细胞水平

摘要： 水生植物按挺水、浮水、沉水植物分成3类,分别列举出常见的具有化感抑藻作用的水生植物及其抑制藻类.总结出化感物质抑藻具有选择性、低促高抑等特点,同时不同化感物质之间还存在协同、相加和拮抗作用,并从光合系统、细胞膜、酶活性等细胞水平和基因水平出发介绍了水生植物化感抑藻的作用机制.针对水生植物日常代谢的化感物质浓度较低以及实验室效果能否较好地应用于工程项目,今后的研究重点将是具有高效抑藻作用的化感物质的人工提取或合成,及其在自然水体中的实际应用研究.

摘要： 苔草(Carex)为莎草科(Cyperaceae)苔草属(Carex L.)的多年生草本植物,具有耐荫、自繁能力强、多年生、种质资源丰富等特点,在园林绿化、草牧业生产、生态修复等方面发挥着越来越重要的作用.随着苔草属植物的广泛应用,种质资源进一步开发和新品种选育成为当前的重点,而遗传多样性研究是基础.本文综述了苔草属植物在形态、细胞及分子水平的遗传多样性研究进展.此外,还介绍了苔草属植物遗传多样性研究在新品种选育、品种鉴定、物种起源及亲缘关系、遗传图谱构建等方面的应用.最后对苔草属植物基因组开发、新品种培育进行展望,以期为今后苔草的遗传育种及进一步开发应用奠定基础.

摘要： [目的]建立一种体外细胞的甜度定量测定方法并应用于卷烟甜感评价,以弥补感官质量评吸存在的不足.[方法]通过构建小分子标签的重组甜味素受体细胞系,利用PTI钙离子成像技术检测钙离子的响应,建立甜度定量测定方法,应用于特色香料及烟气甜度测定.[结果]特色香料相对甜度值与烟气甜度值呈正相关,其中百香果提取物能获得较好烟气甜感与口腔甜感.[结论]此方法可用于以增加甜感为目的的卷烟烟用香精香料评价及烟气甜感评价.

摘要： 电离辐射是一种无阈值的致癌物,然而,长期低剂量电离辐射对机体的影响机制一直不甚清楚.放射工作人员是长期暴露在低剂量的电离辐射环境中的主体.本文通过调研国内外相关文献以期阐明低剂量电离辐射在细胞水平、组织或器官水平以及癌症发生风险等方面的影响.

摘要： 目的:探讨钙激活Cl-通道蛋白(CLCA)在急性呼吸窘迫综合征(ARDS)体外气道上皮细胞中的蛋白表达情况,并初步探讨其作用.方法:运用脂多糖(LPS)刺激16HBE细胞系,Western Blot检测hCLCA1蛋白表达水平与ARDS的时程关系;运用hCLCA1-siRNA干扰16HBE细胞系中hCLCA1的表达,real-time RT-PCR法检测细胞系中hCLCA1的mRNA和蛋白表达水平,验证siRN A是否对目的基因成功抑制.同时检测炎症因子的m RN A表达变化水平,观察CLCA的降低与炎症因子表达的关系.结果:Western Blot结果显示:16HBE细胞系加LPS(1μg/ml)刺激12h、24h后hCLCA1的蛋白表达量下降,且LPS刺激24h后hCLCA1的降低有统计学差异(P<0.05).real-time RT-PCR检测证实hCLCA1-siRNA对目的基因成功抑制,表明成功构建hCLCA1低表达的16HBE细胞系;同时real-time RT-PCR结果显示TNF-α和IL-1β的mRNA表达水平升高(P<0.05).结论:CLCA在LPS刺激后的培养HBE细胞系中蛋白表达水平下降,并表现为时间依赖性.抑制HBE细胞系hCLCA1的基因表达,则该细胞分泌炎症因子的水平升高,推测CLCA在ARDS体外气道上皮细胞分泌炎症介质过程中发挥负性调节作用.

摘要： 对枸杞发酵液以抗氧化和免疫调节功能为指标进行细胞水平评价研究.应用偶氮二异丁脒盐酸盐[2,2'-azobis(2-methylpropionamidine)dihydrochloride,AAPH]损伤HepG2细胞检测清除活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)的能力,研究其抗氧化能力;应用刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)和脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导小鼠T/B淋巴细胞检测其增殖能力,应用脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞,检测其中性红吞噬能力和一氧化氮(nitric oxide,NO)释放量,研究免疫调节能力.结果表明:枸杞发酵液能够清除细胞内ROS的含量、提高脾细胞的增殖能力、腹腔巨噬细胞的吞噬能力和NO释放量.枸杞发酵液具有较好的抗氧化能力和增强免疫的功能.

摘要： 骨是一种不断变化的器官,需要不断的重建,维持结构的完整性,满足运动系统及体内矿物稳定的需要.骨重建过程主要由破骨细胞的骨吸收活动与成骨细胞的骨形成活动达到偶联平衡.一旦偶联失衡,容易导致各种骨代谢疾病,如骨质疏松症等.目前骨重建致病机制尚不明确,因此,在细胞水平上了解骨重建过程,为骨代谢疾病的治疗提供潜在的药物靶点.

摘要： 本文研究上变频荧光纳米颗粒NaYF4：Yb，Er的生物学相容性，以及基于前列腺癌细胞水平生物成像的实验方法和效果。

摘要： 传统的MIRD剂量估算方法中假放射性药物在器官内均匀分布,用器官的平均剂量描述每个细胞及细胞核的剂量.实际上,放射性药物在细胞/亚细胞水平的分布是非均匀的.如有人估算载体为硫化胶体的Tc对人肝枯否氏细胞的剂量是平均值的1500倍.还有人估算载体为微球或巨聚集蛋白的Tc对人肺细胞的剂量,发现92％的细胞的剂量是平均值的1/4,而其它8％的细胞的剂量是平均值的3-7500倍.这表明放射性药物在亚细胞水平非均匀分布现象的存在.用MIRD器官平均剂量值描述单个细胞及细胞核的剂量,存在较大的误差.当进行核医学诊断和治疗时,了解放射性药物在细胞以及亚细胞水平的微剂量分布信息,对放射性药物在人体内的代谢及毒理学评价、正确拟定临床核医学详细的治疗计划有十分重要的意义.在核医学研究和临床诊治工作中,在放射分子生物学研究中,都急需有一套实用的微剂量分布研究技术,放射自显影术是实验核医学中研究微剂量分布的较好方法,为此本研究课题采用了放射自显影术和冰冻切片技术,为进行剂量计算建立了了自显影银颗粒与放射性药物强度的刻度曲线.观察了Tc-MIBI和Tc-DTPA两种放射性药物在小鼠肝脏和肾脏细胞水平的分布.

摘要： ALK6基因,也称BMPR1B,属TGF-β超家族受体成员,参与机体的多项生命活动.研究表明ALK6基因的点突变,Fecb突变,能够提高多种绵羊品种的排卵率和多胎率.因此,ALK6基因是一个非常具有育种价值的、提高水牛繁殖效率的候选靶基因.本研究以水牛为研究对象,以人、小鼠、牛和水牛的ALK6基因序列为模板,针对多物种的同源区域设计并构建4条CRISPR/Cas9载体,于细胞水平验证获得ALK6-cas2的打靶效率为30％左右,为高繁殖力水牛的培育奠定了基础.

摘要： 阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是一种神经变性疾病和最常见的痴呆形式,组织病理学上的两个典型特征为细胞内的神经元纤维缠结和细胞外的神经炎性斑.炎症过程在AD的发病过程起根本性作用,与AD相关的炎性成分包括脑细胞如小胶质细胞和星形细胞,补体系统,以及细胞因子和趋化因子.虽然炎症在AD中的角色仍然是有争议的,但是通过更好地理解AD炎症和免疫调节过程,应该有可能开发抗炎办法,它可能不能治愈AD,但可能会有助于减缓这种严重疾病的发作.本综述主要从细胞水平阐明参与的AD的活化及在促进神经炎症和接下来的行为改变所起的作用.

摘要： 现代生物科技飞速发展,为中药现代化提供了平台.本文在这个基础上建立了心脏的12个常规的离子通道细胞株,能够快速地筛选相关的中药单体.在相关的筛选中,在世界上首次筛选到Kir2.1通道的2个激动剂和多个钾离子通道的阻断剂,为这些单体的成药性提供的理论基础.

摘要： 21世纪的医学模式正在向分子医学模式转变。分子医学侧重于主要疾病的病理变化分子机制及其关键性研究技术的发展，核心任务是阐明人类疾病在分子、细胞和整体水平的生理、病理机制，并将有关成果转化为临床预测、诊断、预防和治疗的有效手段，是功能基因组时代生命科学发展的大趋势。分子医学强调细胞和分子现象，在分子和基因水平上认识疾病有别于以往传统医学偏重于病人机体和器官的观点，应用分子生物学方法检测患者体内遗传物质的结构或表达水平的变化而做出判断，运用医学影像学手段显示组织、细胞和亚细胞水平的特异分子标志物，反映机体在分子水平的变化，对机体生物学行为进行影像学定性和定量研究。个体化治疗是用先进的分子医学检测技术，对个体的药物相关基因进行检测。

摘要： 骨质疏松症(osteoporosis，OP)是指单位体积内骨量减少，骨组织显微结构的异常，导致骨脆性增加和易发生骨折为特征的全身性疾病。基于对细胞水平对骨质疏松发病机制的研究，研究者产生了应对骨质疏松的新思路，补充功能结构完整的干细胞、骨髓基质等进人骨质疏松者体内，从而调节机能紊乱补足功能和成骨诱导生长因子的不足，以此达到预防和治疗骨质疏松的目的。这样产生了包括骨髓移植、干细胞移植、成骨细胞移植在内的应对骨质疏松的新策略。

摘要： 以10日龄清远麻鸡鸡胚为研究材料，采用组织块直接培养法成功地构建了样本含量为60的成纤维细胞库。生物学分析结果表明：细胞群体倍增时间(PDT)约为24小时;50个核型中二倍体细胞占主体，为78—88％;乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)检测，未发生细胞交叉污染;细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性;转染效果好，能够表达外源基因。该细胞库的各项指标均达到ATCC细胞系鉴定标准。此项研究不仅在细胞水平上保存了清远麻鸡这一重要畜禽品种的种质资源，而且亦为其基因组和后基因组及体细胞克隆等研究提供宝贵试验材料。同时，此技术平台的建立必将为其它畜禽遗传资源细胞水平的保存提供技术与理论支撑和保障。

摘要： 本发明涉及能够比人体外周血的自然杀伤细胞产生更高水平的自然杀伤细胞受体并且具有优秀的杀伤活性及很高的γ‑干扰素生产能力的记忆样自然杀伤细胞的制备方法、通过上述方法制备的记忆样自然杀伤细胞以及利用上述记忆样自然杀伤细胞的癌症治疗方法。

摘要： 本发明的目的在于提供：一种用于定量评估单个细胞的活性的方法；以及用于其的装置。这种细胞观察装置配备有细胞导入部、细胞排列部、观察部和分析部，其中：细胞导入部将一个或多个细胞引入到细胞排列部；细胞排列部排列引入的一个或多个细胞；观察部观察在细胞排列部中由细胞接触所引起的时序事件，并且分析部分析由细胞接触引起的时序事件。

摘要： 本发明的可提高无细胞蛋白质表达水平的真核生物细胞和方法，通过对真核生物细胞的基因组DNA中，在编码eIF4E蛋白质的基因编码序列末端，融合表达His标签的编码序列，从而对在真核生物细胞的生命过程中，合成体内蛋白质、所必须的eIF4E蛋白上，插入His标签。而完成改造后的真核生物细胞，在细胞培养和增殖到设定数量后，被裂解并提取上清液，用于体外蛋白合成。实验证实，这可以促进体外合成目的蛋白质的表达水平。所述目的蛋白质包括任一可经由核糖体合成的多肽及蛋白质分子。本发明的可提高无细胞蛋白质表达水平的真核生物细胞，能够应用于合成任何不依赖于5’‑Cap的、由核糖体合成的多肽和蛋白质的体外蛋白合成体系，具有广泛的应用前景。

摘要： 本发明的可提高无细胞蛋白质表达水平的真核生物细胞和方法，通过对真核生物细胞的基因组DNA中，在编码4E‑BP蛋白质的基因编码序列末端，融合表达His标签的编码序列，从而对在真核生物细胞的生命过程中，合成体内蛋白质、所必须的eIF4E蛋白上，插入His标签。而完成改造后的真核生物细胞，在细胞培养和增殖到设定数量后，被裂解并提取上清液，用于体外蛋白合成。实验证实，这可以促进体外合成目的蛋白质的表达水平。所述目的蛋白质包括任一可经由核糖体合成的多肽及蛋白质分子。本发明的可提高无细胞蛋白质表达水平的真核生物细胞，能够应用于合成任何不依赖于5’‑Cap的、由核糖体合成的多肽和蛋白质的体外蛋白合成体系，具有广泛的应用前景。

摘要： 本发明的可提高无细胞蛋白质表达水平的真核生物细胞和方法，通过对真核生物细胞的基因组DNA中，在编码eIF4E蛋白质的基因编码序列末端，融合表达His标签的编码序列，从而对在真核生物细胞的生命过程中，合成体内蛋白质、所必须的eIF4E蛋白上，插入His标签。而完成改造后的真核生物细胞，在细胞培养和增殖到设定数量后，被裂解并提取上清液，用于体外蛋白合成。实验证实，这可以促进体外合成目的蛋白质的表达水平。所述目的蛋白质包括任一可经由核糖体合成的多肽及蛋白质分子。本发明的可提高无细胞蛋白质表达水平的真核生物细胞，能够应用于合成任何不依赖于5’‑Cap的、由核糖体合成的多肽和蛋白质的体外蛋白合成体系，具有广泛的应用前景。

摘要： 本发明提供了一种间充质干细胞对家犬炎症水平和细胞增殖作用的评价方法及应用，涉及作用评价技术领域。本发明所述评价方法结合血浆中炎症因子表达水平和转录组分析结果，综合评价间充质干细胞延缓衰老的效果。经本发明实施例验证，通过注射间充质干细胞的方式评价间充质干细胞对昆明犬的延缓衰老作用，结果显示间充质干细胞通过调节血浆中炎症因子的蛋白浓度、炎症反应和细胞增殖相关基因的表达，从而达到减轻炎症反应、促进细胞增殖的作用，起到延缓衰老的目的。

摘要： 本发明公开了活细胞水平上改变基因启动子内特定顺式作用元件甲基化修饰水平的方法。所述的方法包括以下步骤：(1)构建目的基因野生型启动子荧光素酶载体；(2)构建带有特定限制性内切酶位点的目的基因突变型启动子荧光素酶载体；(3)获得目的基因启动子区仅特定顺式作用元件高甲基化(>90％)的环形pGL3质粒。将所得环形质粒直接转染U251细胞，利用荧光素酶报告系统分析各顺式作用元件甲基化修饰改变对基因启动子活性的影响。通过特定序列甲基化再环形质粒法，实现了活细胞内目的基因启动子上特定顺式作用元件甲基化修饰水平的改变，以此方法可深入探讨同一启动子内不同顺式作用元件甲基化修饰水平变化对基因转录活性的影响。

摘要： 本发明公开了活细胞水平上改变基因启动子内特定顺式作用元件甲基化修饰水平的方法。所述的方法包括以下步骤：(1)构建目的基因野生型启动子荧光素酶载体；(2)构建带有特定限制性内切酶位点的目的基因突变型启动子荧光素酶载体；(3)获得目的基因启动子区仅特定顺式作用元件高甲基化(>90％)的环形pGL3质粒。将所得环形质粒直接转染U251细胞，利用荧光素酶报告系统分析各顺式作用元件甲基化修饰改变对基因启动子活性的影响。通过特定序列甲基化再环形质粒法，实现了活细胞内目的基因启动子上特定顺式作用元件甲基化修饰水平的改变，以此方法可深入探讨同一启动子内不同顺式作用元件甲基化修饰水平变化对基因转录活性的影响。

摘要： 本发明公开了一种在单细胞水平上同时可视化和定量细胞累积金属纳米颗粒的方法，包括步骤一：将累积了一系列浓度金属纳米颗粒的细胞样品分别分为两组，一组用ICP‑MS定量细胞累积的金属纳米颗粒，另一组用高光谱技术定量细胞累积的金属纳米颗粒；步骤二：根据步骤一两种定量结果之间的对应关系建立绝对定量的标准曲线；步骤三：计算高光谱图片中单个细胞内金属纳米颗粒面积和细胞面积的比值，根据步骤二中的绝对定量的标准曲线，绝对定量单个细胞累积的金属纳米颗粒。

摘要： 本发明属于微流控技术领域，具体涉及了一种基于单细胞水平检测循环肿瘤细胞分泌物的微流控芯片系统。所述系统包微流控芯片、微液滴孵育设备、光源设备、检测设备。其中，芯片由一级螺旋结构和二级微液滴形成结构构成；一级螺旋结构包含血液样品入口、周期性扩张的螺旋通道、血细胞出口、将目标肿瘤细胞输出到二级结构的连接通道；二级结构包含分泌物检测底物入口、蛇形混合通道、油相入口、十字形液滴生成结构、微液滴出口。以本发明建立集成循环肿瘤细胞分选、封装单个循环肿瘤细胞于微液滴的微流控芯片系统可以实现循环肿瘤细胞分离和分泌物检测连续进行的目的。