微量肉汤稀释法

摘要： 为了解上海市猪丹毒杆菌流行株的耐药状况,对上海市2011—2017年分离到的猪丹毒杆菌采用纸片扩散法(K-B法)和微量肉汤稀释法(MIC法)进行药敏试验,同时对临床分离株与健康带毒株的MIC结果进行比较.结果显示:所有菌株对β-内酰胺类和大环内酯类药物敏感,而对林可霉素、四环素类、氯霉素类、喹诺酮类等原本敏感的药物,已产生较强耐药性;对临床分离株与健康带毒株的MIC结果比较分析发现,致病菌株和健康带毒株的耐药性存在较大差异.结果表明,上海市猪丹毒杆菌耐药情况较为严峻,除对β-内酰胺类和大环内酯类药物较为敏感外,对其他药物均出现不同程度的耐药.本研究为临床合理用药提供了有价值的参考资料.

摘要： 目的评价氨苄西林预报粪肠球菌和屎肠球菌亚胺培南敏感性的可行性。方法收集23家医院的127株粪肠球菌和124株屎肠球菌非重复临床分离株。采用微量肉汤稀释法和纸片扩散法测定粪肠球菌和屎肠球菌对青霉素、氨苄西林、亚胺培南的敏感性。结果纸片扩散法青霉素和氨苄西林均敏感或均耐药的粪肠球菌,微量肉汤稀释法氨苄西林-亚胺培南的分类一致率(CA)均为100.0%,未出现非常重大误差(VME)和重大误差(ME);纸片扩散法青霉素和氨苄西林均耐药的粪肠球菌,微量肉汤稀释法氨苄西林-亚胺培南的CA为77.8%,ME占22.2%;青霉素耐药、氨苄西林敏感的粪肠球菌,微量肉汤稀释法氨苄西林-亚胺培南的CA为57.1%,纸片扩散法的CA为81.8%。结论氨苄西林预报粪肠球菌和屎肠球菌亚胺培南敏感性的可靠性优于青霉素,但氨苄西林的敏感性不能用于预报青霉素耐药、氨苄西林敏感表型粪肠球菌和屎肠球菌的亚胺培南敏感性;青霉素敏感可预报粪肠球菌和屎肠球菌对氨苄西林敏感。

摘要： 【目的】由嗜冷黄杆菌(Flavobacterium psychrophilum)引起的细菌性冷水病是造成国内外鲑科鱼类养殖巨大经济损失的细菌性疾病之一。通过对我国东北地区临床分离的鲑源嗜冷黄杆菌的药敏特性进行比较分析,以期对该菌引发疾病的防治提供基础数据和用药指导。【方法】采用微量肉汤稀释法检测11株嗜冷黄杆菌分离株对20种抗菌药物的敏感性,并进一步探讨其药物敏感性与时空分布和宿主的关联性。【结果】分离株普遍对链霉素、甲氧苄啶敏感性低,对利福平、呋喃唑酮等敏感;分离自黑龙江省的菌株对链霉素和甲氧苄啶的药物敏感性较低,MIC值分别达到32μg/mL(50%)和16μg/mL(75%);吉林省菌株对链霉素、甲氧苄啶的药物敏感性较低,分别达到32μg/mL(33.3%)和16μg/mL(66.7%)。白点鲑源、美洲红点鲑源和亚东鲑源分离株对链霉素和甲氧苄啶药物敏感性较低,MIC均达到16μg/mL以上;白点鲑源分离株对新霉素和氯霉素表现出较低的药物敏感性,美洲红点鲑源分离株则对甲砜霉素、氟甲喹和恶喹酸表现出较低的药物敏感性。【结论】2019—2020年我国东北地区临床分离的嗜冷黄杆菌分离株对氟甲喹、恶喹酸、左氧氟沙星、庆大霉素、四环素、氨苄西林、氟苯尼考等药物的敏感性均呈现升高趋势,建议选用恩诺沙星对嗜冷黄杆菌引起的细菌性冷水病进行防治。

摘要： 目的比较欧洲抗菌药物敏感性试验委员会(EUCAST)和美国临床实验室标准化协会(CLSI)微量肉汤稀释法白念珠菌体外药物敏感性试验结果的差异。方法分别用EUCAST方法和CLSI方法检测42株白念珠菌对两性霉素B、阿尼芬净、卡泊芬净、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑和米卡芬净的敏感性,比较2种方法的基本一致性(EA)、分类一致性(CA)、极重大误差率(VME)和重大误差率(ME)。结果EUCAST方法和CLSI方法总体EA为95.2%~100.0%,CA为95.2%~100.0%,ME为0%~4.8%,VME为0%~2.4%;氟康唑的ME为4.8%,泊沙康唑的VME为2.4%。结论EUCAST方法和CLSI方法白念珠菌体外药物敏感性试验结果具有可比性,但部分药物之间需要额外的协调步骤。

摘要： 渔业生态环境监测与保护、水产病害防治等众多领域的活动都需要对病原微生物进行药敏试验(Antimicrobial susceptibility testing,AST).本研究以副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)为模式微生物,以卡那霉素、四环素、青霉素和恩诺沙星为代表性抗生素,对比研究了微生物生长传感器AST法和标准微量肉汤稀释(Broth microdilution,BMD)AST法的性能特征.结果 显示,无论是标准菌株还是来自养殖环境和对虾的分离菌株,分别测定4种抗生素对它们的剂量效应时,2种方法所得最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)值的基本一致率(Essential agreement,EA)都是100％,因而具有高度吻合性.微生物生长传感器AST法测定的MIC值往往不小于BMD AST法的测定结果,表明自动化仪器法的灵敏度高于肉眼观察.比较而言,微生物生长传感器AST法因为能提供细菌生长实时动力学曲线而呈现更高的效率和更多的抗生素响应信息,而且自动化程度高,操作简便,用户友好,因而具有更好的应用推广前景.

摘要： 为了解2018年-2019年从广东省内生猪屠宰场分离的19株大肠埃希氏菌O157:H7耐药情况,采用微量肉汤稀释法测定阿莫西林等16种抗菌药物对分离菌株的最小抑菌浓度(MIC),并用普通PCR法检测blaNDM-1等10种耐药基因.结果表明,19株大肠埃希氏菌O157:H7分离菌株对不同抗生素存在耐药差异,其中对阿莫西林、氨苄西林、青霉素、氯霉素和恩诺沙星的耐药率均为100％,对头孢哌酮的耐药率最低为5.26％,其余10种抗菌药物的耐药率位于31.58％～84.21％之间;mcr-1、tetM、floR和rmtB 4种耐药基因未检出,blaNDM-1等6种耐药基因检出率范围为5.26％～89.47％.生猪屠宰场大肠埃希氏菌O157:H7耐药且多重耐药严重,分离株携带丰富的耐药基因.

摘要： 目的 探讨改良微量肉汤药敏实验(荧光法)应用效果及可靠性.方法 通过改良微量肉汤药敏实验(荧光法)、VITEK2全自动细菌鉴定仪、微量肉汤稀释法分别对标准菌株金黄色葡萄球菌ATCC29213和大肠埃希菌ATCC25922进行三种不同抗生素(金黄色葡萄球菌ATCC29213:苯唑西林、利奈唑胺和环丙沙星;大肠埃希菌ATCC25922:庆大霉素、环丙沙星和亚胺培南)的药敏实验,并对5株临床分离金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌分别进行4种不同抗生素(金黄色葡萄球菌:苯唑西林、利奈唑胺、青霉素和红霉素;大肠埃希菌:亚胺培南、头孢曲松、哌拉西林和妥布霉素)的药敏实验,检测最低抑菌浓度(MIC)并记录检测周转时间(turn-around time,TAT),比较三种方法检测结果的一致性.结果 改良微量肉汤药敏实验(荧光法)与VITEK2全自动细菌鉴定仪、微量肉汤稀释法检测标准菌株和临床分离菌株的MIC基本一致(Cohen'skappa值为1.000,P=0.083),即三种抗生素敏感性实验结果具有高度吻合性;改良微量肉汤药敏实验(荧光法)对金黄色葡萄球菌的TAT(约10 h)均低于VITEK2全自动细菌鉴定仪(约17 h)和微量肉汤稀释法(约22 h)(P均<0.05).结论 改良微量肉汤药敏实验(荧光法)较VITEK2全自动细菌鉴定仪更快捷,较微量肉汤稀释法更省时,并可通过进一步优化为今后的临床检验工作提供全新的快速药敏检测方法.

摘要： 目的 观察替加环素与左氧氟沙星、复方新诺明、米诺环素、头孢他啶、头孢哌酮-舒巴坦的单药及联合使用对耐左氧氟沙星的嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia,SMA)的体外抗菌作用.方法 33株耐左氧氟沙星的嗜麦芽窄食单胞菌分离自首都医科大学附属北京友谊医院的患者血液及无菌部位体液标本,根据其耐药程度不同分为3组(耐左氧氟沙星SMA 17株;耐左氧氟沙星及复方新诺明SMA 11株;耐左氧氟沙星、复方新诺明及米诺环素SMA 5株).采用微量肉汤稀释法分别测定6种抗菌药物对其最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC).采用棋盘式微量肉汤稀释法进行替加环素与其他5种抗菌药物的联合药敏试验,计算部分抑菌指数(fractional inhibitory concentration,FIC)以判定其联合效果.结果 替加环素对耐左氧氟沙星SMA和耐左氧氟沙星及复方新诺明SMA的敏感率分别为76.4％和54.5％,稍低于米诺环素的敏感率.联合药敏结果显示,替加环素与左氧氟沙星、头孢他啶、头孢哌酮-舒巴坦联合使用对SMA显示出一定的协同作用,替加环素与复方新诺明和米诺环素没有表现出明显的协同作用,均未显示拮抗作用.结论 替加环素单独或联合使用可以作为临床治疗SMA感染的备选用药.

摘要： 目的 评估显色药敏板Sensititre YeastOne与微量肉汤稀释法检测曲霉体外抗真菌药物敏感性的一致性.方法 使用同样的孢子悬液按照CLSI M38-A2微量肉汤稀释法和Sensititre YeastOne YO10对307株曲霉进行体外抗真菌药物敏感性试验,计算两种药敏方法结果 间的基本一致性、分类一致性以及错误率.结果CLSI M38-A2药敏试验显示98.4％(302/307)曲霉菌株对测试的6种抗真菌药物持野生型状态,Sensititre YeastOne则检出97.1％(298/307)菌株为野生型.除伊曲康唑外,其余5种抗真菌药物在Sensititre YeastOne与CLSI M38-A2间的基本一致性均>90％.两种方法在曲霉药物敏感性检测的分类一致性为98.1％(301/307),极显著错误率为0.3％(1/307),显著错误率为1.6％(5/307).结论 Sensititre YeastOne在检测曲霉体外药物敏感性方面与CLSI方法一致性良好,可用于临床实验室曲霉体外药敏检测.

摘要： 为了解新疆奎屯地区不同团场牛源大肠杆菌对临床常用抗菌药物的耐药情况,比较不同养殖场之间牛源大肠杆菌的耐药差异.分别从新疆奎屯地区兵团第七师位于123团(30份)、127团(30份)和128团(30份)的牛场,用肛拭子在直肠采集粪样,并分离大肠杆菌.采用微量肉汤稀释法,对分离出的大肠杆菌进行10种抗菌药物最小抑菌浓度的测定,通过卡方检验对不同养殖场牛源大肠杆菌耐药差异性进行比较分析.结果显示:128团对阿莫西林/克拉维酸(33.3％)和安普霉素(23.3％)耐药率相对较高;127团对氨苄西林(20.0％)和氟苯尼考(16.7％)耐药率相对较高;123团场对氨苄西林(13.3％)和安普霉素(13.3％)耐药率相对较高.卡方检验结果显示:127团对氨苄西林、氟苯尼考和恩诺沙星的耐药率显著高于123团和128团(P＜0.05);128团对阿莫西林/克拉维酸和安普霉素的耐药率显著高于123团和127团(P＜0.05).不同团场多药耐药均以0耐和1耐为主.结果表明,新疆奎屯地区不同团场牛源大肠杆菌对多数被检药物的耐药率不高,仅对常用药物如阿莫西林/克拉维酸和安普霉素等具有较高耐药率,需在临床治疗细菌疾病时更换或避免使用此类抗菌药物.此外,各养殖场对被检抗菌药物的耐药情况不同,说明养殖场的用药极大程度影响细菌的耐药.

摘要： [目的]为了解江苏苏北部分地区肉鸡胴体中沙门菌多重耐药状况及耐药程度,对从江苏苏北地区的2个食品加工厂肉鸡胴体中分离的沙门菌进行耐药检测,并对多重耐药谱进行分析。[方法]采用美国CLSI推荐的微量肉汤稀释法测定分离株的耐药性。[结果]药敏试验显示,大多数沙门菌至少对三种以上的抗生素产生耐药,耐3～7种药物的有24株(33.8％),8～12种药物的有19株(26.8％),泛耐的有26株(36.6％)。71株沙门菌对抗生素的耐药情况是:奈啶酸(100％)、磺胺嘧啶(98.6％)、氨苄青霉素(97.2％)、复方磺胺甲恶唑(85.9％)、四环素(85.9％)、阿莫西林/克拉维酸(84,5％)。[结论]肉鸡胴体中沙门菌的耐药或多重耐药现象严重,说明江苏省苏北及周边地区畜牧养殖业在使用抗生素方面监管力度不够,未来应加强对饲科添加剂使用的安全性管理和抗生素耐药的主动监测。

摘要： 应用微量肉汤稀释法对从样品中随机抽取已分离鉴定的47株沙门氏菌进行耐药性监测。分析其对30种抗菌药物的耐药情况，并按照美国的NCCLS标准进行耐药性判断。结果表明，氟甲喹和培氟沙星的耐药率最高，达到了100.0%，其次是多粘菌素、复方新诺明，其耐药率都达到了95.0%以上，再次是链霉素、甲氧苄啶和多西环素，其耐药率在80.0%～90.O%之间，其余药物的耐药率均小于或等于60.0%;不同地区来源菌株耐药性存在差异。本次试验为指导兽医临床合理用药提供科学依据。

摘要： 采用微量肉汤稀释法对120株宠物医院分离的大肠杆菌进行头孢噻呋，恩诺沙星等14种抗生素的MIC值测定，以了解广州市宠物源性大肠杆菌的耐药情况。通过对其耐药谱型的调查分析，对其耐药机制的分析和研究，为指导宠物临床用药和耐药性及耐药性监测提供理论依据。

摘要： 目的：了解我院3年间侵袭性真菌感染的临床特点、病原菌分布及分离真菌对6种抗真菌药物(两性霉素B、氟胞嘧啶、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、卡泊芬净)的体外敏感性。方法：对我院2004年1月～2006年12月确诊及拟诊侵袭性真菌感染的病例(根据EORTC/MSG诊断标准)进行回顾性临床分析。并采用CLSI推荐的微量肉汤稀释法对临床分离株进行体外药敏试验。结果：本研究共入选侵袭性真菌感染病例147例。其中确诊(proven)140例，拟诊(probable)7例。感染部位以中枢神经系统感染最常见，占43.5％，其次为血流感染34.7％、肺部感染14.3％。病原真菌以念珠菌属最常见占57.9％，其次为隐球菌和曲霉，分别占32.6％和8.2％。属社区获得性感染73例，医院感染74例。社区感染和医院感染在感染部位、致病真菌及基础疾病方面均存在较大差异。侵袭性真菌感染病死率为15.0％(22/147)。其中医院感染病死率高于社区获得性深部真菌感染(18.9％和11.0％，但差异无统计学意义)。不同真菌感染的病死率以曲霉感染最高(33.3％)。本研究共获得临床分离念珠菌82株和隐球菌44株。药敏结果显示，念珠菌属对氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑的MIC90和国内外数据相似，白念珠菌和非白念珠菌对以下3种药物敏感率最高：氟胞嘧啶(100％，95.8％)、伏立康唑(98.3％，95.8％)、氟康唑(96.6％，85.7％)。隐球菌对两性霉素B及氟胞嘧啶敏感率均为95.5％，对伏立康唑、氟康唑及伊曲康唑显示相同的敏感率，为88.6％。和既往研究相比，本研究中伏立康唑对隐球菌的MIC90升高了6～7个稀释度，氟康唑和伊曲康唑对隐球菌的MIC90升高了1～2个稀释度。本研究观察到隐球菌对3种吡咯类药物显示交叉耐药现象。结论：我院3年间侵袭性真菌感染共147例。以中枢神经系统感染、血流感染及肺部感染最常见。病原真菌依次为念珠菌、隐球菌和曲霉。社区获得性真菌感染以隐球菌脑膜炎最多见，为本院特点。医院感染则以念珠菌血流感染最多见。侵袭性真菌感染病死率以曲霉感染最高。念珠菌属对氟胞嘧啶、氟康唑、伏立康唑敏感率最高，念珠菌属对氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑的MIC90和国内外数据相似。两性霉素B、氟胞嘧啶、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑对隐球菌仍具有良好的体外抗真菌活性，但隐球菌对3种吡咯类药物的敏感性较前有下降趋势。3种吡咯类药物在隐球菌中显示交叉耐药现象，需引起临床高度重视。

摘要： 本发明大体上涉及分析领域，例如生物分析领域。更具体地，本发明涉及检测放置于密闭容器内的样品中存在的至少一种微生物的方法，所述方法基本包括以下步骤：a)在所述容器内，使所述样品与至少一种培养基和能够捕获待检测的所述微生物的支持物接触；b)封闭所述容器；c)将所述容器放置于能够允许所述微生物生长的条件下；和d)在所述密闭容器内，使用检测工具检测固定于所述捕获支持物上的微生物的存在。

摘要： 本发明提供一种具有微细流路结构的微量流体设备，该微细流路结构在内部可容易且切实地提供各种稀释倍率的微量流体。设于基板(2)内的微细流路结构具有第一混合单元(11)和与该第一混合单元(11)的下游侧连接的第二混合单元(21)。各混合单元(11、21)分别具有第一～第三微细流路。由容积与一定量的第一微量流体的体积相等的微细流路构成的第一称取部(11d)的一端与第一微细流路(11a)连接，另一端朝设于第二微细流路(12)的汇合部(12a)开口。由容积与一定量的第二微量流体的体积相等的微细流路构成的第二称取部(13d)的一端与第三微细流路(13)连接，另一端朝汇合部(12a)开口。第一混合单元的第一～第三出口端中的任一个与第二混合单元(21)的第一或第三入口端连接。

摘要： 本发明提供了用于评估抗菌效力和确定杀灭细菌的多肽(包括溶素多肽)的最小抑制浓度(MIC)的组分、测定和方法。提供了改良的肉汤微量稀释组分和方法，包括补充剂以使得模拟人基质(包括血清和血液)中的溶素多肽活性的精确MIC测定成为可能。

摘要： 一组用于免疫检测技术，其特征是(一)以微量稀释法来基本克服HOOK效应：用一尖头物沾取微量标本，置入无吸附反应容器中，使微量标本参与反应，再加足量标本参与反应；(二)以扣除上清液法来避免常规洗涤：在与沉集物分离后，用无残留吸头将部分或全部上清液(或稀释上清液)吸入另一容器对照反应显示，再从沉集孔显示值扣除对照孔显示值(或经过计算的值)，就可得出沉集物中结合物的显示值，查出待测物含量；或将上清液(或稀释上清液)和沉集物在同一容器中分步反应显示，再算出沉集物的显示值，查出待测物浓度。两者可组合使用或分别使用。

摘要： 本发明公开了一种96孔微量稀释法检测支原体的药敏的检测方法，包括支原体菌株的准备，颜色变化单位的测定，药物的处理，支原体的最小抑菌浓度测定，本发明的检测方法采用无菌的96孔微量稀释板代替培养用的试管，稀释过程采用8道移液器同时对不同的药物进行稀释，简化了操作，同时稀释减小了不同药物之间的稀释误差。采用8道移液器进行稀释和加样品大大减少了工作量，也减少了反复开启试管塞造成得污染几率。并且对于药物得不同浓度，可以分别展开进行检测。更直观得将支原体与药物进行作用，得出药敏结果。

摘要： 一种应用于微量明胶颗粒凝集HIV-1近期感染检测法的抗原稀释液，属于生物技术领域，尤其是一种检测HIV－1近期感染中应用的试剂。本发明的稀释液由NaCl、KCl、Na

摘要： 一种应用于微量明胶颗粒凝集检测HIV-1近期感染法的血清或血浆样品稀释液，属于生物技术领域，尤其是一种检测HIV－1近期感染中应用的试剂。本发明的稀释液由缓冲液、30％TritonX100、NaN3和牛血清白蛋白按比例混合制备得。本发明的稀释液完全可以替代Dilsim

摘要： 本发明大体上涉及分析领域，例如生物分析领域。更具体地，本发明涉及检测放置于密闭容器内的样品中存在的至少一种微生物的方法，所述方法基本包括以下步骤：a)在所述容器内，使所述样品与至少一种培养基和能够捕获待检测的所述微生物的支持物接触；b)封闭所述容器；c)将所述容器放置于能够允许所述微生物生长的条件下；和d)在所述密闭容器内，使用检测工具检测固定于所述捕获支持物上的微生物的存在。

摘要： 本发明提供一种具有微细流路结构的微量流体设备，该微细流路结构在内部可容易且切实地提供各种稀释倍率的微量流体。设于基板(2)内的微细流路结构具有第一混合单元(11)和与该第一混合单元(11)的下游侧连接的第二混合单元(21)。各混合单元(11、21)分别具有第一～第三微细流路。由容积与一定量的第一微量流体的体积相等的微细流路构成的第一称取部(11d)的一端与第一微细流路(11a)连接，另一端朝设于第二微细流路(12)的汇合部(12a)开口。由容积与一定量的第二微量流体的体积相等的微细流路构成的第二称取部(13d)的一端与第三微细流路(13)连接，另一端朝汇合部(12a)开口。第一混合单元的第一～第三出口端中的任一个与第二混合单元(21)的第一或第三入口端连接。

摘要： 本申请提供一种血流感染病原阴性菌微量肉汤荧光药敏方法，包括：挑取单个菌落于培养基中过夜培养并进行12个梯度设计，测试菌浓度的OD625值；用无菌去离子水将缓冲液稀释，得到稀释后的缓冲液；将20μL ApoH磁珠、缓冲液以及培养后的菌落在37°C细菌培养摇床300rpm孵育15min，得到细菌‑ApoH磁珠混合物；将细菌‑ApoH磁珠混合物于4°C、12000rpm离心、弃上清以及重悬得到菌悬液；将菌悬液置于MS分离柱上过柱，得到过柱后的反应液；使用反应液进行96孔板荧光药敏试验。本申请提供所述方法检测血流感染病原菌时，由于利用的是磁珠富集原理来进行检测，而且磁珠富集细菌能够提高检测灵敏度，从而提高检测的阳性率和检出率。