角朊细胞

摘要： 目的探讨高山灌木苏嘎纯提取液是否具有抗氧化应激作用。方法采用MTT法检测终质量浓度分别为100、50、25 mg/L的苏嘎纯提取液对角朊细胞存活率影响;利用体外培养人角朊细胞系,给予H2O 2处理造成细胞氧化应激模型,采用100mg/L的苏嘎纯提取液预先作用角朊细胞,MTT法检测细胞存活率,并用Annexin V的方法检测细胞凋亡指数。结果通过MTT法检测,发现浓度为100mg/L以下的苏嘎纯提取液对细胞生长没有明显损伤;采用100mg/L的苏嘎纯提取液预处理角朊细胞,使该细胞存活明显增加;经过Annexin V细胞凋亡检测,发现100mg/L的苏嘎纯提取液能够抑制H2O2诱导的角朊细胞凋亡。结论苏嘎提取取液具有抑制角朊细胞凋亡,拮抗氧化应激的作用。

摘要： 目的探讨高山灌木苏嘎纯提取液是否具有抗氧化应激作用。方法采用MTT法检测终质量浓度分别为100、50、25 mg/L的苏嘎纯提取液对角朊细胞存活率影响;利用体外培养人角朊细胞系,给予H2O 2处理造成细胞氧化应激模型,采用100mg/L的苏嘎纯提取液预先作用角朊细胞,MTT法检测细胞存活率,并用Annexin V的方法检测细胞凋亡指数。结果通过MTT法检测,发现浓度为100mg/L以下的苏嘎纯提取液对细胞生长没有明显损伤;采用100mg/L的苏嘎纯提取液预处理角朊细胞,使该细胞存活明显增加;经过Annexin V细胞凋亡检测,发现100mg/L的苏嘎纯提取液能够抑制H_2O_2诱导的角朊细胞凋亡。结论苏嘎提取取液具有抑制角朊细胞凋亡,拮抗氧化应激的作用。

摘要： 目的：：探讨自体角朊细胞表达的B7-H1分子在混合皮肤移植中的作用和相关机制。方法：体外模拟混合皮肤移植模拟系统( MELC体系),通过流式细胞术检测角朊细胞B7-H1和淋巴细胞PD-1的表达。同时,实时荧光定量PCR检测淋巴细胞IL-10、Foxp3、GATA-3 mRNA的表达。结果：流式细胞仪检测结果显示,在有自体角朊细胞参与的MELC体系中,随着作用时间增加,角朊细胞上B7-H1的表达和淋巴细胞上PD-1的表达水平均明显升高,且具有时间依赖性(P<0.01)；实时荧光定量PCR检测结果显示,随着作用时间增加,与无自体角朊细胞参与的MELC体系相比,在自体角朊细胞参与的MELC体系中,淋巴细胞IL-10、GATA-3、Foxp3 mRNA的表达水平均明显升高,且具有时间依赖性( P<0.01)。结论：在体外混合皮肤移植模拟系统中,自体角朊细胞通过表达共刺激分子B7-H1,上调淋巴细胞表面PD-1的表达,二者相结合,诱导Th2细胞和Foxp3+的Treg细胞分化,从而负向调节免疫反应。%Objective:To explore the role and mechanism of the B7-H1 expressed by auto-keratinocytes in the intermingled skin grafting model in vitro(MELC). Methods:The intermingled skin grafting model(MELC) was established in vitro. Flow cytometry was performed to detect the expressions of B7-H1 in keratinocytes. The expressions of PD-1 in lymphocytes were measured at the same time. The levels of IL-10,Foxp3 and GATA-3 mRNA in lymphocytes were detected by Real-time quantitative PCR. Results: Through flow eytometry,in the MELC with auto-keratinocytes,the expression of B7-H1 in auto-keratinocytes and the PD-1 in lymphocytes were rising trend and the rising rate was in time-dependent manners(P<0. 01). RT-PCR assay indicated that the relative levels of IL-10, Foxp3,GATA-3mRNA expression were significant raised and the rising rate was in time-dependent manners (P<0. 01). Conclusion:In the intermingled skin grafting model,the auto-keratinocytes could express B7-H1 to enhance the expression of PD-1 in T cells. When B7-H1 combined with PD-1,the Th2 cells and Foxp3+Tregs were induced and suppressed the immune response in the intermingled skin grafting model.

摘要： 目的：探讨 IKKɑ调控表皮角朊细胞的增殖和分化及与 p63的关系。方法原代分离培养野生型（wildtype， WT）和 Ikkɑ基因敲除小鼠（Ikkα-／-）的表皮角朊细胞（WT-KTC 及 Ikkα-／-KTC），Western blot 检测 Ikkα-／-中 p63的表达。含0．5mM Ca2＋培养基刺激分化后，免疫荧光染色观察分化标记物 Zonula occludens-1（ZO-1）及增殖标记物 BrdU 的表达。制备沉默 p63表达的慢病毒并感染 Ikkα-／-KTC，观察其增殖及分化能力的变化。结果在正常培养条件下，Ikkα-／-KTC中 BrdU 阳性细胞率显著高于 WT-KTC（P ＜0．05）。Ikkα-／-KTC 中 p63高表达。高钙条件刺激分化后，WT-KTC 中 Br-dU 表达显著降低，表达 ZO-1；而 Ikkα-／-KTC 的 BrdU 表达无明显变化；且无 ZO-1的表达。将表达 shRNA p63的慢病毒感染 Ikkα-／-KTC 沉默 p63后，含0．5 mM Ca2＋培养基刺激细胞，Ikkα-／-KTC 中 BrdU 的表达显著降低，不表达分化标记物 ZO-1。结论IKKɑ调控表皮角朊细胞的增殖和分化，且其对增殖的调控通过 p63信号通路。%Objective The purpose of this study is to discuss the regulation of IKKɑon the proliferation and differ-entiation of keratinocytes and its relationship with p63 pathway.Methods The keratinocytes was separated and cul-tured from wild-type (WT-KTC)and Ikkɑknockout mice (Ikkα-/-KTC),and p63 expression was detected by Western blot in those cells.WT-KTC and Ikkα-/-KTC were stimulated with the medium including high calcium (0.5 mM).It was observed and compared between WT-KTC and Ikkα-/-KTC that the expression of Zonula occludens-1 (ZO-1)and BrdU by immunofluorescence staining,as well as p63 expression by Western blot.The proliferation and differentiation of Ikkα-/-KTC under the high calcium condition were evaluated after infected with the lentivirus expressed the p63-spe-cific shRNA.Results Under the normal cultured condition,the BrdU positive ratio of Ikkα-/-KTC and p63 expression were significantly higher than that of WT-KTC.With the high calcium stimulation,the BrdU positive ratio was decreased and ZO-1 expression was detected in WT-KTC,however,there was no ZO-1 expression and no change of the BrdU positive ratio in Ikkα-/-KTC.When the Ikkα-/-KTC were infected with the lentivirus expressed p63-specific shRNA and stimulated with high calcium,the BrdU expression was inhibited,while there was still no ZO-1 expression.Conclusion IKKɑregulates the prolifera-tion and differentiation of keratinocytes,and the effect on proliferation is through p63 pathway.

摘要： 目的 观察不同浓度人羊膜匀浆上清液(hAHS)对体外培养的SD大鼠角朊细胞生长的影响.方法 取SD大鼠背部皮肤,采用中性蛋白酶与胰蛋白酶复合消化的方法,分离第一代角朊细胞.将新鲜人羊膜制备成hAHS,采用考马斯亮蓝法、酶联免疫吸附试验分别测定hAHS中总蛋白含量和表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)的浓度.用不同浓度hAHS对第一代角朊细胞进行体外培养:将细胞以2.5 ×104个/mL密度接种于96孔板中(每孔100 μL),随机数字表法将其分为体积分数0(对照组)及10％、15％、20％、25％ hAHS组,用含10％胎牛血清低糖培养基培养24 h后,根据hAHS在低糖DMEM培养基中的不同体积分数进行换液,分别于培养即刻和培养24、48、96 h,用噻唑兰法检测各孔的吸光度值并绘制角朊细胞的生长曲线和计算各组细胞增殖率.采用SPSS13.0统计软件进行分析,各不同体积分数hAHS组的数据与对照组比较采用Dunnett-t检验.结果 hAHS中总蛋白含量为(675.435 ±9.215)×10-3 g/L,EGF、bFGF和VEGF的浓度分别为(470.625±2.546)×10-6、(4.121 ±0.026)×10-6和(0.172 ±0.002)×10-6g/L.与对照组比较,10％ hAHS组培养48、96 h角朊细胞增殖率明显高于对照组,差异均有显著性统计学意义(=4.644、9.694,P值均小于0.01),15％ hAHS组培养48、96 h角朊细胞增殖率均明显高于对照组,差异均有显著性统计学意义(t=4.766、6.648,P值均小于0.01);20％ hAHS组培养24 h角朊细胞增殖率高于对照组,差异有统计学意义(t=2.272,P＜0.05),培养48、96 h增殖率均明显高于对照组,差异有显著性统计学意义(t=5.027、8.861,P值均小于0.01);25％ hAHS组培养48 h增殖率低于对照组,差异有统计学意义(=2.188,P＜0.05),培养96 h增殖率明显低于对照组,差异有显著性统计学意义(t=5.147,P＜0.01).结论 体积分数10％、15％、20％ hAHS对体外培养的角朊细胞增殖有明显促进作用,且促增殖的效果随hAHS体积分数的增加而增强,但hAHS的体积分数在25％时角朊细胞的增殖受到抑制,平稳期相对缩短.

摘要： 目的 观察化浊解毒方对黄褐斑模型小鼠用药前后角朊细胞中c-myc基因表达的影响.方法 采用紫外线照射法造小鼠黄褐斑模型30只,用免疫组化方法检测小鼠模型皮损角朊细胞中c-myc基因的表达,并与正常对照组比较.测定给予化浊解毒方后c-myc基因表达的变化.结果 与正常对照组比较,小鼠黄褐斑模型皮损处c-myc基因表达明显增多(P＜0.05);经化浊解毒方治疗后,c-myc基因表达明显下降,但与正常对照组比较无显著性差异(P＞0.05).结论 化浊解毒方可能是通过降低表皮角朊细胞中c-myc基因的表达产生治疗效果.

摘要： 目的 观察硫化氢(H2S)对丙酮醛(MGO)诱导的人皮肤角质形成细胞(HaCaT)损伤的影响.方法 HaCaT细胞分为MGO组、对照组和MGO+NSHD(H2S供体)组.MGO组用200、400、600 μmol/LMGO处理HaCaT细胞48 h造成细胞损伤;对照组给予等体积培养基;MGO+NSHD组应用400 μmol/LMGO处理,48 h前用50、100、200μmol/LNSHD预处理1h.通过CCK-8检测各组细胞活性.HaCaT细胞经100 μmol/LNSHD预处理1h,用20 μmol/L的H2S荧光探针WSP-1染色结合荧光照相术检测NSHD预处理1h组和对照组培养基和细胞内的H2S含量.将HaCaT细胞分为MGO组、MGO+NSHD组、NSHD组和对照组.MGO组仅用400 μmol/L MGO处理48 h;MGO+NSHD组在400 μmol/L MGO处理48 h前用100 μmol/L NSHD预处理1 h;NSHD组的细胞仅用100 μmol/L NSHD处理1h;对照组则给予等体积培养基.Hoechst 33258核染色结合荧光照相术检测细胞凋亡.Rh123染色结合荧光照相术检测线粒体膜电位(MMP).结果 HaCaT细胞经200、400和600 μmol/L MGO处理48 h,细胞活性依次为0.325±0.023、0.224±0.009和0.095±0.102,均低于对照组0.415±0.031(F=37.866,P＜0.05),其中400 μmol/LMGO组细胞活性约为对照组的1/2,选用此浓度的MGO作为有效损伤浓度.100 μmol/L NSHD处理1h可使培养基和细胞内的H2S含量较对照组均增加.在400μmol/L MGO处理48 h前,分别用50、100和200 μnol/L NSHD预处理1h,细胞活性依次为0.235±0.028、0.314±0.017、0.346±0.020,均高于单独400μmol/L MGO处理组0.224±0.009(F=61.209,P＜0.05).400 μmol/L MGO处理48 h后细胞凋亡率高于对照组和NSHD组[(32.6±3.5)％比(5.1±1.2)％、(3.4±0.8)％,均P＜0.05],MMP低于对照组和NSHD组(28.5±2.9比46.1±3.8、48.6±4.3,均P＜0.05).MGO+ NSHD组细胞凋亡率(18.3±2.6)％,低于MGO组但高于对照组和NSHD组(均P＜0.05),MMP为38.9±3.2,高于MGO组但低于对照组和NSHD组(均P＜0.05).结论 NSHD能通过释放H2S拮抗MGO诱导的皮肤细胞损伤.%Objective To investigate the effects of hydrogen sulfide (H2S) on methylglyoxal (MGO)-induced human skin keratinocytes (HaCaT cells) injury.Methods HaCaT cells were assigned to control group,MGO group and MGO+NSHD(H2S donor) group.The MGO group was treated with 200,400 and 600 μmol/L MGO for 48 h to induce cell injury.Control group was treated with an aliquot of plain culture medium.In the MGO +NSHD group,before treatment with 400 μmol/L MGO for 48 h,the cells were preconditioned with 50,100 and 200 μmol/L NSHD for 1 h to examine the protective effects of H2S according to cell viability as measured by cell counting kit 8.After treatment with 100 μmol/L NSHD for 1 h,the levels of H2S in medium and cells of NSHD and control groups were assayed with 20 μmol/L WSP-1,the H2S fluorescent probe,for photofluorography.HaCaT cells were assigned to control group,MGO group,NSHD group and MGO+NSHD group.The MGO group was treated with 400 μmol/L MGO for 48 h to induce cell injury.Control group was treated with an aliquot of plain culture medium.In the MGO+NSHD group,before treatment with 400 μmol/L MGO for 48 h,the cells were preconditioned with 100 μmol/L NSHD,NSHD group was treated with only 100 μmol/L NSHD for 1 h.Cellular apoptosis and mitochondrial membrane potential (MMP) were observed by Hoechst 33258 and Rh123 staining followed by photofluorography respectively.Results Treatment with 200,400 and 600 μmol/L MGO for 48 h,were attenuated HaCaT cell viability 0.325±0.023,0.224±0.009 and 0.095±0.102 compared with control group 0.415±0.031 (F=37.866,P ＜ 0.05).Both in medium and in cells of NSHD group,the content of H2S was enhanced after treatment with 100 μmol/L NSHD for 1 h compared with control group.The viability in 400 μmol/L MGO treatment for 48 h group was halved compared with control group,and therefore 400 μmol/L was deemed the optimal concentration for MGO treatment.Before treatment with 400 μtmol/L MGO for 48 h,the cells were preconditioned with 50,100 and 200 μmol/L NSHD for 1 h,with the viability being 0.235±0.028,0.314± 0.017 and 0.346±0.020 respectively,There were higher than that in the individual 400 μmol/L MGO group (F=61.209,P ＜ 0.05).Compared with control and NSHD groups,The treatment with 400 μmol/L MGO for 48 h increased the apoptotic rate from (5.1±1.2)％,(3.4±0.8)％ to (32.6±3.5)％,and decreased the MMP from 46.1±3.8,48.6±4.3 to 28.5±2.9 (all P＜0.05).Prior to treatment with 400 μmol/L MGO for 48 h in the presence of preconditioning with 100 μmol/L NSHD for 1 h,the apoptotic rate was decreased to (18.3±2.6)％ and the MMP was increased to 38.9±3.2.The apoptotic rate in MGO+NSHD group was lower than that in MGO group but higher than those in control group and NSHD group.The MMP in MGO+NSHD group was higher than that in MGO group but lower than those in control group and NSHD group (all P＜0.05).Conclusion NSHD protects human skin keratinocytes from MGO-induced injury via release of H2S.

摘要： 目的 探讨离子微电流对体外培养角朊细胞增殖的作用.方法 建立HaCaT角朊细胞增殖的体外培养模型,观察不同浓度硝酸银溶液产生的离子电流对HaCaT细胞增殖的影响.结果不同浓度AgNO3溶液产生的离子电流微电流对HaCaT细胞增殖影响有显著性差异.结论 离子微电流对HaCaT细胞增殖有促进作用.

摘要： 背景：皮肤真皮组织是皮肤损伤修复时除表皮基底层以外可形成表皮层结构的重要干细胞来源。目的：探索从人皮肤真皮组织中分离培养角朊干细胞样细胞的新方法。方法：将一定大小的成人腹部全层皮肤组织用Dispase过夜消化后去除表皮层结构，然后用0．1％I型胶原酶过夜消化，离心分离以获取真皮来源总细胞。将分离的细胞用含有体积分数1％N2，2％B27，20μg／L表皮生长因子和40pg／L碱性成纤维细胞生长因子的DMEM／F12（1：1）无血清培养液悬浮后以低密度接种于培养皿进行培养。采用RT-PCR和免疫细胞荧光染色法对其进行分析。结果与结论：RT-PCR分析结果显示所分离的真皮细胞中含有表达Lgr5和Lirgl等特异基因的毛囊来源干细胞；免疫细胞荧光分析结果显示其表达细胞角蛋白8和细胞角蛋白14。在无血清条件下培养6d时，可观察到表达细胞角蛋白14和整合素α6的“铺路石”样细胞克隆。进行传代培养后P1细胞表达角朊干细胞标志物CD29、细胞角蛋白14和P63。传代培养至P3，4时大部分细胞分化，不能继续传代。结果证实，以无血清培养液结合低密度培养法可直接从人真皮组织中有效地培养增殖活跃、细胞角蛋白14和P63阳性的角朊干细胞样细胞。

摘要： 背景：皮肤真皮组织是皮肤损伤修复时除表皮基底层以外可形成表皮层结构的重要干细胞来源。目的：探索从人皮肤真皮组织中分离培养角朊干细胞样细胞的新方法。方法：将一定大小的成人腹部全层皮肤组织用 Dispase 过夜消化后去除表皮层结构，然后用0.1%Ⅰ型胶原酶过夜消化，离心分离以获取真皮来源总细胞。将分离的细胞用含有体积分数1% N2，2% B27，20μg/L表皮生长因子和40μg/L 碱性成纤维细胞生长因子的DMEM/F12(1∶1)无血清培养液悬浮后以低密度接种于培养皿进行培养。采用RT-PCR和免疫细胞荧光染色法对其进行分析。结果与结论：RT-PCR分析结果显示所分离的真皮细胞中含有表达Lgr5和Lirg1等特异基因的毛囊来源干细胞；免疫细胞荧光分析结果显示其表达细胞角蛋白8和细胞角蛋白14。在无血清条件下培养6 d时，可观察到表达细胞角蛋白14和整合素α6的“铺路石”样细胞克隆。进行传代培养后P1细胞表达角朊干细胞标志物CD29、细胞角蛋白14和P63。传代培养至P3，4时大部分细胞分化，不能继续传代。结果证实，以无血清培养液结合低密度培养法可直接从人真皮组织中有效地培养增殖活跃、细胞角蛋白14和P63阳性的角朊干细胞样细胞。%　　BACKGROUND: Skin dermis is an essential stem cel source, except basal layer of epidermis, for forming epidermis structure during the process of skin wound healing. OBJECTIVE: To explore a new method for isolating and culturing keratinocyte-stem like cel s from human skin dermis. METHODS: Definitive sizes of ful skins from adult abdomen were digested with dispase overnight and the epidermal structure was discarded. The remaining dermis were digested with 0.1% type I col agenase overnight. Thereafter, the digested cel s were col ected by centrifugation, suspended in serum-free Dulbecco’s modified Eagle’s mediumutrient mixture F12 (1:1) containing 1% N 2 , 2% B27, 20 μg/L epidermal growth factor, 40 μg/L basic fibroblast growth factor, and cultured at a low cel density. The isolated and cultivated cel s were analyzed by reverse transcription-polymerase chain reaction and immunofluorescence analysis. RESULTS AND CONCLUSION: The reverse transcription-polymerase chain reaction analysis showed that, the cel s isolated from dermis contained hair fol icle stem cel s expressing Lgr5 and Lirg1. The immunofluorescence analysis showed that, the cel s isolated from dermis expressed cytokeratin 8 and cytokeratin 14. After cultivated in serum-free media for 6 days, some cytokeratin 14 and integrin-α6 positive cel colonies appeared “paving stone” like morphology. The passage 1 cel s expressed keratinocyte stem cel markers, such as cytokeratin 14, CD29 and P63. The cel proliferation rate was declined with passage times and almost al cel s were terminal y differentiated at passage 3 or 4. Experimental findings indicate that, keratinocyte stem-like cel s expressing CD29, cytokeratin 14 and P63 can be successful y isolated from human skin dermis by directly cultured at a low density and in serum-free media.

摘要： 本文观察不同浓度人羊膜匀浆上清液(hAHS)对体外培养的SD大鼠角朊细胞生长的影响.取SD幼鼠背部皮肤,采用中性蛋白酶与胰蛋白酶复合消化的方法,分离原代角朊细胞.将新鲜人羊膜制备成hAHS,用考马斯亮蓝法、ELISA法分别测定hAHS中总蛋白含量和表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)的浓度.用不同浓度hAHS对第一代角朊细胞进行体外培养:将细胞以2.5×104个·mL1密度接种于96孔板中,每孔加100μL,含10％FBS低糖培养基孵育24h后,根据hAHS在低糖DMEM培养基中的不同体积分数(0、10、15、20、25％)进行换液,于孵育后第0、24、48、96h用噻唑兰法检测各孔的吸光度(A)值并绘制角朊细胞的生长曲线和计算各组细胞增殖率.

摘要： 雷公藤具有多种免疫调节作用,在临床上,多用于免疫性疾病,包括对银屑病的治疗中,取得了相当肯定的疗效.本文介绍了从雷公藤中提取的两种新的单体TRY-16和TZ-93对成纤维细胞和角朊细胞的免疫特性及增殖的影响的研究情况.

摘要： 目的:观察大鼠角朊细胞增殖活性的影响因素.方法:将传代培养的第2代大鼠角朊细胞(KC),以含有新生牛血清的DMEM-F12培养基进行无滋养层法培养,当细胞培养至对数生长期时,分别改用含有不同浓度表皮生长因子(EGF)、肝细胞生长因子(HGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、霍乱毒素(CT)、氢化可的松(HVB)、胰岛素(Insulin)、三碘甲腺原氨酸(T)的培养液继续培养,以MTT法测定细胞增殖活性.结果:EGF、HGF、FGF、CT、HVB、Insulin、T对KC的增殖均具有不同程度的促进作用.结论:采用无滋养层法培养大鼠表皮角朊细胞时,在培养液中加入一定浓度的EGF、HGF、FGF、CT、HVB、Insulin、T是必要的.

摘要： 本文利用扫描电镜观察角朊细胞在人羊膜上的生长情况,确立角朊细胞在HAM上的合适接种密度和培养时间,为HAM负载角朊细胞构建皮肤表皮替代物修复创伤提供依据.

摘要： 目的：探讨人表皮干细胞体外分离、培养和鉴定的技术方法,为组织工程皮肤的构建提供种子细胞. 方法：用DispaseII酶和胰蛋白酶两步法分离出角朊细胞和成纤维细胞,并制备改良的表皮干细胞培养基,置培养箱内培养分离的角朊细胞片,37C,静置lOmin,留用贴壁细胞,Ⅳ型胶原快速粘附法富集分离继续培养,所得细胞分别以能否呈克隆状生长,β1整合素、角蛋白19(K19)免疫细胞化学染色进行鉴定。 结果：人胎盘Ⅳ型胶原包被的培养瓶内快速贴壁细胞继续培养24 h后细胞呈克隆状生长；β1整合素、Kl9免疫细胞化学染色呈阳性。 结论：人表皮干细胞在体外成功得到分离与培养,为其体外的大量扩增奠定了基础。

摘要： 目的：构建含有人内皮抑素(Endostatin，ES)基因的重组腺病毒Ad/hEnd，并探讨与感染该病毒的角朊细胞共培养时内皮细胞增殖特性的改变。rn 方法：以人胎肝组织mRNA为模板，通过RT-PCR及PCR获得ES基冈序列，插入到腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中，获得重组质粒pAdTrack-ES。经鉴定后将阳性重组子转化至pAdeasyl受体菌，筛选阳性克隆。脂质体介导转染293细胞，获取Ad/hEnd，经PCR鉴定及上清中ES含量检测后。感染角朊细胞，并采用套皿法与内皮细胞共培养，测定培养液中ES含量、内皮细胞凋亡及细胞抑制率。rn 结果：成功获取Ad/hEnd，病毒滴度可达1.65×1012 PFU/L。感染Ad/hEnd的角朊细胞可有效表达并分泌ES，连续培养3 d后，培养液中ES含量可达226 ng/ml；与转基因角朊细胞共培养的内皮细胞凋亡百分数与抑制率分别为[(32.7±7.1)％，(60.5±8.3)％]，均显著高于对照组[(7.3±2.0)%,(13.8±1.6)%]。rn 结论：与内皮细胞共培养时，转Ad/hEnd角朊细胞可通过分泌ES促进内皮细胞凋亡，并抑制其增殖。

摘要： 20世纪80年代中期之前,角朊细胞是银屑病研究的重点,临床和组织表型都显示角朊细胞增殖和分化异常.然而,后来研究发现,如果清除了银屑病斑块中活化的T淋巴细胞,角朊细胞的增殖和分化会回归正常,这说明角朊细胞的异常是可逆的.80年代中期以后,人们逐渐发现T淋巴细胞在银屑病发病机制中的关键作用.系统应用T淋巴细胞生长因子IL-2或IFN-γ或IFN-α,可以使银屑病恶化.而免疫抑制剂环孢菌素A在治疗银屑病方面所取得的显著临床疗效,更使人们将研究工作的重点放在T淋巴细胞上,本文介绍T淋巴细胞与银屑病发病的关系的研究进展.

摘要： 寻常型银屑病是一种常见的慢性炎症性增生性皮肤病,临床表现为皮肤反复发生红斑鳞屑.其主要病理变化表现为角朊细胞的过度增生和异常分化,以及炎性细胞浸润、毛细血管异常增殖.中医称之为"白疕",目前将患者的临床症状主要辨证分为血热、血瘀、血虚三型,并分别以清热凉血、活血化瘀、养血润燥为治疗原则.但由于中医分型缺乏客观的实验室具体指标,并未建立传统中医证型的银屑病模型,因此中医治疗寻常型银屑病的基础研究进展缓慢.建立和应用银屑病的中医动物模型,研究中医药治疗寻常型银屑病的机理、疗效,使中医研究银屑病的发展走上科学的道路,其重要性日益昭显.

摘要： 本发明涉及一种基于废弃角朊的生物塑料的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下工艺步骤：废弃角朊→120～135°C高温热水处理→烘干→粉碎至颗粒尺寸为5～200μm→添加甘油、乙二醇、丙二醇等增塑剂的一种并进行混合→二次烘干→在热压温度150～165°C、热压压力30～70MPa条件下热压成型8～20min→自然冷却→废弃角朊生物塑料。所制备的角朊生物塑料透明性好，成本低廉，安全无毒，可用于家居、装饰、生物医用等领域。该发明不仅可使大量的废弃羊毛、禽类羽毛等角朊材料得到有效利用，而且可减少不可降解塑料带来的环境问题。

摘要： 本发明为一种制取纯羊毛角朊蛋白溶液制品的方法。所述的角朊蛋白溶液是由含二硫键断开剂及强极性的中性助剂和羊毛组成的中性溶解液，经过滤，透析，浓缩而制成，为无色无味的透明角朊蛋白溶液。所述的羊毛角朊蛋白膜、粉末和块状物是由羊毛角朊蛋白溶液的提纯、固化成形，或对其固化物粉碎或粉体化加工制成。所述的增塑羊毛角朊蛋白是由羊毛角朊蛋白溶液与增塑剂混合制成。本发明也可用于羊绒、牦牛毛、牦牛绒、驼毛、驼绒及其他动物毛发类纤维等的溶解液。

摘要： 本发明为一种从羊毛中溶解羊毛角朊蛋白的助剂，及其制备方法和用途，属制取纯羊毛及其它角朊纤维蛋白溶液，角朊蛋白膜、粉末和块状物及其增塑角朊蛋白的技术。所述的助剂由溶剂、开键还原剂、表面活性剂、交联剂和水组成。其重量百分比分别为：溶剂5%～25%、还原剂10%～20%、表面活性剂0.5%～5%、交联剂大于0至等于或小于8%，其余为水。制备方法是将羊毛浸于所配制的助剂中溶解，溶解温度为50～80°C，溶解时间为4～10小时，并过滤去杂为角朊蛋白溶解液。所述助剂也适用于羊绒、牦牛毛、牦牛绒、驼毛、驼绒及其他动物毛发类角朊蛋白纤维等。

摘要： 本发明公开了一种角朊蛋白基因修饰小鼠动物模型的构建方法和应用。在角朊蛋白基因hornerin的第三外显子中插入荧光蛋白编码基因Tdtomato和终止子序列WPRE，使得hornerin基因不表达主要蛋白功能单元而表达Tdtomato，达到hornerin基因功能缺失的效果。本发明按照独特的方法构建成功KO小鼠动物模型，实现了生物工具的制备，具有很好的应用价值，可用于发病机制及药物的筛选。

摘要： 本发明涉及一种基于废弃角朊的生物塑料的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下工艺步骤：废弃角朊→120～135°C高温热水处理→烘干→粉碎至颗粒尺寸为5～200μm→添加甘油、乙二醇、丙二醇等增塑剂的一种并进行混合→二次烘干→在热压温度150～165°C、热压压力30～70MPa条件下热压成型8～20min→自然冷却→废弃角朊生物塑料。所制备的角朊生物塑料透明性好，成本低廉，安全无毒，可用于家居、装饰、生物医用等领域。该发明不仅可使大量的废弃羊毛、禽类羽毛等角朊材料得到有效利用，而且可减少不可降解塑料带来的环境问题。

摘要： 本发明公开了一种氧化法制备羊毛角朊蛋白溶液的方法，本发明旨在提供一种能保持羊毛原有的理化性能、提高溶解度，降低氧化法溶解的温度的氧化法制备羊毛角朊蛋白溶液的方法。第一步，羊毛清选，即把羊毛经过洗涤然后烘干即可；第二步，羊毛溶解液的制备，H2O2在搅拌状态下加入脲，经过反应得过氧化氢脲加合物；把上述制得的过氧化氢脲加合物与蒸馏水混合，并在搅拌状态下加入阴离子表面活性剂，得无色透明液体；将上述制得的无色透明液体放入上述制得的羊毛，该液体与羊毛的重量比为5－20∶1，保持搅拌状态，缓慢升温至65－85°C，经过4－6小时以后，得淡黄色半透明液体，过滤出羊毛中的不可溶杂质，即制得羊毛角朊蛋白溶液。该方法具有工艺简单、成本低等特点。

摘要： 本发明为一种从羊毛中溶解羊毛角朊蛋白的助剂，及其制备方法和用途，属制取纯羊毛及其它角朊纤维蛋白溶液，角朊蛋白膜、粉末和块状物及其增塑角朊蛋白的技术。所述的助剂由溶剂、开键还原剂、表面活性剂、交联剂和水组成。其重量百分比分别为：溶剂5％～25％、还原剂10％～20％、表面活性剂0.5％～5％、交联剂0～8％，其余为水。制备方法是将羊毛浸于所配制的助剂中溶解，溶解温度为50°C～80°C，溶解时间为4～10小时，并过滤去杂为角朊蛋白溶解液。所述助剂也适用于羊绒、牦牛毛、牦牛绒、驼毛、驼绒及其他动物毛发类角朊蛋白纤维等。

摘要： 本发明为一种制取纯羊毛角朊蛋白溶液，角朊蛋白膜、粉末和块状物及其增塑羊毛角朊蛋白的方法。所述的角朊蛋白溶液是由含二硫键断开剂及强极性的中性助剂和羊毛组成的中性溶解液，经过滤，透析，浓缩而制成，为无色无味的透明角朊蛋白溶液。所述的羊毛角朊蛋白膜、粉末和块状物是由羊毛角朊蛋白溶液的提纯、固化成形，或对其固化物粉碎或粉体化加工制成。所述的增塑羊毛角朊蛋白是由羊毛角朊蛋白溶液与增塑剂混合制成。本发明也可用于羊绒、牦牛毛、牦牛绒、驼毛、驼绒及其他动物毛发类纤维等的溶解液。

摘要： 本发明属于器官再生技术，具体说，本发明涉及利用角朊细胞干细胞和牙髓干细胞进行牙齿再生的技术。本发明的技术方案：从臼牙中取出牙髓组织，经消化酶消化后，转入培养液中培养；培养24h后，用PBS洗涤三次，去除末贴壁细胞，贴壁生长的细胞继续培养至14－16天时，进行传代培养；牙髓干细胞经生长因子BMP4和FGF10诱导24h后将体外培养的角朊细胞干细胞和牙髓干细胞进行重组，形成重组团块；将重组团块置于37°C5％CO

摘要： 本发明属于器官再生技术，具体说，本发明涉及一种利用角朊细胞干细胞和牙间充质进行牙齿再生的技术。其特征是取小鼠胚胎磨牙牙胚，经消化液消化后，分离间充质，将角朊细胞干细胞覆盖在牙间充质表面构成重组块，加入含胎牛血清的DMEM培养液过夜培养。最后将重组块移植到裸鼠体内的肾囊膜，经培养4－6周后，移植的重组块逐步发育形成牙齿。本发明利用角朊细胞干细胞进行牙齿的再生，角朊细胞干细胞可以从组织中分离培养，也可根据公开的技术手段通过体外大量培养得到，大大扩大了材料的来源，因此，材料来源极为丰富，方便推广使用。本发明可应用于哺乳类生物牙齿的再生，特别是人类牙齿的再生。如将重组植块移植到人的牙床内培养，将能进行牙齿再生。