内生真菌

摘要： 通过查阅黄芩相关文献,对生物技术在黄芩中的应用进行综述,比较分析了黄芩的快速繁殖、愈伤组织的诱导和培养、毛状根的诱导和培养,内生真菌培养,采用生物技术方法获取黄芩活性成分黄芩苷或黄芩素,促进中药传承和创新发展,以期为利用黄芩生物技术富集黄芩苷提供一定的参考。

摘要： 红树植物内生真菌是新型天然产物先导药物的重要来源之一.为获得具有新颖结构的化合物,对两株红树内生真菌Phomopsis sp.DHS11和Aspergillus fumigatus JRJ111048的代谢产物进行研究.综合利用正/反相硅胶柱、Sephadex LH20凝胶柱和HPLC高效液相色谱法,从发酵提取物中分离得到9种化合物,分别记为化合物1~9.利用高分辨电喷雾质谱(high resolution electrospray ionization mass spectroscopy,HRESIMS)、核磁共振波谱(nuclear magnetic resonance spectroscopy,NMR)、旋光、紫外和红外光谱等技术,鉴定化合物1~9依次为norpestaphthalide C(1)、norpestaphthalide A(2-a)、norpestaphthalide B(2-b)、7-hydroxy-3-(2-hydroxy-propyl)-5-methyl-isochromen-1-one(3)、alternaroside B(4)、细胞松驰素B(5)、啤酒甾醇(6)、5-羟甲基糠醛(7)、N-(4-羟基苯乙基)-乙酰胺(8)和3,5-dihydroxybenzoic acid(9).其中,化合物1为首次发现的新型苯并呋喃酮类化合物,化合物4是首次从Phomopsis sp.属真菌中分离得到的脑苷脂类化合物.对化合物1~9进行体外免疫抑制、抗肿瘤和抗老年痴呆活性评价,结果表明,细胞松弛素类化合物5具有良好的免疫抑制活性.研究结果为深入挖掘红树植物内生真菌新型生物活性物质提供了参考.

摘要： 【目的】探究沙地云杉Pieca mongolica内生拮抗菌对沙地云杉立枯病菌Fusarium sp.的拮抗作用,旨在为利用生物资源、开发生防菌提供依据。【方法】以前期筛选出的4株具有强拮抗作用的沙地云杉内生真菌互隔链格孢菌Alternaria alternata (SDYS36)、三线镰刀菌Fusarium tricinctum (SDYS63)、产黄青霉菌Penicillium chrysogenum (SDYS95)、聚多曲霉菌Aspergillus sydowii (SDYS180)为材料,以沙地云杉立枯病菌为靶标菌,采用体外对峙和盆栽试验,测定内生真菌对病原菌的体外拮抗性及感病幼苗的形态和相关生理指标变化,通过显著性分析筛选优势拮抗菌株。【结果】4株内生拮抗菌对立枯病菌均表现出体外拮抗活性,SDYS180的发酵液拮抗活性最高,达78.67%;SDYS95的菌株拮抗活性最高,达69.64%;SDYS63的挥发性代谢产物拮抗活性最高,达16.94%。4株内生拮抗菌对盆栽沙地云杉立枯病菌均表现出不同程度的拮抗活性,接种SDYS180促进染病幼苗的组织生长,株高、地径和根长分别提高17.12%、32.64%和16.56%;接种SDYS95的染病幼苗可溶性蛋白质质量分数提高13.41%,丙二醛质量摩尔浓度降低5.27%,过氧化物酶活性提高224.46%,超氧化物歧化酶活性提高37.05%,过氧化氢酶活性提高9.02%。【结论】菌株SDYS180和SDYS95是筛选出的防治沙地云杉立枯病的优势拮抗生防菌。

摘要： 菌根真菌广泛存在于宿主植物根部,可促进植物对土壤养分的吸收,改善宿主矿质元素水平,保护植物免受生物和非生物胁迫。植物根部微生态系统中包含大量不同种类的真菌,如病原真菌、腐生真菌、植物内生真菌等。菌根真菌与植物根部微生态系统中不同真菌间形成错综复杂的微生物互作网络,从而影响植物生长发育。对菌根真菌与植物内生真菌、植物病原真菌、根际土壤真菌的相互作用进行了综述,以期为解析菌根真菌与植物根部微生态系统中不同真菌之间的互作机制、维持植物根际微生态系统的稳定性提供参考。

摘要： 目的对南板蓝根Baphicacanthus cusia(Nees)Bremek.内生真菌进行分离鉴定,并考察其生物活性。方法采用植物组织表面灭菌法分离纯化南板蓝根、茎和叶中的内生真菌,结合分子生物学与形态学进行种属鉴定。采用二倍稀释法测定真菌发酵物的抑制活性。采用总还原力、DPPH自由基和羟基自由基清除法测定真菌发酵物的抗氧化活性。结果分离纯化并鉴定出的23株内生真菌均属于子囊菌门,分为3纲7目9科11属23种。菌株Nb 6、Nb 12、Nb 19发酵物对金黄色葡萄球菌抑制作用显著,最小抑菌浓度均为2.56 mg/mL;11株真菌的发酵物对大肠杆菌有不同程度的抑制活性。菌株Nb 19、Nb 2、Nb 22发酵物对DPPH自由基的清除率超过80%,IC_(50)值分别为54.86、59.26、64.02μg/mL;菌株Nb 19、Nb 10、Nb 14发酵物对羟基自由基的清除率超过50%,IC_(50)值分别为104.80、127.70、109.30μg/mL;菌株Nb 2、Nb 3、Nb 11、Nb 22发酵物总还原力超过10 mg/L。结论南板蓝根内生真菌中菌株Nb 19和Nb 2具有抗菌、抗氧化活性。

摘要： 目的:调查小白芨内生真菌的多样性及产酶情况,为植物内生真菌的研究及开发提供科学依据。方法:用三点种植法进行内生真菌分离纯化,用形态鉴定和ITS序列分子鉴定方法对菌株进行鉴定,用透明圈法观察菌株产活性物质情况。结果:通过分离,获得2株内生真菌,具有较好的产酶特性,经分子鉴定分别是青霉属雷斯青霉(Penicillium raistrickii)M15和青霉属波兰青霉(Penicillium polonicum)PDAX2。结论:小白芨中含有丰富的内生真菌,对其生长发育和适应性生存具有重要意义,具有一定的开发利用前景。

摘要： 本研究对广西香蕉主产区的香蕉根系样本进行内生真菌分离,采用形态学与ITS序列分析相结合的方法进行菌株鉴定,开展其物种组成与多样性分析,对了解广西香蕉与其根部内生真菌间的关系以及探索其内生真菌功能具有重要意义。从168个香蕉根段中共分离获得352株内生真菌,分别归属于5纲17目34科43属62个分类单元,不同分类单元的代表菌株中,有41株菌株能够产生分生孢子(66.13%)。其中,优势纲为粪壳菌纲(Sordariomycetes)和散囊菌纲(Eurotiomycetes),相对频率(RF)分别为66.19%和20.45%;优势目为肉座菌目(Hypocreales)、散囊菌目(Eurotiales)和格孢腔菌目(Pleosporales),相对频率分别为55.4%、17.61%和9.66%;优势属为镰刀菌属(Fusarium)、青霉属(Penicillium)、木霉属(Trichoderma)、未鉴定属3、帚枝霉属(Sarocladium)、未鉴定属2、弯孢属(Curvularia)和突脐蠕孢属(Exserohilum),相对频率分别为32.39%、15.06%、13.35%、5.11%、3.98%、3.41%、3.13%和2.84%,后5个属的相对频率未超过10%,其优势不明显。多样性指数和均匀度系数结果表明,南宁地区坛洛镇TL2样地和锣圩镇LX样地的香蕉根系内生真菌种群多样性较丰富,群落分布较均匀。相似度系数分析显示,钦州地区大成镇2个样地(DC1、DC2)间香蕉根系内生真菌种群组成相似度最高(C_(s)=0.67)。不同采样点的地理环境和气候条件给香蕉提供了不同的生境,是影响香蕉根系内生真菌种类组成及多样性差异的主要因素之一。

摘要： 目的探讨铁皮石斛内生真菌Fusarium sp.TP-G1的次生代谢产物中结构新颖或生物活性独特的氨基醇类天然产物。方法采用色谱层析技术对铁皮石斛内生真菌Fusarium sp.TP-G1的大米发酵液粗提物进行分离纯化;通过质谱(MS)及核磁共振(NMR)波谱数据分析,并结合文献数据,鉴定化合物,并确定所得化合物的结构。结果分离获得6个化合物,分别为麦角甾醇(1),(22E,24R)-ergosta-6,22-dien-3β,5α,8α-triol(2),tert-butyl(1-hydroxy-3-phenylpropan-2-yl)carbamate(3),(1-hydroxy-3-phenyl⁃propan-2-yl)carbamic acid(4),N-(1-hydroxy-3-phenylpropan-2-yl)benzamide(5),N-(1-hydroxy-3-phenylpropan-2-yl)-2-phenylacetamide(6)。结论从铁皮石斛内生真菌Fusarium sp.TP-G1中分离获得6个次生代谢产物,其中化合物3至化合物6为新的氨基醇类天然产物。微生物是氨基醇类化合物的新供体,可通过微生物的基因工程改造来获得更多的氨基醇类化合物。

摘要： 目的:分离野生甘草内生真菌并就其次生代谢产物的抑菌和抗氧化活性进行评价。方法:以新鲜野生甘草为材料,选取甘草不同组织部位,采用组织切块法,以9种培养基分离纯化其内生真菌并进行分子生物学鉴定;以纸片扩散法评价其代谢物对5种测试菌株的抑菌活性;以DPPH自由基和·OH清除能力评价代谢物的抗氧化活性。结果:从植物甘草中分离得到128株真菌,经分子生物学鉴定归属于5个不同的属。其中,YS-6发酵液样品对金黄色葡萄球菌显示一定的抑菌活性;GS-6a发酵液样品对DPPH自由基清除率达97.54%,其菌丝体样品对·OH清除率达98.83%。结论:甘草内生真菌丰富多样,是筛选抗菌和抗氧化活性物质的良好来源。

摘要： 为探究内生真菌砖红镰刀菌在番茄生长及抗病过程中的作用,使用1×10^(7) CFU/mL砖红镰刀菌芽生孢子悬液浸根处理发芽的番茄,结果显示:处理50 d后番茄株高较对照组增加了1.15倍;叶绿素a、叶绿素b含量较对照组分别增加1.16倍和1.47倍;根系生物量较对照增加1.38倍;砖红镰刀菌处理组对番茄枯萎病的病情指数(45.16%)较对照组(74.15%)下降;浸根处理20 d时植物生长素合成关键基因SlYUC5、水杨酸合成关键基因SlICS1表达水平与未处理对照组相比无显著差异;处理30及40 d后,SlYUC5表达水平较对照组相比表达显著上升,SlICS1表达水平较对照组显著降低;茉莉酸合成途径关键基因SlLOXD在20 d时表达水平较对照组显著下调38.73%(P<0.01),而在30 d时其表达量与对照组无显著差异,40 d后,其表达量较对照组显著上调(2.33倍,P<0.01);试验组中植物抗性相关蛋白基因SlPR1a在20、30和40 d的表达量被显著上调了7.89倍、5.77倍和1.8倍(P<0.01)。进一步用GFP标记菌株进行荧光定殖观察并通过qPCR法计算其定殖率,14 h后在番茄根系观察到镰刀菌菌丝存在,并随处理时间延长定殖率逐渐上升。综上,推测砖红镰刀菌能够通过内生定殖于番茄根系介导植物激素相关基因表达从而影响植株的长生发育和抗病。

摘要： 目的：本研究对来源于海南特有药用植物海南暗罗的一株内生真菌为研究对象,从中分离获得活性次级代谢产物,以期得到具有良好生物活性的单体化合物.方法：利用正相硅胶、SephadexLH-20、自制薄层色谱及半制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,根据波谱数据鉴定化合物的结构.结果：分离得到4个单体化合物：V2(1)、Skyrin(2)、β-Sitosterol(3)、β-sitostenone(4),其中化合物1为新化合物.

摘要： 金钗石斛是一种珍贵的兰科植物石斛属多年生附生草本植物,其包含的生物碱类、多糖类、倍半萜类等化合物,对胃炎、糖尿病、癌症和老化有特殊的药理作用,是我国中医行业历代相传的名贵中草药.但其自然生长的条件十分苛刻,多分布在贵州一带.本研究为探究金钗石斛内生真菌对原球茎及组培苗的致病性，先从金钗石斛中分离纯化出两株内生真菌，并对其进行形态观察和种属鉴定；然后采用孢子悬浮液注射和菌丝体附着伤口的方法对组培苗和原球茎进行接种，观察其生长情况；最后参照柯赫氏法则对菌株进行重新分离，并结合切片观察结果验证侵染情况。

摘要： 金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl)隶属于兰科石斛属,多为附生,群居分布的草本植物.兰科植物在世界分布有730属,两万多种,热带和亚热带地区是其主要产地.在我国,金钗石斛有166属,1000余种,其中76属,289种被证实有药用价值,在贵州境内分布范围较广.金钗石斛的化学成分主要有生物碱类、多糖类、黄酮类、酚类、倍半萜类、香豆素类及甾体糖苷类化合物等多种化学物质,其中有效成分为生物碱和多糖.王宪楷等实验证明石斛属中金钗石斛的生物碱含量最高.在《神农草本经》中早有记载,并列其为上品药材.因其具有润肺止咳、滋阴清热、益胃生津之功效,被称之为"药中黄金"。本研究对金钗石斛根部内生真菌的ITS区域进行测序，分析其内生真菌的群落多态性，并对不同聚类水平上进行相对丰度统计，探究金钗石斛根部内生真菌的多样性特点，为系统性地筛选产活性成分的内生真菌等研究提供基础数据依据。

摘要： 本研究以药用植物丹参的内生真菌为研究对象，以发根农杆菌诱导丹参无菌苗产生的丹参毛状根为研究材料，通过研究内生真菌对丹参毛状根有效成分积累的影响（以六种丹参标准品作为对照），筛选目标菌株。

摘要： 传统的新分子实体的筛选模式费力费时,而通过植物内生真菌代谢产物是一个非常好的筛选策略,这是由于内生真菌代谢产物与植物病原体的毒素强烈相关,而且新陈代谢的相互作用能增强次级代谢产物的合成.为寻找具有抗肿瘤、抗菌等生物活性的化合物，本文对一株源于海南红树角果木((Ceriops tagal)根的内生真菌Fusarium sp.JG13进行了活性次级代谢产物的研究。本研究综合运用各种色谱分离技术和波谱鉴定技术，从该菌中分离得到2个新的化合物。该类化合物具有很好的抗菌活性，值得进一步深入研究。

摘要： 在稻田生态系统,与土壤氮循环密切相关的有机农业模式越来越受到重视.依赖于自然降解的氮循环是一个复杂漫长的过程,近年来,许多研究者致力于建立一种生态友好的农业模型以应对这一问题.本课题组前期研究表明,一株广谱内生真菌枫香拟茎点霉Phomopsis liquidambari接种水稻能显著促进根际氮循环过程,但目前为止,关于这种内生真菌是如何响应土壤氮肥水平并影响根际土壤氮循环还知之甚少.因此,利用凋落物袋(内装水稻秸秆)实验来表征N循环过程,追踪了水稻整个生育期地下氮素的动态变化,以评估P.liquidambari定殖对地下氮循环的影响.为了量化秸秆降解率、氮素释放量及土壤理化性质，进行了3×2析因设计(氮素水平x内生真菌)，并追踪了凋落物袋内容物在水稻苗期、分桑期、抽穗期和成熟期的动态响应。研究结果表明，P.liquidambari接种对地下秸秆降解有显著的“内生真菌-宿主”效应，即促进了地下氮循环过程。在分别设定内生细菌和氮素水平为独立变量时，发现随水稻生育期的推进，内生真菌接种在后期阶段表现出更大的优势(包括较高的降解速率和氮素释放量)，而氮素水平则更多影响前期的降解速率。研究证明了广谱内生真菌P.liquidambari接种可以响应稻田土壤氮肥水平，从而影响地下氮循环，并且可能存在一种后期的累积效应而不是早期效应，另一方面也进一步拓宽了对内生真菌影响宿主外周微环境的认识。

摘要： 目的：筛选出具有较高抗氧化活性的狭叶柴胡内生真菌并鉴定菌种,以寻找新型抗氧化活性物质.方法：采用DPPH法初步筛选出高抗氧化活性的内生真菌,用CTAB法提取真菌基因组DNA进行分子鉴定.结果：有25株内生真菌中CHR12呈剂量依赖性且抗氧化活性较明显,质量浓度为500μg·mL-1时对DPPH自由基清除率在90％以上,通过构建系统进化树确定菌株为镰刀孢属菌.结论：筛选出狭叶柴胡高抗氧化活性的内生真菌CHR12是镰刀孢属菌,为进一步研究调节柴胡代谢物在体内外的表达奠定理论基础.

摘要： 目的：研究沉香(Resinous of Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg)中内生真菌橘青霉(Penicillium citrinum)的化学成分.方法：利用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱及半制备液相等色谱方法分离纯化,结合其理化性质及MS、NMR等光谱数据鉴定化合物的结构.结果：从橘青霉乙酸乙酯提取物中分离得到5个化合物,分别鉴定为8-(甲氧酰基)-1-羟基-3-甲基酮(1);橘霉素(2);2-(2-乙酰基-3,5-二羟基-4,6-二甲苯基)乙酸甲酯(3);Penicitrinone A(4);Penicitrinol B(5).结论：这些化合物很可能是橘青霉乙酸乙酯提取物具有抗炎活性的药效物质基础.

摘要： 为探明印度梨形孢对烟草抗旱性的影响,采用聚乙二醇(PEG6000)人工模拟干旱胁迫条件进行盆栽试验.在干旱胁迫下,测定了烟叶中丙二醛(MDA)和脯氨酸(Pro)的含量、叶片相对电导率以及干旱相关基因的表达量.结果表明:印度梨形孢能定殖于烟草根部,并促进烟草地上部和地下部的生长.在干旱条件下,根部接种印度梨形孢的烟草缺水症状较轻.与未接种印度梨形孢的烟草相比,其烟叶中Pro含量显著升高,MDA含量和叶片相对电导率显著下降,干旱相关基因RD29A、ERD10A、RD26A、SDIR1、HAT、ERD1和DREB2A的表达量均明显上升.印度梨形孢提高烟草的抗旱能力,是通过降低烟草细胞生物膜的损伤程度、增强烟草的抗氧化防御能力、促进细胞渗透调节物质Pro的积累以及上调干旱胁迫相关基因的表达来实现的.

摘要： 为探明印度梨形孢对烟草抗旱性的影响,采用聚乙二醇(PEG6000)人工模拟干旱胁迫条件进行盆栽试验.在干旱胁迫下,测定了烟叶中丙二醛(MDA)和脯氨酸(Pro)的含量、叶片相对电导率以及干旱相关基因的表达量.结果表明:印度梨形孢能定殖于烟草根部,并促进烟草地上部和地下部的生长.在干旱条件下,根部接种印度梨形孢的烟草缺水症状较轻.与未接种印度梨形孢的烟草相比,其烟叶中Pro含量显著升高,MDA含量和叶片相对电导率显著下降,干旱相关基因RD29A、ERD10A、RD26A、SDIR1、HAT、ERD1和DREB2A的表达量均明显上升.印度梨形孢提高烟草的抗旱能力,是通过降低烟草细胞生物膜的损伤程度、增强烟草的抗氧化防御能力、促进细胞渗透调节物质Pro的积累以及上调干旱胁迫相关基因的表达来实现的.

摘要： 本发明涉及含有真菌互隔交链孢霉菌(Alternaria alternata)和/或属于二酮哌嗪(DKP)家族的式(1)、式(2)和式(3)的其次生代谢物的组合物，用于控制病原体真菌葡萄霜霉菌(Plasmopara viticola)。

摘要： 本发明提供了一种枳壳内生真菌及其在拮抗真菌及降解真菌毒素中的应用。本发明的菌株分离自枳壳的叶子，为植物内生真菌，其对一些植物病原真菌如镰孢菌具有优异的抑制作用，有着广泛的应用潜力。

摘要： 本发明公开了银杏内生真菌代谢产物在防治植物真菌病害中的应用，属于微生物农药技术领域。该发明包括：银杏组织的准备、表面消毒与无菌检测，内生真菌的分离与培养，有效菌株的筛选、发酵及杀菌药物的制备等步骤。本发明首次将银杏内生真菌发酵代谢产物应用于植物真菌病害的防治，为农用杀菌剂的开发增添了一个新的途径。

摘要： 本发明公开了一种具有促生效果的内生真菌(Alternariaarborescens)AT180及其应用。属于微生物技术领域。本发明以促进烟草生长、提高烟叶品质为目标，对分离获得的烟草内生真菌进行了筛选，获得具有明显促生效果的功能菌株，可应用于制备烟草专用微生物菌肥。

摘要： 本发明提供了一种枳壳内生真菌及其在拮抗真菌及降解真菌毒素中的应用。本发明的菌株分离自枳壳的叶子，为植物内生真菌，其对一些植物病原真菌如镰孢菌具有优异的抑制作用，有着广泛的应用潜力。

摘要： 本发明涉及农作物种植技术领域，并提供一种防治马铃薯真菌病害的内生真菌代谢产物及制备方法，其成分包括代森猛锌粉剂、复合微生物、三乙磷酸铝可湿性粉剂、去离子水、碳酸钾、多菌灵、有机硅乳液、恶甲水剂、粗粮颗粒、植物油、组合物配剂、无机填料、细土、马铃薯。通过代谢产物中有机硅乳液来作为催化三乙磷酸铝可湿性粉剂，以及代森猛锌粉剂有机结合，来防止植株腐烂，并且内部加入的恶甲水剂和多菌灵之间的高效低毒内吸性杀菌剂，来吸治疗和保护作用，带动溶液性质更加稳定，高效防治常见的多种真菌病害，同时渗入土壤中溶液内部，加入的复合微生物以及碳酸钾都能够提高土壤肥力，增加土壤有效钙的含量，使马铃薯能够健壮生长。

摘要： 一株具有抗真菌活性的工业大麻内生真菌及其应用，涉及微生物领域，尤其涉及一株工业大麻内生真菌及其应用。是要解决现有人工合成类抗真菌药物污染环境，且容易产生副产品的问题。该内生真菌为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)HMY01，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址是武汉市武汉大学，保藏日期为2021年8月26日，保藏编号为CCTCC NO：M20211092。尖孢镰刀菌HMY01能够抑制真菌活性，能够发酵产金丝桃苷。本发明的工业大麻内生真菌用于抑制真菌和发酵产金丝桃苷。

摘要： 本发明公开了一种筛选能够提高农作物抗真菌病害能力内生真菌的方法，其步骤为：1）采集植物材料，获得无任何病害的植物脱毒移栽苗；2）从植物中分离内生真菌；3）将分离到的各株内生真菌制备成内生真菌孢子悬液，不产生孢子的内生真菌制成菌丝悬液；4）接种内生真菌孢子或菌丝悬液至脱毒移栽苗，以不接种内生真菌的移栽苗作为对照；5）用病原真菌感染接种了内生真菌的移栽苗和不接种内生真菌的移栽苗，一个月后观察其防治效果，防治效果大于80%的内生真菌是能够提高该种农作物抗真菌病害能力的内生真菌。

摘要： 本发明公开了银杏内生真菌代谢产物在防治植物真菌病害中的应用，属于微生物农药技术领域。该发明包括：银杏组织的准备、表面消毒与无菌检测，内生真菌的分离与培养，有效菌株的筛选、发酵及杀菌药物的制备等步骤。本发明首次将银杏内生真菌发酵代谢产物应用于植物真菌病害的防治，为农用杀菌剂的开发增添了一个新的途径。

摘要： 本发明属于微生物和农作物病害技术领域，具体涉及一株生防内生真菌褐红篮状菌及其应用。本发明通过室内平板培养和活体温室防效筛选出一株生防内生真菌褐红篮状菌(Talaromyces pinophilus)XBTp4，该菌株对烟草疫霉菌、茄病镰刀菌、立枯丝核菌均有很好的拮抗活性，且试验证明其对烟草植株安全有效，并具有良好的促生效果，因此可用于连作土壤条件下烟草土传真菌性病害，是一种新型优质的微生物农药资源，因此具有良好的实际应用之价值。