流式细胞

摘要： 目的探讨中性粒细胞膜碱性磷酸酶(mNAP)在细菌、病毒感染鉴别诊断中价值。方法选择2019年6月-2020年6月连云港市第一医院住院经明确诊断的细菌感染患者124例,病毒感染患者48例,非感染患者40例(对照组)为研究对象。采用荧光标记流式细胞术检测mNAP,免疫散射比浊法检测CRP,通过ROC曲线评价mNAP、CRP诊断效能。结果细菌感染患者mNAP、CRP水平高于病毒感染患者和对照组(P0.05),而CRP水平高于对照组(P<0.01);mNAP、CRP诊断细菌感染AUC分别为0.980、0.970,诊断的敏感性分别为95.98%、94.87%;特异性分别为96.51%、74.23%。结论 mNAP在对细菌感染诊断特异性明显高于CRP,对细菌、病毒感染鉴别诊断具有一定参考价值。

摘要： 通过转录组测序筛选草棉同源多倍体与二倍体相比差异表达基因,为同源多倍体的表型变化及其染色体加倍过程中遗传物质的变化提供基因表达水平的依据。本研究以草棉二倍体(CK)和同源多倍体后代为材料,通过流式细胞仪鉴定出同源三倍体(T)和同源四倍体(M)植株,比较同源四倍体与二倍体的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、脯氨酸和可溶性蛋白含量生理指标,并进行转录组测序分析。草棉同源四倍体叶片的SOD、POD、CAT、脯氨酸和可溶性蛋白含量均显著高于二倍体。DESeq差异分析结果表明, CK vs T、T vs M、CK vs M分别有4166 (2832个上调, 1334个下调)、4037 (1766个上调, 2271个下调)、4184 (2679个上调, 1505个下调)个DEGs,有205个DEGs是不同倍性植株两两比较的3组间共同表达的。GO功能分析表明, DEGs在膜的固有成分、膜的组成部分、催化活性等途径差异显著。KEGG富集分析表明, DEGs在类黄酮生物合成、苯丙烷生物合成、光合作用-天线蛋白等通路较为活跃。通过富集分析筛选CK vs T和CK vs M中与倍性相关的DEGs发现,多倍体在应激反应(62.46%和54.84%)、逆境反应(57.42%和53.85%)、细胞(70.16%和66.22%)、代谢(72.73%和66.14%)、生物活性物质和抗性(60.33%和63.37%)、光合(58.06%和63.16%)等方面的差异基因大都是上调表达,这可能是导致多倍体优势的关键因子。Nr注释信息CK vs M中共获得27个与抗性相关的基因(19个上调, 8个下调), 11个与光合相关的基因(9个上调,2个下调)。对不同倍性草棉与光合相关的27个DEGs进行聚类分析发现, 18个(66.67%)基因在四倍体中表达丰度最高。对3组间共同表达的205个DEGs进行Nr注释和表达情况分析发现,有30个基因都表现为上调表达,且在四倍体中表达量最高,7个基因都表现为下调表达,且在四倍体中表达量最低,这37个基因可能是受DNA剂量影响或是与植株倍性相关的基因。研究结果进一步表明多倍体植株在抗性、生长势、新陈代谢以及光合速率方面均优于二倍体。

摘要： 目的 探讨外周血细胞表面CD64与HLA-DR指数联合应用对早期预警烧伤感染的临床价值.方法 选取2017年6—12月南昌大学第一附属医院烧伤科收治的烧伤患者76例为观察组,其中烧伤面积≥30％9例,烧伤面积10％～29％18例,烧伤面积<10％49例.所有患者均于入院后24 h内抽取抗凝静脉血,应用流式细胞术检测外周血细胞表面CD64和HLA-DR指数水平.选取同期来本院进行健康体检人员76例为对照组.比较2组外周血细胞表面CD64和HLA-DR指数水平及白细胞(WBC)计数的差异.结果 观察组CD64指数和WBC计数明显高于对照组,HLA-DR指数明显低于对照组(均P<0.05).烧伤面积≥30％的患者CD64指数和WBC计数高于、HLA-DR指数低于烧伤面积10％～29％和<10％的患者及对照组(均P<0.05);烧伤面积10％～29％的患者CD64指数高于、HLA-DR指数低于烧伤面积<10％的患者及对照组(均P<0.05);烧伤面积<10％的患者CD64指数高于、HLA-DR指数低于对照组(均P<0.05).CD64指数随烧伤面积增大相对升高,HLA-DR指数随烧伤面积增大相对降低.结论 外周血细胞表面CD64和HLA-DR指数水平可预警烧伤患者早期感染,并与烧伤面积有一定相关性.

摘要： 目的 利用流式细胞仪分选小鼠肺脏自然杀伤细胞(NK细胞)并检测分选后细胞纯度与存活率.方法 小鼠肺脏经胶原酶灌注法得到单细胞悬液,流式细胞仪分选悬液中FVS510-CD3-CD19-NK1.1+NKp46+细胞,分选后的细胞流式细胞仪回测阳性率,台盼蓝染色检测细胞活力.结果 第一滴液流断点位置Drop1为345,Gap为9,液流开启0.5 h以上无晃动,无断点位置改变,稳定性良好,各种参数符合分选条件.分选前NK细胞占总细胞(4.40±1.20)％Total,分选后为(96.10±2.20)％Total,差异有统计学意义(P<0.05).经台盼蓝染色显示,分选后细胞存活率为(95.70±2.02)％,细胞形态良好.结论 利用流式细胞分选仪可快速高效分离小鼠肺脏NK细胞,分选后的细胞保持良好的活性,可为进一步研究NK细胞提供保证.

摘要： 目的:建立流式细胞仪分选小鼠肝脏Kupffer细胞(KCs)的方法.方法:小鼠肝脏经胶原酶灌注后密度梯度离心法分离非实质细胞,流式细胞分选仪分选单细胞悬液中7-AAD-CD45+ CD11b+ F4/80+肝脏KCs并检测分选后细胞纯度,台盼蓝染色检测细胞活力,荧光微球吞噬实验检测细胞吞噬功能,CD86、CD206染色鉴定KCs细胞分型,脂多糖(LPS)刺激后检测炎性因子TNF-α、IL-1β的表达情况.结果:经过密度梯度分离和流式细胞分选,获得的7-AAD-CD45+ CD11b+ F4/80+细胞纯度为(96.1±1.8)％,细胞存活率(96.5±2.1)％,分选后CD86+和CD206+所占比例分别为(92.3±1.6)％、(2.1±0.8)％,吞噬荧光微球的细胞百分比为(84.7±3.6)％,LPS刺激8h后,培养上清液中TNF-α、IL-1β显著升高(P＜0.001).结论:流式细胞分选仪可快速高效分离小鼠肝脏KCs,分选后的KCs保持良好细胞活性和吞噬功能,LPS刺激可诱导其分泌大量炎性因子.

摘要： 目的分析慢性肾小球肾炎患者免疫功能。方法收集100例慢性肾小球肾炎患者和30例健康体检者血清,用免疫比浊法测定IgG、IgA、IgM、C3和C4等体液免疫指标,用流式细胞法测定CD3、CD4、CD8、CD19(B细胞)和CD16+56+(NK细胞)等细胞免疫指标。结果慢性肾小球肾炎组的体液免疫指标中IgG、IgA、IgM、C3和C4都明显降低(P<0.05),细胞免疫指标中CD3、CD4和CD8百分比明显增加(P<0.05),而绝对计数却减少,其中以CD4绝对计数降低最明显(P<0.05),B细胞和NK细胞百分比和绝对计数均明显降低(P<0.05)。结论慢性肾小球肾炎患者免疫功能降低。

摘要： 纳米氧化锌(ZnO NPs)的广泛应用所引发的环境与健康风险备受关注.为探究ZnO NPs对水生生物的毒性影响,以美国红鱼的原代肝细胞为实验对象,通过MTT法和中性红摄取(NRU)法检测细胞存活率,以评估ZnO NPs的细胞毒性;美国红鱼肝细胞经ZnO NPs处理6 h后,检测肝细胞内丙二醛(MDA)含量,并用流式细胞仪检测细胞对ZnO NPs的吞噬、胞内活性氧(ROS)的释放以及细胞凋亡率的变化.结果表明,美国红鱼肝细胞暴露于37.5μg·mL-1和50μg·mL-1 ZnO NPs 6 h后,细胞存活率较对照组显著降低,且ZnO NPs的毒性具有浓度和时间依赖性.研究表明,ZnO NPs进入细胞后,细胞内ROS产量增加,引起氧化应激,诱导细胞凋亡.

摘要： 目的 探讨程序性死亡因子-1(PD-1)在非小细胞肺癌(NSCLC) CD3+T细胞上的表达及其与病理特征的相关性.方法 抽取2016年6月至2019年6月于郑州大学第一附属医院行肺癌根治术的NSCLC患者53例和行肺纤维支气管镜检查的非恶性肺部疾病患者28例.描述性分析NSCLC患者一般特征,通过流式细胞术观察淋巴结组织CD3 +T细胞中PD-1表达情况,分析其与癌灶病理特征的相关性.结果 鳞癌和腺癌患者CD3+T细胞表面PD-1表达率分别为19.23％±5.12％、19.58％±5.24％,高于非恶性肺部疾病患者的7.53％±3.42％,P＜0.05.53例NSCLC患者中不同TNM分期、淋巴结转移、分化程度者CD3 +T细胞中PD-1表达率比较,差异有统计学意义(P＜0.05);且CD3+T细胞中PD-1表达率与TNM分期、淋巴结转移、分化程度呈正相关(r=0.947、1.025、1.214,P＜0.05).结论 NSCLC患者肿瘤组织CD3+T细胞表面PD-1呈高表达并与TNM分期、淋巴结转移、分化程度密切相关,其可能参与了疾病发生发展,PD-1可作为NSCLC患者免疫功能状态的检测指标.

摘要： 利用流式细胞技术,检测家族性高胆固醇血症(FH)患者淋巴细胞低密度脂蛋白受体(LDL-R)活性,试图建立适合临床应用的LDL-B活性检测方法.

摘要： 为探索梯度浓度的JA2对体外培养人肝癌细胞株(HCC-9724)的细胞周期、细胞线粒体膜电位和wt-p53蛋白表达的影响。采用流式细胞技术和体外细胞培养技术。经JA1处理后的细胞培养样本中有明显的DNA低含量颗粒(“亚G1期”峰),细胞周期各时相分布发生改变,细胞在G1被阻滞。细胞线粒体膜电位(△Ψm)明显下降,且表现出剂量和时间效应关系。而wt-p53蛋白阳性细胞百分率则随时间延长而逐渐增加。JA1诱导了HCC-9724细胞线粒体膜电位的下降和细胞凋亡,而wt-p53蛋白表达的增强则是其诱导HCC-9724细胞凋亡的重要分子机制之一。

摘要： 强直性脊柱炎(AS)是以骶髂关节和脊柱慢性炎症为主的、可能与遗传、感染、免疫异常等因素有关的原因不明的全身性自身免疫性疾病,临床观察和研究靠发现HLA-B27抗原的表达与AS有着高度的相关性,并呈现出明显的家族聚集性.本文采用流式细胞技术初步探讨了AS患者外周血淋巴细胞的凋亡及细胞周期.

摘要： 强直性脊柱炎(Ankylosing Spondylitis,AS)是一种主要侵犯脊柱,并累及骶髂关节和周围关节,以慢性进行性炎症为主要表现的自身免疫性疾病,发病机理仍不十分清楚,有研究表明AS患者TH1/TH2激活比例失衡,HLA-B27阳性个体似乎呈TNF-α低分泌状态,这可能导致对抗某种微生物的免疫功能下降而激发自身免疫应答.我们运用流式细胞组合微球细胞因子捕获法(Cytometric Bead Array,CBA)联合检测同一份患者血浆中六种细胞因子(TNF-α,IFN-γ,IL-4,IL-5,IL-10),和外周血CD3、CD4和CD8T,B淋巴细胞(CD3CD19),及T细胞表面HLA-DR,了解淋巴细胞的活化状况,探讨TH1/TH2细胞的激活状态与AS关系,从而为临床治疗提供新思路.

摘要： 对青岛沿海海洋污损生物资源进行调查，采用海虾细胞毒性法及流式细胞术对已鉴定的18种污损生物进行抗癌活性筛选。结果表明：星座美洲海鞘Amaroacium ecostellatum Verril、大菊海鞘 Botryllusmagnicoecus、山形海绵Mycale macilenta、海黍子Sargassum kjelimanianum、裙带菜 Undaria pinnatifida甲醇提取物具有较强的抗癌活性。并进一步进行活性成分追踪研究，确定星座美洲海鞘、大菊海鞘、山形海绵、海黍子、裙带菜的活性部位。

摘要： 一种光学引擎，用于台式流式细胞仪，该光学引擎具有一组激光器，每个激光器沿x轴水平聚焦到相同的水平位置，沿流动池的相同激发平面沿y轴垂直聚焦到不同的垂直位置，一组光学器件，根据激发荧光的不同激光，将相同波长范围的荧光分离到收集光学器件的焦平面中的不同位置；以及检测器，选择性地从不同的位置检测光，从而根据不同的激光器激发在相同波长范围内发射的荧光之间的区分。

摘要： 本发明提供一种流式细胞仪液路系统，包括：流动室；样本液供给模块，其包括进样针、第一柱塞泵、第一三通阀、样本液供给管路；第一三通阀进口端与进样针通过样本液供给管路相连，其两个出口端通过样本液供给管路分别与流动室、第一柱塞泵相连；鞘液供给模块，其包括鞘液桶、第二三通阀、定量泵、滤芯、加热装置、鞘液供给管路；定量泵分别与鞘液桶、滤芯顶部相连；加热装置分别与滤芯底部、流动室相连；第二三通阀设置于定量泵与鞘液桶相连的鞘液供给管路上，用以在鞘液供给过程中在滤芯顶部存储空气；取样模块；清洗模块。本发明还提供一种流式细胞仪。通过改进样本液供给模块及鞘液供给模块的液路结构设计，以提高样本液及鞘液流动的稳定性。

摘要： 本发明公开一种流式细胞检测液路系统，涉及细胞检测领域。该流式细胞检测液路系统包括流动室外壳体、细胞悬液输送管和鞘液输送管。该流式细胞检测液路系统在进行使用时，设置的流式细胞检测液路系统中设有鞘液质量检测盒体，鞘液质量检测盒体能够对鞘液输送管内部的鞘液进行检测，减少检测数据的不准确性，该液路系统整体结构较为成熟，设置的混合管能够保证鞘液与细胞悬液的混合效果好，在鞘液受到压力进入混合管后，鞘液输送管与混合管呈倾斜角度，因此鞘液产生涡旋，并最终向下运动，与细胞悬液输送管底部输送的细胞悬液混合形成鞘流，细胞悬液位于中心位置，使得鞘液对细胞悬液的周围进行包裹。

摘要： 本发明公开了一种流式细胞分选仪的照明系统和流式细胞分选仪，其中，所述流式细胞分选仪的照明系统包括光源单元和光束整形单元，所述光束整形单元位于所述光源单元的出射光线的传播路径上；所述光束整形单元包括柱面非球面透镜组，所述柱面非球面透镜组包括第一圆锥面和第二圆锥面；所述第一圆锥面具备第一光焦度所述第二圆锥面具备第二光焦度其中采用上述技术方案，通过设置柱面非球面透镜组包括两个圆锥面，且通过合理设置两个圆锥面的光焦度可以保证光源单元发出的光束经光束整形单元后得到平顶椭圆光束，且平顶椭圆光束的光斑面积较大，保证细胞或微粒检测精确度高；同时可以保证出射激光的能量利用率较高。

摘要： 本发明公开了一种流式细胞分选仪的照明系统和流式细胞分选仪，流式细胞分选仪的照明系统包括光源模块和光束能量分布调整模块；所述光源模块用于产生出射光束；所述光束能量分布调整模块包括变倍扩束单元和光束整形单元，所述变倍扩束单元用于对所述出射光束进行扩束处理得到扩束光束，且所述变倍扩束单元的扩束倍率可调；所述光束整形单元用于根据所述扩束光束的光束口径调整所述扩束光束的能量分布。通过变倍扩束单元得到光束口径不同的扩束光束，再经过光束整形单元得到能量分布不同的照明光斑，例如高斯光斑、类高斯光斑和平顶光斑，针对不同的探测样品采用不同的照明光斑进行探测，可以降低照明系统的功耗，增加照明系统的普适性。

摘要： 本发明实施例公开了一种流式细胞分选仪及流式细胞分选方法，包括液滴延迟时间测量模块和液滴分流模块；所述液滴延迟时间测量模块用于根据液流经过液滴断裂点的时间测量液滴延迟时间；所述液滴延迟时间测量模块前馈所述液滴延迟时间至所述液滴分流模块，以控制所述液滴被充电的时间。采用上述技术方案，通过液滴延迟时间测量模块根据液流经过液滴断裂点的时间测量液滴延迟时间；并将液滴延迟时间前馈至液滴分流模块，保证液滴分流模块可以准确获知液滴的延迟时间，准确控制液滴被充电的时间，保证被充电的液滴可以准确进入液滴分选通道，保证液滴分选精确度高，进而保证位于液滴内的细胞分选精确度高。

摘要： 本发明公开了一种流式细胞分选仪的照明系统和流式细胞分选仪，流式细胞分选仪的照明系统包括光源单元、光束扩束单元和光束汇聚单元；光束扩束单元位于光源单元的第一出射光束的传播路径上，光束汇聚单元位于光束扩束单元的第二出射光束的传播路径上；光束经透射棱镜组首次扩束后得到第一扩束光束，第一扩束光束经反射镜组反射后得到反射光束，反射光束经透射棱镜组再次扩束后得到第二扩束光束。通过透射棱镜组对出射光束进行两次扩束，保证光束扩束单元结构简单，且保证经光束汇聚单元后入射至流动室的光束汇聚效果好能量集中，流式细胞分选仪的分选精度高。

摘要： 流式细胞术研究和流式细胞术结果分析，以使用流式细胞计确定目标样本流体库存的流式细胞术研究的优化稀释因数范围。可以使用流式细胞术系统的筛选化验模块确定优化稀释因数范围，以分析确定的流式细胞术结果落入流式细胞计的动态范围内，从而确定给定流式细胞计的优化稀释因数范围，以研究给定目标样本流体库存。进而，可以执行效价化验模块以基于在优化稀释因数范围内提供的优化的目标流体样本准备颗粒效价结果。筛选化验模块和/或效价化验模块可以提供具有数据通知和确认的自动化数据处理，以提供鲁棒的数据分析。

摘要： 一种流式细胞仪的激光照射系统及采用这种激光照射系统的流式细胞仪，该激光照射系统的各激光照射机构的传播光路从不同方向独立地延伸向流动室，并且通过各自的光学组件来保证各路激光照射机构照射到流动室的聚焦光斑的大小大致相同。因为该系统不需要将多路激光光路合并到同一光路上，因此可省略二向色镜的使用，同时也节省了相应的结构布置，从而使该激光照射系统体积更小，更利于流式细胞仪的小型化设计。

摘要： 本发明提供一种基于多激光流式细胞仪的数据处理方法，包括步骤：阈值设定、通道触发、延迟数据处理。本发明还涉及基于多激光流式细胞仪的数据处理系统及流式细胞仪控制系统。本发明通过一个激光器对应一个数据处理子板，可以更加灵活的进行系统配置，不同数量的激光，不同数量的采集通道，以及不同模块的升级、增减。另外，本发明根据激光器之间的延迟，为每个数据处理子板开辟特定大小的数据缓冲区，来存放第一个激光器和最后一个激光器延迟的这段时间所采集的数据，以便于任意选定触发通道。