莱茵衣藻

摘要： 茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)是植物次生代谢的调节剂,参与异戊二烯代谢调控,对莱茵衣藻的异戊二烯类物质合成有重要影响.为探究莱茵衣藻如何快速响应MeJA处理,测定MeJA处理下莱茵衣藻的生长状态和光合效率等生理特征参数,重点关注MeJA处理24 h内2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸(2-C-methnatureyl-D-rythritol-4-phosphate,MEP)合成途径、类胡萝卜素合成途径和甾醇合成途径关键基因的表达水平变化.结果表明,MeJA处理降低了莱茵衣藻的生物量积累和光合活性,上调了MEP通路和甾醇合成通路相关基因,下调了类胡萝卜素合成途径的关键基因.在转录与生理层面,莱茵衣藻对于MeJA处理的初期响应具有快速与剂量依赖性的特点.研究结果为探索微藻类异戊二烯合成和代谢机制提供理论参考.

摘要： 能进行光合作用的服装问世近期,伊朗裔加拿大设计师Roya Aghighi推出了一款以藻类为原料的外套,并将其命名为"Biogarmentry"。来自英属哥伦比亚大学的数名科学家为Roya Aghighi提供了技术支持与协助,最终成功研发出由藻类制成的衣服。实验结果发现,将莱茵衣藻与纳米聚合物一起纺丝,将会得到近似于亚麻的混合物。经过持续的探究,设计师成功创造出"第一个非织造的光合纺织品"。据悉,这件衣服与大自然的花卉植物无异,它是一件会"呼吸"的生物服装。

摘要： 日前,国家卫生健康委发布了《关于莱茵衣藻等36种“三新食品”的公告》,公告称,“根据《中华人民共和国食品安全法》规定,审评机构组织专家对莱茵衣藻等3种新食品原料、喹啉黄铝色淀等18种食品添加剂新品种、磷酸锆(2∶1)等15种食品相关产品新品种的安全性评估材料进行审查并通过”。国家卫生健康委食品安全标准与监测评估司对此公告进行了解读。本刊全文刊登如下。

摘要： 研究建立了基于超高效液相色谱串联三重四级杆质谱技术的1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯(1,3-Dioleoyl-2-palmitoylglycerol,OPO)分析方法。在正离子模式下,以[876>577]为定量离子对,通过多反应监测模式(Multiple Reaction Monitoring,MRM)扫描,采用内标法对OPO进行定量分析。对缺氮胁迫条件下一株野生型莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)cc-5325及其半乳糖基水解酶基因敲降突变体M08的OPO进行了定量分析,研究结果发现莱茵衣藻中OPO在缺氮胁迫期间显著积累,且不同遗传背景的莱茵衣藻OPO积累量不同。在缺氮第1至第3天,M08的OPO含量相较于cc-5325分别提高了3.70、3.04和2.74倍,M08的OPO产量相较于cc-5325分别提高了1.13、1.53和1.33倍,说明通过遗传改造莱茵衣藻的某些脂质代谢途径相关基因可以增加其OPO含量,因此莱茵衣藻具有改成为商业化油脂新食品原料的潜在应用价值。研究建立的功能脂质OPO的定量分析方法对进一步研究不同遗传改造的莱茵衣藻中OPO结构脂的检测提供了技术支持和分析基础。

摘要： 5月11日,国家卫生健康委食品安全标准与监测评估司发布关于莱茵衣藻等36种“三新食品”的公告,其中,长双歧杆菌长亚种BB536获批新食品原料,可用于婴幼儿食品的菌种。事实上,长双歧杆菌长亚种BB536(以下简称“BB536菌株”)是日本森永乳业株式会社(以下简称“森永乳业”)的专有益生菌,该菌株从健康婴儿肠道中分离得到,并已在美国、日本被批准用于婴幼儿食品。森永乳业是一家怎样的企业?BB536菌株具有哪些特性?获批新食品原料后的发展规划是什么?为此,《食品安全导刊》杂志采访了森永乳业海外事业部首席研究助理黄勤雯博士。

摘要： 为制备一支高特异性的莱茵衣藻BBS8兔源多克隆抗体,研究首先在大肠杆菌中表达N-端6×His标签标记的BBS8融合蛋白(6×His::BBS8)并对其进行镍柱纯化,而后将纯化所得6×His::BBS8蛋白免疫新西兰大白兔。免疫3次后采集少量抗血清,利用间接ELISA法测定其效价为1﹕102400。然后,利用protein A纯化珠对所得BBS8抗血清进行IgG亚型抗体富集,接着利用大肠杆菌表达和纯化所得N-端MBP标签标记的BBS8(MBP::BBS8)对IgG抗血清进行抗原抗体亲和纯化。利用纯化后的anti-BBS8多克隆抗体对莱茵衣藻野生型CC-125和bbs8突变体藻种的全细胞蛋白提取物进行免疫印迹鉴定,所得anti-BBS8多克隆抗体特异性较高,适合用于后续莱茵衣藻BBS8蛋白功能的研究。

摘要： 高温影响坛紫菜(Pyropia haitanensis)的产量和品质,是制约紫菜产业发展的主要因素.前期研究发现,高温胁迫下,坛紫菜泛素蛋白酶体系统相关基因显著上调表达,但其响应高温胁迫的分子功能还未知.本研究通过分子生物学、遗传学等技术手段对坛紫菜cuUin E3连接酶基因(PhCUL1)的功能进行研究.利用PCR方法克隆了PhCUL1基因的全长,PhCUL1全长为2500 bp,开放阅读框(ORE)长度为2481bp,该基因存在1个Cullin (407～618 aa)结构域和1个Cullin Nedd8(754～821 aa)结构域,其中,Cullin Nedd8结构域为蛋白融合位点.进化树分析显示,PhCUL1在进化上与脐形紫菜(Porphyra umbilicalis)有较近的亲缘关系.qRT-PCR结果显示,PhCUL1基因被高温显著诱导.为进一步阐明PhCUL1的分子功能,将其转入莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)进行功能验证,过表达PhCUL1株系比野生型更能耐受高温胁迫.同时,在高温33°C下处理3h和6h内,转基因植株的PhCUL1基因呈上调表达.这初步说明PhCUL1基因在坛紫菜响应高温胁迫过程中发挥着重要作用,其具体调控机制有待进一步研究.本研究有助于阐明坛紫菜泛素蛋白酶体系统响应高温胁迫的分子机制,为指导耐高温新品种选育提供理论依据.

摘要： 为简化莱茵衣藻叶绿体表达载体构建步骤,将莱茵衣藻叶绿体中表达所需的DNA元件组合,构建入可一步TA克隆插入靶基因的载体pTBNK,可直接用于在莱茵衣藻叶绿体表达靶基因。将EGFP克隆至表达载体pTBNK,经蓝白班筛选获得阳性转化子pTBNK-EGFP,通过基因枪转化衣藻叶绿体并获得阳性克隆。通过PCR鉴定,EGFP成功整合至衣藻叶绿体基因组中。

摘要： [目的]为建立根癌农杆菌介导的莱茵衣藻快速简便高效的遗传转化体系,本研究以模式生物莱茵衣藻为受体材料,从转化方法和转化子快速鉴定两个方面进行了优化.[方法]比较了固体培养基共培养转化方法和液体培养基共培养转化方法对根癌农杆菌LBA 4404介导的莱茵衣藻CC425转化效率的影响;研究并比较了(1)首先经过TE裂解再进行PCR(两步法)和(2)不经TE裂解直接进行PCR(一步法)的两种转化子鉴定方法的最佳反应条件和扩增效率.[结果]农杆菌LBA 4404和莱茵衣藻CC425液体培养基共培养5 d后的转化效果最好,转化率达43.33±1.67个转化子/106个藻细胞.PCR最佳反应条件为:使用高保真DNA聚合酶Taq 1进行扩增;参加PCR反应的细胞密度为5×l03-5xl06个/mL;TE裂解缓冲液沸水浴20 min(两步直接PCR方法),或者预变性15 min(一步直接PCR方法).两步法直接PCR的扩增效率优于一步法,但后者反应步骤更简洁.[结论]本研究建立并优化了农杆菌液体介导莱茵衣藻遗传转化体系,该体系可快速获得遗传转化子,减少转化工作量.

摘要： 为研究多基因调控下微藻油脂合成调控的分子机制,对acs2-cis1-dof基因共调控的莱茵衣藻藻株DLC进行转录组测序及分析,获得749个差异表达基因.通过京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)聚类分析发现,有51个差异表达基因参与碳水化合物代谢,15个差异表达基因参与脂质代谢,差异基因主要富集在甘油酯代谢、脂肪酸降解、糖酵解及糖异生、淀粉和蔗糖代谢等通路中.采用BODIPY 505/515荧光染色法检测发现,热激后莱茵衣藻藻株DLC细胞内的甘油三酯质量较野生型提高了193％,通过检测吸光度发现藻细胞的淀粉质量降低了45％,说明基因共调控不仅增强了脂质合成代谢,还使得糖代谢中的碳流重新定向.研究工作为探究基因共调控下脂质合成代谢的分子机理以及微藻产油基因工程提供理论参考.

摘要： 为探究不同磷水平下莱茵衣藻对砷酸盐转化的影响，设置0.063、0.315、3.15mg/L3个P水平，As(V)处理浓度为63μg/L，测定处理后不同时间莱茵衣藻胞内外砷形态和含量的变化。结果发现，不同P水平下藻富集、吸收砷含量存在差异，P1、P2条件有利于藻吸收、富集更多的砷，是P3条件下的3-4倍。通过测定藻细胞和培养液中不同形态砷含量，莱茵衣藻能把As(V)还原为As(Ⅲ)之后外排到胞外，不同P水平下莱茵衣藻对As(V)的还原能力、速率以及As(Ⅲ)的外排速率不同。在P1、P2下2h时藻胞内As(V)还原为As(Ⅲ)达到最大值，而在P3下8h时As(V)还原为As(Ⅲ)达到最大值；在P1、P2下从1h开始就检测到胞内As(Ⅲ)外排到培养液中，而P3下培养液中在4h出现As(Ⅲ)。因此，莱茵衣藻对As(V)的转化过程和速率与培养液中磷的含量关系密切。

摘要： 微藻油脂是生物柴油的一种理想原料,而缺氮作为一种有效的环境胁迫条件,可以诱导微藻油脂的积累,但关于该过程的作用机制尚未完全清楚.活性氧是细胞内重要的信号物质,参与了生物体的逆境胁迫损害和保护机制,可以诱导抗氧化次生代谢产物和动物细胞内脂类物质的合成.本文以莱茵衣藻为研究对象,分别在正常、缺氮和加入活性氧抑制剂的条件下培养,观察其OD750变化,并用荧光倒置显微镜观察细胞内油脂的变化,探讨缺氮胁迫、活性氧和微藻油脂含量之间的关系.结果表明:1)缺氮条件会抑制野生型莱茵衣藻CC-125的生长,但对无细胞壁突变型莱茵衣藻CC-503的生长影响不大;2)缺氮条件会诱导CC-125和CC-503两种莱茵衣藻中的油脂合成;3)加入活性氧抑制剂会影响缺氮诱导莱茵衣藻油脂合成过程,使油脂合成减少.以上结果表明活性氧可能参与了缺氮条件下莱茵衣藻油脂积累的过程,也表明CC-503可能是一种极有潜力的产油藻种.

摘要： 人类对传统化石能源的过度开采在推动经济发展的同时,其造成的能源危机、环境污染等问题也日益凸显.微藻因为油脂含量高、油脂质量好、洁净可再生等特点成为生物能源领域研究的热点.莱茵衣藻是微藻研究及分子生物学研究的模式生物,研究莱茵衣藻油脂合成途径中的关键基因/蛋白质,对了解微藻产油机理,进而实现优化、筛选高油藻种有重要意义.以莱茵衣藻为研究材料,在正常/缺氮培养条件下观察了莱茵衣藻生长表型差异,利用蛋白质免疫印迹分析技术,检测了醋酸盐同化、柠檬酸循环、淀粉代谢和三酰甘油合成等途径中40多个油脂合成相关基因的蛋白质差异表达情况.在缺氮处理条件下，莱茵衣藻的生长和叶绿素合成受到强烈抑制，总蛋白质含量明显下降，通过尼罗红染色观察到细胞内形成油脂颗粒(lipid droplets)，免疫印迹分析结果显示，磷脂二脂酰甘油酰基转移酶1 (PDAT1),dof类转录因子(CGL19)，柠檬酸合成酶2(CS2)，两个二酰基甘油酰基转移酶(DGAT1,DGAT2-1)等蛋白质在缺氮处理后显著上调，同时也鉴定到表达相对稳定的内参蛋白质，如G蛋白质β亚基(CBLP)、放氧增强蛋白质2(OEE2)等。为微藻油脂合成通路的蛋白质组学研究提供了实验依据。

摘要： 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)是在维管植物中普遍存在的一种胞质酶，也广泛分布在吉细菌、细菌、蓝藻和单细胞绿藻中。本研究报导克隆莱茵衣藻PEPC2基因。正在构建正义和反义载体，检测莱茵衣藻PEPC基因的不同表达对在其脂类含量及其组分以及光合的影响。本实验克隆到的莱茵衣藻PEPC2的序列包含起始位点ATG和磷酸烯醇式丙酮酸竣化酶的第一段保守序列(VITAHPTQa1RR)和催化活性位点(H156），连接pMD 18-T载体测序。PEPC酶在物种间的同源性很低，其结构和功能也具有较大的差异。

摘要： 莱茵衣藻以其特有的生物学特性和遗传背景成为迄今生物界中唯一能独立地对其核、叶绿体及线粒体分别进行基因转化的模式物种.近年来,利用衣藻作为新型生物反应器来生产药物蛋白和生物制氢的研究受到越来越多关注.深入研究其基因转化体系的特性和表达调控机理,对利用其构建高效生物反应器具有重要意义。本文归纳了衣藻核转化和叶绿体转化的原理、特点及表达调控机理,并对其应用与发展趋势作了分析。

摘要： 本文通过在一般培养基中添加尿素、谷氨酸、葡萄糖等有机物,考察了莱茵衣藻混合营养培养的产氢效果.结果表明,混合营养培养是一般培养基培养莱茵衣藻产氢的6倍,同时去硫和混合营养培养具有最佳的产氢效果,是一般培养基的10倍.尿素、谷氨酸及葡萄糖的添加对其生长和产氢也有促进作用,对莱茵衣藻生长和产氢促进作用的尿素的最佳添加量为0.25g/L,谷氨酸的最佳添加量为0.7g/L,葡萄糖的添加量为0.2g/L.

摘要： 用微玻璃珠研磨法将p387NIT1质粒转入至莱茵衣藻硝酸还原酶缺陷型及缺壁突变株品系CC-2677中,得到了一些不同的插入型突变转化子.经检测,该突变体的确丧失了叶绿素b合成能力,该突变株将可作为CBN1基因克隆及其定位的有力工具.本文对此实验研究过程进行了介绍.

摘要： 我国盐土面积很大,目前国内外学者通过不同的方法,努力培育出耐盐性较高的优良植物品种.莱茵衣藻作为研究植物分子生物学的模式材料,具有操作简便,遗传背景较清楚,易获得突变株,对遗传性状分析方法较标准等优点.本文介绍了莱茵衣藻野生型和不同突变株品系对NaCI的抗性检测以及用紫外线照射法诱变对NaCI具有抗性或敏感性突变株方面所做的工作.

摘要： 本文以莱茵衣藻、螺旋藻、酿酒酵母、粘红酵母等四种微生物为研究对象,分别用索氏法提取并测定了这四种微生物中粗油脂占菌体干重的含量,实验结果表明莱茵衣藻的含油量最大,占细胞干重的37.7％,酿酒酵母的含油量最低,占细胞干重不足3％.用气相色谱初步分析了各种微生物的油脂的组成以及各组分的含量,结果发现,粘红酵母油脂的组成与目前生物柴油的原料极为相似.进一步研究了粘红酵母生物量、油脂含量及油脂成分随培养时间的变化情况。

摘要： 本发明提供了一种莱茵衣藻、莱茵衣藻粉的异养发酵制备方法及应用，莱茵衣藻粉的制备方法包括以下步骤：（a）将莱茵衣藻种子接种到种子罐中进行异养培养，培养完成后，以1～5vol%的接种量接种到发酵罐中进行异养发酵；所述种子罐和发酵罐的培养温度均为15～38°C、压力为0.03～0.08MPa、pH为5.0～8.0、溶解氧为10～100%、搅拌转速为0～700转/分；（b）发酵结束后，将所得发酵液进行膜分离得到莱茵衣藻固体产物；（c）将所得产物进行喷雾干燥即得莱茵衣藻粉。本发明制得的莱茵衣藻粉具有优质的蛋白、多糖、不饱和脂肪酸、维生素等营养物质，同时安全性高，具有显著的降血糖效果。

摘要： 本发明提供了一种莱茵衣藻、莱茵衣藻粉的异氧发酵制备方法及应用，莱茵衣藻粉的制备方法包括以下步骤：（a）将莱茵衣藻种子接种到种子罐中进行异养培养，培养完成后，以1～5vol%的接种量接种到发酵罐中进行异养发酵；所述种子罐和发酵罐的培养温度均为15～38°C、压力为0.03～0.08MPa、pH为5.0～8.0、溶解氧为10～100%、搅拌转速为0～700转/分；（b）发酵结束后，将所得发酵液进行膜分离得到莱茵衣藻固体产物；（c）将所得产物进行喷雾干燥即得莱茵衣藻粉。本发明制得的莱茵衣藻粉具有优质的蛋白、多糖、不饱和脂肪酸、维生素等营养物质，同时安全性高，具有显著的降血糖效果。

摘要： 本发明公开了莱茵衣藻

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