腔前卵泡

摘要： 研究腔前卵泡的体外培养可以深入了解卵泡发育生长机理以及卵母细胞与周围颗粒细胞、膜细胞之间信息交流机制.猪卵巢采用机械法分离卵泡,随机分为五组:基础培养组、MT10-11 M组、MT10-9 M组、MT10-7 M组、DMSO组.基础培养组以DMEM/F12为基础培养基,添加10 mU FSH、7.5％FBS、1％ITS、100μg/mL L-AA进行培养;MT10-11 M组、MT10-9 M组、MT10-7 M组、DMSO组分别在上述培养基中加入10-11 M、10-9 M、10-7 M浓度的MT及0.1‰浓度的DMSO后培养.在37°C、5％CO2培养箱中培养4 d,每48 h更换半量培养液一次,每次50μL.培养结束后进行分组收样,进行RN A表达水平的分析比较.在本实验研究浓度范围内,褪黑素对于体外培养猪腔前卵泡的生长没有显著影响.在体外培养体系中添加褪黑素具有抑制卵泡细胞凋亡的作用,其中10-9 M浓度的MT抗凋亡效果最明显.

摘要： 目的 探讨Rho/ROCK信号通路抑制剂Y27632对小鼠卵泡体外发育的影响.方法 取出生后12.5d的小鼠卵巢,采用机械法收集单个腔前卵泡,用微滴培养法对其进行培养.设置对照组和含有Y27632的处理组,培养期间观察卵泡和卵母细胞生长状态,同时,测量对照组和处理组的卵泡直径和卵母细胞直径,用荧光定量PCR技术检测颗粒细胞、卵母细胞以及凋亡相关基因的表达情况,同时用细胞荧光染色技术监测卵泡中颗粒细胞的凋亡情况.结果 通过形态学观察,培养基中添加Y27632后,整个卵泡生长过程中,卵泡的增长直径为(25.90±3.69)μm和卵母细胞增长直径为(4.37±1.89)μm,与对照组相比差异均无统计学意义(P均>0.05).经荧光定量PCR技术检测发现,随着卵泡的不断发育,颗粒细胞表达相关基因Amh、Lhr、Fshr和Foxl2,与对照组相比有差异,而卵母细胞特异性基因Bmp15则无变化.卵母细胞成熟后经微管染色发现,Y27632的添加并不影响卵母细胞完成第一次减数分裂.通过卵泡活力检测的结果 得知,处理组的颗粒细胞凋亡现象少于对照组,凋亡基因Bad低于对照组,且能引起凋亡抑制基因Xiap的上调.结论 小鼠卵泡经微滴法培养后,添加Y27632能提高颗粒细胞的基因Amh、Lhr、Fshr和Foxl2的表达.同时可降低颗粒细胞的凋亡,从而维持卵泡的正常发育.

摘要： 目的 探讨双酚A(BPA)对腔前卵泡体外发育的干扰作用.方法 将分离获取的小鼠腔前卵泡体外培养11d,培养液中分别添加0μmol/L BPA、1μl/ml DMSO、4.5μmol/L BPA和45μmol/L BPA,即为正常组、对照组、4.5μmol/L BPA组和45μmol/L BPA组.观察卵泡、卵母细胞和颗粒细胞的生长发育情况;统计卵泡成腔率、裸卵率和卵母细胞成熟率;采用ELISA法、免疫荧光染色法和Western blotting检测培养液中雌二醇(E2)含量、卵母细胞雌激素受体的表达,以及卵泡中生长分化因子9(GDF-9)和骨形态发生蛋白15(BMP-15)的表达.结果 与正常组比较,45μmol/L BPA组腔前卵泡的成腔率(10.1％)、卵母细胞成熟率(60.0％)、卵泡直径和颗粒细胞厚度明显降低(P<0.05),而裸卵率(28.6％)明显升高(P<0.05);且45μmol/L BPA明显降低了D8和D10卵泡培养液中的E2含量、卵母细胞雌激素受体的表达以及卵泡中GDF-9和BMP-15的表达(P<0.05).4.5μmol/L BPA组的各项指标与正常组比较差异均无统计学意义.结论 45μmol/L BPA可抑制腔前卵泡中雌激素的合成和分泌,降低卵母细胞中雌激素受体的表达,影响卵母细胞分泌促生长因子GDF-9和BMP-15,进而干扰卵泡发育、颗粒细胞增殖和卵母细胞成熟.

摘要： 为确立一种快速分离高质量腔前卵泡的方法,试验选择绵羊卵巢30枚随机分为1组、2组、3组,分别采用剪碎法、消化酶-机械分离法、针刮法进行分离处理.结果表明:每个卵巢采卵数以3组最高,极显著高于1组(P＜0.01),与2组之间差异不显著(P＞0.05);分离处理时间3组较短,与1组、2组之间差异极显著(P＜0.01),1组与2组之间差异不显著(P＞0.05);腔前卵泡质量以3组获取可用卵泡数占捡卵总数(卵泡完好率)最高,达80.16％,1组次之,2组最差.综合考虑,针刮法操作过程简单、处理时间短、分离腔前卵泡总数及可用卵泡数量较多,可作为分离绵羊腔前卵泡的一种较为理想方法.

摘要： 通过对绵羊腔前卵泡培养方法的研究,能够探索出适宜绵羊腔前卵泡生长发育的培养条件,以及为进一步揭示绵羊卵泡生长发育的规律奠定一些基础。试验一通过使用微滴法和琼脂培养基法培养腔前卵泡,观察其对绵羊腔前卵泡生长的影响;试验二通过绵羊腔前卵泡单独培养与群体培养,探讨不同培养密度对绵羊腔前卵泡生长的影响。试验结果显示,使用微滴法与琼脂培养基法培养的绵羊腔前卵泡,在培养3天时,卵泡直径增加值和存活率差异均不显著(P>0.05);但培养6天时,琼脂培养基法培养的腔前卵泡的直径增加值和存活率均极显著高于微滴法培养的腔前卵泡(P0.05)。试验结果表明,琼脂培养基法是较为适宜的绵羊腔前卵泡体外培养方法;培养密度对绵羊腔前卵泡体外培养并无显著影响。

摘要： 为了研究褪黑激素(Melatonin,MLT)对休情期银黑狐腔前卵泡卵母细胞超微结构的影响.本研究选取健康7月龄埋植和未埋植MLT的银黑狐各5只,取其左侧卵巢共计10枚,制备超薄切片后利用透射电镜分别观察每枚卵巢的各级腔前卵泡各1-5个,并进行拍照.结果埋植和未埋植MLT的银黑狐原始卵泡卵母细胞内均有少量线粒体和高尔基体,而未埋植MLT的银黑狐卵母细胞中还可见少量滑面内质网;初级卵泡卵母细胞内,均开始形成不完整透明带,线粒体及内质网数量均有所增加,沿透明带出现少量皮质颗粒;次级卵泡阶段,未埋植MLT银黑狐卵母细胞微绒毛数量较埋植MLT的多,其余细胞器未见差异.结果表明,MLT对休情期银黑狐卵巢腔前卵泡卵母细胞的线粒体、脂滴、高尔基体、皮质颗粒等细胞器的发育没有影响,仅对初级卵泡阶段内质网的发育有抑制作用.

摘要： 通过使用改良的TCM199无血清培养系统,在96孔细胞培养板中,每孔放入一个腔前卵泡等条件下,探索添加物黄体生成素对小鼠腔前卵泡卵母细胞体外生长发育的影响,旨在摸索一套适合小鼠腔前卵泡体外生长发育的培养体系.结果表明:随着浓度的增加,卵泡和卵母细胞的直径都不同程度的有所增长,其中200 mIU/mL浓度组在卵泡培养的同期时间,卵泡和卵母细胞的增长值最大,与其他各浓度组之间存在显著性差异(P＜0.05).卵泡培养到第2天时,对照组(0浓度组)卵泡存活率最高,为94％.但是培养到第6天时,200 mIU/mL浓度组卵泡存活率最高,为62.5％.从卵泡成腔率来看,卵泡培养到第4天时,300 mIU/mL浓度组卵泡成腔率最高,为24.4％.培养到第6天时,200 mIU/mL浓度组卵泡成腔率最高,为35.4％.从卵泡发生生发泡破裂率和排出第一极体来看,300 mIU/mL浓度组均略高于200 mIU/mL浓度组.实验结果证明200 mIU/mL浓度组与其他浓度组相比卵泡存活率最高,成腔率最高.且卵泡及卵母细胞增长最快,但发生生发泡破裂率、排出第一极体率次于300 mIU/mL浓度组.

摘要： 哺乳动物卵巢有大量的腔前卵泡,其中大部分卵泡不能进行排卵,而卵泡发育和闭锁的调节是一个高度复杂的过程.随着对卵泡生长过程的深入研究,国内外已经建立了多种体外培养方法,而腔前卵泡体外培养已成为现今的研究热点,并将其应用于雌性生殖毒理评价研究当中,为新药评价研究提供了可靠的实验工具.对哺乳动物腔前卵泡的体外培养中的胚胎来源、分离方法、培养条件和添加成分等几个方面进行了阐述,为进一步完善腔前卵泡培养体系提供实验依据.

摘要： 目的:探索添加物维生素C和促性腺激素对小鼠腔前卵泡卵母细胞体外生长发育的影响及适合小鼠腔前卵泡体外生长发育的培养体系.方法:通过改良的TCM199无血清培养系统,在96孔细胞培养板中,每孔放入1个腔前卵泡等条件下体外培养腔前卵泡卵母细胞.结果:随着培养时间的延长,各组卵泡和卵母细胞的直径都不同程度的有所增长,其中FSH400+ LH200组和VC50+ FSH400+ LH200影响均大于VC50和对照组,存在显著性差异(P＜0.05),但二者之间无显著性差异.FSH400+ LH200质量浓度组卵泡存活率、发生GVBD率和第一极体排出率均最高,分别为68.6％、17.6％、9.8％.但VC50+ FSH400+ LH 200组卵泡成腔率最高,为48％.结论:在改良的TCM199无血清培养系统中,联合添加促性腺激素和抗氧化剂后,卵泡成腔率大有提高,卵泡存活率、发生GVBD率和第一极体排出率仅次于单独添加促性腺激素组.

摘要： 目的:研究C型钠肽(CNP)促进小鼠腔前卵泡到有腔卵泡发育的分子机制.方法:在常规小鼠腔前卵泡培养体系中添加不同剂量的CNP,观察卵泡腔形成及发育情况并借此模型利用各种分子技术探究CNP促进腔前卵泡发育的信号转导机制.预期结果:利用小鼠腔前卵泡体外培养模型研究CNP/NPR2信号下游转导信使分子cGMP下游信号转导通路并完成关键基因的筛选.创新点:CNP/NPR2信号通路促进卵泡发育中的下游转导机制还没有相关报道,利用小鼠腔前卵泡培养这一模型来探究其具体的CNP/NPR2下游信号转导机制,具有理论机制研究原创性.

摘要： 本试验旨在研究褪黑激素(Melatonin,MLT)对休情期银黑狐腔前卵泡卵母细胞超微结构的影响.选取健康7月龄埋植MLT和未埋植MLT的银黑狐各5只,取其左侧卵巢共计10枚,制备超薄切片后利用透射电镜分别观察每枚卵巢的各级腔前卵泡各1-5个,并进行拍照.结果表明,埋植MLT和未埋植MLT的银黑狐原始卵泡卵母细胞内均有少量线粒体和高尔基体,而未埋植MLT的银黑狐卵母细胞中还可见少量滑面内质网;初级卵泡卵母细胞内,均开始形成不完整透明带,线粒体及内质网数量均有所增加,沿透明带出现少量皮质颗粒;次级卵泡阶段,未埋植MLT银黑狐卵母细胞微绒毛数量较埋植MLT的多,其余细胞器未见差异.结果提示,MLT仅对初级卵泡阶段内质网有一定影响.

摘要： 目的：采用三维小鼠腔前卵泡体外培养成熟体系来检测静磁场对小鼠腔前卵泡的发育毒性.方法：12日龄昆明小鼠卵巢中分离腔前卵泡,用海藻酸钠凝胶包埋后,放入预平衡的培养液中培养,随机分成对照组和实验组、5和450 mT暴磁组,隔天半量换液,倒置显微镜下测量其直径,连续培养8天,对成腔的卵泡进行体外HCG刺激,16～18 h后检测卵母细胞成熟情况.结果：各组形态学发育均良好,随着体外培养时间延长,卵泡逐渐增大,第4天450mT组与对照组相比增大显著(P＜0.05),第6天5和450 mT组均明显高于对照组(P＜0.05).随着磁场强度增强,卵泡成腔率亦比对照组明显提高(P＜0.05).结论：随着磁场强度增强,卵泡的成腔率明显提高,成腔卵泡直径显著增大,但高强度的静磁场可能会影响卵母细胞的成熟过程.

摘要： 研究的目的在于分析用不同的方法分离绵羊腔前卵泡以及用不同的培养方式对分离得到的腔前卵泡进行培养，对于绵羊腔前卵泡存活和发育能力的影响。实验分两部分进行：实验1为分离卵巢皮质，分别用显微分离法和胶原酶法分离腔前卵泡。实验2是在实验l的基础上，将较优方法获得的腔前卵泡分别进行单独培养和群体培养。结果显示，显微分离法与胶原酶法相比，在获得的腔前卵泡数量上差异不显著，但显微分离法获得的腔前卵泡基膜完整率显著高于胶原酶法(p<0.05)。获得的腔前卵泡使用单独和群体两种方式进行培养，其直径增加值在第三天和第六天差异不显著，但单独培养法在第三天和第六天的存活率显著高于群体培养法(p<0.05)，且有卵泡腔形成。研究显示使用显微分离法分离腔前卵泡与胶原酶法相比具有优势，相对简单，廉价并且对卵泡的损害很小。经显微分离法获得的腔前卵泡，使用单独培养法进行培养能够促进卵泡的生长发育。

摘要： 本研究通过对不同卵巢状况的成年水牛腔前卵泡采集数量进行统计分析，探讨卵巢直径大小及表面可见卵泡分布状况与腔前卵泡采集数量的关系，以期在腔前卵泡采集前对卵巢进行预选择。中国沼泽型水牛来自本地的屠宰场，屠宰水牛之后，手术摘除卵巢，将其置于含有35～39°C生理盐水溶液的保温瓶内，在4h之内送回实验室。将卵巢周围的结缔组织、脂肪组织、黄体及髓质去掉，保留韧带。用自制工具梳刮分离128枚成年水牛的卵巢。结果显示，直径在1～1.5cm和1.5-2cm的卵巢分离所得的腔前卵泡数较多。直径在1～1.5cm的卵巢几乎没有黄体出现，直径在1.5～2cm范围内的卵巢有少部分出现黄体，直径大于2cm的卵巢大部分有黄体。直径在1.5-2cm范围内的无黄体卵巢分离所得的腔前卵泡数明显多于有黄体卵巢(p＜0.05)。而直径大于2cm的卵巢有无黄体时分离所得的卵泡数量差异不显著(p＞0.05)。卵巢上没有大卵泡分布且可见小卵泡分布较多时，采集腔前卵泡数较多，而有大卵泡分布或者小卵泡分布较少时，采集卯泡数较少。由此可见，卵巢直径在1-1.5cm和1.5-2cm的卵巢，以及卵巢上没有大卵泡分布且可见小卵泡分布较多时，采集腔前卵泡数较多。

摘要： 以屠宰母牛卵巢为实验材料，对卵巢表面直径2mm以下腔前卵泡卵母细胞的体外成熟(IVM)、体外受精(IVF)和受精卵的体外培养(IVC)进行了系统研究。结果显示：腔前卵泡卵母细胞成熟率、受精后的卵裂率均显著低于直径2～6mm以及直径6mm以上卵泡卵母细胞。而腔前卵泡卵母细胞的退化率则显著高于直径2-6mm和直径6mm以上卵泡卵母细胞。腔前卵泡卵母细胞没有发育到桑椹胚;而直径2-6mm以及6mm以上卵泡卵母细胞则分别有11.76％和14.47％发育到桑椹胚。对冻精分别采取直接离心法。上游法和下潜法处理，用上述3种方法获得的精子分别对腔前卵泡卵母细胞进行IVM、IVF和IVC，比较其卵裂率。结果显示：上游法与下潜法之间卵裂率、下潜法与直接离心法之间卵裂率、上游法与直接离心法之间卵裂率差异均不显著。

摘要： 目的:研究C型钠肽(CNP)在羔羊超排中的应用及促进腔前卵泡发育的分子机制.rn 方法:在常规羔羊超排之前连续注射数天一定剂量的CNP,超排后检测获得的可用卵母细胞数量,后期利用体外受精技术及早期胚胎体外培养技术获得可用于胚胎移植的囊胚.rn 预期结果:对羔羊利用CNP前处理+常规促性腺激素超排方法可以增加每只羔羊可利用卵母细胞数,进而增加每只羔羊超排后提供的后代数,在一定水平上提高畜牧业发展速度.rn 创新点:国内外幼畜超排方法均是直接利用促性腺激素进行超排获得卵母细胞,在常规促性腺激素诱导前利用CNP促进腔前卵泡发育作用对幼畜进行一个前处理,使得早期有腔卵泡数量增多进而获得更多的超排后卵母细胞,该技术国内外没有任何报道,具有技术方法原创性.

摘要： 为了研究第二信使cAMP/cGMP通路对哺乳动物卵巢卵泡发育的调控作用，本试验应用七种特异性抗体(sGCα、sGC β、nNOs、FOX01、PDE4、PKB/Akt和Inhibin α)对中国荷斯坦奶牛卵巢卵泡细胞进行免疫组织化学定位。结果表明PKB主要存在于原始卵泡、腔前卵泡和有腔卵泡颗粒细胞，黄体细胞中没有;FOx01主要位于原始卵泡、腔前卵泡和有腔卵泡颗粒细胞;PDE4仅位于部分有腔卵泡的颗粒细胞;抑制素α、nNOs、sGC α和β存在于各级卵泡的颗粒细胞层，其中sGC α和β主要存在于原始卵泡和腔前卵泡的颗粒细胞。这七种蛋白的阶段/细胞特异性表达表明它们在中国荷斯坦卵巢卵泡的发育、闭锁和黄体化过程中起非常重要的作用。

摘要： 本文利用新近建立的大鼠腔前卵泡体外培养方法，研究了氯化镉对卵泡发育和卵母细胞成熟的影响及其机制,探讨了该方法用于雌性生死毒物鉴定和机制研究的可行性。结果显示，1.2μg/ml以上剂量CdCL2可以影响卵泡生长、分化和孕激素生成.在卵泡发育不同阶段d2(腔前阶段)、d6(有腔阶段)、d11(排卵前阶段)暴露氯化镉,在1.6ug/mL剂量下d2暴露比d6暴露有腔卵泡形成率、存活率减少,而异常卵泡率比d6增加;d2暴露1.2ug/ml以上氯化镉停止在GV期的卵母细胞卵母细胞明显比d6、d11增加；高浓度的氯化镉可以抑制卵母细胞生发泡的破裂；d2、d6和d11暴露氯化镉对PB形成率有随剂量啬而下降的超势,但无统计学差异。研究表明，氯化镉对卵泡发育和卵母细胞成熟的影响,其对卵母细泡发育影响的敏感阶段可能在腔前卵泡阶段；大鼠控前卵泡体外试验方法可用于雌性生殖毒物鉴定和机制的研究,有良好的应用前景。

摘要： 本文综述卵泡经原始卵泡、腔前卵泡和有腔卵泡发育至成熟卵泡的生长发育动态过程模式,着重阐述卵泡生长发育过程中的调控机制,为进一步研究卵泡的生长、发育和排卵机制提供了理论基础.

摘要： 本发明属于家畜分子生物学技术领域，具体涉及一种与猪有腔卵泡闭锁相关的circRNA、其siRNA抑制剂及其应用；所述circRNA为circSLC41A1，其线性核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；本发明针对circSLC41A1设计特异性扩增引物，经PCR扩增、RNase R酶消化及荧光原位杂交验证所述的circSLC41A1的真实存在；利用荧光定量PCR检测到circSLC41A1在猪卵巢中健康有腔卵泡组织中表达高于闭锁卵泡，用siRNA干扰技术证实circSLC41A1对颗粒细胞凋亡具有显著抑制作用；同时，本发明设计并提供一种可作为circSLC41A1抑制剂的小RNA；本发明公开的circSLC41A1有望作为母猪繁殖相关的分子标志物，为猪繁殖性状的评价，繁殖力提升，为人类卵泡异常相关疾病的发生和预防提供新的理论基础和潜在的分子标靶。

摘要： 本发明涉及虾青素的应用，具体涉及虾青素在促进小鼠腔前卵泡发育中的应用及制剂。本发明通过在小鼠腔前卵泡体外培养液中添加虾青素，以探索其在卵泡发育过程中的抗氧化作用和抗氧化机制，结果显示，虾青素通过提高卵泡中抗氧化基因的表达，减少了卵泡中的脂质过氧化，提高了卵泡的发育率和对雌激素的分泌，促进了小鼠腔前卵泡的体外发育，该结果为其在其他物种卵泡体外培养中的应用提供借鉴。

摘要： 本发明提供一种体外人卵母细胞腔前卵泡培养方法，其特征在于培养方法的具体步骤包括：1)将放在含蔗糖和丙二醇的冷冻保护液中的并进行液氮低温贮存的体外人卵母细胞解冻后复苏培养；2)将复苏培养获取的体外人卵母细胞分离提取后放入含有卵泡雌激素FSH的营养液中进行腔前培养。体外人卵母细胞腔前卵泡培养需要FSH的支持，FSH不仅能促进卵泡的生长，增加其存活天数，还能促进颗粒细胞增殖，促进卵母细胞成熟，是卵泡生长发育调控的重要因子。曲古柳菌素A可有效抑制肿瘤细胞增殖，可为调控细胞周期进程进而诱导肿瘤细胞凋亡，从而保证细胞成活质量，该方法对于试管婴儿方面的研究具有重要意义。

摘要： 本发明涉及虾青素的应用，具体涉及虾青素在促进小鼠腔前卵泡发育中的应用及制剂。本发明通过在小鼠腔前卵泡体外培养液中添加虾青素，以探索其在卵泡发育过程中的抗氧化作用和抗氧化机制，结果显示，虾青素通过提高卵泡中抗氧化基因的表达，减少了卵泡中的脂质过氧化，提高了卵泡的发育率和对雌激素的分泌，促进了小鼠腔前卵泡的体外发育，该结果为其在其他物种卵泡体外培养中的应用提供借鉴。

摘要： 本发明公开了一种小鼠腔前卵泡三维培养体系及其建立方法，提供了一种用于体外培养小鼠腔前卵泡的试剂组合，该试剂组合包含：藻酸盐溶液、CaCl2凝胶液、卵泡分离液(DM)、卵泡平衡液(MM)、卵泡酶解液(EM)、卵泡生长液(GM)、卵泡成熟液(MM1)和透明质酸酶。采用该试剂组合建立了一种小鼠腔前卵泡三维培养体系，该三维培养体系以藻酸盐凝胶为基质，以藻酸盐与Ca2+形成的凝胶滴为卵泡发育提供立体结构，再通过在不同的培养基质中进行培养，得到发育成熟的卵泡，进一步得到成熟的卵母细胞。

摘要： 本发明公开了一种家畜腔前卵泡体外培养液及其制备方法，所述培养液为α‑亚麻酸，α‑亚麻酸在每1mL常规培养液中的添加量为100～200μg，所述常规培养液由100mLα‑MEM溶液、1.5mL转铁蛋白，150μL胰岛素，100μL维生素C，0.5mL亚硒酸钠，500μg牛血清白蛋白，100ng海藻酸钠，500IU FSH，0.06g青霉素钠、0.1g硫酸链霉素组成。与现有技术相比，本发明首次将α‑亚麻酸家畜卵巢腔前卵泡的体外培养，效果可靠，易于推广，适用于家畜腔前卵泡的体外培养，可显著提高体外培养家畜腔前卵泡的体外存活率。

摘要： 本发明提供一种体外人卵母细胞腔前卵泡培养方法，其特征在于培养方法的具体步骤包括：1)将放在含蔗糖和丙二醇的冷冻保护液中的并进行液氮低温贮存的体外人卵母细胞解冻后复苏培养；2)将复苏培养获取的体外人卵母细胞分离提取后放入含有卵泡雌激素FSH的营养液中进行腔前培养。体外人卵母细胞腔前卵泡培养需要FSH的支持，FSH不仅能促进卵泡的生长，增加其存活天数，还能促进颗粒细胞增殖，促进卵母细胞成熟，是卵泡生长发育调控的重要因子。曲古柳菌素A可有效抑制肿瘤细胞增殖，可为调控细胞周期进程进而诱导肿瘤细胞凋亡，从而保证细胞成活质量，该方法对于试管婴儿方面的研究具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种分离腔前卵泡的方法及其专用刀。本发明提供的用于分离腔前卵泡的刀，包括至少两个叠放的刀片，所述刀片之间设有间隙。所述刀片为双刃刀片。在所述双刃刀片的中部沿纵向设有间隔拿持部件；所述间隔拿持部件是用胶带缠绕形成的。本发明的用于分离腔前卵泡的刀可以广泛应用在体外离体分离腔前卵泡中，具有以下优点：简捷、高效、成本低、便于推广，通过本发明的刀，可以使分离出的腔前卵泡数量增多，且分离效果好。

摘要： 本发明公开了一种提高牛腔前卵泡体外发育的培养基及其应用。本发明提供制备促进离体哺乳动物腔前卵泡体外发育的培养基的方法，为将胰岛素、转铁蛋白、亚硒酸钠、丙酮酸钠、谷氨酰胺、次黄嘌呤、血清、促卵泡素、促黄体素、雌激素、PTEN抑制剂和α-MEM培养基混合，得到培养基。本发明的实验证明，本发明首先从卵巢皮质分离牛腔前卵泡，随后将获取的卵泡在本发明提供的培养基和对照培养基中进行体外培养，观察其直径增长以及卵泡的成腔率，结果发现，本发明提供的培养基培养得到成腔率和直径增长值均高于对照，为进一步挖掘雌性生殖资源提供必要的培养体系。

摘要： 本实用新型公开了一种应用于腔前卵泡培养的培养基，该培养基包括：培养皿和能够盖合在该培养皿上方开口的盖子，其特征在于，所述培养皿内部设置有琼脂凝固层，所述琼脂凝固层上覆盖有石蜡油层，琼脂凝固层的上表面设置有若干个用于容置腔前卵泡和培养液的凹坑，所述凹坑的深度小于所述琼脂凝固层的厚度。本实用新型利用琼脂具有一定的支撑回弹作用，可确保基膜完整，卵泡维持圆形结构，卵母细胞和颗粒细胞不会逸出生长，便于进行长期的培养观察和测量，另一方面便于添加和更换培养液。