受精能力

摘要： 【目的】明确修饰基因组通过穿膜肽载体转染精子的可行性及穿膜肽载体对精子和受精卵的影响,为实现安全有效地大批量制备猪转基因胚胎提供技术支撑。【方法】以水牛Sohlh2基因为目的基因,通过细胞穿膜肽(C105y、MPG和TAT)和慢病毒介导转染猪精子后,采用激光共聚焦扫描显微镜观察转染精子形态特征的变化,利用精子图像分析仪(CASA)检测精子活率、平均曲线运动速度(VCL)、平均直线运动速度(VSL)和前向性(STR)等指标,运用精子顶体染色试剂盒测定猪精子顶体反应,并通过体外受精进一步验证不同载体转染制备生产转Sohlh基因猪胚胎的效果。【结果】转染后的猪精子顶体结构完整,细胞膜未见破裂;不同细胞穿膜肽(C105y、MPG和TAT)的猪精子转染阳性率分别为56.74%、50.44%和43.58%,低于慢病毒的转染阳性率(61.48%),但差异不显著(P>0.05,下同)。经穿膜肽C105y转染24 h,猪精子活率(70.09%)、平均直线运动速度(35.36μm/s)、平均曲线运动速度(42.20μm/s)、前向性(1.03μm/s)与对照组相比差异均不显著;而经穿膜肽MPG和TAT及慢病毒转染后,猪精子的各项指标均呈一定程度的下降趋势。细胞穿膜肽转染猪精子的自发顶体反应率与对照组相比无显著差异,慢病毒转染则呈显著的上升趋势(P<0.05,下同);在诱发顶体反应率方面,慢病毒转染猪精子的诱发顶体反应率较对照组呈显著下降趋势,而不同细胞穿膜肽转染对猪精子诱发顶体反应率也无显著影响。慢病毒和穿膜肽C105y转染猪精子经体外受精获得的受精卵继续培养24 h后其卵裂率为64.82%和65.91%,与对照组受精卵的卵裂率(64.52%)差异不显著;穿膜肽C105y转染组的囊胚率(15.82%)与对照组间无显著差异,而慢病毒转染组的囊胚率(9.11%)显著低于对照组;在转基因胚胎阳性率方面,穿膜肽C105y转染组显著低于慢病毒转染组(8.54%vs 10.38%)。【结论】穿膜肽C105y对猪精子的受精能力及转基因猪胚胎发育影响小,且毒害作用不明显,是一个能高效转导外源基因的安全载体。

摘要： l公猪因素1.1过度使用公猪使用过度的直接后果是公猪的精液变稀,不成熟精子比例升高,精子密度降低,从而获能精子减少,降低受精能力,造成配种失败。因此公猪每周使用次数应在3~4次或更少一些,具体情况视公猪的月龄而定。1.2繁殖障碍公猪繁殖障碍主要体现在公猪生殖器官异常发育。解决这类问题的办法是通过检查精液发现并淘汰不能产生正常精液的公猪,对阴茎短小、精液质量正常的公猪采用人工授精的方式配种。

摘要： 试验旨在探究公猪精液冷冻保存对其精子功能的影响.取长白猪的鲜精和优质冻精,用精子分析仪检测精子的运动能力,台盼蓝染色检测精子活率,体外受精(IVF)试验检测卵裂率与囊胚率,采用不同功能检测试剂盒检测冻精和鲜精的顶体完整率、线粒体膜通道孔(MPTP)活性、线粒体膜电位(MMP)、线粒体活性、线粒体氧化应激活性氧(ROS)以及精子DNA完整性,实时荧光定量PCR检测弱精子症相关蛋白基因SMCP、TEKT3,DNAH1、TCTE3的表达.结果表明,与猪鲜精相比,猪冻精的活率及活力均显著降低(P＜0.05),冻精的顶体完整率也明显下降(P＜0.05);冻精的卵裂率和囊胚率显著低于鲜精(P＜0.05);精子线粒体功能分析结果显示,冻精的MPTP相对荧光单位值(RFU)、线粒体膜电位荧光比率以及线粒体活性光密度(OD)值均显著低于鲜精(P＜0.05);精子线粒体ROS检测发现,冻精的RFU值显著高于鲜精(P＜0.05);精子DNA完整性检测结果显示,冻精拖尾率显著高于鲜精(P＜0.05);而弱精子症相关蛋白基因的表达与鲜精相比,差异不显著(P＞0.05).综上所述,冷冻导致猪精子活率、活力、线粒体功能、DNA完整性下降,最终使得冷冻精液精子的受精能力降低.

摘要： 宝宝到底何时来到妈妈的肚子里呢?想成功怀孕.就要保证"播种"时机精确。卵子从卵巢排出后,只有在最初的12小时内才有受精能力,而精子的受精能力在女性体内可以保留2~3天,经常是精子在输卵管内提前静候,等待与卵子相会。

摘要： 精液品质：公牛精液品质好坏主要反映在精子的活力强弱上,活力强的精子受精能力可保持较长时间,是促进授精、提高受胎率的先决条件,所以要保持种公牛的品种个体良好,用于输精的冷冻精液解冻后精子活力不得低于0.3.

摘要： Objective To evaluate the guidance of sperm quality in choosing assisted reproductive technology for pa-tients with infertility. Methods We chose 201 infertile couples receiving conventional in vitro fertilization-embryo trans-plantation ( IVF-ET) , in whom, 126 couples ( IVF-ET group) succeeded ( the number of diodes accounted for≥30% of embryos) and 75 couples ( R-ICSI group) with unsuccessful IVF-ET ( the number of diodes accounted for 0. 05). The fertilization rate and good embryo rate of the R-ICSI group were lower than those of the IVF-ET group (all P0.05)；R-IC-SI组受精率、优胚率低于IVF-ET组(P均<0.05)。结论当精子密度低于11.1×106/mL,正常形态率低于1.4%, DFI高于15.9%,顶体完整率低于77.3%,顶体反应率低于15.7%时建议直接行R-ICSI助孕。

摘要： Objective To explore the effects of nicotine intake on male semen quality and in vitro fertilization outcome.Methods 1 900 male infertility patients were divided into four groups according to their daily nicotine intake,Group A1(500 cases smoked individually more than 20 cigarettes daily),Group A2(600 cases smoked individually 10 to 20 cigarettes daily),Group A3(400 cases smoked individually less than 10 cigarettes daily ) , and the other 400 cases who weren′t smoker as control group.Semen routine parameters, sperm DNA fragmentation index( DFI ) , sperm acrosome intact rate, in vitro fertilization and pregnancy outcomes were compared among four groups. Results Semen volume,sperm motility,survival ability,density,normal sperm number and sperm acrosome intact rate decreased with the increasing nicotine intake of the patients among four groups(P<0.05),while DFI increased with the increasing nicotine intake(P<0.05). The total fertilization rate,double pronucleus(2PN) rate and good embryo rate decreased with the increasing nicotine intake among four groups (P<0.05).Group A1 gained the lowest clinical pregnancy rate as well as the highest incidences of spontaneous abortion and teras(P<0.05), while control group obtained the highest clinical pregnancy rate as well as the lowest incidences of spontaneous abortion and teras (P<0.05). Conclusion Male semen quality,function,in vitro fertilization rate,2PN rate,good embryo rate and clinical pregnancy rate decline with the increasing nicotine intake a,nd the incidences of spontaneous abortion and teras increase as well .%目的：探讨吸烟量对男性精液质量及精子体外受精结局的影响。方法1900例男性不育患者，其中吸烟＞20支／d 500例（ A1组），＞10～20支／d 600例（ A2组），1～10支／d 400例（ A3组），不吸烟400例作为对照组。比较各组精液常规、精子DNA断裂指数（ DFI）、精子顶体完整率及体外受精及妊娠结局。结果4组患者的精液量、精子活动力、存活率、密度、正常形态精子数、精子顶体完整率随着吸烟量增加而降低（P＜0．05），DFI随着吸烟量的增加而增加（P＜0．05）。4组患者行体外受精的总受精率、双原核（2PN）率及优胚率随着吸烟量增加而下降（ P＜0．05）；A1组临床妊娠率最低，流产率、畸胎率最高（P＜0．05），对照组临床妊娠率最高，流产率、畸胎率最低（P＜0．05）。结论随着吸烟量升高男性精液质量、功能、体外受精的受精率、2PN率、优胚率及临床妊娠率下降，自然流产率及畸胎率增高。

摘要： 受孕是由男方的生殖细胞——精子与女方的生殖细胞——卵子相遇的结果。精子中只有少数在射精后1~3天具有穿透卵子的能力,而卵子却只在排出卵巢后18~45小时期间才具有较强的受精能力。如果机遇适合,精卵便能结合成为受精卵。如果未能结合,卵子死亡,精子也随之死亡。精卵结合后,受精卵经过3~4天会缓缓地从输卵管进入子宫。由此可见,精子在整个受孕过程中扮演着十分重要的角色。

摘要： 前不久,据外媒报道,Facebook宣布,为公司女性员工增加一项新的福利,免费冷冻卵子,旨在帮助那些有意把精力放在工作上而又不想影响今后生育的女性。苹果公司也将于明年一月开始向女员工提供该福利。这就涉及到一个问题,即＂生育力的保存＂。人的生育年龄是有限的,在生育力旺盛的有限时间内,投一份生育保险,以备不时之需,是有识之士的明智选择。

摘要： 目的：评价Adjudin对人精子的受精能力及其可能的作用机制.方法：根据WHO(1999)男性学标准,从浙江省精子库获得45例生育男子精液标本.精子获能和顶体反应评价采用CTC免疫荧光染色法;以人精子穿透去透明带仓鼠卵(SPA)鉴定人精子的受精能力;精子活力及其超激活运动(HAM)鉴定采用CASA分析方法;以EIA法测定精子细胞cAMP水平;采用PY、PS和PT抗体免疫测定评价Adjudin是否参与精子获能相关事件——蛋白酪氨酸、丝氨酸和苏氨酸磷酸化.结果：Adjudin抑制孕酮诱导的精子获能和ZP触发的顶体反应,并呈剂量依赖关系,由此导致精子受精能力明显下降.值得注意的是Adjudin抑制精子获能是一个可逆过程.Adjudin抑制精子HAM,但不影响精子活力;它显著抑制Forskdin激活的跨膜腺苷酸环化酶(tmACs)和HCO3激活的胞内可溶性腺苷酸环化酶(sAC)活性,导致人精子[cAMP]i水平显著下降.此外,Adjudin可明显抑制丝氨酸和苏氨酸蛋白磷酸化,但不能抑制蛋白酪氨酸磷酸化.Adjudin抑制获能和获能相关事件只能在含Cl-培养基中发生,在缺Cl-培养基中不能发挥其抑制作用,提示CI及其通道可能参与精子HAM和获能事件;加入cAMP激动剂dbcAMP既可拮抗Adjudin的抑制作用,亦可克服缺Cl-引起的HAM和获能的抑制作用.结构性C1-通道抑制剂DPC和DIDs均可抑制人精子获能,进一步支持Adjudin可能抑制Cl-/HCO3-交换子的功能.结论：Adjudin是一强有力的结构性Cl-通道家族抑制剂,干扰Cl-功能,从而阻止人精子获能和受精能力.

摘要： 公猪的受精能力在规模化养猪生产起到至关重要的作用。养猪生产中，对于公猪的受精能力的评估，主要是通过精液的常规品质评定实现的。但是，常规的品质评定往往不能准确评估公猪个体的受精能力，这就需要发展一些相对准确并且有一定预见性的生物标记物来满足高水平养猪业的需要。本文对于目前所知公猪受精能力相关标记，诸如精清蛋白、精子附着蛋白，及其遗传信息方露的研究内容进行综述，为养猪从业人员和期望在该领域的深入研究提供参考。

摘要： 本文主要对公猪受精蛋白的一些研究进行介绍，阐述相关蛋白分子的功能作用以及与公猪受精能力的关系，并对其在提高公猪受精能力和育种水平上的应用前景提出展望。

摘要： 本试验希望通过深入系统地研究猪精液冷冻机理和生产的关键技术，探讨影响猪冻精活率及受精能力的因素，用改良的冷冻系统进行冷冻或经其它方法保存后，并用子宫角深部输精的方法进行输精。

摘要： 目的：针对Usp26基因突变与男性精液质量及其受精能力的关系进行研究。方法：应用精液分析及针对其它不育因素的检测方法,如免疫性因素如抗精子抗体,感染性因素如沙眼衣原体和解脲支原体等不育原因,以及精浆生化项目(如酸性磷酸酶、果糖和α-葡糖苷酶)测定筛选特发性不育男性患者.提取上述不育组和对照组的外周血DNA,应用PCR技术扩增Usp26基因后行序列分析以确定突变方式和突变位点.采用精子穿透去透明带仓鼠卵母细胞试验(简称精子穿卵试验),检测基因突变的特发性不育症患者精子的受精功能.结果：筛选出的44位特发性男性不育患者主要表现为精子密度低，活动率差。基因测序分析结果显示:44位不育患者中9位(22.0%, P=0.01)存在Usp26基因的改变。其中，从8名(19. 5%a , P =0. O1)患者中检测出复合突变:364位插人ACA和460位A置换了仪从1名(2.4%, P>0.05)患者中检测出1044位的A置换了T。以上三种变化均可以导致编码氨基酸的改变:46l)位的G一A使撷氨酸转变为异亮氨酸;1044位的T-A使苯丙氨酸转变为亮氨酸;364位ACA的插入则引入了苏氮酸。56位正常生育男性中均未发现该基因的突变。精子穿卵实验显示，不育组的卵子受精率(17. 50%)和受精指数(2.7)均显著低于相同实验条件下生育组的卵子受精率和受精指数(P<0.01)。结论：Usp26基因可能与雄性生殖有关，该基因的突变可能会引起精液质量下降和受精障碍。

摘要： 目的：采用拉曼光谱非侵入性技术，对精子受精能力与形态提供了详细的评估，以此探寻可能发生在精子细胞染色质的分子结构变异，进一步筛选正常精子用于辅助生殖技术。方法：选取在上海交通大学医学院附属仁济医院就诊的严重畸形的断头精子患者为研究对象，以生育者的正常形态精子为对照。采用拉曼光谱非侵入性技术分析精子染色质情况。结论：由于拉曼光谱分析，无需破坏样品，能直接对精子形态与功能进行无损鉴别，这对精子的DNA分子结构，以及和DNA与其他分子间的作用研究特别重要。拉曼光谱作为一种无损伤的生殖细胞评估技术，对临床有重大的研究价值，可望成为精子形态与功能的新的无创评估技术。

摘要： 家兔精子质量的评定，对于人工授精技术和体外受精技术的应用具有重要意义。目前，用于反映精子质量的指标和评定方法有：精液量、精子密度和形态、精子运动力、活率、质膜完整性、顶体完整性、精子染色质状态、线粒体活性和受精能力的检测。在生产上，进行多指标联合检测，是目前评定精子质量有效的方法。本文对上述指标的评定方法进行了综述，并对其发展进行了展望。

摘要： [目的]通过对野牦牛新鲜精子、冷冻精液的超微结构的研究，了解野牦牛精子结构和冷冻对野牦牛精子生理结构的影响，为利用野牦牛遗传资源，提高人工授精(AI)和体外受精(IVF)技术的研究提供实验依据。[方法]野牦牛鲜精和冻精通过离心洗涤去上清液，利用电镜制作方法制片并观察其结构形态。[结论]野牦牛精子的形态结构符合牛属动物精子特征，只是其大小略有差异，全长为78.34±7.24μm。野牦牛精子冷冻保存后，其头部、颈部和尾部均受到不同程度的损伤，精子顶体、顶体内容物出现分布不均现象，中段原生质膜破损或脱落，螺旋线粒体裸露，线粒体发生断裂、剥离和丢失超微结构明显损伤，受精能力明显下降。

摘要： 用mRNA差异显示技术对鸡贮精腺中基因的差异表达进行研究,分离并筛选出两个差异表达片段SST02和SST03,经测序和BLAST比对,发现SST02碱基序列与鸡第3号染色体上的丝裂素活化蛋白激酶基因的一部分相似,同源性达98.7％；SST03序列与鸡第8号染色体上磷脂酰肌醇蛋白聚糖基因的一部分相似,同源性达98.5％。综合这两个基因的功能并结合贮精腺的生理功能发现,这些基因的表达产物能使得精子在贮精腺内长期保存并维持其受精能力。

摘要： 本发明提供了一种用于选择母鸡储精能力期间受精率的SNP分子标记及其应用，通过全基因组关联分析（GWAS）和限制性内切酶长度多态性（PCR‑RFLP）技术方法，首次在母鸡基因组3号染色体上筛选到6个与母鸡储精能力期间受精率相关联的SNP分子标记，这些SNP位点的多态性与母鸡的储精能力期间的受精率（授精一次至母鸡产出最后一枚受精蛋之间受精蛋个数所占产蛋个数的百分率）显著关联，所述的SNP分子标记可以分别单独用于选择和改良母鸡的受精率。

摘要： 本发明提供了一种与母鸡储精能力期间受精率相关的SNP分子标记及其应用，通过全基因组关联分析（GWAS）和限制性内切酶长度多态性（PCR‑RFLP）技术方法，首次在母鸡基因组13号染色体上筛选到6个与母鸡储精能力期间受精率相关联的SNP分子标记，这些SNP位点的多态性与母鸡的储精能力期间的受精率（授精一次至母鸡产出最后一枚受精蛋之间受精蛋个数所占产蛋个数的百分率）显著关联，所述的SNP分子标记可以分别单独用于选择和改良母鸡的受精率。

摘要： 一种快速分离葡萄串状青鳉受精卵为单个受精卵并清理受精卵卵膜表面的方法，涉及一种鱼类人工精卵护理、处理的方法。本发明提供了一种能够快速分离葡萄串状青鳉受精卵为单个受精卵，同时清理受精卵卵膜表面丝状物的方法。方法：一、将青鳉受精卵剥离转入培养液或者曝气自来水中；二、将成簇的受精卵分离成n块；三、在培养皿底部铺上砂纸，再加入培养液或者曝气自来水浸没砂纸；四、将步骤二分离的受精卵放在步骤三湿润的砂纸上面，揉滚受精卵。本发明方法能够有效的实现葡萄串状受精卵分离为单个受精卵，去除青鳉受精卵卵膜表面丝状物，获得的青鳉胚胎卵膜表面干净、清洁，细胞发育清晰可见，便于观察胚胎发育时期观察和其它与之相关的实验。

摘要： 本发明提供了一种提高玻璃化冷冻牛卵母细胞受精能力的方法。本发明在玻璃化冷冻处理前，将牛卵母细胞采用含有钆和CLC的溶液联合处理，再进行玻璃化冷冻；解冻后采用甲基化‑β‑环糊精处理，而后进行体外受精。结果表明，该方法能够显著提高玻璃化冷冻牛卵母细胞的卵裂率和囊胚率，并且高于新鲜牛卵母细胞的体外受精效率，具有广泛的应用前景，值得推广。

摘要： 本发明提出了花青素和吡咯喹啉醌在提高性控冻精体外受精能力方面的用途，并提出了添加花青素和吡咯喹啉醌的洗精液和受精液。本发明在牛性控冻精解冻、获能过程中，向洗精液和受精液中分别都加入花青素和吡咯喹啉醌，来处理牛性控冻精，而后进行体外受精。结果表明，牛性控精液的卵裂率、囊胚率得到显著性提高，并显著超过了同头公牛未分离冻精的体外受精效率，具有广泛的应用前景，值得推广。

摘要： 本发明公开了一种SLC2A1表达在制备卵母细胞受精能力检测试剂盒上的应用。作为一项评估卵母细胞生理功能的方法，属于细胞学、生物技术领域。其最主要的特性是：1）在卵母细胞中，SLC2A1是葡萄糖转运蛋白家族中表达最多的葡萄糖转运蛋白；2）在卵母细胞中，SLC2A1表达量与其受精能力成正相关；3）未能受精的卵母细胞表现了SLC2A1基因的缺失和显著下降；4）这种卵母细胞受精能力检测试剂盒是通过实时荧光定量反转录多肽链反应（qRT‑PCR）法，检测分析同一卵母细胞中SLC2A家族目前已知的全部成员的表达，发现SLC2A1与卵母细胞质量及其受精能力有关，为辅助生殖技术的质量控制提供了有效的生物学评估手段。

摘要： 本发明涉及家禽遗传育种技术领域，具体涉及一种检测母鸡持续受精能力的方法。该方法主要包括如下步骤：公鸡精液品质评定及分组、混合精液稀释、人工输精、合格种蛋收集、孵化照蛋、计算母鸡持续受精天数(FDD)。本发明步骤简单、实施容易，充分考虑了公鸡精液品质和鸡蛋质量对种蛋受精的影响，重点关注母鸡输精后前几天所产种蛋受精情况。以FDD作为评价依据，能有效地反映母鸡持续受精潜能。本发明为母鸡持续受精能力的准确测定提供了新的手段和思路，在家鸡持续受精能力的遗传改良工作中具有广阔的应用价值。

摘要： 本发明涉及家禽遗传育种技术领域，具体涉及提高鸡持续受精能力的选育方法。该方法在产蛋高峰期和产蛋中后期对每个世代的育种群分别进行一次持续受精能力测定；依据第一次持续受精能力测定的结果和300日龄产蛋量评价综合育种能力，而后按照评价结果进行第一次综合选择并组建家系；待下一世代转入育成舍后，再依据第二次持续受精能力测定的结果和全期产蛋量评价双亲的综合育种能力，并按照评价结果对后代做第二次综合选择。本发明方法既可以有效提高鸡持续受精能力和群体受精水平，又兼顾了产蛋量等性状的选育效果，而且第二次选择时，考虑了亲本对后代数量的不均等遗传贡献。本发明在家禽育种领域具有广阔的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种根据人精子mRNA评估精子受精能力的方法，评估步骤包括如下：S1，提取：首先对精子样本中的mRNA进行提取，在提取的过程中由于mRNA末端含有多poly(A)+，所以当mRNA流径纤维素时，加入适量的高盐缓冲液，这样在高盐缓冲液的作用下，其中的mRNA就会被特异的吸附在纤维素柱上，这样在低盐浓度或蒸馏水中，mRNA可被洗下，经过两次纤维素柱，即可得到纯度较高的mRNA，S2，质量检验：制备12g/L甲醛变性凝胶。本发明通过采用精细化提取步骤并结合聚合酶链反应方式检测来对精子中的mRNA进行评估，如此即可准确的了解到人精子本身的活性程度，从而也就可以明确被检测者的精子受精能力，且整个评估过程精简明了，评估效果的准确性较高，具有广泛的应用前景。

摘要： 本发明提供了STAC2卵丘细胞在评估卵母细胞受精能力中的应用，属于生物工程领域。本发明通过RNA‑seq等技术发现，卵丘细胞的基因组分析可以作为评估卵母细胞质量、胚胎能力和妊娠结果的高通量和非侵入性手段，尤其是STAC2，与合格卵母细胞密切相关，可作为一种生物标志物，用于改善健康胚胎的选择，从而实现良好的妊娠率。