肺成纤维细胞

摘要： 背景:c-Myc是一种众所周知的致癌基因,在许多癌症中过表达.肺泡巨噬细胞是肺脏重要的功能细胞,它不但参与肺脏的免疫防御,吞噬侵入肺脏的细菌颗粒,还可分泌大量生物活性物质,维持肺脏和机体正常的生理功能.超氧化物歧化酶和肿瘤有着密切的关系.目的:观察抗氧化剂超氧化物歧化酶对二氧化硅(SiO2)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞培养上清诱导的大鼠肺成纤维细胞增殖及c-myc表达的影响.方法:采用肺泡原位灌洗技术获取肺泡巨噬细胞,①制备条件培养上清:超氧化物歧化酶培养上清(超氧化物歧化酶+肺泡巨噬细胞+不加血清DMEM)、二氧化硅培养上清(二氧化硅+肺泡巨噬细胞+不加血清DMEM)、二氧化硅+超氧化物歧化酶培养上清(二氧化硅+超氧化物歧化酶+肺泡巨噬细胞+不加血清DMEM);分别在培养1,2,4,8,16,32 h不同时间点收取上清;②肺成纤维细胞诱导培养:取第3代肺成纤维细胞,将条件上清与含体积分数5％FBS的DMEM按照1:1比例配制进行诱导,实验分组为:阴性对照组(体积分数2.5％FBS-DMEM培养),阳性对照组(体积分数10％FBS-DMEM培养);超氧化物歧化酶培养上清组;二氧化硅培养上清组;二氧化硅+超氧化物歧化酶培养上清组;培养时间与上述时间点同步进行.采用MTT法、免疫细胞化学法和RT-PCR法分别检测肺成纤维细胞增殖、c-myc蛋白和mRNA的表达情况.实验方案经华北理工大学动物实验伦理委员会批准.结果 与结论:①与对照组相比较,二氧化硅培养上清组能够显著促进成纤维细胞增殖,使c-myc蛋白及mRNA表达水平上调;与二氧化硅培养上清组相比较,二氧化硅+超氧化物歧化酶培养上清组成纤维细胞增殖减少,c-myc蛋白及mRNA表达水平下调(P＜0.05);②结果说明,超氧化物歧化酶能够抑制二氧化硅刺激的肺泡巨噬细胞培养上清介导的肺成纤维细胞增殖和c-myc表达水平的上调.

摘要： 目的比较不同方法提取猕猴肺成纤维细胞的效率及对细胞相关功能的影响,为获得类似人肺成纤维细胞提供有效方法。方法采用两种猕猴肺成纤维细胞的提取方法,组织块黏附法和胶原酶联合消化+组织黏附法。倒置显微镜观察细胞形态,免疫荧光鉴定猕猴肺成纤维细胞,CCK-8检测细胞活力,流式细胞仪检测肺成纤维细胞标志物α-SMA的表达,凋亡试剂盒检测细胞凋亡,Western blot检测细胞α-SMA蛋白水平表达。结果组织黏附法贴壁的组织块72 h后可见小而亮的细胞爬出,4~5 d后细胞小范围爬出,呈长梭形;7 d后可见细胞大范围爬出,形成单层细胞,传代后细胞均呈长梭形。用胶原酶联合消化+组织黏附法处理后24 h即可见小而亮的细胞从组织块中爬出,48 h后可见细胞大范围爬出,细胞呈长梭形;4~5 d后可形成单层细胞,传代后的细胞均呈长梭形,用免疫荧光鉴定均表达α-SMA。实验结果显示胶原酶联合消化+组织黏附法提取的肺成纤维细胞的活力明显高于组织黏附法所得细胞活力。TGF-β1刺激肺成纤维细胞后,胶原酶联合消化+组织黏附法提取的细胞增殖更快,α-SMA蛋白表达更高。结论两种方法均能体外分离出猕猴肺成纤维细胞,胶原酶消化法提取猕猴肺成纤维细胞所需的时间较短且状态较好,TGF-β1刺激后相关蛋白水平表达更稳定,是获得猕猴肺成纤维细胞的有效方法,也是获得接近人原代肺成纤维细胞的有效方法。

摘要： 目的 探讨罗格列酮(RGZ)对肺成纤维HELF细胞增殖的影响,并探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路在其中的作用.方法 HELF细胞培养于DMEM培养液中,实验分为:对照组、TGF-β1组、低剂量RGZ(LD-RGZ)组和高剂量RGZ(HD-RGZ)组.CCK-8检测细胞增殖.流式细胞仪检测细胞周期.Western blot检测蛋白表达.结果 24 h、48 h和72 h时HD-RGZ组细胞增殖OD450值显著低于LD-RGZ组(P<0.05),LD-RGZ组又显著低于TGF-β1组(P<0.05).对照组、TGF-β1组、LD-RGZ组和HD-RGZ组G1期细胞分别占细胞周期的(91.23±6.32)％、(70.35±4.14)％、(76.12±4.38)％和(82.35±5.16)％,各组间存在显著差异(P<0.05).其中,HD-RGZ组G1期细胞比例显著高于LD-RGZ组(P<0.05),LD-RGZ组又显著高于TGF-β1组(P<0.05).HD-RGZ组Col I、Col III和P-p38MAPK蛋白显著低于LD-RGZ组(P<0.01),LD-RGZ组又显著低于TGF-β1组(P<0.01).结论 罗格列酮抑制p38MAPK通路,进一步抑制肺成纤维细胞增殖以及胶原的合成.

摘要： 目的 探讨机械通气促进肺成纤维细胞活化及肺纤维化的机制,明确乳酸-转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)途径在该过程中的作用. 方法 ①将C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为假手术组(Sham组)和机械通气组(MV组),每组12只,其中Sham组仅行麻醉插管处理并保持自主呼吸,MV组采用20 ml/kg潮气量和70次/min通气频率行单次2h机械通气,观察7d后取材.采用H-E染色、Masson染色观察肺组织的损伤程度和纤维化程度,采用Western blot 法检测肺组织Ⅰ型胶原蛋白α1链(collagen type Ⅰ alpha 1 chain,COL1A1)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和TGF-β1的蛋白表达情况,采用比色法检测小鼠肺泡灌洗液(bronchial alveolar lavage fluid,BALF)和血清的乳酸浓度.②将人胚肺成纤维细胞MRC-5采用随机数字表法分为4组(每组3个孔):PBS对照组(Con组)、1 mmol/L乳酸组(Lac1组)、10 mmol/L乳酸组(Lac10组)和20 mmol/L乳酸组(Lac20组),于乳酸刺激MRC-5细胞24 h后采用ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β1含量,同时采用细胞免疫荧光观察α-SMA的表达情况;于乳酸刺激MRC-5细胞72 h后采用Western blot法检测不同分组细胞COL1A1和α-SMA的表达情况,并通过ELISA法检测细胞培养上清液Ⅰ型前胶原羧基肽(procollagen type Ⅰ carboxyl peptide,PICP)的含量变化.③另取MRC-5细胞采用随机数字表法分为3组(每组3个孔):PBS对照组(Con组)、20 mmol/L乳酸组(Lac2.组)和20 mmol/L乳酸+TGF-β1受体抑制剂(SB431542)组(Lac20+SB组),处理24h后采用Western blot法检测不同分组细胞COL1A1和α-SMA的表达情况. 结果 ①与Sham组比较,MV组小鼠肺泡间隔增厚、胶原蛋白沉积、肺纤维化程度加重,伴有COL1A1、α-SMA和TGF-β1表达水平升高(P＜0.05),血清和BALF乳酸浓度升高(P＜0.05).②与Con组比较,Lac10组和Lac20组细胞培养上清液中TGF-β1、PICP含量升高(P＜0.05),细胞中COL1A1和α-SMA表达水平升高(P＜0.05),免疫荧光观察到α-SMA在细胞内表达增多(P＞0.05).③与Lac20组比较,Lac20+SB组细胞COL1A1和α-SMA表达水平降低(P＜0.05). 结论 机械通气可以通过乳酸-TGF-β1途径活化肺成纤维细胞,引起胶原蛋白分泌,促进机械通气相关性肺纤维化进程.

摘要： 目的探讨膜联蛋白A1(Annexin A1)对肺成纤维细胞炎症反应、增殖及胶原沉积的作用。方法分离小鼠原代肺成纤维细胞,利用不同浓度的Annexin A1干预肺成纤维细胞24 h或48 h后,检测炎症因子、细胞增殖及胶原沉积表达。将C57/BL6小鼠分为对照组、Annexin A1干预组,每组6~8只。Annexin A1干预组每只小鼠气管滴注1μg/50μL Annexin A1重组因子,对照组每只小鼠气道滴注50μL生理盐水,连续干预7 d后取检。检测肺组织炎症因子、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)及气道平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果与对照组比较,Annexin A1能促进肺成纤维细胞分泌IL-6、IL-8等炎症因子(均P<0.05),促进成纤维细胞的增殖,CollagenⅢ合成和α-SMA表达增加(均P<0.05)。与对照组小鼠比较,Annexin A1干预组小鼠的肺泡灌洗液细胞总数[(2.91±0.26)×10^(4)/mL vs.(7.03±0.48)×10^(4)/mL,t=7.432,P=0.008]及中性粒细胞数目明显升高[(0.12±0.04)×10^(4)/mL vs.(1.01±0.05)×10^(4)/mL,t=13.810,P<0.001],炎症因子、胶原沉积及平滑肌表达也显著增加(均P<0.05)。结论 Annexin A1具有诱导肺成纤维细胞的炎症反应、增殖及胶原沉积作用,提示可能在气道重构发病中起重要作用。

摘要： 目的:探讨保护素(PDX)对脂多糖(LPS)诱导的原代肺成纤维细胞环氧合酶-2(COX-2)表达的影响及对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导其纤维化增殖转化的影响.方法:分离、纯化、鉴定得到小鼠肺成纤维细胞,用LPS诱导建立成纤维细胞体外炎症模型,用TGF-β1诱导建立体外纤维化增殖模型.PDX分别作用于经过LPS或TGF-β1诱导的原代肺成纤维细胞.采用细胞浓度试剂盒测定细胞增殖,采用实时定量PCR测定基因表达,采用ELISA法检测细胞上清液前列腺素E2(PGE2)水平,应用Western blot检测COX-2蛋白的表达.结果:采用10 ng/mL TGF-β1刺激诱导体外培养的原代肺成纤维细胞48 h能建立较为合理的体外纤维化增殖模型.PDX抑制LPS诱导的原代肺成纤维细胞COX-2蛋白的表达及上清液PGE2水平,同时可能通过剂量依赖方式抑制TGF-β1诱导的原代肺成纤维细胞的增殖.PDX抑制TGF-β1诱导的原代肺成纤维细胞collagen 1α1、collagen 1α2的合成以及α-SMA、纤连蛋白的基因表达.结论:PDX能抑制LPS诱导的小鼠原代肺成纤维细胞COX-2表达及PGE2水平,同时能抑制TGF-β1诱导的小鼠原代肺成纤维细胞纤维化增殖、胶原蛋白合成及向肌成纤维细胞转化.

摘要： 明确脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对小鼠肺成纤维细胞胸腺细胞分化抗原-1(thymocyte differentiation antigen,Thy-1)和整合素β3蛋白表达的调控作用,并观察其与自噬抑制的关系.将原代培养的小鼠肺成纤维细胞接种于六孔培养板,密度4*105个/ml.待小鼠肺成纤维细胞贴壁后,更换无血清培养基饥饿过夜,将其随机分为四组(n=3)：PBS对照组(Con.组)、0.25μg/ml LPS组(LPS0.25组)、0.50μg/ml LPS组(LPS0.50组)、1.00μg/mlLPS(LPS1.00组),分别加入PBS以及以上终浓度的LPS,刺激小鼠肺成纤维细胞6小时后,提取细胞总蛋白,比较不同浓度LPS刺激小鼠肺成纤维细胞6小时后Thy-1和整合素β3的蛋白表达情况.随后将小鼠肺成纤维细胞随机分为两组(n=3)：PBS对照组(Con.组)、1.00μg/ml LPS(LPS1.00组),分别加入PBS以及以上终浓度的LPS,刺激小鼠肺成纤维细胞6小时后,提取细胞总蛋白,比较不同浓度LPS刺激小鼠肺成纤维细胞30小时后自噬相关蛋白LC3和Beclin-1的表达情况,同时通过透射电镜观察小鼠肺成纤维细胞内自噬小体的形成情况.

摘要： 革兰氏阴性杆菌细胞壁的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是内毒素的主要成份,能诱导肺成纤维细胞异常增殖活化并分泌胶原蛋白沉积于肺组织,引起肺纤维化.自噬是存在于真核细胞中一种进化保守的,依赖于溶酶体的亚细胞降解途径.生理条件下,哺乳动物体内存在着基础水平的自噬,而在饥饿、压力、感染等刺激下,自噬可被激活,通过清除受损的细胞器,对细胞组分进行降解及回收再利用以助细胞存活.有研究表明,特发性肺纤维化患者肺组织存在低水平的自噬,而LPS刺激肺成纤维细胞可抑制细胞自噬,促进肺成纤维细胞增殖和肺纤维化进程,但其机制未明.本研究利用LPS致肺成纤维细胞增殖模型，深入探究 LPS 诱导的肺成纤维细胞自噬抑制现象及其内在机制，为进一步丰富和完善LPS致肺纤维化的发病机理、探索该病的防治手段奠定基础。

摘要： 有机紫外防晒剂(UV filters)进入环境介质中不断累积,形成潜在的生态和健康风险.为探究UV filters对人体呼吸暴露的毒性作用,选择人胚肺成纤维细胞(MRC-5)作为受试对象,分别考察了二苯酮-3(BP-3)、二苯酮-4(BP-4)、奥克立林(OC)、对甲氧基肉桂酸异辛酯(EHMC)、丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷(BM-DBM)5中UV filters对其MXR机制的影响.

摘要： 目的:研究经SiO2染毒的肺成纤维细胞转分化前后全基因组蛋白修饰的甲基化水平.rn 方法:原代培养大鼠肺巨噬细胞和肺成纤维细胞,采用Transwell共培养建立矽肺体外模型,收集共培养24h后的肺成纤维细胞,采用染色质免疫共沉淀联合芯片技术(ChIP-chip)分别对肺成纤维细胞全基因组蛋白三甲基化进行高通量筛选,染色质免疫共沉淀-实时荧光定量聚合酶联反应(ChIP-qPCR)验证芯片结果,定量反转录聚合酶联反应(qRT-PCR)检测H3K4和H3K27同时出现显著差异的mRNA表达水平.rn 结果:经两组细胞组蛋白H3K4、H3K27三甲基化水平对比,共筛选出1815个基因存在H3K4显著性差异,其中518个基因出现H3K4三甲基化程度增高,1297个基因H3K4三甲基化程度降低;同时筛选出1850个基因存在H3K27显著性差异,有198个基因出现H3K27三甲基化程度增高,1652个基因H3K27三甲基化程度降低.经过对数据的分析和比较,进一步统计了每个阳性基因的高甲基化启动子位点数目,缩小并确定了进一步研究的基因范围.即H3K4三甲基化上调同时伴随调基因有166个基因,而三甲基化下调同时伴随H3K27三甲基化上调有37个基因.前者两个基因的变化可能共同刺激基因转录,后者二者的变化可能共同抑制基因转录.ChIP-qPCR验证结果与CpG岛芯片结果一致.rn 结论:经SiO2染毒的肺成纤维细胞转分化前后全基因组蛋白H3K4和H3K27三甲基化水平存在显著改变,以H3K27去甲基化和H3K4甲基化为主.

摘要： 目的:观察养阴清肺方对肺成纤维细胞TGF-β1的分泌及α-SMA表达的影响.方法:实验分为四组:空白组、中药组、激素组、中药加激素组;用钴60照射肺成纤维细胞,照射剂量为8Gy;然后采用血清药理学方法培养细胞.用免疫酶联吸附法检测细胞上清液中的TGF-β1含量;用免疫荧光化学法检测肺成纤维细胞α-SMA的表达.结果:细胞经照射后,TGF-β1含量明显增加;24h,空白组与中药组无差异(P＞0.05),其余各组之间均有差异(P＜0.05):48h,空白组与激素组无差异(P＞0.05),其余各组之间均有差异(P＜0.05);72h,空白组与中药加激素组、中药组与激素组之间无差异(P＞0.05),其余各组之间均有差异(P＜0.05).空白组α-SMA的表达与各药物组均有显著差异(P＜0.05);中药组、激素组两组分别与中药联合激素组都有显著差异(P＜0.05),而中药组与激素组二者之间没有统计学差异(P＞0.05).结论:养阴清肺方能抑制肺成纤维细胞分泌TGF-β1,在48小时时相作用最强;中药联合激素组抑制α-SMA表达的作用最强.

摘要： 目的：通过力学-生物学手段研究人胚肺成纤维细胞(MRC-5)粘弹性和CTGF表达,解释百草枯对肺细胞作用的机理,进一步解释肺损伤机理或肺纤维化机制,为探索有效治疗手段提供理论指导.方法：MRC-5细胞培养于MEM培养基,于恒温恒湿的C02孵箱内培养,C02含量5％,温度37°C,并进行传代培养.配制不同PQ浓度的MEM培养液-50 mg/L、100mg/L、200mg/L备用.收集MRC-5细胞,待细胞贴壁生长后换含有PQ的细胞培养液,于孵箱内培养12h.12h后换不含PQ的细胞培养液继续培养.(1)经PQ处理后的MRC-5细胞换不含PQ的细胞培养液继续培养,分别于12h、24h、36h、48h、60h、72h收集细胞上清液,离心去杂质后-70°C冷藏备用.ELISA法检测MRC-5细胞CTGF的表达,研究PQ对MRC-5细胞CTGF表达的影响.(2)经PQ处理后的MRC-5细胞,换不含PQ的细胞培养液继续培养24h,收集细胞,通过微管吸吮技术检测MRC-5细胞的粘弹性,研究生物力学特性的影响.结果：正常MRC-5细胞分泌少量CTGF, CTGF浓度在0-48h，随时间变化而明显增加(P0.05); 50mg/L PQ处理后，0-36h CTGF浓度有少量表达，无明显差异，48h时CTGF表达明显增加(P0.05),48h时CTGF表达明显增加(P0.05), 60h时CTGF表达明显增加(P<0.05)，在72h时CTGF浓度有大幅度的提高(P<0.05）结论：(1)MRC-5细胞在PQ处理72小时后，CTGF表达分泌大量增加，将促进肺纤维化进程。(2) PQ处理后的MRC-5细胞粘弹性降低，表明中毒过程中，细胞骨架发生改变。

摘要： 目的 探讨大气粗、细颗粒物诱导人肺成纤维细胞(HLF)DNA链的损伤作用以及番茄红素的保护作用.方法 MTT法测定PM10、PM2.5以及番茄红素对细胞增殖作用的影响,单细胞凝胶电泳法检测PM10、PM2.5对细胞DNA的损伤程度以及番茄红素对DNA损伤的保护作用.结果 PM10、PM2.5均能抑制HLF细胞的增殖,具有明显的剂量-效应关系(p＜0.01),且PM2.5的毒性大于PM10;PM10、PM2.5均能诱导细胞DNA链发生断裂,但PM2.5的损伤程度小于PM10;番茄红素可极有效地阻止由PM10或PM2.5导致的DNA损伤.结论 PMs能抑制HLF细胞的增殖、诱导细胞DNA链断;番茄红素可以有效地减小颗粒物对细胞DNA造成的损伤.

摘要： 体外培养肺成纤维细胞是研究肺部疾病如支气管哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺纤维化等的重要手段和工具。目前对于成年大鼠肺成纤维细胞的原代培养，国内尚未见报道。基于此，利用组织块培养法对成年SD大鼠肺成纤维细胞进行了原代培养，并用免疫细胞化学的方法进行了鉴定。

摘要： 应用MTT法检测不同浓度的天然冰片对中国仓鼠肺成纤维(CHL)细胞的细胞毒性，并应用染色体畸变试验研究了天然冰片对CHL细胞的染色体畸变效应。发现MTT还原量、生成甲臜的光密度(OD)值与天然冰片之间存在剂量关系，24h的50％细胞生长抑制浓度(IC50)为207.86 μg·ml-1。染色体畸变试验剂量为200、100、50、25、12.5(μg·ml-1)，分别于加药(+/-S9mix)后24h、48h收获细胞，制备染色体。各剂量组的染色体畸变率20％：各剂量组与溶剂对照组比较差异无显著性，P>0.05。结果表明：天然冰片无诱发CHL细胞染色体畸变作用。

摘要： 应用MTT法检测不同浓度的天然冰片对中国仓鼠肺成纤维(CHL)细胞的细胞毒性，并应用染色体畸变试验研究了天然冰片对CHL细胞的染色体畸变效应。发现MTT还原量、生成甲臜的光密度(OD)值与天然冰片之间存在剂量关系，24h的50％细胞生长抑制浓度(IC50)为207.86 μg·ml-1。染色体畸变试验剂量为200、100、50、25、12.5(μg·ml-1)，分别于加药(+/-S9mix)后24h、48h收获细胞，制备染色体。各剂量组的染色体畸变率20％：各剂量组与溶剂对照组比较差异无显著性，P>0.05。结果表明：天然冰片无诱发CHL细胞染色体畸变作用。

摘要： 一种人成纤维细胞无血清培养基，包括基础培养基和无血清培养上清浓缩液，还包括如下组分及其浓度：维生素组合物为5‑100ng/mL，葡多酚为50‑200μg/mL，重组人表皮细胞生长因子为1～50ng/mL，重组人碱性成纤维细胞生长因子为50～200ng/mL，重组人转化生长因子β1为1～50ng/mL，重组血小板衍生生长因子‑C为1～10ng/mL，重组人胰岛素样生长因子‑1浓度为1～10ng/mL，β‑巯基乙醇为50～200μM，人血白蛋白浓度为1～100μg/mL，谷胱甘肽浓度为1‑100μg/mL，黄芪多糖为1‑50μg/mL，透明质酸0.1‑5μg/mL，碳酸氢钠为1.0‑3.7g/L。利用无血清培养基替代传统含动物血清的培养基来培养人成纤维细胞，避免了动物源性成分污染以及异种蛋白引起人体免疫反应等不安全因素。

摘要： 本发明公开了一种使用电磁射线治疗各种皮肤病的方法。尤其优选窄带、多色电磁射线发射器，该发射器的主发射波长对应于被对准治疗的哺乳动物组织的峰值吸收波长。还公开了一种局部成分，用于对被对准的组织进行预处理以改变该组织的峰值吸收波长。

摘要： 本发明公开了一种使用电磁射线治疗各种皮肤病的方法。尤其优选窄带、多色电磁射线发射器，该发射器的主发射波长对应于被对准治疗的哺乳动物组织的峰值吸收波长。还公开了一种局部成分，用于对被对准的组织进行预处理以改变该组织的峰值吸收波长。

摘要： 提供以新的作用机制为指标的成纤维细胞I型胶原产生促进剂的筛选方法。通过以神经激活作为指标，能够进行成纤维细胞I型胶原产生促进剂的筛选。

摘要： 本发明涉及对成纤维细胞激活蛋白(FAP)具有特异性的能够与犬、小鼠、和人FAP交叉反应的抗体、结合多肽、和scFv。

摘要： 本发明提供了一种成纤维细胞转化培养基及其应用、成纤维细胞的制备方法，涉及生物技术的技术领域。该成纤维细胞转化培养基中含有血小板活性因子(PRP)，用于诱导脐带间充质干细胞向成纤维细胞转化，可以使脐带间充质干细胞更好的向成纤维细胞转化，缓解了现有技术中存在的外源成纤维细胞获取困难的技术问题。

摘要： 提供制备CD106阳性和/或CD90阳性成纤维细胞的方法。此外，提供G‑CSF阳性成纤维细胞群。一种制备CD106阳性和/或CD90阳性成纤维细胞的方法，所述方法包括在选自于由TNF‑α和IL‑4组成的组中的一种以上的存在下培养成纤维细胞以使CD106阳性和/或CD90阳性成纤维细胞增加的步骤。

摘要： 本发明涉及一种成纤维细胞的培养基及利用其培养成纤维细胞的方法，包括基础培养基、NH

摘要： 本发明提供了一种诱导成纤维细胞分泌抗菌肽的诱导培养基和方法、成纤维细胞及应用，涉及细胞工程领域。该诱导培养基包含基础培养基、血小板裂解液和TGF‑β信号通路抑制剂。该诱导培养基能够激活皮肤成纤维细胞的脂肪分化潜能并在脂肪分化的过程中分泌抗菌肽。使用该诱导培养基诱导成纤维细胞分泌抗菌肽，操作简单，可操控性强，缓解了现有技术中存在的缺乏一种获得能够体外分泌抗菌肽的成纤维细胞的问题。

摘要： 一种人成纤维细胞无血清培养基，包括基础培养基和无血清培养上清浓缩液，还包括如下组分及其浓度：维生素组合物为5‑100ng/mL，葡多酚为50‑200μg/mL，重组人表皮细胞生长因子为1～50ng/mL，重组人碱性成纤维细胞生长因子为50～200ng/mL，重组人转化生长因子β1为1～50ng/mL，重组血小板衍生生长因子‑C为1～10ng/mL，重组人胰岛素样生长因子‑1浓度为1～10ng/mL，β‑巯基乙醇为50～200μM，人血白蛋白浓度为1～100μg/mL，谷胱甘肽浓度为1‑100μg/mL，黄芪多糖为1‑50μg/mL，透明质酸0.1‑5μg/mL，碳酸氢钠为1.0‑3.7g/L。利用无血清培养基替代传统含动物血清的培养基来培养人成纤维细胞，避免了动物源性成分污染以及异种蛋白引起人体免疫反应等不安全因素。