酶联免疫吸附法

摘要： 目的:探讨子痫前期孕妇血清中晚期氧化蛋白产物(AOPP)和髓过氧化物酶(MPO)的表达及其临床意义。方法:选取2018年9月—2020年10月收治的50例子痫前期孕妇,根据病情严重程度分为轻度子痫前期(MPE)组25例和重度子痫前期(SPE)组25例,选取同期产检的孕妇25例为对照组。酶联免疫吸附法(ELISA)检测三组AOPP及MPO表达水平,ROC曲线分析诊断价值。结果:SPE组AOPP和MPO的表达显著高于MPE组(P<0.05),SPE组和MPE组AOPP和MPO的表达均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析:AOPP及MPO用于诊断子痫前期的曲线下面积(AUC)分别为0.906及0.823,截断值为52.35μmol/L,40.45μg/L时,敏感度为74.00%,72.00%,特异度为96.00%,84.00%;两者联合时AUC为0.950,敏感度为90.00%,特异度为96.00%。结论:AOPP及MPO在子痫前期孕妇中均呈高表达,而且两因子联合应用的价值明显高于单独应用。

摘要： 目的探讨在无偿献血者血液筛选过程中,对酶联免疫吸附法(ELISA)筛查人类免疫缺陷病毒(HIV)-乙型肝炎病毒(HBV)-丙型肝炎病毒(HCV)阴性标本再实施核酸检测(NAT)的安全性。方法选取37997例无偿献血者,对其血液样本实施ELISA检查,并针对ELISA呈阴性样本再行NAT,统计分析两次检测结果。结果 37997份无偿献血者血液标本实施ELISA检测后显示有465份阳性样本,其阳性检出率为1.22%;对37532份血清ELISA检测呈阴性的标本再NAT后,其检测结果显示存在39份阳性标本,阳性检出率为0.10%。结论目前对献血者血液实施血清学ELISA检测后,即便是合格血液仍存在一定的输血传播疾病风险,输血传染疾病主要是以HBV为主,在对献血者血液进行再NAT可以有效提升血液筛查质量,从而最大限度的避免输血传播疾病发生,进一步提升输血安全性。

摘要： 目的分析酶联免疫吸附(ELISA)法筛查人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体的结果和价值。方法接受艾滋病体检者的5000份标本,均通过ELISA法筛查HIV抗体,将实验室确证试验结果作为金标准,分析ELISA法筛查HIV抗体的结果及价值。结果5000份标本经过ELISA法筛查HIV抗体阳性率为0.94%(47/5000),实验室确证试验HIV抗体阳性率为0.86%(43/5000),ELISA法的HIV抗体阳性率与实验室确证试验比较,差异无统计学意义(P>0.05)。ELISA法筛查HIV抗体的阳性预测值、阴性预测值、敏感度、特异度、准确度、误诊率、漏诊率分别为91.49%、100.00%、100.00%、99.92%、99.92%、0.08%、0。结论ELISA法筛查HIV可以为艾滋病的筛查工作提供可靠的辅助,具有较高的诊断价值,需严格遵守相关的规范进行操作,以便进一步提升筛查结果的准确性。

摘要： 纳米抗体来源于天然缺失轻链的重链抗体可变区,是已知最小抗原结合单元。该研究构建了抗黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))纳米抗体的单价及多价串联体,分别与绿色荧光蛋白(GFP)编码片段融合并克隆至原核表达载体p ET30。以大肠杆菌BL21(DE3)作为表达宿主,通过异丙基-β-D硫代吡喃半乳糖苷诱导,亲和层析技术分别纯化单、双及三价抗AFB_(1)纳米抗体与GFP的融合蛋白。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析结果表明三种融合蛋白均为可溶性表达,表达量分别为6.0、7.5、4.0 mg/L。采用酶联免疫吸附法和荧光扫描法对重组融合蛋白的抗原识别活性及荧光特性进行测定。结果显示,未融合蛋白、单价及双价串联重组蛋白的半抑制浓度(IC;)分别为12.10、14.10、2.19 ng/m L,表明单价重组蛋白的IC;值与未融合蛋白相似,而双价重组蛋白的IC;值与之相比提高了5.5倍。当浓度为0.7 mg/m L时,两种重组蛋白的荧光强度均可达3000以上,荧光强度与GFP相当,且二价重组蛋白表现出更高的荧光强度;三价串联重组蛋白表现出与抗原的结合活性,但AFB_(1)的阻断活性较差,且荧光强度仅为1700左右。该研究为后续建立基于荧光信号的免疫学检测方法奠定了基础,同时也为优化免疫学检测中纳米抗体亲和活性提供了思路和借鉴。

摘要： 目的探究电化学发光法与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒(HBV)标志物的临床研究。方法选取2020年2月至2021年2月我院接诊的70例疑似乙型肝炎患者为研究对象,所有患者分别采用电化学发光法(ECLIA)和ELISA法检测乙型肝炎病毒血清标志物(HBV-M)。结果2种检测方法的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性检出率、阴性检出率差异均无统计学意义(P>0.05);ECLIA检测敏感度为95%(54/56),特异度为93%(13/14);ELISA检测敏感度为89%(50/56),特异度为86%;2种检测方法在敏感度及特异度上差异无统计学意义(P>0.05)。结论ECLIA与ELISA用于HBV检测在阳性检出率、敏感度、特异度上差异均无统计学意义,但2种检测方法各有优缺点,在临床使用时,应根据具体检测项目选择合适方法。

摘要： 目的建立一种基于均相时间分辨荧光(HTRF)技术的分析方法,用于快速、简便、稳定地检测阿达木单抗与TNF-α抗原的结合活性。方法将检测试剂、梯度稀释的标准品及待测样品加入96孔板,孵育后在酶标仪上读取荧光信号值,用软件对信号值和抗体浓度进行四参数曲线拟合,根据标准品及待测样品的EC_(50)值计算样品的相对结合活性;同时对方法的专属性、准确性、精密度、线性与范围及稳定性指示能力进行验证;此外对该方法与常规酶联免疫吸附法(ELISA)进行了对比研究。结果建立的HTRF检测法呈典型的“S”型剂量-效应曲线;方法验证结果显示,本法专属性强,相对结合活性的检测范围为50%~150%,在此范围内线性良好,相关系数在0.99以上,斜率接近1.0;平均回收率范围为92.5%~104.8%;重复性及不同人员之间精密度的CV均不超过15%;本法可反映加热破坏的单抗样品的结合活性变化趋势;对比研究显示,HTRF法与ELISA法测得的结果等效。结论建立了一种新的检测阿达木单抗与TNF-α结合活性的测定方法,该法经验证符合要求,可代替ELISA法用于该类单抗药物结合活性的测定,适用于细胞克隆筛选、原液或成品质量放行检测及稳定性研究等。

摘要： 目的:探讨HIV检测中ELISA与GICA初筛结果与WB确证结果之间的相关性,评价不同初筛方法与确证结果。方法:分析我中心2018年5月—2020年5月780例HIV感染者样本。采用ELISA及GICA法分别对样品进行初筛,采用WB对样本进行确证。结果:780例血液样本ELISA与GICA初筛双阴性40例,双阳性690例,ELISA阴性/GICA阳性21例,ELISA阳性/GICA阴性29例,ELISA与GICA结果配对检验显示差异无统计学意义(P>0.05)。740例HIV抗体初筛阳性样本经WB确证,HIV-1抗体阳性681例(确证阳性率98.70%),HIV-1抗体阴性45例,抗体不确定14例。681例确证阳性样本均是HIV-1抗体阳性,WB检测样本带型分布出现率由高到低排列前两位为gp160、p24,gp160出现率99.56%,p24出现率为98.97%,出现率最低的为P55,为55.36%。780例初筛样本中,以WB确证结果为检验金标准,GICA的敏感性为94.71%、特异度为75.86%,与ELISA的95.78%、100.00%对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:HIV的ELISA与GICA初筛结果基本一致,两者诊断效能相差不大,而初筛样本ELISA、GICA检测均为阳性者WB结果确证阳性率最高,联合诊断更有利于提高HIV阳性检出率。

摘要： 目的研究血标本在应用化学发光免疫分析法检测HIV抗体时对检测结果的影响。方法自我院体检中心2020年1-12月间接受健康体检的人群中选出100名志愿者,均采集外周静脉血标本,将标本分成4份,1份为正常合格标本(未溶血组),将血液标本人工溶血成游离血红蛋白110 mmol/L(重度溶血组),采用酶联免疫吸附法和化学发光免疫分析法对四组标本进行HIV抗体检测,对比吸光度A值和化学发光值(RLU)。结果应用酶联免疫吸附法检测的血液标本,随着溶血程度的提高,吸光度A值也明显提高(P0.05),且轻度溶血组和中度溶血组均无假阳性,仅重度溶血组有1例假阳性。结论在HIV抗体检测中:溶血标本对应用酶联免疫吸附法检测的结果影响较大,对化学发光免疫分析法检测的结果影响较小,但是随着溶血程度的加重,应用化学发光免疫分析法检测也可能出现假阳性,因此需加强检验前质量控制,保证标本的合格。

摘要： 目的探讨对乙型肝炎病毒感染采用不同免疫检验方法检测血清学标志物的价值。方法选择医院2020年1—12月收治的乙型肝炎病毒感染患者100例为研究对象,按照随机数表法分为两组,各50例。对照组采用酶联免疫吸附法检验,干预组采用电化学发光法进行检验,比较两种检测方法对乙型肝炎患者的诊断准确率,并比较两种检测方法对乙肝表面抗原、乙肝e抗原、乙肝表面抗体、乙肝核心抗体、乙肝e抗体阳性检出率的差异。结果电化学发光法对乙型肝炎感染诊断准确率为98.00%,高于酶联免疫吸附法82.00%;电化学发光法对乙型肝炎病毒血清标志物乙肝表面抗原、乙肝e抗原、乙肝表面抗体阳性检出率分别为84.00%、38.00%、40.00%,均高于酶联免疫吸附法的64.00%、20.00%、20.00%,差异有统计学意义(χ^(2)=5.198、3.934、4.762,P0.05)。结论对乙型肝炎病毒感染患者采用电化学发光法检测血清学标志物诊断准确率高于酶联免疫吸附法,对乙肝表面抗原、乙肝e抗原、乙肝表面抗体的阳性检出率更高,值得推广。

摘要： 目的分析对比酶联免疫吸附法(ELISA)和磁微粒化学发光法检测丙型肝炎病毒(HCV)抗体的结果。方法选取2019年2月至2020年10月我院检测的90例HCV抗体患者,随机将其分为对照组(ELISA)和观察组(磁微粒化学发光法)各45例。比较两组的丙型肝炎检出率、检测时间及满意度。结果观察组的丙型肝炎检出率为95.56%,明显高于对照组的82.22%(P<0.05).观察组的丙型肝炎检测时间明显短于对照组,满意度明显高于对照组(P<0.05).结论ELISA和磁微粒化学发光法均可用于检测HCV抗体,但与ELISA相比,磁微粒化学发光法灵敏度较高,且检测时间较短,值得临床推广。

摘要： 酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)已经成为马铃薯病毒检测的常规方法.马铃薯在生长过程中,因受到各种不同病毒病害的侵染,容易造成减产和退化.为了提高马铃薯种薯的质量,使其从根本上不含有马铃薯常见病毒,对马铃薯脱毒苗的质量检测尤为重要.采用DASELISA技术,对10个不同马铃薯品种共186份脱毒苗进行了6种病毒检测.检测结果表明,共有78份材料不含有6种主要病毒,能够应用于马铃薯的脱毒种薯生产;在脱毒苗中,PVS的含有率最高,应提高脱除马铃薯S病毒的技术水平.

摘要： 目的:探讨酶联免疫吸附法检测乙肝五项结果中的常见影响因素.rn 方法:随机选择2014年5月至2015年6月来我院门诊或者病房进行乙肝五项检测的患者160名,将所有患者的血标本分为4个组,抗凝组与不抗凝组,静置水浴时间20分钟组与静置水浴时间40分钟组,每组各40个标本,都对其进行酶联免疫吸附法和胶体金标法检测,比较各组标本的检测结果.rn 结果:抗凝组与不抗凝组比较,不抗凝组的阳性率低于抗凝组,且差异明显,具有统计学意义(P＜0.05),静置水浴40分钟组的阳性率明显低于静置水浴20分钟组,且差异明显,具有统计学意义(P＜0.05).rn 结论:标本的血清状态及静置时间的长短可以影响酶联免疫吸附法检测乙肝五项的结果,检测过程应严格按照标准步骤进行,以保证检测结果的准确性.

摘要： 目的：对酶联免疫吸附法(ELISA)测定牛奶中链霉素残留量的测量不确定度进行评定.方法：分析了该方法的不确定度来源,建立数学模型,并进行分析后找到主要影响因素.结果：当牛奶中链霉素含量为7.7ng/mL时,其扩展不确定度为1.52ng/mL(k=2).其中,测量样品重复性和反应温度影响较大.结论：采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定牛奶中链霉素含量应保证实验具有良好的重复性,严格控制实验反应条件,并且保证样品回收率符合要求.

摘要： 目的：探讨抗桥粒芯蛋白Dsg1、Dsg3抗体水平在天疱疮诊断和病情评估中的应用价值. 方法：选择经组织病理及直接免疫荧光法检查确诊的63例天疱疮患者(试验组)及同期40例排除大疱性皮肤病诊断的健康人群(对照组),分别采集静脉血使用酶联免疫吸附法检测血清中抗桥粒芯蛋白Dsg1、Dsg3抗体,对比酶联免疫吸附法与直接免疫荧光法两者符合率,分析Dsg1、Dsg3抗体水平与临床病情的相关性. 结果：63例经组织病理及直接免疫荧光法检查确诊的天疱疮患者利用酶联免疫吸附法检测其血清中抗桥粒芯蛋白Dsg1、Dsg3抗体水平与直接免疫荧光法对比结果的一致性(符合率)为88.89％.抗桥粒芯蛋白Dsg1抗体水平治疗中及治疗后(158.70±62.62、81.98±45.23)与治疗前(232.61±80.67)有显著性差异(P＜0.05),Dsg3抗体水平治疗中及治疗后(52.24±15.58、39.58±52.72)与治疗前(78.87±13.7)有显著性差异(P＜0.05). 结论：酶联免疫吸附法检测患者血清中抗桥粒芯蛋白Dsg1、Dsg3抗体水平用于天疱疮疾病的诊断与直接免疫荧光法一致性较高,且血清中抗桥粒芯蛋白Dsg1、Dsg3抗体水平与病情疗效呈正相关性,可用于疾病治疗疗效观察.

摘要： 目的：对酶联免疫吸附法(ELISA)测定饲料中黄曲霉毒素B1残留量的测量不确定度进行评定.方法：分析了该方法的不确定度来源,建立数学模型,并进行分析后找到主要影响因素.结果：当饲料中黄曲霉毒素B1含量为5.19ng/mL时,其扩展不确定度为1.66ng/mL(k=2).其中,测量样品重复性和回收率影响较大.结论：采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定饲料中黄曲霉毒素B1含量应保证实验具有良好的重复性,并且保证样品回收率符合要求.

摘要： 建立了测定水产品中庆大霉素(*0)残留的直接竞争酶联免疫吸附法(GF(/,6A).通过碳二亚胺法和戊二醛法分别制备了免疫原*0-./+和包被原*0-29A,经动物免疫后获取的多克隆抗体与辣根过氧化物酶偶联制备酶标抗体*0-3AE-+53.优化确立了GF(/,6A最佳检测条件:包被原浓度0.2μJ/P/,*0-3AE-+53稀释度1/3200,抗体反应时间40PLQ,缓冲液为3％6(S+8.0,10PPRO//).本方法的抑制中浓度,&50为0.99μJ//,定量检测线性范围为0.27a3.64μJ//.水产样品加标回收率83.9％～104.3％,56D为6.7％～12.6％,最低检测限为2.0μJ/NJ.本方法可用于水产品中庆大霉素残留的快速测定.

摘要： 自身抗体的产生：正常的免疫反应具有保护性、防御性作用，对正常自身组织和成分不发生反应；正常生理情况下存在自身抗体，净化体内衰老及死亡的细胞；各种原因导致将自身成分视为“异物“发生自身免疫反应，产生自身抗体；自身抗体超过一定水平，就可能对身体产生损伤——自身免疫病。

摘要： 自身抗体的产生：正常的免疫反应具有保护性、防御性作用，对正常自身组织和成分不发生反应；正常生理情况下存在自身抗体，净化体内衰老及死亡的细胞；各种原因导致将自身成分视为“异物“发生自身免疫反应，产生自身抗体；自身抗体超过一定水平，就可能对身体产生损伤——自身免疫病。

摘要： 自身抗体的产生：正常的免疫反应具有保护性、防御性作用，对正常自身组织和成分不发生反应；正常生理情况下存在自身抗体，净化体内衰老及死亡的细胞；各种原因导致将自身成分视为“异物“发生自身免疫反应，产生自身抗体；自身抗体超过一定水平，就可能对身体产生损伤——自身免疫病。

摘要： 自身抗体的产生：正常的免疫反应具有保护性、防御性作用，对正常自身组织和成分不发生反应；正常生理情况下存在自身抗体，净化体内衰老及死亡的细胞；各种原因导致将自身成分视为“异物“发生自身免疫反应，产生自身抗体；自身抗体超过一定水平，就可能对身体产生损伤——自身免疫病。

摘要： 本发明公开了一种基于共价键合法固定捕获抗体的纸基双抗体夹心法，属于免疫分析技术领域，用于检测人血液中类过敏相关MRGPRX2受体的含量。以MRGPRX2鼠单抗为捕获抗体，无需对滤纸进行表面化学修饰，通过引入兼具羧基与氨基官能团的牛血清白蛋白(BSA)分子，利用抗体分子与BSA分子中氨基与羧基间的酰胺缩合反应形成抗体‑BSA网络结构，实现捕获抗体的固定；以辣根过氧化物酶HRP标记的MRGPRX2兔多抗为检测抗体，以MRGPRX2溶液为标准品建立MRGPRX2的纸基双抗体夹心法。该捕获抗体的固定方法简单高效、成本低，该检测方法的检测通量高、速度快、检测限和精密度等各项技术指标均符合要求，定量结果的准确性、重现性良好，适用于临床检查和血液流行病学调查。

摘要： 鹿结核病自然感染与卡介苗免疫间接酶联免疫吸附检测法。该检测法选用的生物材料有：纯化蛋白GST-Rv3872-74-75，牛血清白蛋白BSA，兔抗鹿IgG-HRP，标准阳性血清，标准阴性血清，待检血清。检测步骤包括包被抗原、封闭、加血清、加酶结合物—兔抗鹿IgG-HRP、加底物、终止反应、用酶联免疫检测仪测量。本发明的积极效果是：在完成兔抗鹿二抗的基础上，进一步对鹿结核病自然感染与卡介苗免疫间接ELISA的诊断抗原进行筛选，以纯化蛋白GST-Rv3872-74-75作为最佳抗原并确立了最佳试验步骤和条件，建立一种特异性强，敏感性高，简便快捷，耗资少的鹿结核病自然感染与卡介苗免疫鉴别诊断方法。

摘要： 本发明公开了一种基于共价键合法固定捕获抗体的纸基双抗体夹心法，属于免疫分析技术领域，用于检测人血液中类过敏相关MRGPRX2受体的含量。以MRGPRX2鼠单抗为捕获抗体，无需对滤纸进行表面化学修饰，通过引入兼具羧基与氨基官能团的牛血清白蛋白(BSA)分子，利用抗体分子与BSA分子中氨基与羧基间的酰胺缩合反应形成抗体‑BSA网络结构，实现捕获抗体的固定；以辣根过氧化物酶HRP标记的MRGPRX2兔多抗为检测抗体，以MRGPRX2溶液为标准品建立MRGPRX2的纸基双抗体夹心法。该捕获抗体的固定方法简单高效、成本低，该检测方法的检测通量高、速度快、检测限和精密度等各项技术指标均符合要求，定量结果的准确性、重现性良好，适用于临床检查和血液流行病学调查。

摘要： 本发明涉及一种测定水产品及水样中结晶紫的间接竞争酶联免疫吸附分析法。对结晶紫分子进行修饰，使其与载体蛋白交联，得到免疫原和包被抗原，经过多次免疫动物制得抗结晶紫的多克隆抗体。在优化的实验条件下，IC

摘要： 本发明提供了一种酶联免疫吸附法封闭溶液，其中，所述封闭溶液用于利用酶联免疫吸附法测定真菌毒素，所述封闭溶液包括：胎牛血清、脱脂奶粉、蛋白稳定剂以及磷酸缓冲溶液，其中，每1000mL所述封闭溶液含有胎牛血清32.0～48.0mL、脱脂奶粉7.2～10.8g、蛋白稳定剂2.4～3.6g。

摘要： 本发明涉及一种酶联免疫吸附法辅助加样装置，包括工作台和机械臂，工作台上设有固定架，机械臂包括第一连杆、第二连杆、第一电机和马达，第一电机的输出轴与第一连杆的一端连接以实现第一连杆摆动；马达的输出轴与第二连杆的一端连接以实现第二连杆摆动；第二连杆的另一端固设有滴液器；本发明通过第一连杆和第二连杆摆动从而能够使滴管顺次对酶标板进行滴液，自动依照一定的顺序进行滴液代替人工滴液，提高了工作效率。本发明自动化程度高，重复使用，十分便捷。

摘要： 本实用新型涉及医药诊断技术领域，特别是涉及一种对脂蛋白磷脂酶A2检测的酶联免疫吸附法加样装置，包括底板，底板上方对称固接有两个第一支撑板，两个第一支撑板之间设有横向移动组件，横向移动组件固接有纵向移动组件，底板上方边部设有吸液组件，吸液组件与纵向移动组件相连，底板上方中部放置有酶标板，酶标板位于纵向移动组件下方。本实用新型可以达到提高加液效率的目的。

摘要： 本实用新型公开一种酶联免疫吸附法实验用细胞悬浮培养充气装置，包括罐体和充气箱，罐体内设有水泵，罐体顶部设有罐盖，罐盖上分别安装有气压表和端盖，气压表用于测定罐体内气压；充气箱内设有气泵，气泵通过输气管与罐体相连通；充气箱内沿中轴线贯穿有转动杆，转动杆的一端与电动机的输出轴连接，该转动杆上套设有扇叶，电动机驱动转动杆转动，使充气箱内的气体混合均匀，再由气泵通过输气管送入罐体；本实用新型所设计的酶联免疫吸附法实验用细胞悬浮培养充气装置能够同时进行充气放气的操作，满足实验要求，同时能够使充入的CO2和空气混合均匀，提高实验效果。

摘要： 本实用新型公开一种酶联免疫吸附法实验用蛋白质复性装置，工作箱体内设有回收箱；第一容器设于工作箱体的顶部，第一容器通过排液管连接工作箱体内的回收箱；第二容器设于第一容器内，且二者不连通；储液箱内设有供液泵，储液箱通过输液管连通第二容器，供液泵将储液箱内的液体通过输液管泵入第二容器；伸缩箱体位于工作箱体一侧，伸缩箱体的顶部固定有伸缩柱，伸缩柱上连接有承载板，承载板的顶部设有驱动电机，而承载板的底部在对应第二容器的位置设有搅拌轴，驱动电机的输出轴连接该搅拌轴；本实用新型所设计的酶联免疫吸附法实验用蛋白质复性装置可提高蛋白透析的效果，并可提高搅拌效率，提高搅拌效果，实现ELISA实验的快速化及标准化。

摘要： 本实用新型公开一种用于酶联免疫吸附法实验的细胞培养离心管，在密封塞开设若干穿刺孔，在向培养基中加样时可以用注射器直接加样，无需旋开连接盖，连接盖与管体接触部位均设置螺纹结构，能够使连接盖与管体旋拧固定连接；通过设置弹性垫片，能够使连接盖与管体紧密结合。本实用新型所设计的用于ELISA实验的细胞培养离心管，在转移培养细胞时加样方便，加样时不需打开连接盖，且避免在转移细胞过程中的污染，提高细胞培养成功率，确保ELISA实验的结果。