体液免疫应答

摘要： 不同类型新冠疫苗对突变株体液免疫应答情况北京大学生物医学前沿创新中心(BIOPIC)、北京未来基因诊断高精尖创新中心(ICG)谢晓亮课题组与合作者利用多种技术手段解析了新冠病毒灭活疫苗(科兴)和RBD亚单位重组蛋白疫苗(智飞)接种者及新冠感染康复者的血浆和诱导的中和抗体对于目前流行新冠突变株(例如南非株)的应答情况。相关成果发表于Cell Research。与中和抗体实验结果类似,康复者和灭活疫苗接种者的血浆对南非突变株均表现出中和活性下降的趋势。结果表明,如果未来新冠突变株大流行,特别是对于携带能改变N T D抗原热点蛋白构象突变的病毒株,注射第三剂RBD重组蛋白疫苗来加强免疫或是一种优化方案。

摘要： 目的介绍生物材料在疫苗传递及免疫治疗方面的研究进展。方法以国内外30多篇相关文献为依据,阐述了生物材料的理化特性及其在疫苗传递及免疫治疗方面的应用情况,展望生物材料未来的发展方向。结果生物材料具有功能多样、效力强大等突出特性,不但能够有效预防各种传染性疾病,还能用于针对包括自身免疫性疾病以及异体移植排斥等在内的诸多病症的免疫治疗。结论生物材料在疫苗和免疫治疗方面具有广阔的研究前景。

摘要： 滤泡辅助性T细胞(T follicular helper cells,Tfh cel1s)是一类特殊的CD4+效应T细胞亚群,位于淋巴滤泡,可辅助B淋巴细胞功能,并促进生发中心的形成,参与体液免疫应答.Tfh细胞发育和功能异常可导致免疫系统紊乱,引起多种风湿免疫性疾病的发生.本文主要对Tfh细胞的分化、功能以及对于风湿免疫性疾病发生发展的作用等进行综述.

摘要： 目的 研究SFTS病毒(SFTS virus,SFTSV)的非结构蛋白(Nonstructural proteins,NSs)重组质粒的体液免疫原性.方法 利用聚合酶链反应法(Polymerase chain reaction,PCR)构建真核表达质粒pJW4303-NSs、pJW4303-NSs-opt、pJW4303-NSs-Flag;引入Nhe Ⅰ酶切位点及tPA(Tissue plasminogen activator,tPA)信号肽,构建质粒pJW4303-tPA-NSs-opt.将质粒转染至HEK 293T细胞,蛋白质印迹法(Western blot,WB)验证NSs表达.NSs相关质粒免疫BALB/c小鼠,采用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测SFTSV NSs特异性IgG抗体.结果 成功构建了重组NSs质粒,WB验证了NSs可在HEK293T细胞内表达.pJW4303-NSs、pJW4303-NSs-opt、pJW4303-tPA-NSs-opt重组质粒均可诱导小鼠体内产生特异性IgG,其中单优化型质粒pJW4303-NSs-opt的免疫原性较好,在第6、8周的IgG水平显著高于野生型NSs质粒,差异具有统计学意义.结论 本研究构建的SFTSV的NSs重组优化型质粒具有良好体液免疫原性,其中单优化型效果最佳.%Objective To study the construction and humoral immunogenicity of the recombinant plasmids encoding nonstructural proteins(NSs) of severe fever with thrombocytopenia syndrome(SFTS) virus (SFTSV).Methods Recombinant plasmids encoding NSs gene and optimized NSs gene of SFTSV were constructed by polymerase chain reaction (PCR) and cloned into eukaryotic expression vector pJW4303,which were named pJW4303-NSs and pJW4303-NSs-opt,respectively.Then,the plasmid pJW4303-NSs was tagged with Flag,named pJW4303-NSs-Flag.Meanwhile,Nhe Ⅰ restrict site and tissue plasminogen activator (tPA) signal sequence were inserted to construct bi-optimized recombinant plasmid named pJW4303-tPA-NSs-opt.All plasmids were identified by sequencing.The transient expression of NSs was confirmed by Western blotting in human embryonic kidney 293T cells.The NSs-specific IgG antibodies in BALB/c mice which were immunized by intramuscular injection with electroporation were examined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).Results The recombinant plasmids pJW4303-NSs,pJW4303-NSs-opt,pJW4303-tPA-NSs-opt and pJW4303-NSs-Flag were successfully constructed.The expression of NSs was confirmed in lysates and supernatants of 293T cells.The NSs-specific IgG responses of all three recombinant plasmids were detected by ELISA in BALB/c mice.It was found that optimized recombinant plasmid pJW4303-NSs-opt elicited higher levels of the NSs-specific IgG than that of pJW4303-NSs in week 6,8 which induced stronger immune response.Conclusions The recombinant plasmids encoding SFTSV NSs possess the satisfied immunogenicity.In addition,the plasmid pJW4303-NSs-opt could induce the strongest humoral immune response.

摘要： Specific antibody responses induced by inactivated H7N9 influenza vaccine were determined in BALB/c mice within a long period of time after immunization.BALB/c mice were intramuscularly injected once with the vaccine alone or plus MF59 adjuvant.Sera samples were consecutively collected from tail vein within 15 months following vaccination.Vaccine-specific IgG antibody titers were detected by ELISA.HI and neutralization antibody levels were also measured in samples of the last month.It was found that specific antibody levels increased slowly along with time and peaked during 5 months, then declined a little.However, they were relatively stable since then.The antibody levels were positively correlated with the vaccine dosage and were improved by addition of MF59.HI and MN tests showed that antibodies produced after 15 months of immunization could effectively neutralize virus and the neutralizing antibody titers were proportional to the amount of antigen.The experiments demonstrated that immunization once with H7N9 inactivated vaccine could induce relatively stable levels of specific antibodies and provide long-term protection for mice.Increase of vaccine dosage and addition of MF59 adjuvant could raise the humoral immune responses.%以BALB/c小鼠为模型,探讨H7N9流感病毒灭活疫苗免疫小鼠后所诱导的长效体液免疫应答的动态变化.不同剂量的流感H7N9全病毒灭活疫苗单独或辅以MF59佐剂肌肉注射免疫小鼠一次.连续采集免疫后小鼠15个月的血清,用ELISA方法检测特异性IgG抗体水平,血凝抑制(hemagglutination inhibition, HI)试验和微量中和(microneutralization, MN)试验检测第15个月时的HI抗体和中和抗体效价.实验结果发现,小鼠血清中的特异性IgG抗体水平随时间变化持续缓慢上升,第5个月时达到顶峰,随后略有下降但一直持续平稳状态;IgG抗体滴度与疫苗剂量成正相关,且添加佐剂能提高抗体滴度.HI及MN抗体检测表明,免疫后第15个月产生的抗体能有效中和病毒,且抗体跟疫苗剂量成正比.以上研究表明,H7N9流感病毒灭活疫苗免疫小鼠一次诱导产生的特异性抗体能在较长期内保持比较平稳的抗体滴度,为小鼠提供免疫保护;增加抗原剂量和添加MF59佐剂能增加疫苗特异性抗体水平.该研究为H7N9流感疫苗产生的长期保护效应提供了一定的数据积累和参考.

摘要： 孢子体最丰富的表面抗原-环子孢子蛋白（CSP）,已被作为候选疫苗在不同的表达平台进行了广泛研究。临床试验显示：广泛而且高强度的体液免疫应答和大量CSP特异性的、尤其是产生IFN-γ的CD4＋T和CD8＋T细胞,对诱导保护力是必要的。为了达到这个目标,我们基于先前描述的作为疫苗候选成分的间日疟原虫CSP（Pv CSP）的抗原片段设计了两种不同的重组免疫原。

摘要： 经典免疫学理论有2个基本模式阐述抗体免疫反应的发展和功能:(1)亲和力成熟依赖于机体本身的和通过突变形成的高亲和力抗体的抗原驱动选择过程;(2)抗体的生物效应功能是由抗体的类型所决定的.最近研究发现硬骨鱼的免疫系统通过调控结合抗原的亲和力大小来改变分泌的IgM抗体同质异构体结构的比例,从而影响其抗体在血清中的半衰期.这种独特性质的发现是对经典免疫学理论的补充和扩展.文章概述了硬骨鱼IgM抗体结构和功能的亲和力驱动调节,并介绍维持体液免疫记忆的长寿命浆细胞和记忆性B细胞的性质以及抗体分泌细胞(如原浆细胞、浆细胞)在体液免疫应答中的作用.了解硬骨鱼IgM结构和功能的关系,以及不同分化阶段B细胞维持体液免疫反应的机制,将有利于探索构建硬骨鱼免疫评价体系,并为高效的渔用疫苗开发和疫苗效果精确性评价奠定理论基础.

摘要： 猪瘟是一种严重制约我国养猪业发展的重大疾病,猪瘟的防控是养殖场最重要的工作之一。猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）同样是严重影响我国养猪业发展的重大疾病,目前我国90%以上的规模化猪场都呈PRRS阳性。由于猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）主要侵害肺泡巨嗜细胞,因此有人认为它会引起机体的免疫抑制,造成其他疾病,特别是猪瘟疫苗免疫失败[1]。

摘要： 为探索山羊对山羊痘病毒P32基因免疫的应答效果,本研究从pMD-18T-P32中获取P32基因,插入真核表达质粒PVAX1,经PCR和酶切鉴定后,将PVAX1-P32肌肉注射小鼠,于不同时间段采集小鼠组织样本,检测分析重组质粒的分布动态和重组情况,并免疫注射山羊,于不同时间段采集山羊血清样本,检测分析重组质粒诱导山羊的体液免疫应答效果.结果显示:经PCR扩增与双酶切,PVAX1-P32均可得到与预期大小相一致的目的片段(969 bp);注射小鼠后7～45 d,在小鼠腿肌、心肌、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脑、十二指肠中均可检测到目的基因,且未发现P32基因与宿主基因组整合现象;注射山羊15 d后,诱导山羊产生较高水平的总IgG,低于弱毒疫苗组,但差异不显著(P＞0.05);也能诱导山羊产生较高的抗P32-IgG含量,高于弱毒疫苗组,差异显著(P＜0.05).结果表明:本研究成功构建了山羊痘病毒P32基因的重组真核表达质粒PVAX1-P32,能较长时间存在宿主组织器官内,可诱导山羊产生较好的体液免疫应答.

摘要： 乙型肝炎疫苗免疫后诱导细胞和体液免疫应答,其中体液免疫应答在初次免疫和加强免疫后的动态早已得到阐明,免疫后产生的保护性抗体可有效预防病原微生物的感染或发病,实际应用中以抗体阳转率和抗体滴度作为评价疫苗免疫原性和免疫效果的指标.然而,抗体一般在初免后15-20天时出现,对暴露后接种需尽快产生免疫保护的疾病,如乙肝和狂犬病等,较晚产生的体液免疫在疫苗保护中所起的作用有限,近期研究发现接种疫苗,可早期诱导的特异性的细胞免疫,在乙肝疫苗阻断双阳性母亲高危新生儿母婴传播中起重要作用.本文对乙型肝炎疫苗接种者细胞免疫和体液免疫应答进行了比较研究.

摘要： 为了研究HSV-1VP22和hIL-18作为分子佐剂对HBVDNA微球疫苗诱导小鼠体液免疫应答的影响,HSV病毒经Vero细胞培养增殖后,提取病毒DNA,PCR扩增VP22编码基因.从人PBMC中提取总RNA,RT-PCR扩增hIL-18.VP22、hIL-18按不同需要插入pCDNA3.1-S,构建成3种质粒:pCDNA3.1-VP22-S、pCDNA3.1-S-IL18、pCDNA3.1-VP22-S-IL18.制各DNA壳聚糖微球疫苗,鼻腔免疫小鼠,同时裸质粒DNA肌注小鼠,ELISA检测小鼠血清IgG、粪便sIgA水平.结果,与pCDNA3.1-S相比,pCDNA3.1-VP22-S、pCDNA3.1-S-IL18、pCDNA3.1-VP22-S-IL18均能引起小鼠血清IgG、粪便sIgA水平升高.在鼻腔免疫实验中,pCDNA3.1-VP22-S、pCDNA3.1-S-IL18、pCDNA3.1-VP22-S-IL18免疫组的血清IgG水平均在第8周达到最高,并且与pCDNA3.1-S相比,抗体水平有差异(P＜0.05).研究结果表明VP22和hIL-18能够增强乙肝DNA疫苗的体液免疫应答;制备的DNA微球疫苗经鼻腔免疫后,能够诱导粘膜免疫应答.

摘要： 目的：研究DEL型个体是否对D抗原产生体液免疫应答。方法:对1030名经间接抗人球蛋白试验确认为Rh(D)阴性献血者进行抗体筛选，对抗体筛选阳性献血者用10个O型谱细胞和筛选特异细胞进行抗体鉴定。对产生抗-D的Rh(D)阴性献血者和临床产生抗-D孕妇用DEL特异性引物鉴定是否是真正DEL型。对117名Rh(D)阴性献血者吸收放散试验鉴定是否为DEL型，DEL阳性献血者进行抗体筛选。结果:1030名阴性献血者10人产生抗-D抗体，10名产生抗-D抗体献血者和5名产生抗-D抗体孕妇DEL基因分型为阴性，117名Rh(D)阴性献血者DEL血型血清学检测阳性24名，24名DEL阳性献血者抗体筛选阴性。结论:产生抗-D抗体的个体未检出DEL型，DEL型的个体未检出抗-D抗体。

摘要： 目的：观察NY-ESO-1/HSP65融合蛋白(NY-H)免疫BALB/c小鼠诱导的体液和细胞免疫反应及抗肿瘤作用。rn 方法：将BALB/c小鼠随机分为NY-H组、NY+H组、NY组、HSP组和PBS对照组，分别用100μg NY-H、100μg NY+HSP65、100μg NY-ESO-1、100μg HSP65和200μl PBS腹腔免疫4次，间隔2周。每次免疫后7天，尾静脉采血检测血清抗体滴度及亚类。末次免疫后第7天，取小鼠脾细胞检测细胞因子的分泌、脾细胞增殖水平、CD4+与CD8+T细胞的百分比及对肿瘤细胞的特异性杀伤情况。rn 结果：NY-H融合蛋白免疫小鼠后诱导了较强的细胞和体液免疫应答，NY-H组小鼠在第一次免疫后就产生了较强的抗体，抗体滴度(10000)显著高于其他各组；NY-H组抗体亚类IgG1和IgG2a水平明显高于其他各组；NY-H组细胞因子IL-2和IFN-Y分泌能力最强、细胞增殖最显著并且小鼠体内CD4+、CD8+细胞数量大幅增高。NY-H融合蛋白免疫小鼠后，其脾细胞能特异性杀伤表达有NY-ESO-1的B16小鼠瘤细胞。rn 结论：NY-H融合蛋白免疫效果优于两种蛋白单独免疫及混和免疫，HSP65能以免疫复合物的形式协同NY-ESO-1有效诱导体液和细胞免疫应答，具有良好的抗肿瘤效果。

摘要： 泛素-蛋白酶体途径是一种高效蛋白降解途径,主要负责真核细胞内蛋白选择性降解.GP5囊膜糖蛋白是PRRSV的主要结构蛋白,为了评价泛素基因对GP5基因免疫的影响,本研究将ORF5DNA片段克隆到载体pCMV-Ub,构建成重组质粒pCMV-GP5、pCMV-Ub-GP5.测序分析编码框正确后进行小鼠免疫试验,共免疫4次,每次间隔15天,以比较GP5基因和与泛素融合表达GP5基因的免疫特性.结果表明,两个不同质粒免疫后44-59天均诱导产生了ELISA抗体和中和抗体,抗体产生时间和抗体滴度差异不显著.

摘要： 泛素-蛋白酶体途径是一种高效蛋白降解途径,主要负责真核细胞内蛋白选择性降解.GP5囊膜糖蛋白是PRRSV的主要结构蛋白,为了评价泛素基因对GP5基因免疫的影响,本研究将ORF5DNA片段克隆到载体pCMV-Ub,构建成重组质粒pCMV-GP5、pCMV-Ub-GP5.测序分析编码框正确后进行小鼠免疫试验,共免疫4次,每次间隔15天,以比较GP5基因和与泛素融合表达GP5基因的免疫特性.结果表明,两个不同质粒免疫后44-59天均诱导产生了ELISA抗体和中和抗体,抗体产生时间和抗体滴度差异不显著.

摘要： 泛素-蛋白酶体途径是一种高效蛋白降解途径,主要负责真核细胞内蛋白选择性降解.GP5囊膜糖蛋白是PRRSV的主要结构蛋白,为了评价泛素基因对GP5基因免疫的影响,本研究将ORF5DNA片段克隆到载体pCMV-Ub,构建成重组质粒pCMV-GP5、pCMV-Ub-GP5.测序分析编码框正确后进行小鼠免疫试验,共免疫4次,每次间隔15天,以比较GP5基因和与泛素融合表达GP5基因的免疫特性.结果表明,两个不同质粒免疫后44-59天均诱导产生了ELISA抗体和中和抗体,抗体产生时间和抗体滴度差异不显著.

摘要： 泛素-蛋白酶体途径是一种高效蛋白降解途径,主要负责真核细胞内蛋白选择性降解.GP5囊膜糖蛋白是PRRSV的主要结构蛋白,为了评价泛素基因对GP5基因免疫的影响,本研究将ORF5DNA片段克隆到载体pCMV-Ub,构建成重组质粒pCMV-GP5、pCMV-Ub-GP5.测序分析编码框正确后进行小鼠免疫试验,共免疫4次,每次间隔15天,以比较GP5基因和与泛素融合表达GP5基因的免疫特性.结果表明,两个不同质粒免疫后44-59天均诱导产生了ELISA抗体和中和抗体,抗体产生时间和抗体滴度差异不显著.

摘要： 本文提供了利用预先确定的生物标志物，通过测量患者针对细胞抗原特异的主动免疫疗法(CASAI)的应答来预测治疗结果的组合物和方法。

摘要： 本文提供了利用预先确定的生物标志物，通过测量患者针对细胞抗原特异的主动免疫疗法(CASAI)的应答来预测治疗结果的组合物和方法。

摘要： 本发明公开了小分子化合物奥替普拉在制备增强体液免疫应答的药物中的应用。本发明经研究发现，化学小分子奥替普拉可以增强B细胞正向筛选亲和力成熟过程，具有促进抗体免疫应答的作用。能够用于制备增强体液免疫应答的药物，且奥替普拉已经被FDA批准应用于治疗非酒精性脂肪性肝病的三期临床试验，药物的安全性等方面具有较好的保证。

摘要： 本发明涉及用来针对确定抗原产生体液免疫应答的重组乳酸克鲁维酵母、制备这些酵母、以及将其用于针对含有这些抗原的病原体和恶性细胞进行预防接种。

摘要： 本发明属于具有用于在粘膜水平上引发先天免疫应答机制的免疫刺激能力的营养制品或功能性试剂的领域。更确切地说，本发明提及化合物D‑荞麦碱作为该粘膜中的先天免疫应答的免疫刺激剂，并且用于防止或预防与体液免疫应答的过度激活相关联的炎症过程或疾病的用途。本发明还涉及一种用于以上提到的应用的包含D‑荞麦碱的组合物。

摘要： 本发明公开了一种研究北虫草多糖对机体的体液免疫应答和细胞免疫应答反应的方法，本发明包括如下步骤：(1)北虫草多糖粗提物制备；(2)、实验动物及其免疫；(3)、IgG效价的测定；(4)、IgG亚类测定；(5)、淋巴细胞转化试验；(6)、细胞因子mRNA检测；(7)统计学分析，得出结论。本发明步骤简单，使用方便，可以推测北虫草多糖能有效提高机体的体液免疫应答和细胞免疫应答反应，北虫草多糖对Th1和Th2类细胞因子均有明显的提升效果，表明机体的免疫应答机制可能被激活，另外，北虫草多糖可能对体液免疫和细胞免疫反应的平衡上具有一定的调节作用。

摘要： 本发明公开了小分子化合物奥替普拉在制备增强体液免疫应答的药物中的应用。本发明经研究发现，化学小分子奥替普拉可以增强B细胞正向筛选亲和力成熟过程，具有促进抗体免疫应答的作用。能够用于制备增强体液免疫应答的药物，且奥替普拉已经被FDA批准应用于治疗非酒精性脂肪性肝病的三期临床试验，药物的安全性等方面具有较好的保证。

摘要： 本发明公开了一种能够高效诱导机体体液免疫应答的疫苗载体、其制备方法及用途。所述疫苗载体是经由基因工程化表达B细胞活化相关的分子的K562细胞，所述B细胞活化相关的分子包括CD40L、IL‑4、IL‑21、BAFF、霍乱毒素B亚单位或CXCR5以及上述不同因子的组合。此外，所述疫苗载体能够有效活化B细胞，提升B细胞的生存，并促使B细胞分泌抗体。可很好的搭载抗原，在体内也可有效的刺激B细胞成熟分化从而诱导有效的抗体应答，使其在预防和降低病毒感染中有广泛的应用前景。

摘要： 本申请涉及用于降低不期望体液免疫应答的给药组合。公开了与无合成纳米载体之治疗性大分子的给药相组合的治疗性大分子和免疫抑制剂(在一些实施方案中，与合成纳米载体连接)的给药，以及提供降低的体液免疫应答的相关方法。

摘要： 本申请涉及用于降低不期望体液免疫应答的给药组合。公开了与无合成纳米载体之治疗性大分子的给药相组合的治疗性大分子和免疫抑制剂(在一些实施方案中，与合成纳米载体连接)的给药，以及提供降低的体液免疫应答的相关方法。