NOD小鼠

摘要： 目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)激动剂非诺贝特对干燥综合征小鼠Treg细胞的免疫调节作用。方法将14只15周龄雄性NOD小鼠随机分为模型组和非诺贝特组,每组7只。模型组小鼠给予标准饲料喂养,非诺贝特组小鼠予含0.3 g·kg^(-1)非诺贝特的标准饲料喂养。分别于治疗前及治疗后4周、8周进行泪液分泌试验及角膜荧光素钠染色。治疗后8周收集小鼠泪腺组织,HE染色观察小鼠泪腺病理变化,实时荧光定量PCR检测小鼠泪腺中叉头状蛋白P3(Foxp3)及白细胞介素(IL)-10 mRNA相对表达量,流式细胞仪检测脾脏中调节性T细胞(Treg细胞)比例。结果与模型组相比,治疗后4周、8周非诺贝特组小鼠角膜荧光素钠染色评分均显著降低(P=0.003、0.001),泪液分泌量均显著增加(P=0.016、0.000)。组织病理学观察发现,与模型组相比,治疗后8周非诺贝特组小鼠泪腺组织淋巴细胞浸润面积百分比显著降低,差异有统计学意义(P=0.002)。实时荧光定量PCR检测结果显示,与模型组相比,非诺贝特组小鼠泪腺中Foxp3及IL^(-1)0 mRNA相对表达量均明显升高,差异均有统计学意义(P=0.002、0.008);流式细胞仪检测结果发现,与模型组相比,非诺贝特组小鼠脾脏中Treg细胞比例明显升高,差异有统计学意义(P=0.003)。结论非诺贝特可以明显缓解小鼠干燥综合征干眼症状,其机制可能与增加Treg细胞比例有关。

摘要： 目的:探讨滤泡细胞毒性T细胞(follicular cytotoxicT cells,TFC)的特点及其在非肥胖糖尿病(non-obese diabetic,NOD)小鼠自身免疫性糖尿病病程中发挥的作用.方法:分离4、10、15、20、25周龄及高血糖(hyperglycemia,Hi)组NOD小鼠的脾脏、淋巴结及胸腺淋巴细胞并进行流式染色,通过流式检测观察并比较TFC和CXCR5-CD8+T细胞在不同免疫器官中的分布情况、在自身免疫性糖尿病自然病程中的细胞比例变化、脱颗粒标记物白细胞分化抗原(cluster of differentiation 107a,CD107a)、重组人杀伤细胞凝集素样受体G亚族成员1(recombinant human killer cell lectin-like receptor subfamily G,member 1,KLRGl)、抑制性分子程序性死亡分子1(programmed cell death protein 1,PD-1)和T细胞免疫球蛋白黏蛋白结构分子3(T cell immunoglobulin mucin 3,TIM-3)的表达水平以及2种细胞释放干扰素γ(interferonγ,IFN-γ)、颗粒酶B(ganzymeB,GzmB)的能力.结果:TFC在NOD鼠不同免疫器官间表达存在差异,在脾脏和淋巴结中表达量相当,而在胸腺几乎无表达.在NOD小鼠血糖升高前,随着周龄的增加TFC细胞比例呈现逐渐上升趋势,发病后比例下降.与CXCR5-CD8+T细胞相比,TFC细胞比例明显较低,但抑制性分子PD-1、TIM-3和脱颗粒标记物CD107a却呈显著性高表达.与此同时,TFC较CXCR5-CD8+T细胞具有更强地释放GzmB[TFC (3.56±2.1)％,CXCR5-CD8+T细胞(0.78±0.39)％,P＜0.05]和IFN-γ[TFC(43.65±12.25)％,CXCR5-CD8+T细胞(21.92±3.72)％,P＜0.05]的能力.结论:TFC存在并参与NOD小鼠自身免疫性糖尿病的自然病程,并通过细胞毒性作用促进NOD小鼠的免疫损伤.

摘要： 目的 探讨衣康酸二甲酯对非肥胖性糖尿病小鼠(NOD)胰岛炎的影响.方法 利用流式细胞仪检测衣康酸二甲酯对RAW 264.7巨噬细胞表型的影响,通过ELISA观察其对RAW 264.7分泌的细胞因子(IL-6、IL-12和TNF-a)的影响,同时将衣康酸二甲酯腹腔注射NOD小鼠,进一步探讨其对胰岛内部炎症的影响.结果 衣康酸二甲酯有利于降低巨噬细胞M1/M2比率,使巨噬细胞向M2型转换,同时降低IL-6、IL-12和TNF-α的分泌,50mg/kg的衣康酸二甲酯使胰岛评分达到了1.115±0.7821.结论 衣康酸二甲酯通过M1/M2巨噬细胞表型转化可以缓解NOD小鼠胰岛炎.

摘要： 为了探究壳寡糖(COS)延缓NOD小鼠自发性糖尿病进程的可能机制,研究不同剂量COS对血脂异常和氧化应激的影响.持续灌胃不同剂量COS 28 w后,测定各组小鼠血糖、血脂和氧化应激等指标,并进行组织学检查.结果显示,各剂量COS均使NOD小鼠进入糖尿病前期和糖尿病阶段的时间有一定的延后,且可将其处于糖尿病前期的时间段(Control组为9 w)分别延长为10 w、13 w和>16 w;可分别使小鼠血清T-CHO降低了37.10％、46.68％和62.72％(p<0.01),使TC降低了35.01％、45.06％和60.62％(p<0.01),使LDL-C降低了31.21％(p<0.05)、51.68％和72.48％(p<0.01),但对HDL-C无显著影响,改善了血脂异常;使小鼠肝组织内SOD和GSH-Px比活力有所提高,尤其是在COS-H组分别提高了94.69％和167.59％(p<0.01),同时使MDA降低48.41％(p<0.05),有效减轻氧化应激引起的氧化损伤;组织学检查显示COS使胰腺系数有所增加,肝脏系数逐步下降,脂肪空泡有所减少,对胰腺组织完整性具有一定的保护作用.据此推测,COS可通过调节血脂异常、抵抗血糖异常引起的体内氧化应激、保护组织等途径延缓自发性糖尿病发生发展的进程.

摘要： 目的:初步建立非肥胖性糖尿病(NOD)小鼠蒸发过强型干眼模型,通过研究小鼠眼表组织病理变化,初步探讨其作为糖尿病性干眼模型的可行性.方法:选取40只雌性NOD小鼠,NOD小鼠自发糖尿病为实验组,同时选取未自发糖尿病的NOD小鼠作为正常对照组.实验组NOD小鼠置于40％以下湿度环境,每天皮下注射0.5mg/0.2mL氢溴酸菪胺,并置于可控干燥箱中,每天通风12h,制作蒸发过强型干眼模型.在造模后的第1、7、10、14d采用酚红棉线实验测量泪液分泌量,PAS染色检查结膜杯状细胞形态和数目;在造模后的第10d,进行角膜组织苏木精染色检测角膜上皮变化情况.结果:实验组NOD小鼠泪液分泌量随造模时间而逐渐降低,正常对照组未有明显变化.实验组的结膜杯状细胞体积变大,在造模后的第1d,杯状细胞密度较正常对照组减少(P=0.008),从造模后第7d开始,随时间延长,实验组杯状细胞数量逐渐减少,且较同一时间点正常对照组显著减少(均P<0.001).此外,观察两组第10d的角膜上皮情况,实验组NOD小鼠角膜上皮层变薄,部分角膜上皮细胞变性、基底细胞水肿.结论:初步建立了NOD小鼠干眼模型,其眼表变化与临床上干眼症表现类似.

摘要： 目的 探讨大黄素对实验性自身免疫性甲状腺炎小鼠的免疫保护作用和机制.方法 通过过量碘剂诱导NOD小鼠建立EAT动物模型,造模4周后大黄素组小鼠进行大黄素灌胃处理.造模8周后检测小鼠血浆TgAb水平、甲状腺淋巴浸润程度及外周血T细胞亚群频率以观察大黄素对EAT小鼠的免疫保护作用.结果 (1)甲状腺病理学观察,大黄素组较模型组甲状腺淋巴细胞浸润程度减轻,且两组淋巴细胞浸润程度均高于对照组,各组比较差异有统计学意义(P<0.01).(2)造模小鼠血浆TgAb水平均较对照组升高,且大黄素组升高幅度明显低于模型组,各组比较差异有统计学意义(P<0.01).(3)大黄素组外周血单核细胞中CD3+CD4+、CD3+CD8+T细胞频率和CD3+CD4+FIN-γ+、CD3+CD4+IL-4+T细胞频率均明显低于模型组,且均高于对照组,各组间比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 过量碘剂诱导NOD小鼠自身免疫性甲状腺炎造模是可行的;大黄素对造模小鼠甲状腺组织的自身免疫性炎症反应有一定免疫抑制作用,大黄素通过抑制CD4+、CD8+T淋巴细胞增殖分化及其IFN-γ和IL-4细胞因子分泌,从而发挥免疫性保护作用.%Objective To investigate the immuno-protective effect of emodin on thyroid in experimental autoimmune thyroiditis(EAT) mice and its mechanism.MethodsFour weeks after modeling,emodin group were treated by gavage with emodin. While eight weeks after modeling, The TgAb level in plasma,the degree of lymphocyte infiltration in thyroid and T cel subset frequency in peripheral blood were detected to evaluate the immuno-protective effect of emodin on EAT mice.Results(1)The histopathological study revealed that the degree of infiltration of thyroid lymphocyte was decreased in the emodin group compared with the model group,both were higher than that in the normal group,and there were significant differences among the each group(P<0.01).(2)Levels of plasma TgAb were increased in each group after modeling,and the increasing amplitudes in emodin treated groups were significantly less than that in model group(P<0.01).(3)The cel frequencies of CD3+CD4+,CD3+CD8+T cels,CD3+CD4+IL-4+ and CD3+CD4+IFN-γ+ T cels in peripheral blood monocyte were significant decreased in emodin group compared with the model group,both were higher than the control group,and there were significant differences among each group(P<0.01).ConclusionThe EAT model is visible which though an excessive iodine-induced method in NOD mice,and the emodin shows a certain inhibitory effect on autoimmune response in EAT mice. This effect can be performed by inhibiting the differentiation of lymphocyte into CD3+CD4+,CD3+CD8+T cels and inhibiting the secretion of IFN-γ and IL-4 in CD3+CD4+ T cels,thereby,immunological protection is performed.

摘要： 目的:不同剂量下当归六黄汤对非肥胖型糖尿病的预防效果及可能机制.方法:50只NOD小鼠按随机数字表法分为模型组、阳性药组(二甲双胍)、L组、M组及H组.培养4周后每组随机抽取3只小鼠进行OGTT与血清胰岛素检测,免疫组化观察小鼠胰岛Bax、Bcl-2的表达,余下小鼠观察至26周分析糖尿病的发病率.结果:4周后阳性药组、M组、H组整体血糖水平降低且H组糖耐量能力最高,各组血清胰岛素水平(F =21.102,P=0.014)、糖尿病发病率不完全相同,阳性药组、M组、H组均与模型组存在显著差异.秩和检验显示各组胰岛炎评分存在明显差异,阳性药组、M组、H组中Bax、Bax/Bcl-2水平明显减少,且剂量越高效应越明显,而Bcl-2表达水平则相反.结论:当归六黄汤对非肥胖型糖尿病有一定预防效果,其机制可能与减轻胰岛炎症、降低胰岛细胞Bax的表达、增加Bcl-2的表达有关.

摘要： 目的 提高非肥胖型糖尿病(non?obese diabetic,NOD)背景小鼠体外受精(in vitro fertilization,IVF)效果.方法 使用不同周龄的NOD背景雌鼠进行实验,实验分为四组,分别为4、6、8和10周龄雌鼠,与3～6月龄NOD雄鼠进行体外受精,第二天统计每只雌鼠可用胚胎数量,重复两次实验.收集2016—2018年NOD小鼠移植生仔数据进行比较.结果 第一次实验4、6、8和10周龄四组每只雌鼠体外受精后可用二细胞胚胎数以平均数±标准差表示,分别为(13.4±2.5)枚、(22.7±2.9)枚、(22.0±7.0)枚、(30.5±10.9)枚.第二次实验4、6、8和10周龄四组每只雌鼠可用二细胞胚胎数以平均数±标准差表示,分别为(7.8±2.6)枚、(16.5±4.5)枚、(14.2±6.5)枚、(24.5±5.9)枚.4、8、10周龄雌鼠体外受精后胚胎移植平均生仔率±标准差分别为(35.32±9.9)％、(36.19±6.2)％、(43.15±6.9)％.结论 10周龄的NOD背景雌鼠进行体外受精效果最好,建议使用10周龄雌鼠进行体外受精.

摘要： 目的 探讨西格列汀对NOD小鼠胰岛炎的改善作用与其作用机制.方法 将22只3月龄雌性NOD小鼠随机分为西格列汀组与对照组(n=11),西格列汀组每日给予磷酸西格列汀灌胃(30 mg/kg),对照组给予等体积生理盐水,连续处理12周,每周测量小鼠体质量、摄食量、饮水量和血糖值,第13周行腹腔糖耐量试验(IPGTT),ELISA检测血清胰岛素水平,HE染色观察胰岛形态及炎症细胞浸润情况,免疫印迹法(Western Blot)检测TLR4、MyD88和NF-κB蛋白表达水平.结果 西格列汀组小鼠血清胰岛素水平较对照组高(P<0.05),胰岛炎症细胞浸润状况显著改善(P<0.05),TLR4、MyD88及NF-κB蛋白表达水平显著低于对照组(P<0.05).结论 西格列汀显著减轻NOD鼠胰岛炎症浸润情况、增加血清胰岛素水平,这可能与其抑制TLR4/NF-κB信号通路相关.%Objective To explore the effects of DPP-4 inhibitor sitagliptin on insulitis of NOD mice and the potential mechanism. Methods 223-month-old female NOD mice were randomly divided into Sitagliptin(Si-ta)group(n=11)gavaged with Sita(30 mg/Kg)daily for 12 weeks and control(Con)group with equal volume of normal saline(NS). The body weight,food-intake,water-intake and blood glucose were recorded weekly. Intraperi-toneal glucose tolerance test(IPGTT)was performed at the end of treatment and the blood sample was collected. Then mice were execute. The serum insulin level was measured by ELISA. Pancreas morphology and insulitis were evaluated by hematoxylin-eosin staining. The protein expression level of TLR4 ,MyD88 and NF-κB was analyzed by Western Blot. Results Compared with that of Con group ,the insulitis of Sita group was significantly alleviative(P < 0.05)and the serum insulin level was increased significantly(P < 0.05). The protein expression level of TLR4(P<0.05),MyD88(P<0.01)and NF-κB(P<0.05)in Sita group was significantly decreased. Conclusion Sitagliptin alleviates insulitis in NOD mice and increases the serum insulin level ,probably owing to the suppression of TLR4/MyD88/NF-κB signaling pathway.

摘要： 本发明涉及一种NOD遗传背景的动脉粥样硬化小鼠模型的制备方法，属于基因工程和遗传修饰技术领域。本发明首次将NOD遗传背景小鼠中的ApoE和LDLR基因进行同时敲除，获得了NOD遗传背景小鼠的能产生动脉粥样硬化的基因敲除小鼠模型。本发明获得NOD遗传背景的动脉粥样硬化小鼠模型的主动脉有明显的动脉粥样硬化斑块形成，与传统经典的动脉粥样硬化模型C57B/L6背景ApoE基因敲除小鼠相比，其发病程度一致，本发明的方法为研究者提供一种全新的NOD遗传背景动脉粥样硬化的基因敲除小鼠模型，对动脉粥样硬化的基础理论研究和临床诊断治疗具有十分重要的应用价值。

摘要： 本发明涉及一种NOD遗传背景的中性粒细胞缺失的人源化小鼠模型的制备方法，属于基因工程和遗传修饰技术领域。本发明的制备方法包括：将NOD小鼠中Gfi1基因敲除后，即得NOD遗传背景的中性粒细胞缺失的人源化小鼠模型。本发明首次在NOD遗传背景小鼠模型中利用CRISPR/Cas9系统实现了对控制小鼠中性粒细胞发育的关键基因Gfi1进行特异性敲除，获得一种在NOD遗传背景下中性粒细胞缺失的新的人源化小鼠动物模型。该小鼠模型具有接受异种移植的潜力，为开发全新的人源化小鼠提供了新的思路。

摘要： 本文公开了非肥胖糖尿病(NOD)背景下的无毛、免疫缺陷小鼠及其生产方法。所述小鼠为无毛的，并且具有多重免疫缺陷，包括B细胞和T细胞缺陷，以及受损的巨噬细胞和补体功能。所述小鼠还在免疫系统的自然杀伤细胞和树突细胞中具有进一步的缺陷。所述小鼠可用于生物医学研究，例如涉及异种移植、自发性肿瘤、癌细胞肿瘤发生、肿瘤血管发生、肿瘤转移潜能、肿瘤抑制治疗、致癌调控和肿瘤成像的研究。

摘要： 本发明提供一种NOD/SCID小鼠异种移植物抗宿主病模型的建立方法，通过制备活化的人PBMCs，NOD/SCID小鼠造模，小鼠人白细胞数量含量植入检测，小鼠GVHD靶器官的病理表现建立。本发明通过应用环磷酰胺药物联合抗小鼠CD122单克隆抗体预处理代替亚致死剂量辐照方法建立一种人源化NOD/SCID小鼠GVHD模型。该模型具有模拟临床上化疗预处理的异基因造血干细胞移植后移植物抗宿主病的特点；建模型效率高，重复性好；造模过程简单易行；弥补了国内很多研究中心缺乏辐照相关的仪器设备而不能进行相关研究的缺陷，能为在活体动物内进行人类免疫系统GVHD研究提供实验平台。

摘要： 本发明公开了NOD‑B6重组近交系小鼠模型的构建方法及应用，属于实验动物模型技术领域。以NOD/ShiLtJ X小鼠和C57BL/6J小鼠作为亲本，杂交获得F1代；F1代同一窝小鼠全同胞交配，获得F2代；后续各代同一窝小鼠均进行全同胞交配，至20代以上，获得NOD‑B6重组近交系小鼠。本发明构建的小鼠模型纯合率高，后代繁殖稳定，可用于耳聋、糖尿病、干燥综合征等疾病的生物研究。

摘要： 本发明提供一种NOD遗传背景双基因免疫缺陷小鼠模型的制备方法，利用基因编辑技术敲除NOD小鼠的RAG1基因的第2号外显子全部编码区DNA片段以及JAK3基因上包括18‑21号外显子序列在内的DNA片段；敲除的后的RAG1基因序列如SEQ ID NO:9所示，敲除的后的JAK3基因序列如SEQ ID NO:10所示。NOD遗传背景小鼠中利用CRISPR/Cas9系统同时敲除RAG1与JAK3基因在国内外尚属首次，这也是首例RAG1和JAK3双敲基因的纯合子小鼠免疫缺陷小鼠模型，具有很高的原创性和非常重要的基础研究和实际应用价值。

摘要： 本发明涉及一种NOD遗传背景的中性粒细胞缺失的人源化小鼠模型的制备方法，属于基因工程和遗传修饰技术领域。本发明的制备方法包括：将NOD小鼠中Gfi1基因敲除后，即得NOD遗传背景的中性粒细胞缺失的人源化小鼠模型。本发明首次在NOD遗传背景小鼠模型中利用CRISPR/Cas9系统实现了对控制小鼠中性粒细胞发育的关键基因Gfi1进行特异性敲除，获得一种在NOD遗传背景下中性粒细胞缺失的新的人源化小鼠动物模型。该小鼠模型具有接受异种移植的潜力，为开发全新的人源化小鼠提供了新的思路。

摘要： 本发明涉及一种NOD遗传背景的动脉粥样硬化小鼠模型的制备方法，属于基因工程和遗传修饰技术领域。本发明首次将NOD遗传背景小鼠中的ApoE和LDLR基因进行同时敲除，获得了NOD遗传背景小鼠的能产生动脉粥样硬化的基因敲除小鼠模型。本发明获得NOD遗传背景的动脉粥样硬化小鼠模型的主动脉有明显的动脉粥样硬化斑块形成，与传统经典的动脉粥样硬化模型C57B/L6背景ApoE基因敲除小鼠相比，其发病程度一致，本发明的方法为研究者提供一种全新的NOD遗传背景动脉粥样硬化的基因敲除小鼠模型，对动脉粥样硬化的基础理论研究和临床诊断治疗具有十分重要的应用价值。

摘要： 本文公开了非肥胖糖尿病(NOD)背景下的无毛、免疫缺陷小鼠及其生产方法。所述小鼠为无毛的，并且具有多重免疫缺陷，包括B细胞和T细胞缺陷，以及受损的巨噬细胞和补体功能。所述小鼠还在免疫系统的自然杀伤细胞和树突细胞中具有进一步的缺陷。所述小鼠可用于生物医学研究，例如涉及异种移植、自发性肿瘤、癌细胞肿瘤发生、肿瘤血管发生、肿瘤转移潜能、肿瘤抑制治疗、致癌调控和肿瘤成像的研究。

摘要： 本发明提供一种NOD/SCID小鼠异种移植物抗宿主病模型的建立方法，通过制备活化的人PBMCs，NOD/SCID小鼠造模，小鼠人白细胞数量含量植入检测，小鼠GVHD靶器官的病理表现建立。本发明通过应用环磷酰胺药物联合抗小鼠CD122单克隆抗体预处理代替亚致死剂量辐照方法建立一种人源化NOD/SCID小鼠GVHD模型。该模型具有模拟临床上化疗预处理的异基因造血干细胞移植后移植物抗宿主病的特点；建模型效率高，重复性好；造模过程简单易行；弥补了国内很多研究中心缺乏辐照相关的仪器设备而不能进行相关研究的缺陷，能为在活体动物内进行人类免疫系统GVHD研究提供实验平台。