BrdU

摘要： 缺血性脑血管疾病是全球范围内导致患者残疾和死亡的主要原因^([1]),脑缺血后可以诱发内源性的神经发生,是机体应对缺血性损伤的一种代偿性保护机制。5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromo-2-deoxy Uridine,BrdU)作为DNA碱基胸腺嘧啶核苷的类似物,与胸腺嘧啶核苷相同,在细胞有丝分裂的S期掺入到增殖或分裂细胞的核内^([2]),是神经发生中用来标记具有增殖活性细胞的重要指标,常与干细胞、神经祖细胞以及神经元的一些标志物共同标记.

摘要： 背景:研究人员认为,硫化氢作为一种重要的细胞保护分子,通过人为调控内源性硫化氢生物合成或使用硫化氢供体体外给药可能成为新的疾病治疗方式,用来恢复病变细胞或器官系统的生理功能.ADT-OH是硫化氢的一种缓释供体,它能够提高谷氨酸诱导的损伤海马神经细胞的生存率,但是对大脑皮质神经前体细胞增殖的影响尚不清楚.目的:探究ADT-OH对胚胎期大脑皮质神经前体细胞增殖的影响.方法:分离E14.5 d胚胎小鼠大脑皮质心室带和脑室管膜下区神经前体细胞,将1只胎鼠的神经前体细胞接种于1个孔中(24孔板),培养基中加入100μmol/L ADT-OH药物进行培养,3 d后统计每孔中神经球的大小和数目,对培养的神经前体细胞进行BrdU标记检测细胞增殖率,用增殖细胞的特异性抗体Ki67对细胞进行免疫荧光染色进一步验证细胞增殖情况,最后采用Western blot检测增殖相关基因cyclin D1的表达.结果与结论:ADT-OH可促进神经球的形成,提高神经前体细胞的增殖率,同时神经前体细胞中增殖相关基因cyclin D1的表达上调.由以上数据可知,ADT-OH促进神经前体细胞的增殖可能是通过调控cyclin D1的表达来完成.

摘要： 背景:研究人员认为,硫化氢作为一种重要的细胞保护分子,通过人为调控内源性硫化氢生物合成或使用硫化氢供体体外给药可能成为新的疾病治疗方式,用来恢复病变细胞或器官系统的生理功能。ADT-OH是硫化氢的一种缓释供体,它能够提高谷氨酸诱导的损伤海马神经细胞的生存率,但是对大脑皮质神经前体细胞增殖的影响尚不清楚。目的:探究ADT-OH对胚胎期大脑皮质神经前体细胞增殖的影响。方法:分离E14.5 d胚胎小鼠大脑皮质心室带和脑室管膜下区神经前体细胞,将1只胎鼠的神经前体细胞接种于1个孔中(24孔板),培养基中加入100μmol/L ADT-OH药物进行培养,3 d后统计每孔中神经球的大小和数目,对培养的神经前体细胞进行BrdU标记检测细胞增殖率,用增殖细胞的特异性抗体Ki67对细胞进行免疫荧光染色进一步验证细胞增殖情况,最后采用Western blot检测增殖相关基因cyclin D1的表达。结果与结论:ADT-OH可促进神经球的形成,提高神经前体细胞的增殖率,同时神经前体细胞中增殖相关基因cyclin D1的表达上调。由以上数据可知,ADT-OH促进神经前体细胞的增殖可能是通过调控cyclin D1的表达来完成。

摘要： 目的 探讨在胚胎发育关键期注射丙戊酸钠(VPA)对胎鼠大脑皮质神经元增殖与形态的影响.方法 孕E12.5 ICR小鼠分别腹腔注射VPA 350 mg/ml或生理盐水.使用BrdU/EdU双标或BrdU单标实验方法,检测两组胚胎小鼠在大脑皮质发育不同阶段的神经干细胞增殖和迁移情况;Pax6免疫荧光染色检测神经前体细胞数量;子宫内胚胎电转绿色荧光蛋白(GFP)表达质粒,分析生理盐水组与VPA给药组胚胎小鼠的大脑皮质神经元形态和前导突起长度差异.结果 ①与生理盐水组相比,急性VPA暴露对胎鼠的大脑皮质神经前体细胞增殖无显著影响;VPA组小鼠的神经前体细胞密度无显著差别.②长期VPA暴露使小鼠大脑皮质的神经前体细胞增殖减少,迁移无显著影响.③VPA组中大脑皮质的皮质层(CP)内圆形细胞增多,单/双板细胞减少,前导突起变长;中间带(IZ)内多极细胞减少,圆形细胞与单/双极细胞均增多,前导突起变长.结论 胚胎期急性VPA暴露不影响胎鼠的皮质神经元增殖,但长期(10 d) VPA暴露却能导致神经前体细胞增殖能力显著降低,并导致胎鼠大脑皮质内神经元形态异常.

摘要： 目的 采用小鼠局部淋巴结实验(BrdU-ELISA)法检测25％氰氟草酯乳油的致敏性.方法 1.选用雌性BALB/C小鼠进行实验,受试样品设为100％、50％、25％,同时设阴性对照组[丙酮:橄榄油(acetone:olive oil,AOO)=4:1]、阴性对照组(橄榄油)及阳性对照组(25％已基肉桂醛),连续双耳背面染毒3 d,第6天腹腔注射BrdU溶液(5 mg/只),24 h后采集耳后淋巴结称重等并通过BrdU-ELISA实验方法检测淋巴增殖情况.结果 各剂量组的小鼠体重与对照组比较,差异均无显著性(P>0.05);各剂量组的耳厚度增加和耳重均不超过25％;溶剂和空白对照组的刺激指数SI1和SI21.6,实验系统可靠;25％氰氟草酯乳油低、中、高剂量组的刺激指数SI1和SI2<1.6,无剂量反应关系.结论 25％氰氟草酯乳油的小鼠局部淋巴结实验结果为阴性,即25％氰氟草酯乳油为无致敏性.

摘要： N-methyl-D-aspartate receptor hypofunction is the basis of pathophysiology in schizophrenia. Blocking the N-methyl-D-aspartate receptor impairs learning and memory abilities and induces pathological changes in the brain. Previous studies have paid little attention to the role of the N-methyl-D-aspartate receptor subunit 1 (NR1) in neurogenesis in the hippocampus of schizophrenia. A mouse model of schizophrenia was established by intraperitoneal injection of 0.6 mg/kg MK-801, once a day, for 14 days. In N-methyl-D-aspartate-treated mice, N-methyl-D-aspartate was administered by intracerebroventricular injection in schizophrenia mice on day 15. The number of NR1-, Ki67- or BrdU-immunoreactive cells in the dentate gyrus was measured by immunofluorescence staining. Our data showed the number of NR1-immunoreactive cells increased along with the decreasing numbers of BrdU- and Ki67-immunoreactive cells in the schizophrenia groups compared with the control group. N-methyl-D-aspartate could reverse the above changes. These results indicated that NR1 can regulate neurogenesis in the hippocampal dentate gyrus of schizophrenia mice, supporting NR1 as a promising therapeutic target in the treatment of schizophrenia. This study was approved by the Experimental Animal Ethics Committee of the Ningxia Medical University, China (approval No. 2014-014) on March 6, 2014.

摘要： 背景:促进角质形成细胞体外培养增殖能力对皮肤生物学和皮肤相关疾病发病机制的研究具有重要意义.目的:观察Rho激酶抑制剂Y-27632对角质形成细胞增殖与衰老的影响.方法:分离培养人角质形成细胞,通过形态鉴定观察Y-27632(10μmol/L)对角质形成细胞形态的影响;利用群体倍增速率估算Y-27632对角质形成细胞增殖的影响;分别在角质形成细胞第0,5代,通过 β-半乳糖苷酶细胞染色方法检测Y-27632对细胞衰老的作用;进一步通过MTT法和BrdU细胞增殖检测试剂盒检测细胞增殖情况.结果与结论:人角质形成细胞为大小均一的铺路石样细胞,且在早期具有较强的增殖能力,随着细胞传代,增殖能力降低,且形态变为扁平的,胞浆增大的特点;Y-27632显著提高了细胞的群体倍增速率,通过 β-半乳糖苷酶细胞染色显示,Y-27632降低了阳性细胞数,进一步通过MTT法和BrdU细胞增殖检测法得出,Y-27632促进细胞体外增殖.结果说明,人角质形成细胞体外过程中,Y-27632的加入不仅能够抑制细胞衰老,同时促进其增殖,为角质形成细胞体外扩增培养与研究提供了新思路.

摘要： 目的 研究人参皂苷Rg3对体外培养小鼠神经干细胞(NSCs)增殖的影响.方法 分离培养胎鼠NSCs,使用神经球悬浮培养法传代,特异性抗体Nestin和Sox2鉴定NSCs.采用BrdU标记法和CCK-8法检测不同浓度Rg3 (20 nM、50 nM、250 nM和500nM)对NSCs增殖的影响.结果 传代2次后的神经球几乎全为Nestin/Sox2免疫荧光双阳性细胞,表明其为纯度较高的NSCs.BrdU标记法表明与对照组、20 nM组、250 nM组和500 nM组相比,50 nM Rg3组BrdU阳性细胞相对比率最高,差异有统计学意义(P＜0.01),但其他各组之间差异无统计学意义(P＞0.05).CCK-8法检测,结果显示50 nM Rg3在450 nm处吸光值最高,且与对照组(P＜0.01)、20 nM组(P＜0.05)和500 nM组相比,差异有统计学意义(P＜0.01),但其他各组之间无统计学差异(P＞0.05).结论 人参皂苷Rg3能促进体外培养小鼠NSCs的增殖,且其最佳浓度是50 nM.

摘要： 本发明提供抗BRDU抗体，及使用该抗BRDU抗体的方法。

摘要： 本发明公开了一种免疫荧光检测BrdU标记增殖细胞的改良方法。将变性温度固定在4°C，复性统一采用0.01M Tris‑HCL处理，之后进行单标、双标及三标染色，并与常规方法进行比较。结果显示本发明方法具有非常好的染色效果，成功率高，重复性好，操作简单且节约实验时间。

摘要： 本发明公开了一种特异性识别内源标记物Brdu的单克隆抗体的筛选方法，包括如下步骤：制作Brdu内源标记的动物模型，以及制作Brdu内源标记的细胞模型，用内源标记的动物模型及细胞模型对单抗制备中的ELISA阳性融合孔进行筛选，融合后去掉不能识别内源性Brdu标记的ELISA阳性孔，保留能识别内源标记的ELISA阳性融合孔，进行亚克隆操作，分离单克隆，对单克隆孔同法进行内源Brdu标记筛选，获得特异性单克隆细胞株。

摘要： 本发明公开了一种免疫荧光检测BrdU标记增殖细胞的改良方法。将变性温度固定在4°C，复性统一采用0.01M Tris‑HCL处理，之后进行单标、双标及三标染色，并与常规方法进行比较。结果显示本发明方法具有非常好的染色效果，成功率高，重复性好，操作简单且节约实验时间。

摘要： 本发明提供抗BRDU抗体，及使用该抗BRDU抗体的方法。