原位杂交法

摘要： 菌根真菌可与植物根系形成菌根共生体,从而影响植物生长发育.绝大多数菌根真菌促进植物生长,并能够促进植物抵御环境胁迫,因而了解菌根真菌在植物根部的定殖具有重要意义.本文对锥虫蓝染色法、免疫组化及免疫荧光技术、原位杂交这几种主要的菌根真菌定殖检测技术进行了介绍,并对各方法的特点进行了评述.

摘要： 目的:探讨白血病患者骨髓中血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)及CD105表达与髓血屏障调节机制的关系.方法:采用ELISA检测63例白血病患者骨髓中VEGF、bFGF、sICAM-1表达,采用原位杂交法,用CD105标记骨髓活化的血管内皮细胞.结果:急性髓系白血病患者VEGF、bFGF、sICAM-1、CD105表达高于对照组,急性淋巴细胞白血病患者中B-ALL的VEGF、bFGF、sICAM-1、CD105表达高于对照组,T-ALL的bFGF、CD105表达高于对照组,差异均具有统计学意义(P＜0.05);VEGF、sICAM-1表达与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);慢性粒细胞白血病患者VEGF、bFGF、sICAM-1、CD105表达高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05);慢性淋巴细胞白血病患者sICAM-1表达高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05),VEGF、bFGF、CD105表达与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:骨髓VEGF、bFGF、sICAM-1及CD105表达在不同类型白血病中水平不同,并影响白血病患者髓血屏障的正常调节机制.

摘要： 目的:建立抗丙型肝炎病毒(HCV)复制调控区体外药物筛选模型.方法:将全长HCV的5'非翻译区(5' UTR)的cDNA克隆至启动子探测载体pEGFP-1,构建重组载体p5'NCR-EGFP,并转染至人肝癌细胞系HepG2.获得的转染细胞以荧光显微镜检测及原位杂交法验证,并经流式细胞术分选.通过干扰素与利巴韦林2种常规抗病毒药物对所构建的模型进行初步应用.结果:荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白(EGFP)的强表达,原位杂交检测到转染细胞的核区有特异性杂交信号.流式细胞术可检测到表达EGFP的阳性细胞达95％以上.初步运用结果显示,γ干扰素对该模型有明显的抑制作用,而利巴韦林及α-2b干扰素在本模型上的抑制作用较弱.结论:该细胞模型经验证可以成为体外筛选抗HCV复制调控区药物的模型.

摘要： 目的：探讨人乳头瘤病毒(匀孕灾)16/18型与宫颈癌(cervical carcinoma，悦悦)的关系。方法选择2011年1月至2013年10月在我院手术切除的120例宫颈病变组织标本，采用原位杂交法(陨杂匀)检测匀孕灾16/18的阅晕A表达。结果不同宫颈组织的匀孕灾16、匀孕灾18的阳性检出率，组间比较差异均有统计学意义(孕0.05)。匀孕灾18阳性检出率：A哉悦明显高于杂悦悦、悦陨晕、晕悦，差异均有统计学意义(孕0.05)。在杂悦悦、A哉悦中，就高、中、低分化的匀孕灾16、匀孕灾18的阳性检出率，组间比较差异均无统计学意义(孕>0.05)。结论匀孕灾16/18感染是悦悦的高危因素，可以客观反映出宫颈恶性病变的程度，而匀孕灾型别可以反映出癌组织病理学类型，值得深究。%Objective To explore the relationship between HPV16/18 and cervical carcinoma (CC). Methods The clinical data of 120 cervical specimens from January 2011 to October 2013 were chosen to detect the expression of HPV16/18 DNA by in situ hybridization (ISH). Results HPV16/18 positive detection rates of different cervical cancers had significant difference (P 0.05). HPV18 positive detection rate:AUC was significantly higher than SCC, CIN and NC, with significant difference between them (P0.05). In SCC and AUC , the well-differentiated, moderately differentiated and poorly differentiated HPV16/18 positive detection rates had no significant difference (P >0.05). Conclusions HPV16/18 infection is a risk factor of CC, which can objectively reflect the degree of cervical lesions. HPV type can reflect the typology of cancer tissue, which is worthy of further study.

摘要： 目的 探讨半乳糖凝集素(Galeetin)3、基质金属蛋白酶(MMP) 2mRNA在胶质瘤细胞中的表达及二者在胶质瘤的发生及恶性进展中的作用.方法 采用原位杂交法检测5例正常脑组织及40例不同级别胶质瘤中Galectin-3mRNA、MMP-2mRNA的表达情况及二者之间的关系.结果 正常脑组织中Galectin-3mRNA、MMP-2mRNA的表达均为阴性.在脑胶质瘤中Galectin-3mRNA主要表达于肿瘤细胞的胞质,其表达是在胞质中出现棕色或棕黄色染色.在Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤标本23例中阳性2例、弱阳性4例、阴性17例,阳性表达率为29.09％ (6/23),阳性指数值为(4.80±3.22)％；在Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤标本17例中强阳性4例、阳性6例、弱阳性1例、阴性6例,阳性表达率为64.71％(11/17),阳性指数值为(27.30±22.72)％;Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级间差异有统计学意义(x2=5.996,t =4.055;P均＜0.05).在脑胶质瘤中MMP-2mRNA主要表达于瘤细胞及血管基底膜的内皮细胞的胞质,其表达是在胞质中出现棕色或棕黄色染色.在Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤标本23例中阳性5例、弱阳性3例、阴性15例,阳性表达率为34.78％(8/23),阳性指数值为(6.43±5.32)％；在Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤标本17例中强阳性4例、阳性7例、弱阳性1例、阴性5例,阳性表达率为70.59％ (12/17),阳性指数值为(29.88±23.96)％；Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级间差异有统计学意义(x2 =5.013,t =3.966;P均＜0.05).经直线相关分析,Galectin-3 mRNA与MMP-2mRNA的阳性细胞表达率呈正相关(r =0.790,P＜0.05).结论 Galectin-3mRNA、MMP-2mRNA的表达在Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤组明显低于Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤组,与胶质瘤的恶性程度及进展呈正相关,更有利于从分子水平对人脑胶质瘤的恶性生物学行为进行评价和判断.

摘要： 目的 观察电针丰隆穴对高脂血症大鼠ABCA1mRNA表达的影响.方法 36只健康雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组,每组12只.用高脂饮食饲料饲喂法建立高脂血症大鼠模型.造模28 d后,电针组开始电针丰隆穴治疗.治疗结束后,检测各组大鼠血脂,并用原位杂交法检测各组大鼠肝脏及主动脉弓组织中ABCA1mRNA表达水平.结果 与空白组相比,模型组大鼠TC、LDL-C水平显著上升,肝脏及主动脉弓ATP结合盒转运子A1 (ABCA1) mRNA表达显著降低；与模型组比较,电针组大鼠TC、LDL-C水平显著降低,肝脏及主动脉弓ABCA1mRNA表达升高.结论 电针丰隆穴能够增强高脂血症大鼠肝脏及主动脉弓ABCA1mRNA的表达,从而促进胆固醇的逆向转运,这可能是电针丰隆穴降脂及防治动脉粥样硬化的机制之一.%Objective: To investigate the effect and mechanism of electroa-cupuncture (EA) at Fenglong (ST 40) on ABCA1mRNA in hyperlipidemia (HLP) rats. Methods: 36 healthy SD rats were randomly divided into normal control group,model group and EA group. Modeling after 28 days,the EA groups were given EA Treatment. At the end of the treatment,the lipids and expression of ATP binding cassette transporter A1 (ABCA1) mRNA in liver and aortic arch tissue were assayed by in situ hybridization (ISH). Results: The content of TC and LDL-C of the model group were apparently increased and the expression of ABCA1 mRNA were significantly decreased compared with the nomarl control group; compared with the model group, levels of TC and LDL-C were significantly decreased and the expression of ABCA1 mRNA were significantly increased in the the EA group. Conclusion: Electro-acupuncture at the acupoint Fenglong can promote reverse cholesterol transport through improving the expression of ABCA1 mRNA , which may be one of the mechanisms of EA at fenglong lipid-lowering and preventing AS.

摘要： 目的 通过对人Runt相关转录因子3(RUNX3)、凋亡抑制因子生存素(Survivin)蛋白在结直肠腺癌中表达的研究,探讨RUNX3、Survivin与结直肠腺癌发生发展的关系.方法应用免疫组化(SP)、原位杂交法检测RUNX3、Survivin在30例正常结直肠组织、60例结直肠腺瘤、60例结直肠腺癌组织标本中的表达,分析它们与临床病理特征间的关系.结果 RUNX3、Survivin在结直肠腺癌、正常结直肠组织、结直肠腺瘤伴中低度异型增生和结直肠腺瘤伴重度异型增生中的阳性表达率分别为38.33％、73.33％,86.67％、10.00％,72.97％、13.51％和43.48％、52.17％,两者在正常结直肠组织、结直肠腺瘤伴中低度异型增生组织与结直肠腺癌、结直肠腺瘤伴重度异型增生组织比较,差异有统计学意义(P＜0.05).RUNX3、Survivin mRNA在结直肠癌组织、癌旁正常组织、结直肠腺瘤伴中低度异型增生和结直肠腺瘤伴重度异型增生中的阳性表达率分别为31.67％、63.33％,76.67％、6.67％,56.76％、10.81％和39.13％、43.48％,两者在正常结直肠组织、结直肠腺瘤伴中低度异型增生组织与结直肠腺癌、结直肠腺瘤伴重度异型增生组织比较,差异有统计学意义(P＜0.05).RUNX3和Survivin在结直肠腺癌组织中的表达呈负相关(r=-0.455,P＜0.01).RUNX3和Survivin的表达与结直肠腺癌的TNM分期、浸润深度、淋巴结转移、肝转移具有相关性(P＜0.05).结论 RUNX3、Survivin在结直肠腺癌中的不同程度的表达与结直肠黏膜癌变的发生、发展有关.

摘要： The objectives of this study were to investigate the expression of MMP-2 protein and mRNA in glioma cells and its significance in the occurrence and malignant progression of gliomas. Immunohistochemical method and in situ hybridization were adopted to detect the expression of MMP-2mRNA protein and mRNA in 5 cases of normal brain tissue and 40 cases of gliomas at different grades. The expression of both MMP-2mRNA protein and mRNA in normal brain tissue was negative. In the cases of brain gliomas, the expression MMP-2 protein mainly showed in the cytoplasm of the tumor cells and endothelial cells of vascular basement membrane, which could be detected through brown or yellow-brown staining in the cytoplasm. In 23 cases of grade Ⅰ and Ⅱ glioma specimens,positive expression was found in 4 cases,weak positive in 6 cases,negative in 13 cases,with a positive expression rate at 43. 48% (10/23) and LI value at (5. 91 ±4. 78)% ; in 17 cases of grade Ⅲ and Ⅳ glioma specimens,strongly positive expression was detected in 4 cases, positive in 7 cases, weak positive in 4 cases and negative in 2 cases, with a positive expression rate at 88. 24% ( 15/17) and LI value at (30. 06 ±22. 94)%. It can be seen that the difference between grade Ⅰ,Ⅱ and grade Ⅲ,Ⅳ was significant (P <0. 05). In addition,the expression of MMP-2mRNA mainly appeared in the cytoplasm of tumor cells and endothelial cells of vascular basement membrane in brain gliomas,which was detected through brown or yellow-brown staining in the cytoplasm. In 23 cases of grade Ⅰ and Ⅱ glioma specimens, positive expression was found in 3 cases, weak positive in 3 cases, negative in 17 cases,with a positive expression rate at 26. 09% (6/23) and LI value at (6. 43 ±5. 32)% ; in 17 cases of grade Ⅲ and Ⅳ glioma specimens, strongly positive expression was detected in 4 cases, positive in 7 cases, weak positive in 1 cases and negative in 5 cases, with a positive expression rate at 70. 59% ( 12/17 ) and LI value at ( 29. 88 ± 23. 96 ) %. This also shows a significant difference between grade Ⅰ,Ⅱ and grade Ⅲ,Ⅳ with P <0. 05. The expression of MMP-2 protein and mRNA in grade Ⅰ and Ⅱ case group of gliomas was significantly lower than that in grade Ⅲ and Ⅳ case group. It shows a positive correlation with the malignancy and progression of gliomas, which is more conducive to the evaluation and judgment on the malignant biological behavior of human brain gliomas.%探讨MMP-2蛋白及mRNA在胶质瘤细胞中的表达及其在胶质瘤的发生及恶性进展中的作用.采用免疫组化法及原位杂交法检测5例正常脑组织及40例不同级别胶质瘤中MMP-2mRNA蛋白及mRNA的表达情况.正常脑组织中MMP-2mRNA蛋白及mRNA的表达均为阴性.在脑胶质瘤中MMP-2蛋白主要表达于瘤细胞及血管基底膜的内皮细胞的胞浆,其表达是在胞浆中出现棕色或棕黄色染色.在Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤标本23例中阳性4例、弱阳6例、阴性13例,阳性表达率为43.48％ (10/23),LI值为(5.91±4.78)％,在Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤标本17例中强阳性4例、阳性7例、弱阳4例、阴性2例,阳性表达率为88.24％ (15/17),LI值为(30.06±22.94)％,Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级间差异显著,P＜0.05.在脑胶质瘤中MMP-2mRNA主要表达于瘤细胞及血管基底膜的内皮细胞的胞浆,其表达是在胞浆中出现棕色或棕黄色染色.在Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤标本23例中阳性3例、弱阳3例、阴性17例,阳性表达率为26.09％ (6/23),LI值为(6.43±5.32)％,在Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤标本17例中强阳性4例、阳性7例、弱阳1例、阴性5例,阳性表达率为70.59％ (12/17),LI值为(29.88 ±23.96)％,Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级间差异显著,P ＜0.05.MMP-2蛋白及mRNA的表达在Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤组明显低于Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤组,与胶质瘤的恶性程度及进展呈正比,更有利于对人脑胶质瘤的恶性生物学行为进行评价和判断.

摘要： 目的 通过对Survivin蛋白在结直肠腺癌组织、腺瘤组织和癌旁正常组织中表达的研究,探索Survivin在结直肠腺癌发生发展过程中的表达水平.方法 应用免疫组化法(immunohistochemistry,IHC)、原位杂交法(in situ hybridization,ICH)检测Survivin在30例癌旁正常组织,60例结直肠腺瘤(37例伴中低度异型增生、23例伴重度异型增生),60例结直肠腺癌组织标本中的表达情况;结合临床资料分析其表达与临床病理特征间的关系.结果 Survivin在癌旁正常组织、腺瘤伴中低度异型增生,腺瘤伴重度异型增生和结直肠腺癌组织中的阳性表达率分别为10.00%、13.51%、52.17%和73.34%.Survivin mRNA在癌旁正常组织、腺瘤伴中低度异型增生、腺瘤伴重度异型增生和结直肠腺癌组织中的阳性表达率分别为6.67%、10.81%、43.48%和63.33%.Survivin的表达与结直肠癌的肿瘤淋巴结转移(tumor node metastasis,TNM)分期、浸润深度、淋巴转移和肝转移具有相关性,而与患者性别、年龄、肿瘤大小、部位、分化程度和组织学类型无关.结论 Survivin在结直肠组织中不同程度的表达与结直肠黏膜癌变的发生、发展有密切关联,有望成为结直肠癌临床诊断及监测的一个特异性生物标志物.

摘要： 目的通过对Survivin蛋白在结直肠腺癌组织、腺瘤组织和癌旁正常组织中表达的研究，探索Survivin在结直肠腺癌发生发展过程中的表达水平。方法应用免疫组化法（immunohistochemistry，IHC）、原位杂交法（insituhybridization，ICH）检测Survivin在30例癌旁正常组织，60例结直肠腺瘤（37例伴中低度异型增生、23例伴重度异型增生），60例结直肠腺癌组织标本中的表达情况；结合临床资料分析其表达与临床病理特征间的关系。结果Survivin在癌旁正常组织、腺瘤伴中低度异型增生，腺瘤伴重度异型增生和结直肠腺癌组织中的阳性表达率分别为10．00％、13．51％、52．17％和73．34％。SurvivinmRNA在癌旁正常组织、腺瘤伴中低度异型增生、腺瘤伴重度异型增生和结直肠腺癌组织中的阳性表达率分别为6．67％、10．81％、43．48％和63．33％。Survivin的表达与结直肠癌的肿瘤淋巴结转移（tumornodemetastasis，TNM）分期、浸润深度、淋巴转移和肝转移具有相关性，而与患者性别、年龄、肿瘤大小、部位、分化程度和组织学类型无关。结论Survivin在结直肠组织中不同程度的表达与结直肠黏膜癌变的发生、发展有密切关联，有望成为结直肠癌临床诊断及监测的一个特异性生物标志物。

摘要： 为研究猪瘟病毒RNA在感染组织中的分布动态,本实验采用新型的QuantigeneView RNA原位杂交法对猪瘟病毒组织中RNA进行定位检测,能准确反映病毒RNA在组织中的分布位置,为阐明猪瘟病毒在组织细胞中的复制规律提供理论依据.

摘要： 本文通过原位杂交法实验研究了MCP-1在EM发病中的作用以及异位宁对其基因表达的影响。研究发现，在EM患者腹水中含有明显增多的促炎细胞因子、趋化因子及炎性细胞浸润。最明显的是巨噬细胞的数量和活性以及MCP-1浓度和趋化活性的增加。MCP-1是一种重要的多功能细胞因子，能特异性地趋化和激活单核细胞，诱导其表面粘附分子和细胞因子IL-1和IL-6的表达;并促进巨噬细胞活化产生和分泌前炎症介质和细胞因子，促成EM腹腔内无菌性炎症反应。

摘要： 宫颈绒毛管状乳头状腺癌又称绒毛管状腺癌(VGA)，1989年由Young和Scully首次提出，1994年被WHO列为宫颈癌组织病理学类型。rn 本文报道2例宫颈绒毛管状腺癌，通过免疫组化检测该肿瘤的免疫表型，首次采用原位杂交法检测肿瘤组织的HPV DNA，报道宫颈绒毛管状腺癌HPV33/31感染情况，并结合病史、随访资料及文献复习，分别对其病理特征、免疫表型、发病机制、生物学行为、选择手术方式、预后、鉴别诊断等方面进行探讨。

摘要： 为探讨动脉硬化性闭塞症患者与人巨细胞病毒感染的关系,用原位杂交的方法检测了38例ASO患者截肢动脉组织中人巨细胞病毒晚期基因片段.

摘要： 为探讨动脉硬化性闭塞症患者与人巨细胞病毒感染的关系,用原位杂交的方法检测了38例ASO患者截肢动脉组织中人巨细胞病毒晚期基因片段.

摘要： 为探讨动脉硬化性闭塞症患者与人巨细胞病毒感染的关系,用原位杂交的方法检测了38例ASO患者截肢动脉组织中人巨细胞病毒晚期基因片段.

摘要： 为探讨动脉硬化性闭塞症患者与人巨细胞病毒感染的关系,用原位杂交的方法检测了38例ASO患者截肢动脉组织中人巨细胞病毒晚期基因片段.

摘要： 本发明涉及一种用于原位杂交的杂交液、其制备方法及原位杂交检测试剂盒。该用于原位杂交的杂交液，包括以下终浓度的组分：体积百分浓度不超过2％的甲酰胺、重量体积百分浓度为0.1‑10％的氟化物、2‑4倍浓度的SSC、1‑10mM的EDTA、1‑5倍浓度的Denhardts溶液、重量体积百分浓度为5‑10％的硫酸葡聚糖、0.1‑1mg/mL的鲑鱼精DNA、以及50‑100mM且pH为7.0的磷酸氢二钠‑磷酸二氢钠缓冲液或Tris‑HCl缓冲液。本发明的用于原位杂交的杂交液可在保证杂交信号的情况下，提高杂交效率，缩短杂交时间。

摘要： 本发明公开了一种不依赖荧光检测杂交信号的鱼类染色体原位杂交液，由去离子甲酰胺，2xSSC缓冲液,聚氧乙烯失水山梨醇单月桂酸酯,酵母总RNA，封闭试剂，乙二胺四乙酸,硫酸葡聚糖，柠檬酸三钠，磷酸氢二钠,焦碳酸二乙酯处理后的水，变性后的探针与去离子甲酰胺混合液按一定比例配置成的。应用本发明的杂交液可以使染色体原位杂交技术不依赖于荧光检测，使用普通显微镜就可以观察到荧光信号,而且试剂配制和存放便捷，杂交结果观察、拍照方便，杂交材料可以长期存放，实验过程更加简单易于操作，极大的扩大了鱼类染色体原位杂交的应用范围。

摘要： 本发明涉及一种促进荧光原位杂交的组合物及杂交液，荧光原位杂交探针工作液、荧光原位杂交方法，属于分子病理诊断技术领域。本发明中的促进荧光原位杂交的组合物，添加了异硫氰酸胍，异硫氰酸胍能够促进探针中的DNA与样本中的DNA进行结合，提高杂交效率；因此探针工作液能够实现快速杂交、短时杂交。由该组合物制成杂交液，并调整了传统组分氯化钠、柠檬酸钠、甲酰胺、硫酸葡聚糖的浓度；得到的杂交液在3h内即可完成杂交，并且杂交后仍然具有信号亮度强并且特异性好的特点。

摘要： 本发明涉及生物传感器技术领域，特别涉及一种荧光原位杂交芯片及荧光原位杂交方法。包括：支撑衬底和功能结构层；功能结构层设置在支撑衬底上；功能结构层具有腔体结构；腔体结构包括分离区和捕获区；分离区中设置有确定性侧向位移阵列；捕获区与分离区通过连接通道连通；捕获区中设置有捕获阵列；功能结构层中还设置有反应试剂进样通道，反应试剂进样通道与捕获区连通。通过确定性侧向位移阵列将外周血中稀少的肿瘤细胞进行富集分离，并通过捕获阵列实现了对肿瘤细胞的捕获固定。肿瘤细胞可以在捕获区中进行荧光原位杂交，从而实现了直接在荧光原位杂交芯片上进行一体化的肿瘤细胞富集及荧光原位杂交检测，简化了检测过程，省时省力。

摘要： 本发明公开了一种动力相关蛋白1(dynamin‑related protein 1，drp1)基因用于荧光原位杂交的引物及其cRNA原位杂交的探针的制备方法，按照如下步骤：(1)根据drp1基因的Gene bank序列，我们设计了3对drp1的特异引物，并且分别对此引物扩增出drp1基因对应的序列，作为drp1蛋白特异的探针序列；(2)构建drp1的cRNA原位杂交的探针质粒；将探针质粒转化细菌后，细菌培养后进行测序；(3)制备drp1的cRNA原位杂交探针；(4)检测drp1的cRNA探针的原位杂交。

摘要： 在实施方案中，公开了一种用于将样品免疫染色以使染色剂在FISH条件下稳定的方法。

摘要： 本实用新型公开了一种用于荧光原位杂交的简易杂交装置，包括固定基板，所述固定基板的上端安装有固定杆，固定杆的外部表面活动套接有升降套管，升降套管与固定杆之间通过紧固螺栓相固定，所述固定基板上安装有电动机，电动机的输出端通过电动推杆固定连接有实验台板，电动推杆与电动机输出端之间安装有转盘，所述实验台板的内部分别是由导热面层、加热夹层和隔热板所共同组成，导热面层包覆在加热夹层的上表面，隔热板包覆在加热夹层的下表面，加热夹层的内部安装有电加热丝网。本实用新型通过安装有可旋转升降式实验台板，方便对载玻片上微生物进行荧光标记和操作试验，同时可对实验台板进行微加热，用来观察微生物杂交后的活性状态。

摘要： 一种用于降低荧光原位杂交法中自体荧光干扰的检体前处理方法，包含：步骤一：福尔马林固定石蜡包埋组织；步骤二：切片及烘片；步骤三：硫氰酸钠作用；步骤四：在面积24×32mm的组织加入20μl浓度5-10mg/mL第四型胶原蛋白酶或1mg/mL弹性蛋白酶，封片后于37°C作用0.5-1hr，来降解具有自体荧光特性的细胞外基质；步骤五：用胃蛋白酶在37°C作用。又本发明另提供可用于降低荧光原位杂交法中自体荧光干扰之检体前处理法的试剂套组，通过本发明来作检体前处理，可显著降低组织自体荧光现象，提高荧光探针信号与背景荧光比率，提升荧光原位杂交法的检验品质与正确性。

摘要： 本发明公开了一种基于原位杂交法的EB病毒检测方法，所述检测方法采用EBER特有序列设计的地高辛标记探针特异的与组织或细胞中的EBER靶序列互补、杂交，对细胞或组织样本中的EB病毒进行定性分析，包括样本脱蜡处理、酶处理、滴加EBER探针及配套的二抗、DAB显色、复染、脱水透明和封片等步骤。本发明提供的检测方法，选择鼠抗地高辛抗体、羊抗鼠抗体和酶标抗羊IgG聚合物作为配套EBER探针使用的二抗系统，使得探针与细胞或组织切片中核酸杂交结合的特异性好，能够扩大杂交信号，提高了检测的准确度和灵敏度。

摘要： 一种用于降低荧光原位杂交法中自体荧光干扰的检体前处理方法，包含：步骤一：福尔马林固定石蜡包埋组织；步骤二：切片及烘片；步骤三：硫氰酸钠作用；步骤四：在面积24×32mm的组织加入20μl浓度5-10mg/mL第四型胶原蛋白酶或1mg/mL弹性蛋白酶，封片后于37°C作用0.5-1hr，来降解具有自体荧光特性的细胞外基质；步骤五：用胃蛋白酶在37°C作用。又本发明另提供可用于降低荧光原位杂交法中自体荧光干扰之检体前处理法的试剂套组，通过本发明来作检体前处理，可显著降低组织自体荧光现象，提高荧光探针信号与背景荧光比率，提升荧光原位杂交法的检验品质与正确性。