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【24h】

Efficient production of (R)-(-)-2-hydroxy-4-phenyl butyric acid by recombinant Pichia pastoris expressing engineered D-lactate dehydrogenase from Lactobacillus plantarum with a single-site mutation

机译：表达具有单点突变的植物乳杆菌表达工程D-乳酸脱氢酶的重组毕赤酵母有效生产（R）-（-）-2-羟基-4-苯基丁酸

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( R)-2-hydroxy-4-phenylbutyric acid (R-HPBA) is a valuable intermediate for the synthesis of angiotensin-converting enzyme inhibitors. The asymmetric reduction of 2-oxo-4-phenylbutyric acid (OPBA) by oxidoreductases is an efficient approach for its synthesis. Here, we report a novel biocatalytic approach for asymmetric synthesis of R-HPBA using recombinant Pichia pastoris expressing the Tyr52Leu variant of D-lactate dehydrogenase (D-LDH) from Lactobacillus plantarum. The recombinant yeast cells showed impressive catalytic activity at a high concentration of NaOPBA (380 mM, 76 g/L) and achieved full conversion starting with 40 g/L NaOPBA or even at higher concentration. Under optimized reaction conditions (pH 7.5, 37 degrees C, and 2% glucose), a full conversion with 95% reaction yield and similar to 100% product enantiomeric excess (ee) was achieved for the preparation of R-HPBA on a 2-g scale. The findings of this study promote both the biotransformation of R-HPBA and an extension of the application of recombinant yeast as biocatalysts.
机译：（R）-2-羟基-4-苯基丁酸（R-HPBA）是用于合成血管紧张素转化酶抑制剂的有价值的中间体。氧化还原酶不对称还原2-氧代-4-苯基丁酸（OPBA）是一种有效的合成方法。在这里，我们报告了一种新型的生物催化方法，用于不对称合成R-HPBA，使用重组毕赤酵母表达植物乳杆菌的D-乳酸脱氢酶（D-LDH）的Tyr52Leu变体。重组酵母细胞在高浓度的NaOPBA（380 mM，76 g / L）下显示出令人印象深刻的催化活性，并从40 g / L的NaOPBA甚至更高浓度开始完全转化。在优化的反应条件下（pH 7.5、37摄氏度和2％的葡萄糖），在2的条件下制备R-HPBA可获得完全转化，反应产率> 95％，产物对映体过量（ee）接近100％。 -g刻度。这项研究的发现既促进了R-HPBA的生物转化，又扩展了重组酵母作为生物催化剂的应用范围。

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