肌细胞

摘要： 目的探讨分泌型丛生蛋白(sCLU)对心肌细胞氧化损伤的影响及其机制。方法采用大鼠心肌细胞H9C2。实验1分为Control组(仅更换培养基)和H_(2)O_(2)组(100μmol/L H_(2)O_(2)处理)。实验2分为Control组、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1对照空质粒)、pcDNA3.1-sCLU组(转染pcDNA3.1-sCLU过表达质粒)、H_(2)O_(2)组(100μmol/L H_(2)O_(2)处理)、H_(2)O_(2)+pcDNA3.1组(pcDNA3.1对照空质粒转染48 h后加入100μmol/L H_(2)O_(2)处理)、H_(2)O_(2)+pcDNA3.1-sCLU组(pcDNA3.1-sCLU过表达质粒转染48 h后加入100μmol/L H_(2)O_(2)处理)。实验3分为DMSO组(加入1%体积分数的DMSO)、Mdivi-1组(10μmol/L的Mdivi-1处理)、H_(2)O_(2)+DMSO组(加入1%体积分数的DMSO处理30 min后加入100μmol/L的H_(2)O_(2)处理)、H_(2)O_(2)+Mdivi-1组(10μmol/L的Mdivi-1处理30 min后加入100μmol/L的H_(2)O_(2)处理)、H_(2)O_(2)+pcDNA3.1-sCLU组(pcDNA3.1-sCLU过表达质粒转染48 h后加入100μmol/L H_(2)O_(2)处理)、H_(2)O_(2)+pcDNA3.1-sCLU+Mdivi-1组(pcDNA3.1-sCLU过表达质粒转染48 h后加入10μmol/L的Mdivi-1处理30 min,再加入100μmol/L H_(2)O_(2)处理)。采用MTT法检测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡,试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)水平。DFCH-DA荧光探针测定细胞活性氧(ROS)水平。实时定量聚合酶链式反应和酶联免疫吸附试验检测细胞中sCLU表达,Western blot法检测CLU、PINK1、Parkin和LC3蛋白表达水平。结果(1)实验1。与Control组比较,H_(2)O_(2)组细胞中sCLU mRNA、细胞培养上清中sCLU蛋白及细胞中CLU蛋白相对表达水平均降低(P<0.01)。(2)实验2。与Control组比较,H_(2)O_(2)组细胞活力、SOD水平、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均降低,细胞凋亡率、ROS水平、MDA水平、PINK1和Parkin蛋白表达水平均升高(P<0.05);与H_(2)O_(2)组比较,H_(2)O_(2)+pcDNA3.1-sCLU组细胞活力、SOD水平、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均升高,细胞凋亡率、ROS水平、MDA水平、PINK1和Parkin蛋白表达水平均降低(P<0.05)。(3)实验3。与DMSO组比较,Mdivi-1组细胞活力与细胞凋亡率差异无统计学意义;H_(2)O_(2)+DMSO组细胞活力下降,细胞凋亡率升高(P<0.05)。与H_(2)O_(2)+DMSO组比较,H_(2)O_(2)+Mdivi-1组、H_(2)O_(2)+pcDNA3.1-sCLU组和H_(2)O_(2)+pcDNA3.1-sCLU+Mdivi-1组细胞活力均升高,细胞凋亡率均下降(P<0.05)。与H_(2)O_(2)+Mdivi-1组比较,H_(2)O_(2)+pcDNA3.1-sCLU组和H_(2)O_(2)+pcDNA3.1-sCLU+Mdivi-1组细胞活力差异无统计学意义,细胞凋亡率降低(P<0.05)。结论sCLU对氧化应激条下的心肌细胞具有保护作用,其机制可能与线粒体自噬的抑制有关。

摘要： 目的 探究E3泛素连接酶FBXO40在心肌细胞增殖过程中的调控作用。方法 转染si-FBXO40小干扰RNA和FBXO40过表达载体分别敲低和过表达原代心肌细胞中的FBXO40,利用实时定量PCR(qPCR)方法检测经上述处理后原代心肌细胞中增殖相关标记基因(cdc20、Cyr61、Ccna2、Aurkb)的表达水平;转染FBXO40过表达载体以及si-FBXO40小干扰RNA,在24 h后利用CCK-8方法进一步检测原代心肌细胞增殖情况。结果 与对照组相比,过表达FBXO40的原代心肌细胞中与细胞增殖相关基因Ccna2、Cdc20、Aurkb和Cyr61的表达明显上调,差异具有统计学意义(t=2.20~3.90,P<0.05)。与对照组相比,敲低FBXO40表达的原代心肌细胞中促增殖基因Cyr61的表达明显下降,差异有统计学意义(t=10.96,P<0.05)。CCK-8检测显示,FBXO40过表达组的吸光度值高于对照组,敲低组的吸光度值低于对照组,差异有统计学意义(F=6.72,P<0.05)。结论 FBXO40在心肌细胞增殖过程中具有重要的调控作用,可促进心肌细胞增殖。

摘要： 目的观察果糖二磷酸钠后处理对老年大鼠体外缺血再灌注心肌的保护作用。方法选择健康清洁级老年雄性SD大鼠60只,随机分为对照组(A组)、缺血再灌注组(B组)、环孢霉素组(C组)和果糖二磷酸钠后处理组(D组),每组15只。记录平衡末(T_(0))、缺血前1 min(T_(1))、再灌注后10 min(T_(2))、20 min(T_(3))和60 min(T_(4))各时间点心率、左心室发展压(LVDP)和左心室压力上升和下降最大速率(±dp/dt_(max))。实验结束后采用电镜观察心肌线粒体变化情况,并检测烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^(+))和线粒体细胞色素C含量。结果B组、C组、D组T_(2)~T_(4)时心率、LVDP和±dp/dt_(max)较A组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与B组比较,C组、D组T_(2)~T_(4)时心率、LVDP和±dp/dt_(max)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与A组比较,B组、D组线粒体表面积与体积比明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与B组比较,C组、D组线粒体表面积与体积比明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。B组线粒体直径较A组明显增加,而C组、D组线粒体直径较B组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与A组比较,B组、C组、D组心肌细胞NAD^(+)和线粒体细胞色素C含量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);与B组比较,C组、D组心肌细胞NAD^(+)和线粒体细胞色素C含量明显升高[(9.17±0.96)μmol/L、(8.39±0.57)μmol/L vs(6.68±0.70)μmol/L,(0.37±0.06)μmol/g、(0.34±0.07)μmol/g vs(0.23±0.05)μmol/g,P<0.05]。结论果糖二磷酸钠后处理通过抑制线粒体通透性转换孔开放保护线粒体,减轻缺血再灌注对老年大鼠体外心肌的损伤。

摘要： 目的探讨曲美他嗪(TMZ)通过mTOR信号通路抑制过度自噬对大鼠心肌细胞损伤的作用。方法利用乳鼠原代心肌细胞构建心肌细胞损伤模型。按照不同处理方法将细胞分为对照组(Control组)、模型组(Model组)、Model+TMZ组、Model+西罗莫司(RAPA)组、Model+TMZ+RAPA组。检测各组细胞凋亡情况、乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,观察各组自噬小体及自噬流,并检测LC3-Ⅰ/Ⅱ、P62、Bax、Bcl-2、Caspase-3及mTOR蛋白表达水平。结果Model组细胞凋亡率、LDH、LC3-Ⅰ/Ⅱ、Bax、Caspase-3水平高于Control组,Model+TMZ组低于Model组,Model+RAPA组和Model+TMZ+RAPA组高于Model+TMZ组(P<0.05);Model组SOD、P62、Bcl-2、mTOR水平低于Control组,Model+TMZ组高于Model组,Model+RAPA组和Model+TMZ+RAPA组低于Model+TMZ组(P<0.05)。Model组心肌细胞自噬荧光积累,自噬流增加,加入TMZ后抑制受损心肌细胞中的自噬流,自噬小体数量减少,RAPA可部分抵消TMZ抑制自噬的作用。结论TMZ可能通过激活mTOR通路抑制过度自噬,减轻心肌细胞损伤及凋亡。

摘要： 目的 探讨丹参多酚酸盐对黄曲霉素B1(AFB1)诱导下大鼠心肌细胞(H9C2细胞)氧化应激损伤的影响。方法 用不同浓度的AFB1处理H9C2细胞,通过CCK-8法检测细胞活力以确定最佳氧化损伤模型AFB1浓度(128μmol/L)。实验分为正常对照组(用DMEM培养液培养H9C2细胞)、AFB1诱导模型组(在正常对照组基础上加入128μmol/L AFB1)和低、中、高浓度丹参多酚酸盐干预组(128μmol/L AFB1+丹参多酚酸盐浓度分别为5、20、40 mg/L)。采用CCK-8法测定各组细胞的存活率,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化,DCFH-DA染色检测细胞内活性氧(ROS)水平,Western blot方法检测氧化应激相关蛋白过氧化物歧化酶2(SOD2)和过氧化氢酶(CAT)蛋白的表达。结果 与正常对照组比较,AFB1诱导模型组的细胞形态发生明显改变,细胞相对存活率降低,细胞内ROS升高,细胞内SOD2、CAT蛋白表达降低;与AFB1诱导模型组相比较,高浓度丹参多酚酸盐干预组的细胞形态有所改善,细胞相对存活率增加,细胞内ROS明显降低,SOD2、CAT蛋白表达有所上调,差异均有统计学意义(F=8.023~226.937,P<0.05)。结论 丹参多酚酸盐可通过改善抗氧化酶活力、减少ROS的产生、减少氧化应激损伤,改善AFB1诱导的H9C2心肌细胞损伤。

摘要： 线粒体是有氧呼吸的主要场所,在缺氧条件下,线粒体的形态及能量代谢会发生一系列的变化去适应有限的氧环境。该研究从目前国内外的研究现状出发,分析了缺氧环境下,心肌细胞、脑细胞、肺动脉平滑肌细胞及骨骼肌细胞的线粒体能量产生异常、线粒体膜电位及膜通透性改变、钙离子超载、活性氧产生过多,引起氧化应激、自噬及凋亡等反应,造成线粒体功能障碍,从而引起机体组织损伤;指出了线粒体在适应缺氧过程中的重要性;最后总结了目前关于缺氧对线粒体影响的研究局限性及未来研究方向。

摘要： 目的探讨长链非编码RNA胰岛素样生长因子2反义转录物(lncRNA IGF2-AS)调控胰岛素样生长因子2(IGF2)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)心肌样分化的影响。方法分离培养SD大鼠的BMSCs,倒置显微镜观察原代细胞、第3代细胞的形态;流式细胞仪检测BMSCs表面抗原CD29、CD90、CD45的表达。将第3代生长良好的BMSCs分为对照组、空载体组(转染p LVX-IRES-Zs Green1载体)、lncRNA IGF2-AS组(转染pLVX-IRES-Zs Green1-IGF2-AS)、5-氮杂胞嘧啶(5-AZA)组(8μmol/L 5-AZA处理)、si-NC组、si-IGF2-AS组、si-IGF2组、lncRNA IGF2-AS+siNC组及lncRNA IGF2-AS+si-IGF2组。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测IGF2-AS表达;MTT法检测细胞活力;Western blot检测IGF2、间隙连接蛋白43(Cx43)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)蛋白表达;RNA下拉和RNA免疫沉淀(RIP)检测IGF2-AS与IGF2蛋白结合情况。结果原代细胞在培养初期呈悬浮状态,大多数呈圆形,培养48 h后开始贴壁生长;第3代细胞呈长梭形,排列不整齐,相邻细胞间紧密连接,呈成纤维细胞样。第3代BMSCs高表达CD29(98.21%)、CD90(92.54%),低表达CD45(3.67%)。过表达IGF2-AS或5-AZA处理均可促进BMSCs中Cx43、c TnT、c TnI蛋白表达,并降低细胞活力,且5-AZA组相应指标明显低于lncRNA IGF2-AS组(P<0.05)。沉默IGF2-AS或抑制IGF2表达均可降低BMSCs中Cx43、cTnT、cTnI蛋白表达,并降低细胞活力(P<0.05);lncRNA IGF2-AS可靶向上调IGF2蛋白的表达(P<0.05);沉默IGF2逆转了过表达IGF2-AS对BMSCs心肌样分化的促进作用。结论过表达IGF2-AS通过上调IGF2促进BMSCs心肌样分化。

摘要： 随着人口老龄化的加重,心律失常尤其是心房颤动发病率逐年升高,后者不但会加重原有心脏疾病,而且可能诱发心源性猝死[1]。近年来,固有免疫在心血管疾病中的作用和机制不断被揭示:一方面可以影响心肌细胞的电偶联,另一方面可以促进心肌组织发生纤维化,因而在心律失常的触发、维持中具有关键作用[2]。了解固有免疫系统特别是单核巨噬细胞与心肌细胞通过何种途径进行细胞通讯,有助于阐明心律失常的免疫病理机制,发现新的诊断和治疗靶点。

摘要： 心房颤动(房颤)是临床上最常见的快速型心律失常,不仅使患者住院率上升,并增加脑卒中、系统性栓塞及心力衰竭等并发症风险,还增加患者病死率[1-3]。因此对房颤的早期干预,显得尤为重要。其中钠尿肽家族的第一个成员心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide, ANP)引起了人们的极大关注。ANP主要是由心房肌细胞合成并释放的肽类激素,其分泌的主要刺激是由于容量或压力超负荷而使心房肌细胞的机械性牵拉。

摘要： 目的探讨吡格列酮对高糖高脂诱导H9C2心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法体外培养H9C2心肌细胞,通过CCK-8法进行细胞毒性试验分别确定高糖(HG)和棕榈酸(PA)最佳干预浓度,选取0.1 mmol/L PA和50 mmol/L HG共同培养细胞建立高糖高脂损伤模型,不同浓度吡格列酮(PGZ)干预高糖高脂损伤细胞12、24及48 h后通过CCK-8试验选取有效的干预浓度和干预时间。随后细胞分为:对照组(25 mmol/L葡萄糖)、溶剂组(棕榈酸溶剂+二甲基亚砜)、HGPA组(50 mmol/L葡萄糖+0.1 mmol/L PA)、H-PGZ组(10μmol/L PGZ+HGPA)和L-PGZ组(5μmol/L PGZ+HGPA),采用AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;DCFH-DA法检测活性氧簇(ROS)水平;微板法检测丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)水平;Western blot法检测蛋白激酶B(T-AKT)、磷酸化蛋白激酶B(P-AKT)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白激酶3(Caspase3)、剪切化半胱氨酸天冬氨酸蛋白激酶3(C-Caspase3)、B-淋巴细胞瘤基因-2(BCL-2)、BCL-2相关X蛋白(BAX)的蛋白表达。NAC(1 mmol/L N-乙酰半胱氨酸)+HGPA组和HGPA组干预24 h后检测上述AKT通路及凋亡相关蛋白表达。结果48 h内0、0.05、0.1、0.2、0.4 mmol/L PA组H9C2细胞活力依次降低;12 h时,与25 mmol/L葡萄糖组比较,50、75以及100 mmol/L葡萄糖组细胞活力增加,24 h、48 h时25、35、50、75、100 mmol/L葡萄糖组细胞活力依次增加;与对照组比较,48 h内HGPA组细胞活力降低(P<0.05);与HGPA组比较,12 h时80μmol/L组细胞活力降低(P<0.05),24 h时10μmol/L PGZ组细胞活力增加,40、80μmol/L PGZ组细胞活力降低(P<0.05),48 h时5、10和20μmol/L PGZ组细胞活力增加,40、80μmol/L PGZ组细胞活力降低(P<0.05);与对照组比较,HGPA组凋亡率、ROS、MDA、C-Caspase3、BAX表达明显升高,SOD、P-AKT、BCL-2表达降低(P<0.05);HGPA组、L-PGZ组、H-PGZ组的凋亡率、ROS、MDA、C-Caspase3、BAX依次降低,SOD、P-AKT、BCL-2表达依次升高(P<0.05)。与HGPA组比较,NAC+HGPA组C-Caspase3表达降低,P-AKT、Caspase3表达升高(P<0.05)。结论PGZ对ROS有抑制作用,可以促进AKT通路的活化,减轻高糖棕榈酸诱导的H9C2心肌细胞凋亡。

摘要： 骨骼肌的生长发育与营养物质代谢功能息息相关，而胰岛素是调控营养物质代谢的重要激素。水解磷脂酰肌醇(PI)的肌醇多磷酸5-磷酸酶家族成员对细胞的代谢信号和膜运输起重要调节作用。其中包含SH2结构的肌醇多磷酸5-磷酸酶(SHIP2)能通过水解胰岛素介导的脂质第二信使PI(3，4，5)P3，负调控PI3K/Akt/mTOR依赖的胰岛素信号通路，是影响动物个体生长速度的候选基因。研究SHIP2基因在骨骼肌细胞中的表达调控机制，有利于阐明SHIP2参与影响骨骼肌生长发育的方式。

摘要： 目的:探讨游泳运动对大鼠血管平滑肌细胞中间纤维和超微结构的影响,为运动对血管的生理和病理变化研究提供一定的形态学依据。rn 方法:SD大鼠进行1次力竭游泳(SE)和1周力竭游泳(SCDE)和8周不同强度的耐力游泳训练(EST),并在运动后不同时间,取胸主动脉半滑肌分别进行石蜡切片样本处理和常规透射电镜样本处理,石蜡切片分别进行结蛋白和波形蛋白的免疫组织化学染色(Envision法),观察比较各组结蛋白和波形蛋白的分布,计算其平均光密度和阳性面积的改变,电镜观察肌细胞内超微结构的改变。rn 结果:1次力竭运动后血管平滑肌的结蛋白、波形蛋白和超微结构与对照组相比,未见明显改变；经过1周力竭运动训练后,平滑肌的结蛋白和波形蛋白表达降低,超微结构可见损伤性改变。8周耐力训练后,小强度组(LIT)的结蛋白、波形蛋白和超微结构与对照组相比,未见明显改变；中强度组(MIT)的结蛋白和波形蛋白明显增加,且超微结构也产生适应性改变；大强度组(HIT)的结蛋白和波形蚩白显著减少,同时超微结构可见损伤性改变。rn 结论:(1)结蛋白和波形蛋白是肌细胞中间纤维的主要成分,它们对维持正常肌细胞的超微结构有着重要的作用；(2)不同游泳时间的运动对大鼠平滑肌肌细胞中间纤维和超微结构产生不同的影响,中间纤维蛋白降低或者增加,肌细胞超微结构也有相应的变化:(3)运动后恢复过程中大鼠肌细胞的中间纤维和超微结构也有不同变化；(4)大鼠平滑肌中间纤维运动后变化规律不同于心肌、骨骼肌中间纤维运动后变化规律。

摘要： 目的：定量研究人抵抗素对肌细胞胰岛素敏感性的影响及其机制。rn 方法：构建人抵抗素基因真核表达质粒,转染C2C12和COS7细胞。(1)诱导转染人抵抗素质粒和空质粒的C2C12细胞分化,以2-脱氧-D-[3H]-葡萄糖摄入法检测葡萄糖的转运率;半定量RT-PCR方法检测IR和GLUT4基因的表达;测定细胞增殖曲线和细胞周期;考察细胞分化情况。(2)用COS7细胞条件培养基作用分化的C2C12,检测葡萄糖的转运率。rn 结果：稳定转染人抵抗素的C2C12细胞分化后葡萄糖的转运率显著降低,IR和GLUT4表达下调;细胞增殖显著,细胞周期S期上调,G0/G1期下调,细胞分化Marker Desmin和Myoglobin表达受到显著抑制;而人抵抗素转染COS7细胞的条件培养基对分化的C2C12细胞葡萄糖的转运宰无显著影响。rn 结论：人抵抗素对肌细胞的葡萄糖摄取无直接影响,但可能通过抑制肌细胞的分化和促进成肌细胞的增殖来损害胰岛素敏感性。

摘要： 目的:比较真核细胞表达质粒混合与单独接种对各自表达的影响.方法:在小鼠肌组织内单独或混合接种编码HBV主蛋白、HCV-CE抗原的两种真核细胞表达质粒,取不同时间肌组织进行免疫组化检测,进行比较分析.结果:混合接种后相应蛋白均能够表达,但表达强度及持续时间明显不及单独免疫.结论:两种直接表达质粒可以在小鼠肌细胞内表达,但其程度较弱,可能与相对较弱的体液免疫应答有关.

摘要： 本文通过药物治疗，基因治疗和细胞治疗的手段来对DMD疾病达到治疗的目的，药物治疗仍是目前临床上治疗DMD的主要手段。然而DMD的基因治疗集中在利用一种安全的载体将dystropin基因带入DMD患者的肌细胞，恢复肌细胞dystrophin的表达，阻止肌细胞的变性坏死。细胞治疗则是通过成肌细胞移植和干细胞移植治疗来完成的。

摘要： 宰前应激在我国猪肉生产中普遍存在。本文旨在研究宰前应激对肉质的影响以及肉质的变化与应激激素之间的关系。并通过体外细胞模型来模拟应激状态下应激激素对肌细胞的影响。结果表明：宰前导致应激激素显著上升(P<0.05)，同时大部分肉质指标也发生显著的变化(P<0.05)。相关分析表明：宰前应激状态下，应激激素的变化与大部分肉质指标存在着显著相关(P<0.05)。细胞应激模型表明：地塞米松(DEX)对肌细胞有明显的细胞毒性，同时下调GRα基因的表达。BAX基因表达量随DEX刺激浓度的增加而上调，Bcl-2与之相反。且均具有浓度依赖效应。等浓度的RU486能够完全抑制DEX的生物学效应。推测宰前应激可能通过应激激素与GRα结合发挥其对肌肉组织的毒性作用，这种作用可能通过BAX/Bcl—2来实现对肉质的改变。

摘要： 运动生物力学这门学科在国内外经历了几十年的发展,已经从宏观的研究层面逐步向微观层面的研究发展,这得益于生物力学技术研究方法和技术的进步.生物力学研究的热点领域之一就是分子生物力学研究,近几十年来主要在力学-生物学、力学-化学耦合等方面取得了重要的进展.运动生物力学的研究目前也朝着分子层面不断深入,在骨细胞生长的力学参数等研究方面也取得了相应研究成果.本文就是从分子运动生物力学方面入手,介绍其相应的研究方法与技术的发展与应用,并对未来本学科的发展趋势做出相应的展望.通过对运动生物力学的相关研究方法与技术的发展,以及当前在分子-细胞水平层面上的方法与技术进行归纳研究,介绍其发展情况,并对未来应用在分子-细胞水平上的运动生物力学方法与技术进行展望.

摘要： 运动生物力学这门学科在国内外经历了几十年的发展,已经从宏观的研究层面逐步向微观层面的研究发展,这得益于生物力学技术研究方法和技术的进步.生物力学研究的热点领域之一就是分子生物力学研究,近几十年来主要在力学-生物学、力学-化学耦合等方面取得了重要的进展.运动生物力学的研究目前也朝着分子层面不断深入,在骨细胞生长的力学参数等研究方面也取得了相应研究成果.本文就是从分子运动生物力学方面入手,介绍其相应的研究方法与技术的发展与应用,并对未来本学科的发展趋势做出相应的展望.通过对运动生物力学的相关研究方法与技术的发展,以及当前在分子-细胞水平层面上的方法与技术进行归纳研究,介绍其发展情况,并对未来应用在分子-细胞水平上的运动生物力学方法与技术进行展望.

摘要： 运动生物力学这门学科在国内外经历了几十年的发展,已经从宏观的研究层面逐步向微观层面的研究发展,这得益于生物力学技术研究方法和技术的进步.生物力学研究的热点领域之一就是分子生物力学研究,近几十年来主要在力学-生物学、力学-化学耦合等方面取得了重要的进展.运动生物力学的研究目前也朝着分子层面不断深入,在骨细胞生长的力学参数等研究方面也取得了相应研究成果.本文就是从分子运动生物力学方面入手,介绍其相应的研究方法与技术的发展与应用,并对未来本学科的发展趋势做出相应的展望.通过对运动生物力学的相关研究方法与技术的发展,以及当前在分子-细胞水平层面上的方法与技术进行归纳研究,介绍其发展情况,并对未来应用在分子-细胞水平上的运动生物力学方法与技术进行展望.

摘要： 运动生物力学这门学科在国内外经历了几十年的发展,已经从宏观的研究层面逐步向微观层面的研究发展,这得益于生物力学技术研究方法和技术的进步.生物力学研究的热点领域之一就是分子生物力学研究,近几十年来主要在力学-生物学、力学-化学耦合等方面取得了重要的进展.运动生物力学的研究目前也朝着分子层面不断深入,在骨细胞生长的力学参数等研究方面也取得了相应研究成果.本文就是从分子运动生物力学方面入手,介绍其相应的研究方法与技术的发展与应用,并对未来本学科的发展趋势做出相应的展望.通过对运动生物力学的相关研究方法与技术的发展,以及当前在分子-细胞水平层面上的方法与技术进行归纳研究,介绍其发展情况,并对未来应用在分子-细胞水平上的运动生物力学方法与技术进行展望.

摘要： 本发明涉及细胞片的制造方法，所述方法包含下述工序：在使动物细胞朝培养液的中央方向集中的同时对培养液中分散的动物细胞进行悬浮培养，在所述培养液中形成悬浮的细胞片。

摘要： 本发明的课题在于，改善纯化至不含有心肌细胞以外的细胞且不含有来源于其他物种的成分的心肌细胞在移植后的存活率。为了解决上述课题，本发明人等就经纯化的心肌细胞是否能够构筑细胞块进行了研究。其结果明确了：通过提供一种制备来源于多能干细胞的心肌细胞的细胞块的方法，可以解决上述课题。该方法的特征在于，将心肌细胞用无血清条件下的培养基进行培养，使该细胞聚集，所述心肌细胞为如下的心肌细胞：使包含由多能干细胞分化、诱导出的心肌细胞的、聚集状态的细胞块分散并单细胞化，从而得到的经纯化的来源于多能干细胞的心肌细胞。

摘要： 本发明以开发下述方法的课题，即，利用了在目前以纯化心肌细胞为目的研究中从未想到过利用的诸多性质、以及新发现的诸多性质，可在不改变遗传基因，不添加特别的蛋白质及生理活性物质的情况下，从含有来源于胚胎及干细胞的心肌细胞的细胞混合物中，高度且高收率的纯化心肌干细胞。本发明者们发现，通过在低血清条件、低糖条件、低营养条件、低钙条件、弱酸性pH条件、添加乳酸条件、添加天门冬氨酸·谷氨酸条件、和/或添加丙酮酸条件的培养液中培养胚胎干细胞来源的心肌细胞，可有效且高收率的选择和纯化心肌细胞。另外，还发现在胚胎干细胞中发现的方法还可应用于胎儿来源的心肌细胞的选择和纯化、或成体干细胞来源的心肌细胞的选择和纯化。

摘要： 本发明涉及产生胚胎干细胞来源的心肌细胞的方法和由所述方法产生的心肌细胞、由心肌细胞产生心肌细胞聚集体的方法和由所述方法产生的心肌细胞聚集体、用于治疗心脏病的包含所述心肌细胞聚集体作为活性成分的细胞治疗产品、使用所述细胞治疗产品治疗心脏病的方法、以及心肌细胞和心肌细胞聚集体用于产生细胞治疗产品的用途。通过使用本发明的产生心肌细胞的方法，可以容易地纯化胚胎干细胞来源的心肌细胞，并且心肌细胞聚集体可以由纯化的心肌细胞产生，因此可用作可以用于治疗心脏病的细胞治疗产品。因此，本发明可以广泛用于开发用于预防或治疗多种心脏病的制剂。

摘要： 本发明公开了一种诱导干细胞往心肌细胞方向分化及心肌细胞传代与纯化的方法及药剂，属于人多能干细胞向心肌细胞分化调控及维持技术领域。该诱导干细胞往心肌细胞方向分化的方法包括：将人多能干细胞置于含烟酰胺的第一培养基中培养，第一培养基为E5培养基。心肌细胞的传代方法包括：将心肌细胞置于含烟酰胺的第二培养基中培养，第二培养基为E6培养基。心肌细胞的纯化方法包括：将传代处理后的心肌细胞置于含烟酰胺的第三培养基中培养，第三培养基为E6培养基。上述方法能够为人多能干细胞来源的心肌细胞的产生和传代培养提供有效可行的新方法，且效率稳定，费用较低，利于大规模生产。相应的药剂应用前景较广。

摘要： 本发明公开了一种氯离子阻断剂诱导干细胞分化成心肌细胞的方法及心肌细胞与其应用，属于人多能干细胞向心肌细胞分化调控技术领域，其包括以下步骤：于含有分化第3‑5天的干细胞的分化培养基中加入氯离子通道阻断剂以诱导干细胞向心肌方向分化。该方法的特点是采用氯离子阻断剂来诱导干细胞向心肌方向分化。本申请详细阐述了该方法的具体操作步骤，并对分化的心肌细胞进行了鉴定和功能分析，为人多能干细胞来源的心肌细胞的产生提供了新思路。

摘要： 公开了用于从多能干细胞产生心肌细胞群体的方法。群体可以对于心房心肌细胞或心室心肌细胞进行富集，并且所得到的心室群体可以基本上不含起搏细胞。该方法包括使在合适的培养基中的多能干细胞与BMP组分和激活素组分一起温育，激活素的量可以改变以富集心房心肌细胞或心室心肌细胞。公开了富集的群体，以及使用其治疗需要心脏修复的患者的方法。

摘要： 本发明涉及干细胞领域，具体涉及一种多能干细胞快速分化为骨骼肌细胞的方法，旨在解决多能干细胞诱导骨骼肌细胞时间长，效率低的问题。具体包括向培养基中的多能干细胞中引入含有至少一种潜能基因的表达载体，从而将所述多能干细胞定向分化为骨骼肌细胞。通过在诱导人的多能干细胞向骨骼肌细胞定向分化的不同阶段，特异诱导Mef2b、Pax3、Pax7、Mydo1、Pitx1、Myogenin、Mef2c、Mrf4、Desmin中的一种或几种不同组合基因的表达，可获得了纯度高达80％的功能性的骨骼肌细胞，而且显著缩短了诱导的周期。

摘要： 本发明以开发下述方法的课题，即，利用了在目前以纯化心肌细胞为目的研究中从未想到过利用的诸多性质、以及新发现的诸多性质，可在不改变遗传基因，不添加特别的蛋白质及生理活性物质的情况下，从含有来源于胚胎及干细胞的心肌细胞的细胞混合物中，高度且高收率的纯化心肌干细胞。本发明者们发现，通过在低血清条件、低糖条件、低营养条件、低钙条件、弱酸性pH条件、添加乳酸条件、添加天门冬氨酸·谷氨酸条件、和/或添加丙酮酸条件的培养液中培养胚胎干细胞来源的心肌细胞，可有效且高收率的选择和纯化心肌细胞。另外，还发现在胚胎干细胞中发现的方法还可应用于胎儿来源的心肌细胞的选择和纯化、或成体干细胞来源的心肌细胞的选择和纯化。

摘要： 本发明的课题在于，改善纯化至不含有心肌细胞以外的细胞且不含有来源于其他物种的成分的心肌细胞在移植后的存活率。为了解决上述课题，本发明人等就经纯化的心肌细胞是否能够构筑细胞块进行了研究。其结果明确了：通过提供一种制备来源于多能干细胞的心肌细胞的细胞块的方法，可以解决上述课题。该方法的特征在于，将心肌细胞用无血清条件下的培养基进行培养，使该细胞聚集，所述心肌细胞为如下的心肌细胞：使包含由多能干细胞分化、诱导出的心肌细胞的、聚集状态的细胞块分散并单细胞化，从而得到的经纯化的来源于多能干细胞的心肌细胞。