尖吻蝮蛇血凝酶

摘要： 目的探讨尖吻蝮蛇血凝酶对鼻中隔矫正术患者手术创面的止血效果。方法选取2019年1月至2020年10月于天津市武清区中医医院行鼻中隔矫正术治疗的100例患者作为研究对象,将其随机分为对照组和试验组,各50例。试验组于术前30 min经静脉输入尖吻蝮蛇血凝酶2 U,并于术后24 h第二次注射2 U,对照组于术前30 min注射0.9%氯化钠注射液,比较两组的凝血功能指标、血常规指标、术中出血量及并发症发生情况。结果两组术前及术后3 d的血浆凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)均在正常参考范围,组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组术前及术后红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)指标均在正常参考范围,组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。试验组术中出血量少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组未出现血栓等并发症及用药不良结局。结论尖吻蝮蛇血凝酶干预可提高对行鼻中隔矫正术患者的止血效果,且安全性较高。

摘要： 目的 利用血栓弹力图观察尖吻蝮蛇血凝酶(HCA)在体外对健康人和创伤性脑损伤(TBI)患者凝血状态的影响.方法 纳入2018年12月至2019年6月天津医科大学总医院收治的TBI患者10例,同期选择年龄性别匹配的24名健康人作为对照组,收集所有研究对象的临床资料及血液样本.将不同梯度浓度的HCA加入研究血液样本中,进行血栓弹力图检测,分析两组间血栓弹力图参数凝血反应时间(R值)、凝血动力学时间(K值)、凝固角(α角)和最大振幅(MA值),探讨HCA对TBI患者凝血状态的影响.结果 TBI患者组男7例、女3例,年龄的M(范围)为33(28～39)岁,健康对照组男11例、女13例,年龄的M(范围)为33(23～49)岁.TBI患者组和健康对照组在不同浓度梯度的R值、K值、α角和MA值差异有统计学意义(x2值分别为109.80、131.28、185.47、165.97和54.92、75.60、80.12、59.25,均P＜0.001).向血液标本中添加HCA浓度越高,TBI患者组和健康对照组R值和K值水平越高,α角和MA值越低.健康对照组在添加0～0.105 U/ml的HCA后R值间的差异有统计学意义(P=0.025),K值、α角和MA值差异均无统计学意义(P=0.275、0.206、0.330);TBI患者组在添加0～0.105 U/ml的HCA后R值差异无统计学意义(P=0.976),K值、α角和MA值差异均有统计学意义(P=0.047、0.041、0.034).健康对照组、TBI患者组以及整体数据的R值与HCA添加剂量呈正相关(r=0.552、0.700、0.420,均P＜0.001),K值与HCA添加剂量呈正相关(r=0.726、0.861、0.750,均P＜0.001),α角与HCA添加剂量均呈负相关(r=-0.815、-0.876、-0.807,均P＜0.001),MA值与HCA添加剂量均呈负相关(r=-0.757、-0.710、-0.729,均P＜0.001).结论 HCA不会加重健康人和TBI患者血液的促凝状态,并且随加入血中HCA浓度增加,两组的血液样本均表现出凝固能力减低的趋势.

摘要： 笔者对成功抢救1例因使用注射用尖吻蝮蛇血凝酶(苏灵)致过敏性休克患者的病例资料进行回顾性分析.

摘要： 目的 比较尖吻蝮蛇血凝酶联合酚妥拉明或垂体后叶素治疗支气管扩张伴咯血的疗效.方法 选取我院2018年1月至2020年1月收治的60例支气管扩张伴咯血患者,随机将其分为对照组和观察组各30例.两组均给予镇咳、抗感染、体位引流等常规治疗.对照组采用尖吻蝮蛇血凝酶联合酚妥拉明治疗,观察组采用尖吻蝮蛇血凝酶联合垂体后叶素治疗.比较两组的临床疗效、咯血血止时间、住院时间.结果 观察组的总有效率高于对照组,咯血血止时间、住院时间均短于对照组(P＜0.05).结论 尖吻蝮蛇血凝酶联合垂体后叶素治疗支气管扩张伴咯血疗效更佳,可有效缩短咯血血止时间及住院时间,促进患者康复.

摘要： 骨折切开复位内固定术、髋膝关节置换术和脊柱后路手术是骨科手术中常见的手术方式,已获得广泛地发展和运用.然而,复杂的骨折、全髋膝关节置换和多节段的脊柱手术通常伴发大量的失血,围手术期大量失血可能导致多种并发症的发生,因此,在骨科手术中如何有效安全地控制出血至关重要.止血药物已经大量应用于控制外科手术的失血,其中,尖吻蝮蛇血凝酶应用广泛.尖吻蝮蛇血凝酶(HCA)来源于我国特有的尖吻蝮蛇,是从该种毒蛇毒液中提纯得到的单一组分血凝酶,在临床众多外科手术中均具有良好的有效性和安全性,本文就尖吻蝮蛇血凝酶在目前骨科手术应用中止血疗效和安全性的研究进展进行了综述.

摘要： 目的 比较氨甲环酸与尖吻蝮蛇血凝酶对老年股骨转子间骨折内固定手术的止血效果及安全性.方法 股骨转子间骨折行内固定手术治疗的老年患者100例,随机分为氨甲环酸组和尖吻蝮蛇血凝酶组(血凝酶组),各50例.氨甲环酸组切皮前30 min给予氨甲环酸1 g,静脉滴注,关闭切口前将氨甲环酸1 g稀释至20 mg·mL-1于筋膜下及肌内注射.血凝酶组切皮前15 min单次缓慢静脉注射尖吻蝮蛇血凝酶2 U.观察指标:手术前后血红蛋白、红细胞计数、血小板压积,记录显性失血量、输血率、输血量、不良事件的发生情况.根据Gross线性方程计算围术期总失血量和隐性失血量.结果 氨甲环酸组和血凝酶组隐性失血量分别为(215.17±148.65),(340.27±170.85)mL(P0.05).结论 氨甲环酸对于老年转子间骨折内固定术止血效果优于尖吻蝮蛇血凝酶,尤其可减少隐性失血量.

摘要： 目的:了解我院妇科注射用尖吻蝮蛇血凝酶的使用情况,为加强尖吻蝮蛇血凝酶的应用管理,规范其临床应用提供参考.方法:回顾性分析2019年1月 –2020年10月我院妇科使用注射用尖吻蝮蛇血凝酶的出院患者病历信息,统计患者基本情况、临床诊断、手术名称、单次用药剂量、总用量、总疗程等信息.依据相关共识及参考指南,评价用药合理性.结果:共计1263例患者使用了注射用尖吻蝮蛇血凝酶,给药方式均为静脉注射;手术病历1234例(97.70％);203例存在不合理用药,其中给药频次不当者146例(71.92％),用药疗程过长(>7 d)者30例(14.78％),溶媒量不当者19例(9.36％),溶媒种类不当者8例(3.94％).结论:我院妇科注射用尖吻蝮蛇血凝酶存在不合理用药现象,需加强管理,确保其临床应用的安全性和有效性.

摘要： 目的:探讨尖吻蝮蛇血凝酶联合垂体后叶素治疗经皮肾镜碎石取石术后患者出血的临床疗效。方法:回顾性选取2018年6月—2020年12月本院泌尿外科接受经皮肾镜碎石取石术治疗的90例患者,按不同治疗方法分为对照组和研究组,各45例。两组患者均给予尖吻蝮蛇血凝酶注射剂注入氯化钠注射液100 ml稀释后静脉滴注,2 U/次,1次/d,连续用药3 d。研究组在对照组基础上联用垂体后叶素注射剂,将垂体后叶素注射剂注入5%葡萄糖注射液100 ml稀释后静脉滴注,24 U/次,1次/d,连续用药3 d。观察两组患者在术后的第3日、第5日、第7日的出血情况,住院时间和止血时间,肾功能指标的改善及不良反应发生情况。结果:研究组患者在术后的第3日、第5日、第7日的出血量均明显少于对照组(P<0.05);其住院时间和止血时间均明显少于对照组(P<0.05);两组患者治疗前后肾功能的主要指标(血清尿素氮、血清肌酐和尿微量白蛋白)比较均有改善(P<0.05),治疗后研究组患者肾功能指标的改善明显优于对照组(P<0.05);研究组患者的不良反应发生率为28.89%,但多数可耐受,对照组患者的不良反应发生率8.89%,两组比较有统计学意义(P<0.05)。结论:尖吻蝮蛇血凝酶联合垂体后叶素治疗经皮肾镜碎石取石术后出血的临床疗效肯定,可明显减低术后的出血量,减少患者的住院时间和止血时间,且有助于术后肾功能的保护,可在临床应用。

摘要： 目的:评价尖吻蝮蛇血凝酶(HCA)对手术创口止血作用的效果.rn 方法:使用计算机检索PubMed、CNKI、CBM、维普和万方等数据库收集采用HCA治疗手术创口出血的临床随机对照试验(RCT),并追溯纳入研究的参考文献.由2位评价者按照纳入与排除标准独立筛选文献、提取资料和评价质量后,采用RevMan 5.2软件进行Meta分析.rn 结果:最终纳入15篇文献,共1414个患者.Meta分析结果显示:与对照组比较,HCA可明显减少患者手术切口创面出血量[MD=-5.53,95％CI(-9.00,-2.07)],减少术后引流量[MD=-19.81,95％CI(-26.64,-12.99)],减少切口单位面积出血量[MD=-0.10,95％CI(-0.14,-0.07)],缩短止血时间[MD=-50.67,95％CI(-74.85,-26.49)],两组比较差异均有统计学意义.rn 结论:术前给予尖吻蝮蛇血凝酶能明显减少手术患者切口创面出血量、术后引流量和切口单位面积出血量,并缩短止血时间.

摘要： 目的：探讨注射用尖吻蝮蛇血凝酶对上消化道出血患者凝血指标的影响.方法：观察上消化道出血患者使用尖吻蝮蛇血凝酶的凝血指标,比较用药前后患者纤维蛋白原、部分凝血酶时间、凝血酶时间、凝血酶原时间、血小板数目等的变化情况.结果：用药前后,患者凝血酶原时间、部分凝血酶时间、血小板数目差异具有统计学意义(P＜0.05).结论：尖吻蝮蛇血凝酶治疗上消化道出血患者具有一定的疗效.

摘要： 目的：评价尖吻蝮蛇血凝酶(HCA)对手术创口止血作用的效果.rn 方法：使用计算机检索PubMed、CNKI、CBM、维普和万方等数据库收集采用HCA治疗手术创口出血的临床随机对照试验(RCT),并追溯纳入研究的参考文献.由2位评价者按照纳入与排除标准独立筛选文献、提取资料和评价质量后,采用RevMan5.2软件进行Meta分析.rn 结果：最终纳入15篇文献,共1414个患者.Meta分析结果显示：与对照组比较,HCA可明显减少患者手术切口创面出血量[MD=-5.53,95％CI(-9.00,-2.07)],减少术后引流量[MD=-19.81,95％CI(-26.64,-12.99)],减少切口单位面积出血量[MD=-0.10,95％CI(-0.14,-0.07)],缩短止血时间[MD=-50.67,95％CI(-74.85,-26.49)],两组比较差异均有统计学意义.rn 结论：术前给予尖吻蝮蛇血凝酶能明显减少手术患者切口创面出血量、术后引流量和切口单位面积出血量,并缩短止血时间.

摘要： 目的：建立尖吻蝮蛇血凝酶(商品名苏灵,代号Saculin)多克隆抗体检测的间接ELISA法,并应用于其临床免疫学检测.方法：免疫家兔获得多克隆抗体,western blot鉴定其特异性,通过比较各不同条件的检测结果来确立检测尖吻蝮蛇血凝酶多克隆抗体的间接ELISA法的最佳工作条件,并以此为参考检测临床血清。结果：间接ELISA法测定兔抗血清效价高达16553600, 55例临床试验受试者(36例为Saculin实验组，19例为安慰剂组)给药3周后血清抗体检测结果均为阴性。结论：本研究建立的抗尖吻蝮蛇血凝酶多克隆抗体间接ELISA法能够用于临床血清的判定。

摘要： 目的:在中国健康成年志愿者中评价单剂和多剂静注国家注册一类新药注射用尖吻蝮蛇血凝酶的安全性、耐受性.方法:按GCP要求设计试验方案,筛选健康志愿者须自愿签署知情同意书.单剂耐受性试验将30例受试者随机区组分至0.5U、1U、2U、4U、6U五个剂量组,每组6例,男女各半,从最低剂量组开始给药,当所有单剂静注剂量组确证安全耐受后,方可开始多剂静注耐受性试验.多剂耐受性试验入选10例健康男性受试者,静注尖吻蝮蛇血凝酶1U,每日1次,连续4日.观察指标为临床症状、体征,包括体温、脉搏、血压、呼吸等,实验室指标包括血常规、凝血功能、血液流变学、尿常规、肝功能、肾功能、电解质及心电图等.应用方差分析进行数据统计学处理.结论:30名健康受试者分别单剂静注尖吻蝮蛇血凝酶,最大剂量至6U,10名健康受试者多剂静注尖吻蝮蛇血凝酶(每次1U,每日1次,连续4日),比较安全、耐受性较好.仅见一过性轻微的与该药药效学机制有关的不良反应.建议临床使用剂量可为每次1U～2U,给药过程中应注意全血粘度变化.

摘要： 尖吻蝮蛇血凝酶是一种从尖吻蝮蛇中提取的凝血酶,有研究表明该药有较好的止血作用.目前止血类药物以蛇毒血凝酶制剂广泛运用于临床出血性疾病的治疗.对于颅脑损伤患儿应用尖吻蝮蛇血凝酶,可减少术中、术后出血,改善围术期凝血及纤溶异常,促进患儿康复,该药无明显不良反应,具有一定的临床应用价值.检索中国知网和万方医学网发现较多的应用研究领域主要在成人,对于小儿使用尖吻蝮蛇血凝酶的报道不多,说明书对小儿未做特殊说明,建议使用过程中注意监测凝血功能.临床护士在执行医嘱前首先对药物的使用说明应仔细阅读,掌握给药途径,了解适应症,作用机理和代谢途径;使用药物后注意观察不良反应.自2015年1月-7月,本院检验科报告危急值凝血异常的患儿中科室占全院比例达50％以上.为此笔者仔细寻找原因,发现使用尖吻蝮蛇血凝酶2U每日静脉注射的患儿,复测凝血四项时TT、PT均延长,其中以纤维蛋白降低尤为显著.笔者科室医护人员为进一步探求婴幼儿使用尖吻蝮蛇血凝酶的安全剂量,规范、落实用药过程中的病情观察及护理措施.对2015年11月-2016年5月收治的患儿,在安全范围内给予两种剂量尖吻蝮蛇血凝酶应用.

摘要： 本发明提供了一种尖吻蝮蛇血凝酶‑C，其是从尖吻蝮蛇蛇毒中分离得到的一种血凝酶，分子量29213.4D，等电点5.7。该酶由α、β两条链构成，链间由二硫键连接，其中α链具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列，β链具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明尖吻蝮蛇血凝酶为丝氨酸蛋白酶。本发明丝氨酸蛋白酶是用以下纯化方法获得，包括通过硫酸铵分级沉淀预处理去除不溶物及杂蛋白，再通过两次阴离子交换柱层析，收集活性洗脱峰，经透析、超滤浓缩及脱盐后即得高纯度蛇毒血凝酶，其比活力不低于40U/mg蛋白，HPLC分析纯度可达95%以上，以蛇毒原料重量计纯化收得率为0.4%－0.5%。

摘要： 本发明提供了一种尖吻蝮蛇血凝酶-C，其是从尖吻蝮蛇蛇毒中分离得到的一种血凝酶，分子量29213.4D，等电点5.7。该酶由α、β两条链构成，链间由二硫键连接，其中α链具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列，β链具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明尖吻蝮蛇血凝酶为丝氨酸蛋白酶。本发明还提供了该酶的纯化方法，包括通过硫酸铵分级沉淀预处理去除不溶物及杂蛋白，再通过两次阴离子交换柱层析，收集活性洗脱峰，经透析、超滤浓缩及脱盐后即得高纯度蛇毒血凝酶，其比活力不低于40U/mg蛋白，HPLC分析纯度可达95%以上，以蛇毒原料重量计纯化收得率为0.4%－0.5%。

摘要： 本发明提供了一种尖吻蝮蛇血凝酶-B，其是从尖吻蝮蛇蛇毒中分离到的一种高活性血凝酶，该酶为由236个氨基酸组成的单链糖蛋白，具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。链内含有6对二硫键；SDS-PAGE分子量约35kD，脱糖基化后的酶分子量26116.7Da；等电点pI 6.0。酶分子在Asn77,100,229位点上具有杂合多聚糖修饰。该酶为丝氨酸蛋白酶。本发明还提供了该酶的分离纯化方法，包括通过预处理去除不溶物，再通过两次阴离子交换柱层析和一次Sephdex-G75分子筛层析，收集活性洗脱峰，经透析、冻干，即得高纯度蛇毒血凝酶。其比活力不低于2000U/mg，HPLC分析纯度可达95%以上，以蛇毒原料重量计收得率为0.25%－0.30%。

摘要： 尖吻蝮蛇血凝酶基因及其表达载体、宿主细胞和重组蛋白的制备方法，属于生物医学。本发明血凝酶成熟蛋白为含236个氨基酸残基，分子量36000±3000Da，等电点6.59的单链糖蛋白，该蛋白氨基酸全序为SEQNO：1；编码该蛋白的基因为783个核苷酸组成的序列SEQNO：2。该酶具有精氨酸酯酶活性和纤维蛋白原水解活性，能优先降解纤维蛋白原Aα链。本发明所述基因能应用于基因工程制备，提供了利用该基因构建表达载体及用宿主细胞获得重组该血凝酶蛋白的方法，并重述了分子生物学获得该基因的方法。

摘要： 本发明提供了一种尖吻蝮蛇血凝酶，其是从尖吻蝮蛇蛇毒中分离得到的一种高活性血凝酶，分子量29.3～29.5kD，等电点5.5。该酶由α、β两个亚基构成，亚基链间由七个二硫键连接，其中α亚基具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列，β亚基具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明尖吻蝮蛇血凝酶为丝氨酸蛋白酶，能够水解人纤维蛋白原α链。本发明还提供了该酶的纯化方法，包括通过预处理去除不溶物，再通过两次阴离子交换柱层析，收集活性洗脱峰，经透析、超滤浓缩及脱盐后即得高纯度蛇毒血凝酶，其比活力不低于180u/mg蛋白，HPLC分析纯度可达95％以上，以蛇毒原料重量计纯化收得率为0.7％-0.8％。

摘要： 本发明公开了一种尖吻蝮蛇血凝酶的制备方法与用途。它包括溶解蛇毒、低温离心、透析、DEAE-Sepharose FF层析、透析、DEAE-SepharoseFF层析及Sephadex G25层析步骤。它从中国特有的尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化得到的尖吻蝮蛇血凝酶，是由A和B两个亚基组成，具有促进血液凝固和止血作用。A和B两个亚基的分子量为15.0KD和14.2KD。A亚基N端第一至25位的氨基酸序列为DCSSGWSSYEGHCYKVFKQSKTWTA，B亚基N端第一至25位的氨基酸序列为DCPSDWSSYECHCYKPDEPKTWEDA。尖吻蝮蛇血凝酶可用于临床上人的各种类型出血的止血。

摘要： 本发明提供了一种尖吻蝮蛇血凝酶-C，其是从尖吻蝮蛇蛇毒中分离得到的一种血凝酶，分子量29213.4D，等电点5.7。该酶由α、β两条链构成，链间由二硫键连接，其中α链具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列，β链具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明尖吻蝮蛇血凝酶为丝氨酸蛋白酶。本发明丝氨酸蛋白酶是用以下纯化方法获得，包括通过硫酸铵分级沉淀预处理去除不溶物及杂蛋白，再通过两次阴离子交换柱层析，收集活性洗脱峰，经透析、超滤浓缩及脱盐后即得高纯度蛇毒血凝酶，其比活力不低于40U/mg蛋白，HPLC分析纯度可达95%以上，以蛇毒原料重量计纯化收得率为0.4%－0.5%。

摘要： 本发明提供了一种尖吻蝮蛇血凝酶-B，其是从尖吻蝮蛇蛇毒中分离到的一种高活性血凝酶，该酶为由236个氨基酸组成的单链糖蛋白，具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。链内含有6对二硫键；SDS-PAGE分子量约35kD，脱糖基化后的酶分子量26116.7Da；等电点pI 6.0。酶分子在Asn77,100,229位点上具有杂合多聚糖修饰。该酶为丝氨酸蛋白酶。本发明还提供了该酶的分离纯化方法，包括通过预处理去除不溶物，再通过两次阴离子交换柱层析和一次Sephdex-G75分子筛层析，收集活性洗脱峰，经透析、冻干，即得高纯度蛇毒血凝酶。其比活力不低于2000U/mg，HPLC分析纯度可达95%以上，以蛇毒原料重量计收得率为0.25%－0.30%。

摘要： 本发明提供了一种尖吻蝮蛇血凝酶-C，其是从尖吻蝮蛇蛇毒中分离得到的一种血凝酶，分子量29213.4D，等电点5.7。该酶由α、β两条链构成，链间由二硫键连接，其中α链具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列，β链具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明尖吻蝮蛇血凝酶为丝氨酸蛋白酶。本发明还提供了该酶的纯化方法，包括通过硫酸铵分级沉淀预处理去除不溶物及杂蛋白，再通过两次阴离子交换柱层析，收集活性洗脱峰，经透析、超滤浓缩及脱盐后即得高纯度蛇毒血凝酶，其比活力不低于40U/mg蛋白，HPLC分析纯度可达95%以上，以蛇毒原料重量计纯化收得率为0.4%－0.5%。

摘要： 尖吻蝮蛇血凝酶基因及其表达载体、宿主细胞和重组蛋白的制备方法，属于生物医学。本发明血凝酶成熟蛋白为含236个氨基酸残基，分子量36000±3000Da，等电点6.59的单链糖蛋白，该蛋白氨基酸全序为SEQNO：1；编码该蛋白的基因为783个核苷酸组成的序列SEQNO：2。该酶具有精氨酸酯酶活性和纤维蛋白原水解活性，能优先降解纤维蛋白原Aα链。本发明所述基因能应用于基因工程制备，提供了利用该基因构建表达载体及用宿主细胞获得重组该血凝酶蛋白的方法，并重述了分子生物学获得该基因的方法。