的组合物，所述方法利用补料-分批发酵并在达到阈值参数后连续投入诱导物且任选地连续投入碳源(例如，恒定速度投入)以提高蛋白质产量。

摘要： 本发明公开了一种补料生产WF16616的分批发酵工艺，其特征是：所述工艺包括发酵步骤和补料步骤；其中，所述发酵步骤采用的菌株为Tolpocladium？parasiticum？No.16616，所述补料步骤采用的营养成分选自甘露醇、葵花籽油、大豆油和蔗糖中的至少两种。通过本发明的补料发酵工艺，解决分批发酵中WF16616产量低的问题，显著提高WF16616产率，其发酵效价达到550-660mg/L，从而极大程度的降低生产成本。

摘要： 本发明公开了一种酿酒酵母及其补料分批发酵生产S-腺苷甲硫氨酸的工艺。该方法通过补充碳源及添加维生素、无机盐及氨基酸等小分子物质对酿酒酵母的代谢网络进行扰动，强化S-腺苷甲硫氨酸的生成途径，使酿酒酵母活力得到大幅度提高。本发明成本低，操作简易，大幅提高了发酵单位及生产产量，有利于工业化生产。

摘要： 本发明涉及微生物油脂的生产，具体的说是一种以木薯淀粉原料生产微生物油脂的补料分批发酵工艺，属生物化工技术领域。在菌体对数生长期向发酵培养基中同时补加碳源和氮源，当菌体处于稳定期时向发酵培养基中补加碳源。本发明的优点在于延长了菌体的生长期使其生物量显著提高，在菌体处于稳定期时只提供碳源使其大量合成油脂，提高了微生物油脂的含量和产量；本发明所设计的补料工艺可使发酵过程中发酵培养基的pH保持稳定，减少了用于调节pH的酸碱的用量，节约了生产成本，且补料方式简单易行，便于操作。

摘要： 本发明公开了采用补料分批发酵法制备高密度酪酸菌活菌制剂的方法，该方法是由酪酸菌在酪酸菌种子培养基中经二级种子扩大培养和在酪酸菌发酵培养基中发酵，在发酵过程中通过补充碳源、氮源以及用氨水来调节发酵液的pH值等代谢调控措施，来增加酪酸菌的菌体数、芽孢体的转化率以及发酵罐装料系数，再经菌体收集、添加保护剂、喷雾干燥制粉、菌粉检验、包装工序制得;本发明方法生产周期短，酪酸菌的培养密度高，活菌数目较高，生产成本较低，能够大规模产业化生产，产品质量稳定。

摘要： 一种以纤维素为碳源补料分批发酵生产L‑色氨酸的方法，包括以下步骤：1)色氨酸生产菌株的扩大培养阶段：在摇瓶中添加种子培养基，将菌株接种至摇瓶内进行扩大培养；2)补料分批发酵阶段：摇瓶中添加含有纤维素的发酵培养基，将步骤1)中扩大培养后的种子接种至摇瓶，然后在摇瓶内加入纤维素酶粗酶液，纤维素酶粗酶液与发酵培养基中所含的纤维素组分持续反应，为发酵体系提供还原糖作为补料碳源。

摘要： 本发明公开了一种补料分批发酵枯草芽孢杆菌制备褐藻胶裂解酶的方法，该包括：活化菌种，补料分批发酵培养，菌体破碎，提取粗酶液。本方法工艺简单，生产周期短，操作简便，与传统生产途径相比，上述芽孢杆菌所产的褐藻胶降解酶酶活力高，发酵效率高。

摘要： 本发明公开了一种从凝结芽孢杆菌补料分批发酵液中提取蛋白质的方法，依次包括补料分批发酵、低温离心、硫酸铵分级沉淀、低温离心、取沉淀溶解，再进行透析、冷冻干燥。本发明从凝结芽孢杆菌发酵液中提取蛋白质的方法，建立了一种简单的操作流程，得到不同分子量的蛋白质和多肽。通过对提取出的蛋白质进行抑菌作用测定，发现部分组分蛋白质具有一定的抑制病原菌作用。此方法不仅工艺简单、提取率高，而且提高了不同分子量蛋白质的得率，为新型微生态制剂的生产提供模板。

摘要： 本发明公开了一种增强细胞生长及生物过程效率的ε-聚赖氨酸补料分批发酵方法。它是用ε-聚赖氨酸产生菌用其发酵培养基对其进行发酵培养，当培养体系的pH值下降至3.6~4.1之间时，按照每小时每升发酵培养基中补加0.025g~0.5g酵母粉或其他有机氮源至培养体系中直至发酵结束，同时自pH降至3.6~4.1之间开始，用氨水控制培养体系的pH维持在3.6~4.1之间直至发酵结束，并补加灭过菌的含葡萄糖和硫酸铵的补料培养基，维持培养体系的葡萄糖为5~30g/L直至发酵结束。本发明的细胞较快的进入ε-聚赖氨酸合成阶段，避免了细胞进入合成阶段前细胞活性的损失，延长了细胞合成ε-聚赖氨酸的时间，从而显著提高细胞ε-聚赖氨酸合成能力。

摘要： 本实用新型涉及一种新型的补料分批发酵系统，属于微生物发酵技术领域，所述的补料分批发酵系统包括：补料瓶、入泵管路、输送泵、补料输送管路、喷头组件和发酵罐，所述补料瓶内盛放补料培养基，所述入泵管路的一端连接所述补料瓶，所述入泵管路的另一端连接所述输送泵的进口，所述输送泵的出口连接所述补料输送管路，所述补料输送管路的另一端连接所述喷头组件，所述喷头组件安装于所述发酵罐的盖体内部；所述喷头组件包括喷头体、管路接头、喷头芯、喷头片和喷头帽，所述喷头片上设有喷孔。所述的补料分批发酵系统结构简单，可以实现补料培养基的连续流加，减少灭菌批次，物料混合效果好，生化反应速度快，发酵周期短。