旋毛虫

摘要： 为研究旋毛虫谷氨酸脱羧酶(GAD)基因在其谷氨酸依赖型抗酸系统2(AR2)中的作用,本研究根据GenBank中登录的旋毛虫GAD基因序列,设计3条靶向该基因的siRNA(GAD-siRNA1~GAD-siRNA3)及一条阴性对照NC siRNA。将这4条siRNA以2μmol/L的剂量通过浸染法分别转染旋毛虫肌幼虫(后均简写为肌幼虫),12 h后分别采用荧光定量PCR和western blot检测各siRNA的干扰效果;采用不同剂量的最佳siRNA按照上述方法转染确定最佳干扰剂量。结果显示,2μmol/L的GAD-siRNA1(后简写为siRNA1)对GAD基因的干扰效果最好。将2μmol/L siRNA1、NC siRNA分别在不同pH值的培养液中利用浸染法分别转染肌幼虫,培养不同时间后分别计算各组存活率;同时利用荧光定量PCR方法检测GAD基因的转录水平;采用比色法建立γ-氨基丁酸(GABA)的标准曲线,通过酶活性公式和标准曲线计算酸环境培养0.5 h后各组培养液中GAD的酶活性并测定其pH值。存活率结果显示,随培养时间的增加,同一pH值培养液中各组肌幼虫的存活率均降低,其中siRNA1组肌幼虫的存活率明显低于PBS和NC siRNA组(NC组)(P<0.05),其在pH2.5培养0.5 h时的存活率最低,各组肌幼虫在pH6.6培养0.5 h时的存活率均最高。荧光定量PCR结果显示,相同p H条件下,随培养时间的延长,siRNA1组肌幼虫GAD基因的转录水平均显著低于PBS和NC组。相同培养时间内,与两个对照组相比,随着培养液p H值的减小,siRNA1组肌幼虫GAD基因的转录水平均增加,且该组肌幼虫在pH2.5时GAD基因的转录水平显著高于pH6.6时的转录水平(P<0.05)。上述结果表明,酸性环境可以诱导旋毛虫肌幼虫GAD基因转录水平的升高。酶活性测定结果显示,相同pH条件下,siRNA1组肌幼虫培养液中GAD的酶活性均比PBS组和NC组低,且该组肌幼虫在pH2.5和pH4.0时GAD的酶活性显著高于pH6.6和pH8.0(P<0.05);p H值测定结果显示,siRNA1组肌幼虫培养液pH值相比其在不同pH条件下培养前均略升高,但差异不显著。上述结果表明,干扰GAD基因后会降低旋毛虫肌幼虫GAD的酶活性,且在酸性条件下该酶活性较高。将GAD基因干扰后的肌幼虫感染小鼠,感染后第7 d迫杀小鼠收集成虫,计算旋毛虫成虫减虫率,感染后42 d采用相同方法计算肌幼虫的减虫率、繁殖力指数(RCI)及每克肌幼虫数(LPG);采集各组小鼠的膈肌,制作病理切片并经显微镜观察肌幼虫的保姆细胞。结果显示,siRNA1组成虫减虫率为31.50%,肌幼虫的减虫率为49.15%,RCI为62.51±7.32,LPG为1250.22±146.48。PBS组和NC组肌幼虫的RCI、LPG则显著高于siRNA1组(P<0.05);小鼠膈肌病理切片观察可见,siRNA1组肌幼虫子代保姆细胞壁周围有大量炎性细胞,且保姆细胞裂解,而两个对照组肌幼虫子代保姆细胞壁周围无炎性细胞。表明干扰GAD基因后肌幼虫体内的抗酸能力降低,对宿主免疫系统的抵抗力减弱。本研究首次证实了旋毛虫谷氨酸依赖型抗酸机制在其抵抗酸环境过程中发挥的作用,为旋毛虫抗酸系统的全面研究奠定了基础,并为旋毛虫病的预防提供了新思路。

摘要： 在生猪养殖生产过程中,猪旋毛虫病是一种常见的寄生虫性传染病,严重危害生猪的生长和发育,影响养殖户的经济效益。基于此,对猪旋毛虫病的病原形态、流行病学、临床症状、诊断方法进行论述,并提出了综合性预防措施,以期为该病的发生提供相关诊疗与防治的理论依据。

摘要： 为探讨旋毛虫预感染对小鼠急性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的干预效果,选取40只C57BL/6雌性小鼠随机分为4组进行实验:A组(假手术组)、B组(旋毛虫预感染+假手术组)、C组(脊髓损伤组)、D组(旋毛虫预感染+脊髓损伤组)。A组小鼠只打开椎板,不损伤脊膜及脊髓;B组小鼠以旋毛虫肌幼虫(350条/只)灌胃后14 d打开椎板;C组小鼠进行SCI造模;D组小鼠在旋毛虫肌幼虫感染14 d后进行SCI造模。在术后第7天采用Basso小鼠评分(Basso mouse scale,BMS)观察不同组别小鼠后肢运动功能变化,其后收集小鼠脊髓组织和血清,HE染色法观察脊髓损伤处病理学变化及炎性细胞浸润情况;RT-PCR分析促炎因子IL-6、TNF-α和调节性细胞因子IL-10和TGF-β基因表达水平;ELISA检测血清IL-6、TNF-α、IL-10和TGF-β分泌水平。结果显示,术后第7天,4组小鼠行为学评分及单位面积的炎性细胞浸润数量差异均有统计学意义(P<0.05);C组小鼠行为学评分明显低于A组(P<0.05),且脊髓组织结构出现明显损伤,炎性细胞浸润显著增加(P<0.05);经旋毛虫预感染干预后,D组BMS评分较C组明显改善(P<0.05),且脊髓病理损伤显著缓解,炎性细胞浸润亦明显减少(P<0.05)。RT-PCR和ELISA结果显示:与C组相比,D组小鼠脊髓匀浆和血清中促炎细胞因子IL-6和TNF-α的表达均明显降低(P<0.05);抗炎细胞因子IL-10和TGF-β的表达均明显升高(P<0.05)。结果表明,旋毛虫预感染可抑制小鼠急性SCI后的炎症反应,减轻脊髓组织病理损伤,改善SCI小鼠肢体功能。

摘要： 为了探索旋毛虫成虫期核酸酶家族Ts-DNaseⅡ-7蛋白对Caco-2肠上皮细胞屏障模型的作用及机制,本研究采用Transwell细胞培养板构建Caco-2肠上皮细胞屏障,当跨膜电阻值(TEER)达到400Ω·cm^(2)即判定肠上皮屏障模型构建成功。将试验组分为对照组(control)、PBS组、Ts-DNaseⅡ-7组(5μg/m L)、阳性对照LPS组(15μg/m L),作用48 h后,检测跨上皮电阻值(TEER)和对FITC的通透性;Western-blot和荧光定量PCR(qPCR)检测各组细胞Claudin 1、Occludin和ZO-1的蛋白表达水平和m RNA表达水平;通过细胞免疫荧光观察各组紧密连接蛋白的分布情况。结果,与对照组相比,Ts-DNaseⅡ-7组在第48小时TEER值降低,FITC的通透性增加;Claudin 1、Occludin和ZO-1的蛋白及m RNA的表达水平降低;免疫荧光试验可见细胞间的网状结构荧光不连续。结果表明,旋毛虫成虫期Ts-DNaseⅡ-7蛋白可破坏肠上皮细胞的物理屏障,有助于旋毛虫实现顺利寄生。

摘要： 目的观察旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白(Ts-MES)对脓毒症诱发的小鼠心肌损伤的保护作用。方法80只雄性BALB/c小鼠随机分为4组,各组20只,分别为假手术组(A组)、心肌损伤模型组(B组)、Ts-MES治疗组(C组)和地塞米松对照组(D组)。B、C、D组采取盲肠结扎穿孔术构建脓毒症诱发的心肌损伤小鼠模型,A组只行开腹探寻,不结扎和穿刺盲肠。术后40 min,A、B组腹腔注射150μL PBS,C组腹腔注射含20μg Ts-MES的等量PBS,D组腹腔注射含地塞米松(0.3 mg/kg)的等量PBS。术后12 h,每组随机抽取6只小鼠进行超声心动图检测,另抽取8只用于观察72 h生存率。剩余的6只小鼠通过HE染色评价心肌病理变化,ELISA法检测血清中NTPro-BNP和cTnI水平,ELISA法和qRT-PCR法分别检测血清和心肌组织中TNF-α、IL-6、IL-10、TGF-β的表达。结果B组小鼠的心功能指标(LVEF、LVFS、E/A)及72 h生存率较A组显著下降(P<0.001),心肌病理损伤评分及血清中NTPro-BNP和cTnI水平明显升高(P<0.01);与B组相比,C、D两组小鼠的心功能指标和72 h生存率明显回升(P<0.05),心肌病理损伤评分及血清中NTPro-BNP和cTnI水平明显降低(P<0.05)。小鼠血清和心肌组织中TNF-α和IL-6水平比较:B组小鼠血清和心肌组织中TNF-α和IL-6水平较A组显著升高(P<0.001),C、D两组较B组显著下降(P<0.05);IL-10和TGF-β水平:C组较B组显著升高(P<0.05),D组较B组虽有增高但无统计学差异。结论Ts-MES可抑制促炎细胞因子的表达并促进调节性细胞因子的表达,进而保护脓毒症诱发的小鼠心肌损伤。

摘要： 猪旋毛虫病是旋毛虫寄生在猪的小肠中引发的一种体内寄生虫病,因其幼虫主要寄生在同一宿主的横纹肌,又被称为肌旋毛虫病,该病是一种法定检疫传染病。在生猪屠宰检疫过程中,及时发现携带旋毛虫的肉制品,并严格进行无害化处理,对防止该病传播有很大的帮助。该文探讨了猪旋毛虫病的危害以及同步检疫中旋毛虫的检疫检疫处理措施,并在落实好检疫处理的前提下提出了猪旋毛虫病的防控措施,希望对广大同行有所帮助。

摘要： 为探究旋毛虫肌幼虫粗提物(Trichinella spiralis muscle larvae crude worm extract,TMCWE)是否干扰旋毛虫寄生的骨骼肌修复过程及其影响保姆细胞形成的分子机制,以C2C12细胞系作为细胞模型,用不同质量浓度的TMCWE刺激C2C12细胞,并设空白对照组,分别于刺激后第0、3、6、12、24小时,通过检测C2C12细胞增殖分化相关因子及信号通路,在体外评估TMCWE对小鼠成肌细胞增殖与分化的影响。结果表明,TMCWE可促进Cyclin D1基因层面和蛋白层面的表达,能抑制分化标志物Myf5、Pax7和MYH及p21基因和蛋白表达水平;TMCWE可以促进AKT及NF-κB的磷酸化,激活PI3K/AKT/NF-κB信号通路。以上研究结果显示,TMCWE可通过上调PI3K/AKT/NF-κB信号通路相关基因表达促进C2C12细胞增殖及下调分化标志分子基因的表达抑制C2C12细胞分化,这为阐明旋毛虫干扰骨骼肌修复和保姆细胞形成的分子机制提供理论依据和基础数据。

摘要： 在生猪诸多传染性疾病当中,旋毛虫病是威胁较严重的体内寄生虫病,不仅危及猪的健康生长发育,还会威胁人体健康,属于人畜共患传染性疾病,处置不当会对地区公共卫生安全构成严重威胁。该文探讨了旋毛虫的来源与感染过程,提出在生猪同步屠宰检疫中加强旋毛虫的检疫检验和处理,避免该病的传播和蔓延。

摘要： 流行病学分析显示,蠕虫感染率和肥胖等代谢疾病呈负相关,然而其作用机制未被完全阐明。本文探究了旋毛虫(Trichinella spiralis)感染对高脂饮食(HFD)肥胖小鼠的干预作用,并初步分析其作用机制。以高脂饮食构建肥胖模型,分为3组:ND组给予基础饲料,其他两组高脂饲喂。4周后,HFD+inf组口服感染250条肌肉虫期旋毛虫,各组继续饲喂8周。每周称重,实验末期统计肝脏和附睾脂肪湿重;检测血清总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量;HE染色观察附睾脂肪组织病理学形态;油红O染色观察肝脏组织内脂滴情况;荧光定量PCR方法分析附睾脂肪中脂代谢基因表达。结果显示,与HFD组比较,HFD+inf组体重增加明显降低,血清中TC和TG的升高程度有所降低;HE显示附睾脂肪细胞的体积增大得到改善;同时,小鼠肝脏质量增加呈现降低趋势,油红O染色可见肝脏脂质变性得以纠正;此外,旋毛虫感染还可下调附睾脂肪组织中脂质合成相关基因并且上调脂质分解相关基因的mRNA表达水平。结果表明,旋毛虫可以通过减少机体脂质累积和加速脂质分解来影响脂质代谢,从而有效干预高脂诱导的肥胖,因此旋毛虫及其抗原可能为防治肥胖提供了一种新的策略。

摘要： 旋毛虫是一种典型的食源性人兽共患寄生线虫,呈全球分布且寄生无宿主特异性,给畜牧业养殖带来重大经济损失,且严重威胁食品安全。近年来,组学技术的应用为解析旋毛虫致病机制提供了有效的手段。本文主要综述了基因组学、转录组学、蛋白质组学等技术在旋毛虫研究中的应用及研究进展,以期为旋毛虫的生长发育、感染与宿主免疫等研究提供新思路,同时也为其他同类寄生虫研究提供参考。

摘要： 目的：为了探究烯醇化酶对旋毛虫的感染是否具有免疫保护作用.rn 方法：根据GenBank中发表的旋毛虫肌幼虫ENO基因序列(AF363629.1)设计引物,以旋毛虫肌幼虫总RNA为模板,通过RT-PCR扩增出了肌幼虫的Tseno和基因片段.将该片段克隆到pMD19-T载体后进行序列测定和分析,将该基因亚克隆到pET32a载体中,测序验证后转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导后用SDS-PAGE电泳进行分析.再将Tseno克隆到真核表达质粒pVAX1中.rn 结果：表明该基因获得了表达,与GenBank中旋毛虫烯醇化酶基因的相似性高达99％,融合蛋白大小约为66 Ku.重组蛋白存在于包涵体中.酶切鉴定结果显示真核表达质粒pVAX1-Tseno构建成功,Western实验表明重组蛋白可被人工感染旋毛虫的大鼠血清所识别,真核质粒在小鼠体内获得了表达.rn 结论：该重组蛋白具有一定的反应原性,重组质粒p VAX1-Tseno构建成功.

摘要： 本研究用小鼠巨噬细胞RAW264.7作为模型,分析旋毛虫ES抗原和Hsp70对巨噬细胞的活化能力,并观察LPS/Pam3CSK4对已活化的巨噬细胞免疫调节作用.应用半定量PCR方法检测发现,不同浓度的旋毛虫ES抗原,其对RAW264.7细胞上的TLR2/4 mRNA诱导表达存在着明显变化,在ES抗原浓度为15μg/mL时,TLR2/4 mRNA表达量较其他组高,与对照组相比差异显著(P＜0.05)；确定浓度的ES抗原对RAW264.7细胞上TLR2/4基因表达存在时间依赖性,在ES抗原(15μg/mL)作用18h时,TLR2/4 mRNA有较高水平的表达,且与空白组之间存在显著性差异(P＜0.05).用同样方法检测旋毛虫Hsp70对RAW264.7细胞的作用,研究表明,RAW264.7细胞对Hsp70存在剂量依赖性,Hsp70作用浓度为5μg/mL时有相似的结论.15μg/mL的ES抗原作用RAW264.7细胞18h后,再经LPS(10ng/mL)刺激12 h.结果表明,经ES抗原预刺激后的巨噬细胞对LPS再次刺激的反应性明显降低,其表现为巨噬细胞上的TLR2/4 mRNA表达量下降.研究结果证明,适当作用时间和浓度的旋毛虫ES抗原和Hsp70能够活化静息状态下的巨噬细胞；在旋毛虫ES抗原和HspT0持续作用下,巨噬细胞对LPS再刺激的反应性明显降低,表现为TLR2、TLR4和胞内信号分子的表达下调,说明旋毛虫ES抗原可诱导巨噬细胞处于类似于内毒素诱导的免疫抑制.

摘要： Balb/c小鼠经口感染旋毛虫肌幼虫,感染剂量为500蚴/只,感染后0d、4d、7d、14d、21d和28d对小鼠体内Toll样受体和相关细胞因子进行检测.根据GenBank中登录的TLR4、TLR2和管家基因(β-actin)等序列,设计并合成引物,利用Trizol法提取腹腔巨噬细胞、心肌和肺中的总RNA,应用半定量RT-PCR方法扩增目的基因TLR4、TLR2并进行条带分析,分析目的基因在三种组织细胞中的相对表达量；同时应用流式细胞术对腹腔巨噬细胞上TLR4的表达量进行检测.在心肌中,TLR4 mRNA在感染后4d、14d和21d显著高于对照组；TLR2 mRNA在E感染后4d和21d显著高于对照组,感染后7d则显著低于对照组.在肺中,TLR4 mRNA在感染后14d显著高于对照组,感染后21d和28d则显著低于对照组；TLR2 mRNA在感染后变化不显著.在其它时间点TLR4和TLR2在心肌和肺中的相对表达与对照组相比均不显著.应用半定量RT-PCR方法检测腹腔巨噬细胞中TLR4和TLR2的相对表达,结果揭示,旋毛虫侵入机体后可通过其抗原来调节机体TLR2和TLR4受体的表达量的变化,这种变化与旋毛虫的生长发育过程及其引起的宿主免疫反应和器官组织损伤相关.

摘要： 本研究采用体外培养旋毛虫肌幼虫方法制备ES抗原,用于免疫小鼠制各单克隆抗体,经过三轮筛选筛,得到2株稳定分泌抗旋毛虫肌幼虫ES抗原抗体的杂交瘤细胞株,2株细胞分泌抗体亚型均属于IgG类.选取其中A11细胞株制备腹水并纯化,纯化后腹水效价为1-2.1×105,纯化后单抗浓度为3.8mg/ml.Western Blot结果显示单抗A11可识别ES抗原中43、49、53kDa三条蛋白带.用ES抗原免疫家兔制备兔抗ES抗原多抗并纯化,纯化后血清效价为1-1.2×106,纯化后多抗血清蛋白浓度为8.8mg/ml.用单克隆抗体作为捕获抗体,以多抗为检测抗体,建立了双抗体夹心ELISA检测方法.经方阵法确定单抗最佳工作浓度为7.6μl/ml,多抗浓度为4.4μl/ml.该检测方法对常见寄生虫抗原如日本血吸虫、弓形虫、猪鞭虫、猪囊尾蚴、猪蛔虫、华枝睾吸虫、捻转血矛线虫、前后盘吸虫均无交叉反应.本方法对ES抗原最小检出量为12ng/ml.检测肌幼虫24h培养液上清,5蚴/ml即可检测出ES抗原.将虫体进行超声破碎检出量为0.25蚴/ml.通过对感染旋毛虫小鼠不同时间血清进行检测,在感染后7d即可检测出循环抗原.利用制备的单抗A11结合免疫亲和层析法,对旋毛虫肌幼虫ES抗原进行提纯,之后进行SDS-PAGE分析,可见分子量大小约为43、49、53kDa的三条混合蛋白带,混合蛋白浓度为0.34mg/ml.

摘要： 为了探究旋毛虫感染的免疫应答调节机制以及Tregs在旋毛虫改变宿主免疫平衡过程中发挥的作用.首先应用BALB/c小鼠建立T.spiralis感染模型,进而采用流式细胞术和ELISA等方法检测Tregs的数量变化、CD103、CTLA-4等相关标志分子表达量及相关免疫学指标,同时,对脾脏中Th1型和Th2型细胞因子以及血清中IgG1、IgG2a抗体表达量动态监测.检测结果显示BALB/c小鼠感染旋毛虫后肠系膜淋巴结、腹股沟淋巴结以及颈淋巴结中CD4+CD25+Foxp3+Tregs的数量显著增加,且CD4+CD25+Foxp3+Tregs亚群数量增加的部位与旋毛虫在小鼠体内的寄生部位密切相关；同时,随着Foxp3+Tregs亚群的扩增,其表面CD103、CTLA-4等相关标志分子表达量也显著增加.以上结果说明旋毛虫感染能诱导Tregs活化增殖并向感染部位募集.此外,Th1型和Th2型细胞因子以及血清中IgG1、IgG2a抗体表达量动态监测结果表明,旋毛虫感染小鼠后能够引起宿主免疫应答向Th2型方向极化.研究结果证实Tregs在T.spiralis慢性感染建立过程中发挥重要的免疫调节作用,为进一步探索Tregs参与T.spiralis免疫调节机制奠定了基础.

摘要： 为了研究旋毛虫对DCs诱导分化的影响以及DCs在该寄生虫慢性感染建立过程中的作用.应用BALB/c小鼠建立T.spiralis感染模型,同时设立PBS对照组,在T.spiralis慢性感染建立的肌幼虫在横纹肌形成包囊过程中,于感染后的第14、21、28、35天时应用流式细胞术分别检测脾脏和肠系膜淋巴结中DCs亚群(CD11c+CD11b+CD8a+、CD11c+CD11b+CD8a-和CD11c+B220+CD8a-)的数量变化及DCs表面标志(MHC-Ⅱ、CD80、CD86)的变化.本研究发现小鼠感染旋毛虫后,DCs各亚群细胞含量呈增加趋势,表明成虫期和新生幼虫期的旋毛虫均促进了肠系膜淋巴结中DCs各亚群的增殖和分化,同时DCs表面标志表达量增加表明DCs从未成熟状态发育成熟,诱导免疫应答.旋毛虫移行寄生期(1-3周)对小鼠脾脏影响较小,当肌幼虫在横纹肌形成包囊后(4周后),脾脏中DCs各亚群细胞含量降低,表明DCs增殖分化减少；脾脏中DCs表面标志表达量降低,揭示DCs向未成熟方向分化,降低了机体抵抗力,形成免疫逃避,使旋毛虫慢性寄生生活得以建立.本研究初步证实了DCs在旋毛虫慢性感染建立过程中的作用.

摘要： 为进一步了解旋毛虫各个发育阶段的生理特征,并揭示与旋毛虫发育及宿主相互作用相关基因的表达特征,本实验通过采用高通量测序技术,对旋毛虫各个时期基因表达特征进行了深入研究,为发现新的药物作用靶点以及疫苗研发提供基础.构建高质量的旋毛虫不同时期转录组文库,利用solaxa高通量测序技术对三个转录组文库进行测序,并进一步通过生物信息学技术分析旋毛虫不同发育时期基因转录情况,并利用实时荧光定量RT-PCR技术验证各差异基因在不同发育时期的转录水平.本试验全面深入分析了旋毛虫不同发育时期转录组的变化,鉴定了大量在不同发育时期存在差异表达的基因.其中在新生幼虫时期存在较多的表达上调基因,表明在新生幼虫时期基因表达活性更高.同时本实验深入分析了旋毛虫致病相关基因在不同发育时期的差异表达规律,为发现旋毛虫新的期特异抗原以及对旋毛虫的免疫预防具有重要指导意义.

摘要： 本研究旨在观察旋毛虫对柠檬酸杆菌诱导的小鼠炎症性肠病的影响,探讨其防治炎症性肠病可能的作用机制.选用40只3-4周龄的雌性BALB/C小鼠,随机分成4组,正常对照组、肠炎模型组、T.spiralis组和T.spiralis柠檬酸杆菌共感染组；T.spiralis感染21 d后,灌服5×108CFU/ml的C.rodentium 1次,连续记录14d各组小鼠的体重变化,于造模后第14d处死小鼠,对结肠进行大体和病理损伤评估,并通过流式细胞术检测各组小鼠脾脏和肠系膜淋巴结中IFN-γ、IL-4和IL-10的表达.本研究表明T.spiralis可以有效干预C.rodentium感染形成的肠炎发病进程,初步机制研究表明T.spiralis可能通过诱导产生Th2型免疫反应对C.rodentium感染引起的Thl型免疫反应产生影响,从而对炎症性肠病进行良性干预.

摘要： 旋毛虫的发现与命名1835年2月1日,当时还是大一学生的James Paget(近代病理学之父）,在伦敦圣巴塞洛缪医院(St.Bartholomew）进行常规人体尸检时在肌肉中亦发现了一个小白点,随将该肌肉标本请大英博物馆的动、植物学系主任Robert Brown鉴定,在显微镜下发现了毛发样卷曲的虫体,可惜的是观察结果并未发表.同年Owen描述了本虫的形态,并命名为旋毛形线虫(Trichina spiralis）.1895年,Railliet将旋毛虫的属名从Trichina改为Trichinella,因为早在1830年Trichina已被用于蝇的一个属名,更改后的新名Trichinella spiralis被普遍接受并沿用至今.本文阐述了系统发育关系和分化模式，论述了中国旋毛虫的遗传多态性。

摘要： 本试验通过RT-PCR方法从旋毛虫肌幼虫总cDNA中克隆获得旋毛虫抗原基因p43与p53,并将p43、p53基因通过T4连接酶分别连接到真核表达载体pcDNA3.1(+)上,免疫前1d在小鼠胫前肌注射0.5％盐酸普鲁卡因50μl/只.每隔2周免疫一次,于三免后第2周,每个试验组小鼠感染100蚴旋毛虫肌幼虫.通过应用SYBR-Green R荧光定量方法检测小鼠肠上皮细胞TLR2及TLR4表达量变化情况.结果显示在TLR2检测中,除了在感染旋毛虫后21d的TLR2表达增大明显外,其余各个试验时间点其表达量都维持在较低水平,但是在二免后,试验组R、Ⅱ、Ⅲ与PBS组相比差异极显著(P＜0.01)；三免后,试验组Ⅰ与PBS组相比差异不显著(P＞0.05);试验组Ⅱ与PBS组相比差异显著(P＜0.05),试验组Ⅲ与PBS组相比差异极显著(P＜0.01)；在TLR4检测中,其试验结果显示,随着免疫时间的增长,TLR4的表达量有所增加,在攻虫后7d TLR4表达量达到各个试验时间点的最高值,随后表达量开始下降,其中攻虫后21d TLR4表达量仍有较高的表达.本试验通过检测小鼠小肠TLR2与TLR4的表达量变化情况,从而为进一步研究旋毛虫免疫机理与致病机制奠定了一定的理论基础.

摘要： 本发明涉及一种人兽共患旋毛虫病免疫调控的预防、治疗及诊断制剂，属于生物技术领域。按每kg感染旋毛虫动物体重、由如下质量比的原料组成的：poly(I:C)13～17mg、TAK242 23～27mg和ODNH154 0.1～0.3mg。优点是：poly(I:C)、TAK242和ODNH154可独立重新调配人兽共患线虫宿主的Th1/Th2免疫反应，可作为阻碍旋毛虫免疫逃避的药物，可重新调配Th1/Th2免疫反应，可用于旋毛虫病防治及诊断，可用于免疫调控旋毛虫病动物模型构建、人类自身免疫病治疗和动物相关疾病疫苗研制。对poly(I:C)、TAK242和ODNH154基于人兽共患旋毛虫病免疫逃避调控用于预防、治疗及诊断旋毛虫病属首次发现，对旋毛虫疫苗、药物研究、人兽共患寄生线虫免疫治疗及诊断有重大意义。

摘要： 一种杂交瘤细胞株、抗旋毛虫新生幼虫期丝氨酸蛋白酶的单克隆抗体及应用，属于旋毛虫(T.spiralis)的防治领域。针对如何对旋毛虫病进行特异性诊断的技术问题，本发明提供了一种杂交瘤细胞株，其保藏编号为CGMCC No.18319以及由上述杂交瘤细胞株所分泌单克隆抗体。所述单克隆抗体能够特异性的识别ASKEDS氨基酸基序。本发明建立旋毛虫(T.spiralis)血清学诊断方法奠定了基础。

摘要： 一种旋毛虫竞争ELISA抗体检测试剂盒及其检测方法，属于血清学免疫检测技术领域。为了更稳定、准确检测多宿主旋毛虫感染，本发明提供了一种旋毛虫竞争ELISA抗体检测试剂盒，所述试剂盒含有：底板包被有旋毛虫Ts‑WN10重组抗原的96孔反应板，生物素标记的单克隆抗体Ts‑WN10‑1H9溶液，辣根过氧化氢酶HRP标记的亲和素溶液，洗涤液，TMB显色底物，终止液，和阴性质控；其中，所述阴性质控为浓度为1μg/mL的生物素标记的单克隆抗体Ts‑WN10‑1H9溶液。本发明制备的试剂盒具有特异性强、灵敏度高等特点，可用于猪/鼠/人等多宿主旋毛虫病的抗体检测。

摘要： 本发明提供了重组旋毛虫硫氧还蛋白过氧化物酶2在制备抗旋毛虫感染疫苗中的应用，属于免疫调节技术领域，所述重组旋毛虫硫氧还蛋白过氧化物酶2能够诱导小鼠机体产生Th2型免疫应答，诱导小鼠的CD4

摘要： 本发明涉及一种用于猪旋毛虫病预防、治疗及诊断的旋毛虫ES复合诱导剂诱导的DC疫苗，属于生物技术领域。包括旋毛虫ES制备，分别加入喜树碱、金丝桃0.61μg，0.25μg，猪旋毛虫DC疫苗构建，猪外周血单核细胞的分离，贴壁细胞的获得，DC疫苗的获得。优点，利用猪外周血单核细胞，采用完全培养基利用旋毛虫ES复合制剂诱导DC成熟，对感染旋毛虫的肉食猪进行免疫治疗。采用的旋毛虫ES复合诱导剂是喜树碱和金丝桃素，可增强旋毛虫分泌物对DC细胞的诱导作用，本发明可用于预防、治疗、诊断猪旋毛虫病，提升猪肉进出口质量，保障食品安全，降低猪旋毛虫病对养猪业造成的经济损失，避免由猪旋毛虫病给食品安全及猪肉国际贸易带来的负面影响。

摘要： 本发明提供了一种抗旋毛虫小热休克蛋白（sHSPs）鸡卵黄抗体及制备方法，同时还公开了卵黄抗体在抗肿瘤中的医用用途；具有增强动物免疫力、无毒等特点，可作为口服制剂药物用于肿瘤的治疗，同时也可制成口服液等做为食品用于预防肿瘤；鸡等禽类卵黄抗体可口服、使用方便、无毒、成本低、安全、便于大规模工厂化生产。

摘要： 本发明提供了一种抗旋毛虫排泄分泌抗原（ESA）鸡卵黄抗体，同时还公开了卵黄抗体在抗肿瘤中的医用用途；具有增强动物免疫力、无毒等特点，可作为口服制剂用于肺癌等肿瘤的治疗，同时也可制成口服液等做为食品用于预防肿瘤；鸡等禽类卵黄抗体可口服、使用方便、成本低、无毒、安全、便于大规模工厂化生产。

摘要： 本发明公开了一种同时检测旋毛虫和刚地弓形虫的引物组合、试剂盒及方法与应用。所述引物组合包括用于检测旋毛虫的第一引物组和用于检测刚地弓形虫的第二引物组，所述第一引物组包括如SEQ ID NO:1‑SEQ ID NO:6所示的序列，所述第二引物组包括如SEQ ID NO:7‑SEQ ID NO:12所示的序列，本发明的引物组合能够用于猪肉、乳制品、蛋类等动物源性食品中上述2种重要寄生虫的现场快速检测，且灵敏度高，特异性好。

摘要： 本发明涉及生物检测领域，尤其涉及试剂盒、制备方法及其在检测动物旋毛虫病中的应用。本发明提供了试剂盒，包括：金纳米颗粒探针，该金纳米颗粒探针包括：单克隆抗体Ts‑WN10‑1H9和寡核苷酸链I1偶联的金纳米颗粒；上述单克隆抗体Ts‑WN10‑1H9由杂交瘤细胞株WN10‑1H9分泌；上述杂交瘤细胞的保藏编号为：CGMCC No.18316。本发明制备的试剂盒具有操作简单、灵敏度高等ELISA不具备的优点，可同时检测猪和人血清样本，不受宿主物种限制。同时在检测时不与其他寄生虫阳性血清发生交叉反应，特异性及灵敏度高，具有市场开发价值。

摘要： 本实用新型提供了一种采用显微镜的旋毛虫检测装置，包括：用于检测旋毛虫的显微镜和用于调节显微镜高度的调节座，显微镜安装于调节座的上部，其中：调节座主要由圆筒形基座、安装板、活动板、螺纹管、螺纹杆、若干组导向组件、从动锥齿轮、驱动杆、主动锥齿轮以及手柄组成，安装板水平且固定地安装在圆筒形基座的内腔中，活动板水平且活动地安装在圆筒形基座的内腔中，且活动板位于安装板的上方。本实用新型提供的采用显微镜的旋毛虫检测装置设置的显微镜高度可以进行调节，使得该装置能够满足不同身高的检测人员使用，有效提高该装置的实用性；设置的压片夹中的压板可以任意旋转，使得该压片夹使用比较方便。