血凝素

摘要： 旨在利用杆状病毒表达系统构建1株对高致病性H7N9亚型禽流感病毒(A/Chicken/Huizhou/HZ-3/2016)攻击后的家禽提供保护的候选疫苗株。用同源重组的方法构建1株表达H7N9亚型禽流感病毒(A/chicken/Shaoxing/5201/2013株)血凝素(Hemagglutinin,HA)蛋白的重组杆状病毒。用PCR技术鉴定重组杆状病毒rBac-SX5201HA的遗传稳定性,用间接免疫荧光方法和Western Blotting方法鉴定HA蛋白的表达情况,用血凝试验检测HA蛋白的体外活性,继而对重组疫苗在无特定病原体(Specific pathogen free,SPF)鸡上进行免疫效力试验,并对免疫后21 d的SPF鸡血清进行抗体检测,对攻毒5 d后的鸡咽喉和泄殖腔棉拭子进行病毒分离。结果显示,重组杆状病毒rBac-SX5201HA在昆虫细胞中生长良好,且可稳定高效表达H7 HA蛋白,血凝效价可达2^(6);重组疫苗免疫SPF鸡21 d后可诱导2^(8.4)血凝抑制(Hemagglutinin inhibition,HI)抗体效价并能抵抗高致病性H7N9亚型禽流感病毒的攻击,免疫组SPF鸡群均未发病或死亡,仅有17%的SPF鸡在攻毒后第5 d出现排毒。可以看出,重组疫苗对高致病性H7N9亚型禽流感病毒攻击后的SPF鸡提供了100%的保护,且可有效抑制病毒在SPF鸡体内的复制。

摘要： 目的了解深圳市盐田区近年度A(H1N1)pdm09流感病毒HA基因特征。方法选取盐田区2016—2019年监测年度分离的34株A(H1N1)pdm09流感病毒毒株,PCR扩增HA基因并测序,构建进化树,进行糖基化位点、抗原变异位点和受体结合位点等变异分析。结果分析的34株毒株均分布在流感病毒的6B分支,2016年上半年5株分布在6B.2簇;2016年下半年及2017年度毒株分布在6B.1簇;2018—2019年度毒株分布在6B.1A簇,其中有5株为6B.1A.1型,3株为6B.1A.5a型。与同年疫苗株比较,盐田区A(H1N1)pdm09流感毒株3个受体结合部位的氨基酸均没有发生变异。D222和Q223没有出现变异。HA1与HA2的裂解点,R327和G328没有出现变异。所有毒株在潜在糖基化位点10NNST、11NTSD、23NVTV、87NGTC、276NTTC、287NTSL、481NGTY和540NGSL等保持稳定;有31个分离株多出1个位于Sa抗原决定簇内的糖基化位点162NQSY(与疫苗株A/Michigan/45/2015一致)或162NQTY(与疫苗株A/Brisbane/02/2018一致)。结论盐田区A(H1N1)pdm09流感病毒HA基因及其氨基酸持续变异,应持续监测流感病毒,为科学防控提供依据。

摘要： 禽流感是正黏病毒科,流感病毒属的成员,流感病毒属分A、B、C3个型,禽流感是A型流感病毒。病毒粒子大多呈球形,少数呈杆形或丝状,大小为80~120纳米,病毒子表面有一层棒状三聚体纤维叫血凝素(HA),它能凝聚禽类和哺乳动物的红细胞;还有一层蘑菇状(丝状)的四聚体纤维叫神经氨酸酶(NA),它有与血凝素相反的作用,能将被血凝素凝聚的红细胞解离下来.

摘要： 甲型流感病毒感染性强,宿主广泛,主要感染禽类,其次为哺乳动物。当跨物种传染事件发生时,有可能造成流感大流行,因此,对病毒实施及时有效的监控,以及研发抗流感病毒药物刻不容缓。流感病毒表面的糖蛋白血凝素在病毒入侵宿主细胞的过程中发挥了关键的作用,可作为单克隆抗体药物的主要靶点。针对血凝素的单克隆抗体能够有效抑制病毒传播,保护宿主。因此,本文综述了目前报道的针对甲型流感病毒血凝素糖蛋白的人单克隆抗体,为后续抗流感药物的研发提供新的思路和展望。

摘要： 目的分析2016-2020年福建省A(H1N1)pdm09亚型流感病毒的血凝素(Hemagglutinin,HA)基因特征,了解与其他省份和全球范围内时间和空间上的分布差异。方法选取2016-2020年福建省流感监测网络实验室分离A(H1N1)pdm09流感毒株基因序列测定。基因序列用MEGA、Net NGlyc 1.0 Server分析基因特征。结果2016-2020年福建省A(H1N1)pdm09亚型流感病毒HA基因进化树分析与其他省份及国外大部分一致,但仍有少部分不同。HA分支由6B转化为6B.1并演化至6B.1A5A。HA基因变异主要在抗原性决定簇Sa、Ca、Sb。对于不同地区疫苗株匹配度也会有差异。结论福建省A(H 1N 1)pdm09病毒流行株具有遗传多样性。

摘要： 新城疫的病原属于副黏病毒科、副黏病毒属,副黏病毒属共有9个血清型,新城疫属于禽副黏病毒Ⅰ型。成熟病毒多呈蝌蚪形,也有的呈不规则圆形,大小为50~400纳米,新城疫病毒表面有囊膜,囊膜有大小两种纤突,在大纤突上有血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA),血凝素能使禽类和哺乳类动物的红细胞产生凝聚,并且这种凝聚可被新城疫抗体所特异性抑制。小纤突上有融合蛋白,可与受体细胞结合。

摘要： [背景]自2014年以来,H5N6禽流感病毒在我国家禽和活禽市场持续进化,成为人类和动物健康的重大威胁.[目的]对2017-2019年中国南方地区93株高致病性H5N6禽流感病毒的HA基因进行分子进化分析.[方法]接种9-11日龄鸡胚分离核酸检测阳性的H5N6标本,运用下一代测序平台对病毒分离物进行全基因组测序,从NCBI和GISAID数据库下载参考序列,利用BLAST、MEGA 6.1及ClustalX等软件进行序列分析.[结果]2017-2019年,从189份江苏省H5亚型禽类/环境标本和1名H5N6患者咽拭子标本中共分离到43株病毒,完成了33株H5N6病毒的全基因组测序.下载网上同时期中国其他地区流行的H5N6毒株序列,对总计93株H5N6病毒的HA基因进行分子进化分析.93株H5N6病毒中有78株属于Clade2.3.4.4h,9株病毒属于Clade 2.3.4.4e,4株H5N6病毒属于Clade 2.3.4.4b,1 株属于Clade 2.3.4.4f,1 株属于Clade 2.3.4.4g.所有93株病毒HA蛋白的裂解位点含有多个碱性氨基酸,表明它们都属于高致病性禽流感病毒.所有93株病毒HA蛋白的Q222和G224位氨基酸没有发生突变,保留了禽类受体α2-3半乳糖苷唾液酸(SAa2-3Gal)结合特性;158位点丧失糖基化,同时124位出现一个新的潜在糖基化位点.[结论]2017-2019年间中国南方地区H5N6病毒进化活跃,具有明显的基因多样性,需要加强对病毒分子进化的监测.

摘要： 目的 分析济宁市2017-2020年度乙型流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因变异情况及分子进化特征.方法 采集2017-2020年度济宁市哨点医院和流感暴发疫情病例咽拭子标本,进行核酸检测、病毒分离,选取20株乙型流感病毒代表毒株进行HA和NA基因测序,利用生物信息学软件构建进化树并分析分子进化特征.结果 2017-2020年度共监测病例标本4 575例,流感病毒阳性842例,其中乙型流感病毒阳性398例,阳性率8.70％(398/4 575),占比47.27％(398/842).2017-2020年度济宁分离的BV系和BY系流感病毒与疫苗株比,HA基因同源性分别为98.7％～98.8％、98.5％～99.1％.2018-2020年度 BV 系流感归属于 Victoria clade 1A 分支,2017-2018年度BY系流感归属于Yamagata clade 3分支.对抗原表位和耐药位点的变异情况进行了分析,发现多处抗原表位发生了变异,但未发现神经氨酸酶抑制剂耐药位点的变异.结论 2017-2020年度济宁市BV系和BY系乙型流感病毒均发生了数个抗原位点变异,出现了抗原转变,可能是引起乙型流感暴发的原因.

摘要： 目的 分析海南省A(H1N1) pdm09亚型流感病毒的抗原性和基因特性,了解病毒的变异情况,为海南省A(H1N1)pdm09亚型流感病毒的防控提供依据.方法 选取14株2019-2020年海南省流感监测网络实验室分离到的A(H1N1)pdm09亚型流感病毒进行基因序列测定,测序结果用MEGA 10.1.8和DNASTAR7.0.1软件进行基因特性分析.结果 2019-2020年海南省A(H1N1)pdm09亚型流感病毒与国际疫苗株A/Brisbane/02/2018的血凝素基因(HemagglutininHA)和神经氨酸酶基因(Neuraminidase NA)均在核苷酸进化树6B.1分支上.海南分离株与疫苗株A/Brisbane/02/2018 HA基因核苷酸和氨基酸同源性范围分别为98.5％—99.1％和97.7％～99.1％,对神经氨酸酶抑制剂敏感,HA基因在Sa抗原决定簇NQT162-164有共同变异位点,N162位点的变异增加了1个潜在糖基化位点.Sb抗原决定簇K156位点发生变异的分离株为参考血清A/Brisbane/02/2018的低反应株,其余分离株均为疫苗株A/Brisbane/02/2018的类似株.结论 2019-2020年海南省A(H1N1) pdm09亚型流感病毒与WHO推荐的北半球疫苗组分匹配.

摘要： 甲型流感病毒是一种人兽共患病的病原体,它可以引起季节性流感和人感染动物源性流感等多种疾病,具有传染性强、变异率高、危害性大等特点,一直以来都是监测及研究的重点对象.血凝素作为病毒表面的重要糖蛋白之一,在病毒的宿主嗜性、生命周期、变异进化,防控工作的监测监查以及相关抗流感药物的研发等方面地位突出.本文从形态结构、功能作用、变异进化、药物四方面,对近年来血凝素的研究进展作一综述,以加深对血凝素的认识与理解,为相关工作人员的防治工作提供参考依据.

摘要： 目的：了解2013-2014年度宁夏甲型H1N1流行性感冒(流感)病毒的检测情况和血凝素(HA)基因变异情况. 方法：对全区流感监测哨点医院采集的流感样病例(ILI)标本采用real time RT-PCR方法进行核酸检测;对核酸检测阳性标本进行病毒分离.对甲型H1N1毒株提取病毒RNA,通过RT-PCR反应扩增HA1并测序,测定的序列利用生物信息软件进行分析. 结果：宁夏流感网络实验室共检测ILI标本6122份,核酸检测阳性数917份,其中甲型H1N1498份,占54.31％,分离甲型H1N1毒株126株;变异氨基酸多数位于HA蛋白表面,其中部分位于抗原决定簇. 结论：2013-2014年度,宁夏地区流行的流感优势毒株为甲型H1N1,遗传进化分析表明甲型H1N1病毒发生了一定程度的变异,造成2013-2014年度在宁夏地区的再次流行.但关键位点第222位没有变化.

摘要： 目的：纯化B型流感病毒血凝素.方法：使用菠萝蛋白酶切取B型流感病毒血凝素,超速离心获取含血凝素上清后,蔗糖密度梯度离心进行纯化.结果：成功纯化出纯度大于90％的血凝素蛋白,并通过HPLC,质谱进行了鉴定.结论：成功纯化出B型流感病毒血凝素蛋白.

摘要： 目的：建立蛋白定量结合电泳后荧光染色的方法检测单价流感疫苗中血凝素含量.方法：在前期研究的基础上,采用PAGE后荧光染色方法,测定HA在总蛋白中比例,并与考马斯亮蓝染色方法进行了对比.结果：荧光染色法与考马斯亮蓝染色法计算得出HA条带比例基本一致.结论：本研究建立的荧光法与考马斯亮蓝染色法一致性良好,且灵敏度更高,能够用于单价流感疫苗成品的效力检测.

摘要： 目的：分析2011年江苏省乙型流感病毒的血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)的分子变异特征。方法：选择13株2011年不同地区、不同时间段有代表性的乙型流感毒株进行HA、NA基因序列测定,然后对HA、NA分子特征进行分析。结果：13株乙型流感毒株中10株HA为Victoria系、NA却为Yamagata,发生基因重配,3株HA、NA均为Yamagata系；部分毒株HA1、NA氨基酸与相对应的疫苗株相比,发生多个位点的变异；Victoria/Yamagata系毒株与相对应的疫苗株相比197/196位增加一个糖基化位点；重配株NA与经典Yamagata系毒株NA基因氨基酸共有38个位点的差异。结论：2011年江苏省乙型乙型流感Victoria系和Yamagata系同时存在,HA、NA已经发生了抗原漂移和基因重配。

摘要： 目的：了解2009年南平市季节性H1N1流感病毒血凝素HA1基因的特征。方法：随机选取4株从哨点医院分离到的季节性H1N1流感毒株进行病毒核酸提取和RT-PCR扩增,获得HA1基因片段,测定核苷酸序列,通过生物信息软件分析其基因特征。结果：4株季节性H1N1流感病毒与A/California/01/2009(H1N1)高度同源,同源性高达99.1％；相对于当前疫苗代表株A/Brisbane/59/2007(H1 N1),其HA1区出现V131A、S141N、I184V、G185A、N186D、A189T和F260Y的氨基酸位点的改变；糖基化位点未发生改变。结论：南平市分离的季节性H1N1流感病毒抗原性发生一定的突变,但变异程度不大,应密切关注疫苗株对毒株的免疫效果。

摘要： H5亚型流感病毒HA上糖基化位点根据其位置不同起着不同的作用.其中HA蛋白茎部的糖基化位点相对保守,在维持HA蛋白三聚体的稳定性发挥主要作用.本实验室前期研究表明:茎部第10/11位重叠糖基化位点可能对HA蛋白裂解产生影响,但不能确定哪一位点起着关键作用.本试验时H5N1亚型禽流感病毒(AIV)SY株为母本,通过定点突变和反向遗传技术构建了3种HA蛋白茎部糖基化位点缺失的重组病毒(rSY-△10、rSY-△11、rSY-△10/11),并对其生物学特性和致病性进行了测定.结果表明:SY株H5N1茎部第10位和第11位都可以形成糖基化位点.相较于野生型病毒来说,这三种重组病毒都表现出对热及低pH的不稳定性.但是在病毒传代过程中,rSY-△11和rSY-△10/11极易发生回复现象.rSY-△11和rSY-△10/11在CEF细胞上的增殖速率显著低于rSY-△10和野生型病毒(rSY).同时,Western blot检测发现rSY-△11和rSY-△10/11的HAO蛋白裂解时间较rSY-△10和rSY有明显的延迟.小鼠致病性试验显示,rSY-△11和rSY-△10/11的毒力显著低于rSY-△10和rSY.因此,H5N1亚型AIV SY株茎部第11位糖基化位点对于病毒HA蛋白裂解至关重要并可影响其毒力.

摘要： H5亚型流感病毒HA上糖基化位点根据其位置不同起着不同的作用.其中HA蛋白茎部的糖基化位点相对保守,在维持HA蛋白三聚体的稳定性发挥主要作用.本实验室前期研究表明:茎部第10/11位重叠糖基化位点可能对HA蛋白裂解产生影响,但不能确定哪一位点起着关键作用.本试验时H5N1亚型禽流感病毒(AIV)SY株为母本,通过定点突变和反向遗传技术构建了3种HA蛋白茎部糖基化位点缺失的重组病毒(rSY-△10、rSY-△11、rSY-△10/11),并对其生物学特性和致病性进行了测定.结果表明:SY株H5N1茎部第10位和第11位都可以形成糖基化位点.相较于野生型病毒来说,这三种重组病毒都表现出对热及低pH的不稳定性.但是在病毒传代过程中,rSY-△11和rSY-△10/11极易发生回复现象.rSY-△11和rSY-△10/11在CEF细胞上的增殖速率显著低于rSY-△10和野生型病毒(rSY).同时,Western blot检测发现rSY-△11和rSY-△10/11的HAO蛋白裂解时间较rSY-△10和rSY有明显的延迟.小鼠致病性试验显示,rSY-△11和rSY-△10/11的毒力显著低于rSY-△10和rSY.因此,H5N1亚型AIV SY株茎部第11位糖基化位点对于病毒HA蛋白裂解至关重要并可影响其毒力.

摘要： H5亚型流感病毒HA上糖基化位点根据其位置不同起着不同的作用.其中HA蛋白茎部的糖基化位点相对保守,在维持HA蛋白三聚体的稳定性发挥主要作用.本实验室前期研究表明:茎部第10/11位重叠糖基化位点可能对HA蛋白裂解产生影响,但不能确定哪一位点起着关键作用.本试验时H5N1亚型禽流感病毒(AIV)SY株为母本,通过定点突变和反向遗传技术构建了3种HA蛋白茎部糖基化位点缺失的重组病毒(rSY-△10、rSY-△11、rSY-△10/11),并对其生物学特性和致病性进行了测定.结果表明:SY株H5N1茎部第10位和第11位都可以形成糖基化位点.相较于野生型病毒来说,这三种重组病毒都表现出对热及低pH的不稳定性.但是在病毒传代过程中,rSY-△11和rSY-△10/11极易发生回复现象.rSY-△11和rSY-△10/11在CEF细胞上的增殖速率显著低于rSY-△10和野生型病毒(rSY).同时,Western blot检测发现rSY-△11和rSY-△10/11的HAO蛋白裂解时间较rSY-△10和rSY有明显的延迟.小鼠致病性试验显示,rSY-△11和rSY-△10/11的毒力显著低于rSY-△10和rSY.因此,H5N1亚型AIV SY株茎部第11位糖基化位点对于病毒HA蛋白裂解至关重要并可影响其毒力.

摘要： H5亚型流感病毒HA上糖基化位点根据其位置不同起着不同的作用.其中HA蛋白茎部的糖基化位点相对保守,在维持HA蛋白三聚体的稳定性发挥主要作用.本实验室前期研究表明:茎部第10/11位重叠糖基化位点可能对HA蛋白裂解产生影响,但不能确定哪一位点起着关键作用.本试验时H5N1亚型禽流感病毒(AIV)SY株为母本,通过定点突变和反向遗传技术构建了3种HA蛋白茎部糖基化位点缺失的重组病毒(rSY-△10、rSY-△11、rSY-△10/11),并对其生物学特性和致病性进行了测定.结果表明:SY株H5N1茎部第10位和第11位都可以形成糖基化位点.相较于野生型病毒来说,这三种重组病毒都表现出对热及低pH的不稳定性.但是在病毒传代过程中,rSY-△11和rSY-△10/11极易发生回复现象.rSY-△11和rSY-△10/11在CEF细胞上的增殖速率显著低于rSY-△10和野生型病毒(rSY).同时,Western blot检测发现rSY-△11和rSY-△10/11的HAO蛋白裂解时间较rSY-△10和rSY有明显的延迟.小鼠致病性试验显示,rSY-△11和rSY-△10/11的毒力显著低于rSY-△10和rSY.因此,H5N1亚型AIV SY株茎部第11位糖基化位点对于病毒HA蛋白裂解至关重要并可影响其毒力.

摘要： 鸭瘟病毒为疱疹病毒科成员,其基因组约为150KB,含有多个复制非必须区.本实验选择已经证实的US2-S0RF3、US7-US8和UL15-UI18的非编码区作为插入位点构建构建穿梭载体P-US2-S0RF3-EGFP,P-UL15-UL18-EGFP,P-US7-US8-EGFP.在已感染疫苗毒的鸡胚成纤维细胞(chicken embryo fibroblasts,CEFs)中转染穿梭载体,收毒,进行噬斑筛选.结果以pBlusecriptⅡSK构建的穿梭载体未成功筛选到重组噬斑而用pUC18构建的穿梭载体成功筛选到重组噬斑.说明拯救鸭瘟重组毒的研究中.pBlusecriptⅡ载体可能不是最佳的适用载体,为以后重组病毒的拯救提供实验依据.

摘要： 引发广泛保护性抗流感抗体的疫苗。一些疫苗包含在其表面上展示来自流感病毒的HA三聚体的纳米颗粒。纳米颗粒是包含连接到流感HA蛋白的茎区的单体亚基(例如，铁蛋白)的融合蛋白。融合蛋白自组装以形成HA‑展示纳米颗粒。疫苗仅包含连接到三聚化结构域的流感HA蛋白的茎区。还提供了融合蛋白和编码此类蛋白的核酸分子，以及使用本发明的纳米颗粒检测抗流感抗体的测定法。

摘要： 本发明公开一种禽流感血凝素抗原保护剂及提高胚液中禽流感血凝素稳定性的方法，本发明的禽流感血凝素抗原保护剂由多种氨基酸、多糖结合白蛋白、明胶、甘油、葡聚糖配制而成，添加到胚液中，达到延长胚液中的禽流感病毒血凝素的保存期限，相对于未添加保护剂的胚液，在37°C保存时禽流感病毒血凝素保存时间延长至少35天以上。

摘要： 本发明公开一种禽流感血凝素抗原保护剂及提高胚液中禽流感血凝素稳定性的方法，本发明的禽流感血凝素抗原保护剂由多种氨基酸、多糖结合白蛋白、明胶、甘油、葡聚糖配制而成，添加到胚液中，达到延长胚液中的禽流感病毒血凝素的保存期限，相对于未添加保护剂的胚液，在37°C保存时禽流感病毒血凝素保存时间延长至少35天以上。

摘要： 本发明公开了一种流感病毒裂解疫苗单价原液血凝素的检测方法，其包括如下步骤：S1、向流感病毒裂解疫苗单价原液和流感病毒抗原参考品中分别加入裂解剂进行裂解；S2、分别检测裂解流感病毒裂解疫苗单价原液的血凝滴度和裂解流感病毒抗原参考品的血凝滴度；S3、由流感病毒裂解疫苗单价原液的血凝滴度检测值计算流感病毒裂解疫苗单价原液的血凝滴度标准值；S4、由流感病毒裂解疫苗单价原液的血凝滴度标准值计算流感病毒裂解疫苗单价原液的血凝素标准值。本申请提供的检测方法提高了检测结果的稳定性、准确性及灵敏度，且将检验时间由2天缩短为2小时以内，加快了流感疫苗的生产进度。

摘要： 本发明提供抗H3N2流感病毒血凝素蛋白的单克隆抗体ZJU32‑01及其在检测中的应用。一种抗H3N2流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体ZJU32‑01，该单克隆抗体亚型为IgG1、κ型，能与H3N2流感病毒血凝素蛋白抗原特异结合。抗体的重链氨基酸序列如SEQ ID No.2，轻链氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。对该单克隆抗体进行进一步的理化性状分析和鉴定，并建立了以该单克隆抗体为探针通过免疫荧光技术检测H3N2流感病毒的方法。本发明为临床样本中H3N2季节性流感病毒感染的辅助诊断提供了有效的工具，并可推广应用于多种检测技术以及临床和实验研究。

摘要： 本发明提供抗H1N1流感病毒血凝素蛋白的中和性单克隆抗体ZJU11‑01及其应用。一种抗H1N1流感病毒血凝素蛋白中和性单克隆抗体ZJU11‑01，该单克隆抗体亚型为IgG1、κ型，能与H1N1流感病毒血凝素蛋白抗原特异结合。抗体的重链氨基酸序列如SEQ ID No.2，轻链氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。对该单克隆抗体进行进一步的理化性状分析和功能鉴定，该单克隆抗体能够有效中和、治疗H1N1季节性流感病毒感染。本发明为H1N1季节性流感病毒感染的治疗提供了有效的工具，并可推广应用。

摘要： 本发明提供抗H1N1流感病毒血凝素蛋白的中和性单克隆抗体ZCMU‑H1N1及其应用。一种抗H1N1流感病毒血凝素蛋白中和性单克隆抗体ZCMU‑H1N1，该单克隆抗体亚型为IgG1、κ型，能与H1N1流感病毒血凝素蛋白抗原特异结合。抗体的重链氨基酸序列如SEQ ID No.2，轻链氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。对该单克隆抗体进行进一步的理化性状分析和功能鉴定，该单克隆抗体能够有效中和、治疗H1N1季节性流感病毒感染。本发明为H1N1季节性流感病毒感染的治疗提供了有效的工具，并可推广应用。

摘要： 本发明提供抗甲型流感病毒血凝素蛋白的单克隆抗体ZJU‑A1A3及其应用。经纯化的H1N1和H3N2流感病毒血凝素蛋白序贯免疫BALB/C小鼠，收集致敏的BALB/C小鼠B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合，利用酶联免疫吸附试验判定阳性克隆，建立分泌抗甲型流感(H1N1和H3N2)病毒血凝素蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系ZJU‑A1A3，把阳性的细胞扩增培养并注射至同品系的小鼠腹腔诱导产生含抗体的腹水，经过收集腹水与抗体亲和纯化，获得抗甲型流感病毒血凝素蛋白的单克隆抗体ZJU‑A1A3。本发明为临床样本中甲型季节性流感(H1N1和H3N2)病毒感染的辅助诊断提供了有效的工具。

摘要： 公开了修饰形式的血凝素(HA)蛋白包括具有修饰的免疫显性区域和具有修饰的成熟切割位点的那些修饰形式的血凝素蛋白，以及含有它们的病毒和病毒样颗粒。

摘要： 本发明提供抗H1N1流感病毒血凝素蛋白的单克隆抗体ZJU11‑03及其应用。经纯化的H1N1流感病毒血凝素蛋白免疫BALB/C小鼠，收集致敏的BALB/C小鼠B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合，利用酶联免疫吸附试验判定阳性克隆，建立分泌抗H1N1流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系ZJU11‑03，把阳性的细胞扩增培养并注射至同品系的小鼠腹腔诱导产生含抗体的腹水，经过收集腹水与抗体亲和纯化，获得抗H1N1流感病毒血凝素蛋白的单克隆抗体ZJU11‑03。抗体的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID No.2，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。对该单克隆抗体进行进一步的理化性状分析和功能鉴定，建立了以该单克隆抗体为药物治疗H1N1亚型季节性流感病毒感染。本发明为H1N1季节性流感病毒感染的治疗提供了有效的工具，并可推广用于与其他药物联合应用以及其他研究。