β-丙氨酸

摘要： 为提高L-天冬氨酸α-脱羧酶粗酶液催化L-天冬氨酸生产β-丙氨酸的效率,研究了诱导剂添加时间、诱导剂浓度、诱导温度和培养时间对重组菌株产酶的影响,并优化了粗酶液的反应温度、pH和底物浓度等转化条件。得到最优诱导条件:在OD_(600)达到0.6左右时加入诱导剂IPTG 0.5 mmol/L、25°C下诱导表达18 h时,酶活力达到251.2 U/mL。粗酶液的最佳转化条件为反应体系10 mL中含1.5 mL粗酶液,底物质量浓度90 g/L,反应温度60°C,pH 7.5,反应3 h后β-丙氨酸产量最大,可达32.58 g/L。

摘要： β-丙氨酸作为最具开发潜力的一种三碳化工产品,具有重要的营养、药用和经济价值,市场需求量逐年增加。近年来,β-丙氨酸的合成方法在化学法和生物法均有较大的进展。化学法相对成熟;在生物法上,随着β-丙氨酸合成途径和调控机理被深入揭示,通过基因工程、基因编辑和代谢工程等方法对合成β-丙氨酸菌株的改造和生产工艺优化,也得到了一系列具有工业竞争力的菌株。该文着重于对β-丙氨酸合成的化学法和生物法合成途径、调控机理、关键酶L-天冬氨酸-α-脱羧酶和影响因素等进行系统综述,以期为β-丙氨酸合成方法的进一步创新提供基础。

摘要： D-泛酸是一种B族维生素,广泛应用于饲料、食品、医药等行业。由于化学法合成D-泛酸的成本高、环境污染大,采用生物发酵法生产D-泛酸显得尤为重要。为了实现重组大肠杆菌DPA21/pBCST3D的高产,在5 L发酵罐水平进行了发酵参数的优化,并在补料分批发酵实验中对β-丙氨酸和葡萄糖的流加方式和浓度进行优化,进一步提高了D-泛酸的产量。通过优化确定了培养条件为温度30°C、pH 6.8、溶氧15%;β-丙氨酸补料方式为与葡萄糖混合且质量浓度为40 g/L,通过比较2种不同的葡萄糖流加方式,最终选择以脉冲式5~10 g/L的补料方式进行。在以上的发酵条件下,D-泛酸的产量达到41.5 g/L,较初始条件下提高了41.3%。研究结果为D-泛酸的工业化生产奠定了基础。

摘要： 为了确定β-丙氨酸对贻贝代谢物的影响及其可能的代谢模式,本实验利用液相色谱—飞行时间质谱法对厚壳贻贝在β-丙氨酸补充后的代谢物组成及含量变化进行分析.结果显示,注射β-丙氨酸后厚壳贻贝组织代谢物发生明显变化.从中共筛选出60种差异代谢物.上述代谢物主要参与半乳糖代谢、果糖和甘露糖代谢、碳水化合物的消化与吸收以及氨基酸代谢等通路.研究表明,β-丙氨酸补充能有效提升厚壳贻贝能量代谢水平,增加肌肽及部分氨基酸含量.进一步利用氨基酸分析仪验证厚壳贻贝全组织游离氨基酸和肌肽在β-丙氨酸补充后的变化趋势,其结果与代谢组研究结果基本一致.上述结果为β-丙氨酸对贻贝代谢调节及其机制的研究奠定了基础,同时为提升贻贝养殖效率和营养价值方面的研究提供了新的思路和手段.

摘要： 原核来源L-天冬氨酸-α-脱羧酶的活性较低,是限制生物法合成β-丙氨酸的主要因素,该研究将目光由原核来源转向真核来源,意在寻找具有更高催化活性的酶.该文通过基因合成获得埃及伊蚊来源半胱亚磺酸脱羧酶,并添加sumo标签实现了其在大肠杆菌中的高效表达,酶学性质表征实验结果表明,重组酶可催化 L-天冬氨酸生成β-丙氨酸,比酶活力为(5. 00 ± 0. 074) U/mg,添加sumo标签后比酶活力为(5. 40 ± 0. 129) U/mg;最适反应条件为40 °C,pH 6. 0;带标签酶的稳定性要明显优于野生型,在 50 °C处理 30 min 后酶活力仍保留 40% ,在pH 5. 0 ～8. 0 酶活力都维持在80%左右.利用大肠杆菌自身的天冬氨酸裂解酶与重组半胱亚磺酸脱羧酶相偶联,实现了从富马酸到天冬氨酸的一步转化,产物的摩尔转化率达到93. 03% .该研究中半胱亚磺酸脱羧酶对于L-天冬氨酸具有较高的催化活性,为 β-丙氨酸的工业化生产提供理论支持和技术参考.

摘要： 将β-丙氨酸转入枯草芽孢杆菌,构建基因表达载体,优化了β-丙氨酸的密码子基因,构建出3种新型工程菌。通过比较工程菌的表达效果和可溶解性,优选出最适合菌种。

摘要： 为构建高产β-丙氨酸基因工程菌,克隆了来源于枯草芽孢杆菌的L-天冬氨酸-α-脱羧酶(panD)基因,在E.coli BL21(DE3)中异源表达,得到重组菌后,采用不同方法进行优化.通过选用不同表达载体、对目的基因序列进行密码子优化以及对菌株进行自动诱导的策略,逐步提高目的蛋白的表达量,进而提高β-丙氨酸产量.结果表明,经优化后,菌株30a-1的β-丙氨酸产量提高到140.82 mmol/L,较优化前提高了2.5倍.

摘要： L-天冬氨酸α-脱羧酶活性较低,稳定性较差,使得其在工业应用中受到限制.该研究旨在提高L-天冬氨酸α-脱羧酶的催化性能,促进生物法生产β-丙氨酸的工业化进程.依据嗜热蛋白酶的氨基酸内在进化趋势,对赤拟谷盗来源L-天冬氨酸α-脱羧酶进行分子改造,以期提高稳定性.实验共构建21个突变体,获得催化性能优良的突变体K221R,该突变体的比酶活较野生型提高20.3％;野生型经50°C处理30 min,残余酶活接近0,而突变体K221R的残余酶活为43％.建立了基因工程菌全细胞催化天冬氨酸生成β-丙氨酸的工艺,K221R菌株的产量达到134.72 g/L,摩尔转化率为94.52％,是迄今为止的最高产量.该研究构建的基因工程菌具有工业应用潜力,同时也为生物法制备β-丙氨酸提供理论与技术基础.

摘要： β-丙氨酸及其衍生物被广泛应用于医药、食品、饲料及化工等领域.β-丙氨酸的合成方法有化学法和生物法两种,通过β-氨基丙腈的水解是合成β-丙氨酸重要方法之一.然而腈类物质的化学法水解,通常需要强酸、强碱、高温等苛刻条件,反应过程中也会产生一些副产物以及大量的盐类物质,且对于环境污染较大.腈基水解酶(Ntilase,EC3.5.5.1)能够催化腈类物质直接水解生成相应的羧酸,为通过β-氨基丙腈的水解得到β-丙氨酸提供了一个温和、绿色、环境友好的合成途径.通过对实验室现有腈基水解酶筛选得到能够催化高浓度(210g/L) β-氨基丙腈的腈基水解酶，通过将腈基水解酶与天冬氨酸裂解酶的反应进行串联，消耗掉腈基水解酶催化过程中产生的NH3，解决了腈基水解酶催化过程中NH3释放对环境的污染问题，同时也有效地降低了3-氨基酞胺的生成。

摘要： β-丙氨酸及其衍生物被广泛应用于医药、食品、饲料及化工等领域.β-丙氨酸的合成方法有化学法和生物法两种,通过β-氨基丙腈的水解是合成β-丙氨酸重要方法之一.然而腈类物质的化学法水解,通常需要强酸、强碱、高温等苛刻条件,反应过程中也会产生一些副产物以及大量的盐类物质,且对于环境污染较大.腈基水解酶(Ntilase,EC3.5.5.1)能够催化腈类物质直接水解生成相应的羧酸,为通过β-氨基丙腈的水解得到β-丙氨酸提供了一个温和、绿色、环境友好的合成途径.通过对实验室现有腈基水解酶筛选得到能够催化高浓度(210g/L) β-氨基丙腈的腈基水解酶，通过将腈基水解酶与天冬氨酸裂解酶的反应进行串联，消耗掉腈基水解酶催化过程中产生的NH3，解决了腈基水解酶催化过程中NH3释放对环境的污染问题，同时也有效地降低了3-氨基酞胺的生成。

摘要： β-丙氨酸及其衍生物被广泛应用于医药、食品、饲料及化工等领域.β-丙氨酸的合成方法有化学法和生物法两种,通过β-氨基丙腈的水解是合成β-丙氨酸重要方法之一.然而腈类物质的化学法水解,通常需要强酸、强碱、高温等苛刻条件,反应过程中也会产生一些副产物以及大量的盐类物质,且对于环境污染较大.腈基水解酶(Ntilase,EC3.5.5.1)能够催化腈类物质直接水解生成相应的羧酸,为通过β-氨基丙腈的水解得到β-丙氨酸提供了一个温和、绿色、环境友好的合成途径.通过对实验室现有腈基水解酶筛选得到能够催化高浓度(210g/L) β-氨基丙腈的腈基水解酶，通过将腈基水解酶与天冬氨酸裂解酶的反应进行串联，消耗掉腈基水解酶催化过程中产生的NH3，解决了腈基水解酶催化过程中NH3释放对环境的污染问题，同时也有效地降低了3-氨基酞胺的生成。

摘要： β-丙氨酸及其衍生物被广泛应用于医药、食品、饲料及化工等领域.β-丙氨酸的合成方法有化学法和生物法两种,通过β-氨基丙腈的水解是合成β-丙氨酸重要方法之一.然而腈类物质的化学法水解,通常需要强酸、强碱、高温等苛刻条件,反应过程中也会产生一些副产物以及大量的盐类物质,且对于环境污染较大.腈基水解酶(Ntilase,EC3.5.5.1)能够催化腈类物质直接水解生成相应的羧酸,为通过β-氨基丙腈的水解得到β-丙氨酸提供了一个温和、绿色、环境友好的合成途径.通过对实验室现有腈基水解酶筛选得到能够催化高浓度(210g/L) β-氨基丙腈的腈基水解酶，通过将腈基水解酶与天冬氨酸裂解酶的反应进行串联，消耗掉腈基水解酶催化过程中产生的NH3，解决了腈基水解酶催化过程中NH3释放对环境的污染问题，同时也有效地降低了3-氨基酞胺的生成。

摘要： β-丙氨酸及其衍生物被广泛应用于医药、食品、饲料及化工等领域.β-丙氨酸的合成方法有化学法和生物法两种,通过β-氨基丙腈的水解是合成β-丙氨酸重要方法之一.然而腈类物质的化学法水解,通常需要强酸、强碱、高温等苛刻条件,反应过程中也会产生一些副产物以及大量的盐类物质,且对于环境污染较大.腈基水解酶(Ntilase,EC3.5.5.1)能够催化腈类物质直接水解生成相应的羧酸,为通过β-氨基丙腈的水解得到β-丙氨酸提供了一个温和、绿色、环境友好的合成途径.通过对实验室现有腈基水解酶筛选得到能够催化高浓度(210g/L) β-氨基丙腈的腈基水解酶，通过将腈基水解酶与天冬氨酸裂解酶的反应进行串联，消耗掉腈基水解酶催化过程中产生的NH3，解决了腈基水解酶催化过程中NH3释放对环境的污染问题，同时也有效地降低了3-氨基酞胺的生成。

摘要： β-丙氨酸及其衍生物被广泛应用于医药、食品、饲料及化工等领域.β-丙氨酸的合成方法有化学法和生物法两种,通过β-氨基丙腈的水解是合成β-丙氨酸重要方法之一.然而腈类物质的化学法水解,通常需要强酸、强碱、高温等苛刻条件,反应过程中也会产生一些副产物以及大量的盐类物质,且对于环境污染较大.腈基水解酶(Ntilase,EC3.5.5.1)能够催化腈类物质直接水解生成相应的羧酸,为通过β-氨基丙腈的水解得到β-丙氨酸提供了一个温和、绿色、环境友好的合成途径.通过对实验室现有腈基水解酶筛选得到能够催化高浓度(210g/L) β-氨基丙腈的腈基水解酶，通过将腈基水解酶与天冬氨酸裂解酶的反应进行串联，消耗掉腈基水解酶催化过程中产生的NH3，解决了腈基水解酶催化过程中NH3释放对环境的污染问题，同时也有效地降低了3-氨基酞胺的生成。

摘要： 本文在与羊毛染色相近的PH高氯酸水溶液中培养了β-丙氨酸镧的单晶,得到稀土丙氨酸的1:3型配合物的单晶结构.

摘要： 本文在与羊毛染色相近的PH高氯酸水溶液中培养了β-丙氨酸镧的单晶,得到稀土丙氨酸的1:3型配合物的单晶结构.

摘要： 本文在与羊毛染色相近的PH高氯酸水溶液中培养了β-丙氨酸镧的单晶,得到稀土丙氨酸的1:3型配合物的单晶结构.

摘要： 本发明涉及一种通过拆分外消旋化合物N-乙酰基-(D，L)-4-氰基苯丙氨酸乙酯来制备N-乙酰基-(L)-4-氰基苯丙氨酸的新方法，还涉及一种用N-乙酰基-(L)-4-氰基苯丙氨酸中间体来制备Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3)-NH2的立体异构体的新方法。

摘要： 本发明涉及选自N-棕榈酰基丙氨酸、N-棕榈酰基甘氨酸、N-棕榈酰基异亮氨酸和N-椰油酰基丙氨酸的N-酰基氨基酸作为调控表达存活蛋白的核形式的人皮肤表皮的基底角质形成细胞的比例的活性剂的用途、含有其的抗老化美容组合物以及其在实施用于维持人皮肤表皮的干细胞存活的治疗性方法中的用途。

摘要： 本发明公开了一种丙氨酸脱氢酶突变体及其在发酵生产L‑丙氨酸中的应用。本发明的丙氨酸脱氢酶突变体是将丙氨酸脱氢酶氨基酸序列的第327位的赖氨酸突变为天冬酰胺后得到的蛋白质。本发明基于代谢驯化的筛选技术获得活性显著提高的丙氨酸脱氢酶突变体，并将其用于L‑丙氨酸工程菌株的构建和L‑丙氨酸的高效发酵。实验证明：本发明提供的菌株的L‑丙氨酸产量和L‑丙氨酸脱氢酶的酶活性均大大提高，相对于表达野生型丙氨酸脱氢酶的菌株提高了88.2％，可以有效改善L‑丙氨酸工程菌株的发酵能力和L‑丙氨酸的产量，具有重大的应用价值。

摘要： 本发明公开了一种从L‑丙氨酸发酵液中分离纯化L‑丙氨酸的方法，它将采用发酵法制备的L‑丙氨酸发酵液首先经过高温灭菌，然后在发酵液中依次加入聚合氯化铝和聚丙烯酸钠作为絮凝剂除去发酵液中的无机杂质、蛋白质多糖等生物杂质，在经过脱色、浓缩重结晶后得到L‑丙氨酸粗产物，最后使用装填有阳离子交换树脂的色谱柱进行分离纯化L‑丙氨酸粗产物，得到纯度高达到99％以上的L‑丙氨酸产品，且产品的回收率达到75％以上。

摘要： 本发明涉及一种通过拆分外消旋化合物N－乙酰基－(D,L)－4－氰基苯丙氨酸乙酯来制备N－乙酰基－(L)－4－氰基苯丙氨酸的新方法,还涉及一种用N－乙酰基－(L)－4－氰基苯丙氨酸中间体来制备Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3)-NH2的立体异构体的新方法。

摘要： 本发明涉及一种使用手性二芳酰基酒石酸作为光学拆分剂对DL‑4,4'‑联苯基丙氨酸烷基酯进行光学拆分来制备D‑4,4'‑联苯基丙氨酸烷基酯或L‑4,4'‑联苯基丙氨酸烷基酯的方法。

摘要： 本发明涉及选自N-棕榈酰基丙氨酸、N-棕榈酰基甘氨酸、N-棕榈酰基异亮氨酸和N-椰油酰基丙氨酸的N-酰基氨基酸作为调控表达存活蛋白的核形式的人皮肤表皮的基底角质形成细胞的比例的活性剂的用途、含有其的抗老化美容组合物以及其在实施用于维持人皮肤表皮的干细胞存活的治疗性方法中的用途。

摘要： 本发明公开了一种高效生产L‑高苯丙氨酸的方法及一种产L‑高苯丙氨酸的菌株，本发明设计了一条以廉价的苯甲醛和丙酮酸为原料，利用级联酶法合成L‑高苯丙氨酸的新路线，通过将路径酶构建到同一株大肠杆菌中，利用获得的重组大肠杆菌进行催化，在5L反应器中进行反应，产量在100.9g/L，转化率在94％，ee99％。与目前主要的生产L‑HPA的方法相比，极大的降低了L‑高苯丙氨酸的生产成本，具有很好的应用前景。

摘要： 本发明提供了以β‑吲哚基丙氨酸为底物合成5‑羟基β‑吲哚基丙氨酸的方法及其应用。本发明提供的5‑羟基β‑吲哚基丙氨酸高产菌株，用于以β‑吲哚基丙氨酸为底物生物法合成5‑羟基β‑吲哚基丙氨酸的方法，5‑羟基β‑吲哚基丙氨酸的合成产量高。本发明通过对BH4再生系统的构建，新的BH4再生酶的挖掘，加强了工程菌株BH4的再生能力，尤其是双BH4再生系统的同时作用，显著提升了生物合成5‑羟基β‑吲哚基丙氨酸的产量。

摘要： 本发明公开了苯丙氨酸脱氢酶突变体及其在L‑高苯丙氨酸合成中的应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明通过对氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的苯丙氨酸脱氢酶的第306位、第309位、第144位、第50位的氨基酸中的一个或多个进行突变得到突变体。本发明的苯丙氨酸脱氢酶突变体表现出较高的对2‑氧代‑4‑苯基丁酸的催化效率，最高可达219.16mM‑1·s‑1，在高浓度底物下，转化率可达到99％，比时空转化率可达到30.9mmol·g‑1·L‑1·h‑1；本发明的苯丙氨酸脱氢酶突变体仍具有良好的温度稳定性。采用本发明的方法，提高了单位催化剂的生产能力和催化剂的反应效率，降低了反应的成本。