外排泵

摘要： 目的观察老年科临床分离鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物的敏感性及外排泵基因携带情况,为医院感染防控和临床合理用药提供理论依据。方法收集老年科临床分离的非重复鲍曼不动杆菌85株,采用纸片扩散法检测其对临床常用的15种抗菌药物的敏感性,并采用聚合酶链反应(PCR)方法检测adeB、adeG和adeJ基因的携带情况。结果鲍曼不动杆菌对多黏菌素B的敏感率为100.0%,对米诺环素(29.4%)、头孢哌酮-舒巴坦(35.3%)、阿米卡星(38.8%)和庆大霉素(41.2%)的耐药率较低,对其他检测药物的耐药率均超过50.0%,其中多重耐药菌为49株(占57.6%)。PCR结果显示,多重耐药鲍曼不动杆菌adeB、adeG和adeJ外排泵基因的阳性率分别为73.5%、77.6%和71.4%,高于非多重耐药鲍曼不动杆菌,差异有统计学意义(P<0.05)。结论老年科鲍曼不动杆菌耐药形势较严峻,其多重耐药与携带adeB、adeG和adeJ基因相关。

摘要： 目的探讨肺炎克雷伯菌(KP)中外排泵OqxAB、AcrAB和QepA介导的左氧氟沙星(LVX)耐药机制。方法选择分离自南京鼓楼医院集团仪征医院2018年7月至2020年12月的门诊和住院患者的106株KP(剔除同一患者相同部位的重复分离株),采用微量肉汤稀释法检测KP对常用抗菌药物的敏感性,根据药物敏感试验结果随机选择24株对LVX耐药的KP作为试验组,27株LVX非耐药的KP作为对照组。采用羰基氰氯苯腙泵抑制法检测KP的外排泵表型,采用实时定量反转录PCR检测外排泵OqxAB、AcrAB和QepA相应表达基因OqxA、acrB和QepA的表达水平,采用常规PCR及测序检测acrR基因突变。分析两组KP外排泵基因表达水平的差异,LVX最低抑菌浓度(MIC)与外排泵基因表达水平间的关联性,以及两组KP外排泵表型的差异。结果试验组与对照组KP外排泵表型试验结果差异无统计学意义(P>0.05)。两组KP外排泵基因OqxA、QepA表达水平差异无统计学意义(P>0.05),而acrB表达水平差异有统计学意义(P0.05)。结论外排泵是介导KP对LVX耐药的机制之一,AcrAB在外排泵介导KP对LVX耐药中具有明显作用;OqxAB和QepA虽广泛分布于KP中,但并不是介导KP对LVX耐药的主要机制。

摘要： 黑龙江省齐齐哈尔市周边牛场发生了犊牛腹泻情况,通过检测发现致病菌为致病性大肠杆菌。通过纸片法药敏试验发现这株大肠杆菌对四环素极为耐药,通过PCR探究其携带的耐药基因,发现其携带tetK耐药基因。表明该株大肠杆菌通过tetK基因编码四环素类抗生素药物外排泵,将四环素类药物排出体外,保护细菌核糖体,从而使细菌产生耐药性。

摘要： 念珠菌感染是临床最常见的机会性真菌感染之一,好发于老年人群、癌症化疗、移植术后、HIV感染等免疫低下人群。研究显示,患有恶性肿瘤及接受过手术的老年患者中,侵袭性念珠菌病的患病率分别可达73.7%及74.1%[1]。而HIV感染患者中口咽念珠菌病的患病率可高达79.4%[2]。此外,随着体内置管及心脏瓣膜等植入性生物材料的广泛应用,由生物膜引起的深部真菌感染发病率也日趋增多,并可导致40%~60%的高死亡率[3]。

摘要： 结核病是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)引起的一种传染病。随着多药耐药和广泛耐药结核分枝杆菌的出现,结核病的治疗变得更为艰难。近年来研究发现,结核分枝杆菌存在外排泵是其耐药的原因之一,现已发现结核分枝杆菌的主要易化子超家族(major facilitator superfamily,MFS)、三磷酸腺苷(adenosine-triphosphate,ATP)结合盒超家族(ATP-Binding Cassette,ABC)、耐受小节分裂区家族(resistance-nodulation-division,RND)和小耐多药性家族(small multidrug resistance,SMR)外排泵。但是人们对结核分枝杆菌外排泵介导的耐药现象认识不足,仍缺乏从新药发现角度研发外排泵抑制剂的研究。本文拟对结核分枝杆菌的ABC、MFS、RND和SMR外排泵的结构和功能,以及结核分枝杆菌外排泵抑制剂的研究进展进行综述。

摘要： 白色念珠菌是侵袭性真菌中最常见的机会致病菌,唑类药物是临床最常用的抗真菌药物之一,长期广泛使用导致耐药性增加。针对抗真菌药物种类的缺乏,药物联用不仅降低单一药物剂量,同时降低药物毒性,已成为当前防治药物耐药研究领域的热点。文章探讨了药物外排、生物膜形成、钙调磷酸酶及热休克蛋白等白色念珠菌常见的耐药机制,对目前联合用药物逆转白色念珠菌唑类耐药机制的研究进展进行综述,并进一步探讨了未来新型抗真菌药物研发的可能靶点。

摘要： 结核病(TB)是一种在全球范围内流行的慢性致死性人畜共患传染病,目前在欧美等发达国家野生及家养动物中感染现象普遍存在,而对于饲养动物,欧美等发达国家以扑杀淘汰为主要防控措施,发展中国家采取的是以抗生素联合抗结核药物治疗为主,淘汰为辅的防控措施,但结核分支杆菌在长期的高浓度药物环境中会出现耐药现象,不仅没有有效的防治结核,而且加重结核分支杆菌对社会的危害性。目前已有30%~75%的广泛耐药结核病患者仍未能被治愈,而对于动物耐药性结核分支杆菌的危害更是无法估量。防治耐药性结核杆菌已成为研究分支杆菌主要的研究重点之一。而外排泵作为耐药的主要原因之一,外排泵在参与菌体生理代谢的同时,对保护菌体阻止药物进入也至关重要,深入研究有助于靶向药物和外排泵抑制剂的研发,目前已研究鉴定的外排泵家族主要有4大区域,论文主要围绕外排泵结构功能及其相关的最新研究,阐述外排泵与耐药的相关性,为耐药结核靶向性药物的研发提供思路及参考。

摘要： 耐多药肠杆菌的出现严重威胁着人类健康.AcrAB-TolC外排泵的过量表达是引起肠杆菌多重耐药的主要机制之一,其主要由周质融合蛋白AcrA、外膜通道蛋白TolC和药物质子转运子AcrB构成,受整体调控因子、局部调控因子以及环境中的化学物质等调节.对AcrAB-TolC外排泵的研究,不仅有助于阐明相关耐药本质,还有助于研制有临床意义的外排泵抑制剂(EPIs),为解决肠杆菌多重耐药问题提供新思路.本文对AcrAB-TolC外排泵的结构、调控等方面的研究进展作一综述.

摘要： 大肠埃希菌的主动外排系统是抗生素耐药性的主要机制.外排泵是将抗生素泵出体外的特定蛋白,通常细菌的外排泵系统可以排出不同化学性质的有毒物质,有助于病原菌抵御外界恶劣环境,但也增强了对临床抗菌药的抵抗力,使细菌发生多重耐药.外排泵是细胞输出药物的一种途径,同时也是细胞获得抗微生物和肿瘤化疗耐药性的主要因素.因此,未来应集中于外排泵系统的识别和运输机制、外排泵的结构特点、不同类型外排泵之间的相互作用以及外排泵抑制剂体内外的研究,为探索药物识别和药物输出机制奠定基础.

摘要： 为了探究高渗对多重耐药菌外排泵和外膜孔道蛋白基因表达及其生长的影响,试验应用生长曲线和相对适应性测定,对比考察不同盐胁迫条件对多重耐药大肠杆菌QL15和敏感大肠杆菌ATCC 25922的生长差异,采用RT-PCR方法考察2种盐胁迫条件下外排泵与外膜孔道蛋白基因表达差异.结果表明,大肠杆菌QL15为高水平多重耐药菌,其中对大观霉素和恩诺沙星耐药最为严重,可达耐药标准MIC的32倍;独立培养时大肠杆菌QL15对NaCl胁迫的敏感性大于大肠杆菌ATCC 25922,并且在6.0％NaCl胁迫下,大肠杆菌QL15在10 h内生长缓慢,但是在24 h细菌峰值浓度更高;混合培养时大肠杆菌QL15在6.0％NaCl胁迫时具有更高的适应性,在体外培养中更具竞争优势.大肠杆菌QL15共携带5大类、15种耐药相关基因,其中含8种外排泵基因和3种外膜孔道蛋白基因;大肠杆菌ATCC 25922在6.0％NaCl浓度下的5种基因表达量较3.5％NaCl均出现约50％ 的显著下调(P<0.05),大肠杆菌QL15在6.0％NaCl浓度下除acrB、ompF基因下调外,其余3种外排泵与外膜孔道蛋白基因的表达量则显著上调(P<0.05).推测大肠杆菌QL15对盐胁迫具有更高的适应性的原因可能与细胞膜相关蛋白的表达相关.

摘要： 外排泵基因是细菌耐药性形成的主要因素之一,其中主要易化超家族系统(MFS)可通过基因水平转移导致耐药性的播散.本文通过大规模基因组测序,结合生物信息学分析,对分离自临床标本的大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、阴沟杆菌、肺炎克雷伯菌等种属共1200菌株进行MFS类外排泵基因的多样性、多态性分析及结构与基因功能关系的研究.结果显示:六种属菌株基因组编码了包括氯霉素类、四环素类、林可霉素类、诺氟沙星类、甲基紫类、阿拉伯糖类、转运蛋白类、多耐药类等共计17种MFS外排泵耐药性相关基因,其中floR、cmlA、tetA、emrB、emrD、emrK、emrY、yieO、yebQ等9个基因较常见,而某些基因只出现在个别菌种中,如fexA基因只在肺炎克雷伯菌中出现,lmrB基因只在阴沟肠杆菌中检出.通过PCR扩增、克隆了六种属细菌的235个flog基因并测序，聚类分析可将所有floR基因归为3簇(cluster)，其中Cluster One包含218个克隆，Cluster Two包含15个克隆，两簇序列同源性在81%左右，另外2个基因与上述2簇同源性较低，另为一簇。对前2簇基因进行SNPs位点分析发现，Cluster One共检出95个同义突变(Ks),148个非同义突变(Ka)和5个无义突变;Cluster Two中共检出5个同义突变和10个非同义突变。对235个克隆进行了氯霉素和氟苯尼考的耐药性测定(MIC)，结果发现不同克隆对2种药物的敏感性不同，耐药程度分布在2-512μg/mL，大多数在64-256μg/mL之间。本文结果说明，新一代高通量测序技术非常适合在群体水平上分析耐药性相关基因的多样性和遗传变异规律研究，挖掘新的耐药性基因。

摘要： 有机紫外防晒剂被广泛添加于个人护理品,随着日常使用源源不断地进入环境中,成为一类新兴污染物.本文采用同源建模，通过鼠P-gP的晶体结构(3G5U)建立了嗜热四膜虫P-gP的三维立体结构，并运用Autodock 4.2对有机紫外防晒剂与嗜热四膜虫P-gp的相互作用进行了计算机模拟。rn 对接结果表明，三种有机紫外防晒剂3-(4-甲基苯亚甲基)-樟脑(4-MBC)、二苯酮-3(BP-3)和丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷(BM-DBM)与嗜热四膜虫P-gp的结合能分别为-8.19,-6.64和-7.41 kcal/mol，由低到高依次为4-MBC＜BM-DBM＜BP-3，提示三种化合物中4-MBC对P-gP外排功能的抑制最强，其次为BM-DBM，最弱的是BP-3。对接结果与课题组前期嗜热四膜虫外排泵功能抑制实验结果一致。三种有机紫外防晒剂均作用于嗜热四膜虫P-gP疏水结合腔内，该位点主要氨基酸残基有Thr200,Asn281,Phe285,Phe288,Met325,Ser328,Phe329等。4-MBC可与与Ser328之间形成氢键;BP-3分别与Thr200和Ser328产生两个氢键;而BM-DBM能够与Asn281形成一个氢键。提示三种化合物与嗜热四膜虫P-gp的主要作用方式为疏水作用和氢键作用。

摘要： 概述_了大肠杆菌中激活外排泵和减少摄入量这两个重要的耐药机制和克服它们的新策略,主要包括近年来在理解外排泵系统的物理结构、功能和调控子中的进步和有利于开发以外排泵为靶位的药物研究进展.

摘要： 绿脓假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa,Pa)是一种临床上最常见的引起严重医院感染的条件致病菌.由于其固有与获得性耐药,使得治疗成为一大难题,碳青霉烯类抗生素藉其抗菌作用强,对β内酰胺酶高度稳定等优点,被临床广泛应用,随之而来的耐药菌株也逐渐上升.目前国外大量研究发现其耐药与主动外排泵的过度表达有关.本研究观察两种外排泵抑制剂Carbonylcyanidem-chlorophenyl-hydrazone(CCCP)与Phe-Arg-β-naphthylamide(PAβN)在107株Pa菌株中对亚胺培南(imipenem,IMP)和美罗培南(meropenem,MEP)的敏感性影响;对筛选出来的32株对亚胺培南和美罗培南不同耐药表型的Pa,采用实时荧光定量PCR法,检测三种外排泵基因(mexA、mexD、mexF)的表达量,探索临床Pa对亚胺培南和美罗培南耐药性差异与其外排泵表达水平之间的关系.

摘要： 本文公开了式(I)化合物：和其盐。还公开了包含式I化合物的组合物以及式I化合物用于治疗或预防细菌感染。

摘要： 本发明涉及一种鱼缸泵吸鱼便外排电动伸缩管,包括，丝杆电机、电动伸缩管，其特征在于：还包括，自动集中鱼便钝角或弧形玻璃内缸底具有比重大于水的鱼便沿斜坡呈纵向窄长条状自动沉淀的自动集中鱼便区，手按住外排鱼便按键或定时器同时启动丝杆电机和虹吸鱼便外排水泵、电动伸缩管的右排往复虹吸鱼便孔和左排固定虹吸鱼便孔强吸沉淀在自动集中鱼便区的鱼便混合水、电动伸缩管往复行程（10cm）的单程及虹吸鱼便外排水泵运行（7秒），就将自动集中鱼便区长达（2米）范围内沉淀的鱼便混合水通过外排接口直接排出养鱼水系，从源头上解决了100%的鱼便依靠循环水过滤的沉重负担，摆脱了日常频繁洗绵和换水，该项治本技术比现有治标技术效果突出。

摘要： 本申请涉及泵头及具有该泵头的组合阀外排式高压分体注水泵，泵头包括：泵头体包括泵头端盖；泵头体设有进水口及出水口；阀体套接于柱塞腔，阀体设有进水回位弹簧及出水回位弹簧；进水回位弹簧顶住阶梯孔；阀体设有水环槽，进水口与柱塞腔连通，第一孔道与阀体呈第一倾斜角度；出水口与柱塞腔连接，第二孔道与阀体呈第二倾斜角度；第一孔道与进水回位弹簧间贴合进水阀片，第二孔道与出水回位弹簧间贴合出水阀片。本申请提供的泵头及具有该泵头的组合阀外排式高压分体注水泵，组合阀外排式高压分体注水泵采用多个泵头方式，利用第一孔道及第二孔道实现柱塞腔连通，通过进水阀片与出水阀片实现对泵头出水速率控制，保证了高压分体注水泵工作效率。

摘要： 本实用新型涉及一种鱼缸泵吸鱼便外排电动伸缩管,包括，丝杆电机、电动伸缩管，其特征在于：还包括，自动集中鱼便钝角或弧形玻璃内缸底具有比重大于水的鱼便沿斜坡呈纵向窄长条状自动沉淀的自动集中鱼便区，手按住外排鱼便按键或定时器同时启动丝杆电机和虹吸鱼便外排水泵、电动伸缩管的右排往复虹吸鱼便孔和左排固定虹吸鱼便孔强吸沉淀在自动集中鱼便区的鱼便混合水、电动伸缩管往复行程（10cm）的单程及虹吸鱼便外排水泵运行（7秒），就将自动集中鱼便区长达（2米）范围内沉淀的鱼便混合水通过外排接口直接排出养鱼水系，从源头上解决了100%的鱼便依靠循环水过滤的沉重负担，摆脱了日常频繁洗绵和换水，该项治本技术比现有治标技术效果突出。

摘要： 本发明提供了包含大肠杆菌四环素外排泵A(TetA)的氨基酸序列的突变多肽以及编码所述多肽的多核苷酸。本发明提供了包含一个或多个第一多核苷酸、一个或多个第二多核苷酸的第一表达质粒载体和包含所述表达质粒载体的转化体，所述第一多核苷酸编码四环素外排泵，所述第二多核苷酸独立地选自第三多核苷酸和第四多核苷酸，所述第三多核苷酸编码包含赖氨酸脱羧酶多肽，所述第四多核苷酸编码包含赖氨酸生物合成多肽。本发明提供了包含一个或多个整合进宿主细胞染色体中的本发明所述的第一、第三或第四多核苷酸的宿主细胞。本发明还提供了使用所述转化体和/或突变宿主细胞生产赖氨酸或尸胺的方法。

摘要： 本发明属于兽药制备与应用领域，具体涉及一种抑制沙门氏菌外排泵的抗生素佐剂及类似物的应用。利用分子对接方法将AcrB蛋白与潜在候选药物对接，以多潘立酮为最佳候选外排泵抑制剂，通过棋盘法确认多潘立酮增强恩诺沙星抗耐药沙门氏菌和耐药大肠杆菌的抗菌活性的及最佳比例；通过AcrAB‑TolC泵的阳性抑制剂确认了多潘立酮对沙门氏菌AcrAB‑TolC泵的抑制活性。并进一步确证了多潘立酮在抑制沙门氏菌生物膜形成和抑制沙门氏菌多宿主致病力中的作用。本发明证明了多潘立酮与抗菌药物联用时不仅可有效逆转耐药沙门氏菌和大肠杆菌的耐药性，且在抑制生物膜形成和致病力方面有显著的效果。

摘要： 本发明公开了一种靶向肺炎克雷伯菌MdtABC外排泵的sRNA及在制备四环素类抗生素耐药株中的应用。本发明通过对肺炎克雷伯菌替加环素诱导耐药株的生物信息学分析，筛选得到负调控MdtABC外排泵的sRNA—120sRNA。将肺炎克雷伯菌临床敏感株KPS改造为120sRNA敲除株KPS‑△120sRNA。通过最低抑菌浓度实验(MIC)检测120sRNA敲除前后肺炎克雷伯菌对抗生素的敏感性变化。结果发现，120sRNA敲除后菌株对替加环素、奥玛环素以及依拉环素的耐药性均为敲除前菌株的4倍。以上结果揭示了120sRNA对mdtABC外排泵基因的表达有反向调控作用，120sRNA敲除后能够提高肺炎克雷伯菌的耐药性。本发明的提出为研究sRNA参与细菌耐药机制调控以及抗肺炎克雷伯菌耐药菌药物的研制提供了新的技术手段。

摘要： 本发明属于医药化学领域，涉及一种AcrB外排泵抑制剂及其制备方法和应用。AcrB外排泵抑制剂的活性成分为苯并[h]色烯类衍生物或其药学上可接受的盐，或者所述苯并[h]色烯类衍生物或其药学上可接受的盐的溶剂化合物、对映异构体、非对应异构体、互变异构体或其任意比例的混合物，所述苯并[h]色烯类衍生物的化学结构如式A所示：其中，X为连接基团，X选自NH、O或S，n为1或2，R选自C1‑C8直链或支链烷基、环烷基、取代苯基、取代芳杂环、芳杂基和杂烷基。本发明的AcrB外排泵抑制剂联合粘菌素协同抗生素使用时可将对于表达AcrB的大肠埃希菌最小抑菌浓度降低至0.125μg/mL。

摘要： 本发明提供了靶向细胞外排泵和癌症相关抗原二者的多特异性抗体，以及包含或编码此类多特异性抗体的药物组合物、核酸、重组表达载体、细胞和试剂盒。还提供了治疗受试者的癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用靶向细胞外排泵和癌症相关抗原二者的多特异性抗体。还提供了产生所述多特异性抗体的方法以及与其相关的试剂，包括可用于主题方法中的经基因修饰的细胞系以及制备此类经基因修饰的细胞系的方法。

摘要： 本发明公开一种参与吩嗪类物质myxin自我抗性的外排泵LexABC及其编码基因与应用。该外排泵LexABC的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。提供lexA、lexB、lexC基因；将所述的lexA、lexB、lexC基因与载体pBBR1‑MSC5通过无缝连接克隆，得到重组质粒pBBR‑lexABC；将重组质粒pBBR‑lexABC转化至抗生素溶杆菌OH13，得到LexABC过表达的重组菌株。本发明通过过表达LexABC蛋白，可增强myxin产生菌对myxin的抗性，保护myxin产生菌免受来自高浓度myxin的毒性，对于培养myxin高产菌株及开发myxin产生菌为生物农药具有重要实际意义。