蜜环菌

摘要： 天麻近年来价格稳中有升,市场风险小,是甘肃重要的支撑产业.有性繁殖是天麻稳产和丰产的关键技术,天麻靠蜜环菌分解木材纤维素和半纤维素供给养分来生长发育,因此,栽种天麻必须重视种麻的品质、蜜环菌的状态及环境条件的选择.本文从栽培选址、土壤选择、菌种选择、蜜环菌的培养和栽培管理方面对天麻有性繁殖技术进行总结归纳,以期为种植户提供参考.

摘要： 分离纯化野生蜜环菌菌丝培养物,研究菌丝体代谢物质对大肠杆菌、金黄葡萄球菌、志贺氏菌和副溶血性弧菌的抑制作用.采集野生蜜环菌子实体,获得遗传同一性菌丝体纯培养物,振荡培养获得菌丝体代谢液,观察其对致病菌的抑菌效果.实验结果表明,分离纯化得到的菌丝体纯培养物与蜜环菌遗传同一,菌丝体代谢液对大肠杆菌、金黄葡萄球菌、志贺氏菌和副溶血性弧菌等食品中常见的致病菌具有较好的抑制作用。

摘要： 本研究以收集自贵州省(贵州大学农学院M-01~M-07、都匀市M-08、凯里市M-09和福泉市M-11)和湖北省宜昌市(M-10)的11份蜜环菌种质为研究对象,提取其基因组DNA,采用通用引物ITS4/ITS5对核糖体转录间隔区(rDNA-ITS)进行扩增,利用DNAMAN软件对11份蜜环菌种质进行构建同源树并分析其序列特征,采用MEGA软件最近邻距法进行系统发育分析及遗传距离的计算。结果表明,11份蜜环菌种质可分为两个大类4个亚类,第Ⅰ-Ⅰ类包括M-01、M-02、M-04、M-05和M-08-M-10,第Ⅰ-Ⅱ类为M-03,第Ⅱ-Ⅰ类包括M-06和M-07,第Ⅱ-Ⅱ类为M-11,具有较强的同源性(93%);两个大类样品的特征序列均位于ITS1和ITS2区表现为碱基的转换或颠换;共有序列的相似度为88.71%在ITS区存在丰富的变异表现为碱基的转换、颠换和缺失,第Ⅰ类的GC含量(44.2%)高于第Ⅱ类(42.6%);种内遗传距离均为0,第Ⅰ-Ⅱ类和第Ⅱ-Ⅱ类的种间遗传距离最小(0.002),第Ⅱ-Ⅰ类和第Ⅱ-Ⅱ类的种间遗传距离最大(0.035);经NCBI数据库BLAST对比及系统发育分析这4个亚类的样品均不能与下载的蜜环菌归为一支。因此,11份密环菌种质可能是一个较为庞大的复合群,采用通用引物ITS4/ITS5扩增的核糖体基因可以对此类蜜环菌进行分类但不适合作为鉴定的持家基因。

摘要： 为充分利用秦巴山区陕西省略阳县丰富的蜜环菌资源,解决当前蜜环菌菌株退化问题。对采自海拔900~1300 m的野生蜜环菌菌株进行优选培养、鉴定、伴栽天麻试验。结果筛选L1、L3、L4菌株优良蜜环菌菌株,可以用于生产;试验表明红杆天麻共生蜜环菌最佳生长地在海拔900~1300 m。

摘要： 为探究天麻块茎腐烂影响因素,通过选择不同天麻蜜环菌品种、调整天麻种贮藏时间、保存温度、喷水频率等因素分析天麻块茎腐烂情况。结果表明,蜜环菌羌蜜41的菌丝在32°C培养7 d,恢复温度至25°C后仍能正常生长,用其栽培天麻,块茎腐烂率为4%;蜜环菌A9栽培天麻块茎腐烂最多,平均腐烂率达12%;低温处理对天麻成活率及腐烂影响不明显,-5°C低温处理后,天麻种的成活率仍能达到89.8%;天麻种贮藏10 d后栽培存活率不足90%,20 d后为58%,贮藏30 d后栽培的天麻成活率仅有12%;贮藏时间超过20 d的天麻种,6月下旬~7月初会由于其本身腐烂导致新生块茎腐烂;高温、高湿及气温骤变会引起天麻腐烂,主要集中在7月~8月。因此,栽培天麻时应选择耐高温、与天麻种亲活力强的蜜环菌菌种;天麻种需现采现栽,栽后薄盖土厚覆盖物,在保持水分的同时,还要注意开沟排水。

摘要： 目的观察银杏蜜环口服溶液(简称银蜜)对CMECs(大鼠心肌微血管内皮细胞)增殖、迁移、细胞小管形成及VEGF(血管内皮生长因子)、CD31(血小板-内皮细胞粘附分子)蛋白表达的影响,探讨银蜜的体外血管新生能力。方法培养CMECs,分为对照组、银蜜高(2.6 mg/mL)、中(1.3 mg/mL)、低(0.6 mg/mL)剂量组。CCK-8法检测CMECs增殖能力;细胞划痕实验检测CMECs迁移能力;Matrigel血管形成实验检测CMECs成管能力;Western blot检测VEGF、CD31蛋白表达。结果与对照组相比,银蜜高、中、低剂量均能显著促进CMECs增殖;且银蜜高组细胞增殖率显著高于银蜜中、低组。划痕6 h后银蜜高组细胞迁移率显著高于对照组,银蜜中、低组细胞迁移率大于对照组,但无统计学差异;划痕24 h后银蜜高、中、低组CMECs迁移率均显著升高,银蜜高组细胞迁移率高于银蜜中、低组。银蜜高组CMECs网眼数、网眼面积、交叉点数显著优于对照组、银蜜中、低组。银蜜高、中组VEGF、CD31蛋白表达量显著升高。结论银杏蜜环口服溶液可促进CMECs的增殖、迁移和体外血管成环,同时促进VEGF和CD31蛋白表达,且药效随银蜜剂量的增加而增强,提示银杏蜜环口服溶液具有显著的促进体外血管新生能力。

摘要： 为探讨退化和复壮后蜜环菌(Armillaria mellea)菌株几个胞外酶活性的变化情况,将野生蜜环菌菌株连续伴栽天麻4次获得退化菌株,退化菌株经过氨水诱变选育后获得复壮菌株。以野生菌株为对照,将野生菌株、退化菌株、复壮菌株伴栽天麻,分别记录菌索萌发时间,计算平均生长速率,同时观察菌索的密度、粗细、分枝数和颜色,测定天麻产量和天麻素含量以及蜜环菌的漆酶、淀粉酶、纤维素酶、果胶酶、木聚糖酶活性,并进行蜜环菌野生菌株、退化菌株、复壮菌株转录组测序和分析,测定漆酶相关差异基因的相对表达量。结果表明:与野生菌株相比,退化菌株的菌索密度下降,菌索变细,分枝数量减少,菌索变成黑褐色,而复壮菌株的基本没有变化;与野生菌株相比,退化菌株伴栽天麻的产量和天麻素含量均显著下降,而复壮菌株无显著性差异;退化菌株的漆酶活性显著下降,活性仅为野生菌株的1/3,而复壮菌株的漆酶活性无显著性差异;在菌株退化、复壮过程中,漆酶活性与天麻产量和天麻素含量密切相关,变化规律一致;与野生菌株相比,退化菌株的淀粉酶、纤维素酶、果胶酶、木聚糖酶活性无显著性差异,而复壮菌株的果胶酶、木聚糖酶活性显著增加;与野生菌株相比,退化菌株显著差异表达的基因有6153个,其中上调表达的基因有3285个,下调表达的基因有2858个,筛选得到漆酶相关基因35个,退化菌株上调表达的基因有3个,下调表达的基因有8个,在复壮菌株中基因Unigene15885和Unigene19647上调表达量降低,且基因Unigene29569由退化菌株的上调表达变为下调表达,基因Unigene38073、Unigene34671、Unigene35295和Unigene31859下调表达量降低,基因Unigene31095、Unigene 8137、Unigene 33525和Unigene 23435由退化菌株的下调表达变为上调表达。

摘要： 蜜环菌与天麻二者为生物种的共生关系,天麻种植的产量和品质离不开与蜜环菌的种种联系。文章通过概述蜜环菌与天麻的基本情况,并通过蜜环菌与天麻共生机理来阐述蜜环菌影响天麻产量的重要因素,以期为提高天麻种植栽培质量与产量提供思路。

摘要： 独脚金内酯是一类新型植物激素,既能影响植物生长发育,还能释放到植物根部周围影响根际微生物和寄生植物生长。对不同质量浓度的独脚金内酯GR24影响蜜环菌生长的情况进行分析,结果显示添加GR24可促进蜜环菌的分枝形成,促进液体培养基培养时形成的菌丝球直径增大;但在质量浓度较低(2.0μg·L^(-1))时抑制蜜环菌的生长;添加GR24的质量浓度为2.0μg·L^(-1)时为最佳,此条件下促进蜜环菌生长,分枝菌索数最多,分枝率最高,菌丝干质量和菌丝多糖含量均增加。

摘要： 为比较蜜环菌rDNA-IGS序列差异,筛选液体培养优势菌株及优化其培养基,采用引物5SA/CNL12进行rDNA-IGS扩增及测序,利用DNAMAN构建同源树并分析其序列特征。在相同的液体培养条件下培养11份蜜环菌种质,通过比较菌球的个数、直径、鲜(干)重以及折干率等指标,筛选出优良蜜环菌菌株,并采用正交试验对其液体培养基进行优化。结果表明:11份蜜环菌种质可分为两类,Ⅰ类包括M-01—M-05,M-08—M-10,Ⅱ类包括M-06、M-07、M-11;Ⅰ类中有7个位点存在变异,共有序列长度为861 bp,Ⅱ类中有17个位点存在变异,共有序列长度为804 bp,且嘌呤(A+G)均大于嘧啶(T+C)。两类蜜环菌种质的相似度为72.61%,共有序列长度为632 bp,其中碱基A、C、G、T所占比例分别为33.9%、24.8%、16.6%、24.7%。M-09液体培养表现较优,优化培养基为玉米淀粉8.0 g/L,黄豆粉8.0 g/L,葡萄糖20.0 g/L,蛋白胨6.0 g/L,酵母浸膏2.0 g/L,磷酸二氢钾2.5 g/L,七水硫酸镁0.5 g/L,维生素B11.0 g/L。以此培养基培养蜜环菌,最终菌球收率可达1.766 g/150 mL。

摘要： 为筛选出最适蜜环菌栽培生产种的培养基,通过生产种培养基组分筛选试验,测量第20天和第40天时菌丝或菌索的生长速度及其胞外酶活性并进行比较.结果表明:在配方1(70％阔叶木屑,0％棉籽壳,17％麦麸,10％玉米面,1％蔗糖,0.3％磷酸二氢钾,0.2％硫酸镁,0.5％石灰,1％石膏,m木分∶m配料=1∶1.3)中生长速度最大且最先长满管,且菌丝洁白,与其余不同培养料配方之间生长速度差异显著,而且栽培种培养基含木屑越多,菌株活力越好,越不易形成老化的红褐色菌索;在不同培养料和不同生长阶段其木聚糖酶活性大于CMC酶和漆酶,漆酶活性最小,为十位级,其他2个酶为百位级;不同培养基中蜜环菌菌丝分泌的胞外酶活性具有显著性差异,但同种酶在不同培养料中酶活性的变化趋势一致.说明,配方1可作为蜜环菌适宜的栽培种培养基;不同培养料对胞外酶活性变化趋势影响小,但对其活性影响较大.

摘要： 以蜜环菌菌株为试材,通过测定2个生长时期8株蜜环菌栽培基质木质纤维素利用率、生长速度、胞外酶活性,分析三者之间的相关性,揭示不同蜜环菌降解利用基质的差异和规律.结果表明:培养20d时,菌株KY4的木质纤维素利用率都高于其它菌株;培养40d时,菌株KY5的未质纤维素总利用率最高;2个生长期生长速度最快的都是菌株DJ1;通过差值分析,40d时纤维素酶活性大于20d,20d时漆酶活性大于40d,半纤维素酶活性变化无规律;A.mellea、A.cepistipes纤维素利用率与纤维素酶活性呈正相关,A.gallica纤维素利用率与纤维素酶活性呈负相关.

摘要： 目的:研究7株贵州蜜环菌在液体发酵过程中漆酶等胞外酶活性变化规律及菌丝胞内多糖提取率.方法:超声波破碎菌丝,水提醇沉得多糖,苯酚一硫酸法测多糖;DNS法测定蜜环菌发酵液中木聚糖酶、羧甲基纤维素酶的活性;利用丁香醛连氮测定发酵液中漆酶活性.结果:各菌株间多糖得率存在显著差异;各菌株胞外酶活性变化趋势均是先升后降;各酶在不同菌株间达到最大酶活的时间、最大酶活性值存在明显差异;优良菌株DJ1第4天就能结束发酵,达到最大酶活时间最短、持续时间长.结论:蜜环菌液体发酵时最早分泌的是CMC酶、漆酶,然后是木聚糖酶;但起主要作用是木聚糖酶.

摘要： 目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定蜜环菌中甘露醇的方法.方法:ZORBAX NH2色谱柱(250mm×4.6mm,5um),柱温:40°C,流动相:乙腈-水(81: 19),漂移管温度100°C,载气流速为3.0ml/min-1.,增益为150.流速:1.0ml/min.结果与结论:甘露醇的回归方程:y=1.43x 4.2969;相关系数:r2=0.9971.线性范围为:5.2384-41.9072μg/ml;该方法操作简便、结果准确,专属性强,分离效果和重现性好,可有效缩短总分析时间.为较全面控制蜜环菌药材的质量控制提供了简便可靠的方法.

摘要： 蜜环菌是天麻种植的共生菌,传统培养方式存在试管斜面培养菌种量小、PDA培养基种性易退化、固体培养生长不理想以及试管表面接种易污染等问题。通过改试管斜面为试管菌柱、固体方式为半固体方式、PDA培养基为综合培养基、试管表面转扩为试管底部破碎转扩等蜜环菌母种培养与转扩方式的改革,提高了蜜环菌母种的制作质量和转扩成功率。

摘要： 蜜环菌Armillaria (Fr.:Fr.Staude)是一类经济价值较高的大型真菌,广泛分布于世界各地,为名贵中药天麻(Gastrodia elata Bl.)和猪苓(Grifola umbellata)生长繁殖所必需。本文分析和讨论了乌蒙山区蜜环菌资源开发利用的现状和存在的问题,并为该地区资源的有效保护和可持续利用提供建议，以期进一步推动蜜环菌资源的利用。

摘要： 引进8个蜜环菌菌种在7个配方的培养基上接种观察,结果表明:8个菌种在以栎皮煮水加PDA的配方中萌发时间最短,平均为4.3天,在PDA和栎皮煮水加PDA配方上平均24.1和23.7天满皿,在麦芽汁半固体和混合培养基上菌索干重最大,平均为0.16g和0.17g.在各种培养基上以M7菌株长势最好,菌索干重最大.

摘要： 筛选最优菌株，确定最佳液体发酵培养时间和碳源、氮源的组合，采用L16(45)正交试验设计优化蜜环菌水提和超声提取多糖的工艺。用苯酚-硫酸法测定多糖含量。结果表明：最优菌株M7的最佳发酵时间为7d，最适碳源、氮源组合为糊精+红薯粉、蚕蛹粉+玉米浆。水提蜜环菌多糖的最优工艺是水提温度100°C、料液比1:20、水提时间1.5h、水提4次。在最优水提优化的基础上最佳超声工艺是水提时间90min、超声时间10min、超声功率90％、超声2次。水提优化比普通方式提取多糖，多糖得率增加104.27％。在水提优化的基础上进行超声优化，多糖得率增加5.86％，可将超声波法作为蜜环菌多糖提取的辅助手段。

摘要： 选用活树根栽培、双层菌材栽培和单层菌材栽培方法,在不同的土质、海拔高度进行猪苓栽培试验,并对其生长的环境因子进行分析研究,秦巴山区猪苓标准化栽培的技术条件是,栽培时间每年在2～5月和10～12月,海拔600～1500m的林地,以次生阔叶林、杂灌林、混交林、坡度在20° ～ 50°的向阳坡为宜,生长期最适温度22°C～25°C,土壤含水量50～60％,pH5.0～6.7的微酸性或近中性沙壤土,以灰苓为种苓、并选用"京234号"蜜环菌为其营养源.

摘要： 天麻依靠蜜环菌生长使其具有独特的生理生态,培育蜜环菌与天麻共同适合的栽培环境是天麻栽培的关键.本文介绍了天麻的生理生态，探讨了影响天麻人工栽培的环境因子与蜜环菌密切相关，控制天麻栽培环境因子主要采取以下措施：(1)培育壮、旺蜜环菌，使天麻和蜜环菌早期接菌好；(2)选择疏松、透气、利水的沙质土壤载培天麻；(3)做好田间管理。

摘要： 本发明涉及真菌菌剂制备领域，具体而言，涉及一种蜜环菌菌剂的制备方法及该方法制成的蜜环菌菌剂。蜜环菌菌剂的制备方法，包括将蜜环菌原菌的菌索段接入菌株保藏培养基中培养后常温放置，得到待活化菌种；将待活化菌种的尖端菌索转接至菌种活化培养基中进行活化；将活化后菌种扩繁；将扩繁后的固体菌种进行两次暗培养，得到二级液体菌种，并进行深层发酵培养。本发明提供的该方法可获得用于直接侵染枝条的蜜环菌菌剂，该菌剂接种到枝条后约30天即可用于人工种植猪苓或天麻，与现有技术相比，缩短了菌材的获取时间(不经过原种阶段)，进而使得蜜环菌菌材的产量得到保障，还可为医药业获取其药用成分提供充足的物质来源。

摘要： 本发明属于食品饮料发酵工程，本发明涉及用微生物培养方法进行发酵茶叶的生产工艺，特别是利用蜜环菌发酵生产茶以及它的生产工艺。其制备方法包括以下步骤：培养基制备、一级种子培养、二级种子的扩大培养、接种发酵、烘干。本发明具有的有益效果是：利用蜜环菌发酵茶叶，得到的发酵茶具有天麻的药理活性和茶叶饮用的双重生理功效，易于冲泡、吸收，可以充分汲取有发酵产物的效成分，使发酵产物的资源功效得到充分利用，在提高人体免疫力方面有良好的辅助和保健作用。

摘要： 本发明涉及一种蜜环菌食品，确切地说是蜜环菌面条及蜜环菌菌株工业液体发酵生产工艺。其特征在于：一、在面条的配方中加入30%的蜜环菌发酵液；二、其蜜环菌菌株工业液体发酵生产工艺分为四大工序，即菌种分离、斜面种子培养、液体种子培养及液体发酵生产，在液体发酵生产中又分为一、二级种子罐、三级发酵罐生产。蜜环菌营养丰富，其中含有18种氨基酸、人体必须的4种常量元素含量最高，人体所需的6种微量元素等。同时具有镇静、抗惊撅、增强免疫功能等药理作用。菌株的工业液体发酵生产工艺生产周期短、产量高、质量稳定、生产效益高。

摘要： 本发明涉及真菌菌剂制备领域，具体而言，涉及一种蜜环菌菌剂的制备方法及该方法制成的蜜环菌菌剂。蜜环菌菌剂的制备方法，包括将蜜环菌原菌的菌索段接入菌株保藏培养基中培养后常温放置，得到待活化菌种；将待活化菌种的尖端菌索转接至菌种活化培养基中进行活化；将活化后菌种扩繁；将扩繁后的固体菌种进行两次暗培养，得到二级液体菌种，并进行深层发酵培养。本发明提供的该方法可获得用于直接侵染枝条的蜜环菌菌剂，该菌剂接种到枝条后约30天即可用于人工种植猪苓或天麻，与现有技术相比，缩短了菌材的获取时间(不经过原种阶段)，进而使得蜜环菌菌材的产量得到保障，还可为医药业获取其药用成分提供充足的物质来源。

摘要： 本发明公开了一种用于蜜环菌培养的大豆秸秆培养基及其制备方法，包括主料碳源、无机盐营养物，所述主料碳源由如下重量百分比的组分组成：70～90％大豆秸秆粉、10～30％麦麸。还公开了一种采用前述的培养基生产蜜环菌的方法，包括如下步骤：1)制备培养基，灭菌，备用；2)接种活化后的蜜环菌到灭菌后的培养基中，23～27°C避光培养28～32天；优选25°C避光培养30天。本发明使用大豆秸秆代替蜜环菌生产种中使用的木材，筛选出的大豆秸秆培养基作为蜜环菌菌包替代原料，有利于降低栽培成本，以满足天麻种植需求，为工业化生产提供依据和参考，同时为减少资源浪费和保护环境提供新的思路。

摘要： 本发明公开了一种提供的一种蜜环菌母种的培养基，本发明还公开了一种使用上述培养基培养蜜环菌菌种的方法，本发明还公开了一种棉花秸秆使用上述蜜环菌菌种制作菌棒的方法，包括下述步骤：棉花秸秆装袋灭菌，然后取液体蜜环菌菌种4~6ml接种在棉花秸秆上，接种温度为20~22°C；接种后的棉花秸秆控制温度为20~25°C，含水率保持40-50%，生长时间为35~45天制成菌棒，本发明还公开了一种棉花秸秆制作的菌棒栽培天麻的方法，采用本发明的技术方案，保证四季温差大低海拔地区天麻生长的稳定，棉花秸秆制作的菌棒栽培天麻的方法，为大量的棉花秸秆找到了发挥其经济价值的出路，解决了焚烧棉花秸秆带来的环境污染。

摘要： 本发明属于食品饮料发酵工程，本发明涉及用微生物培养方法进行发酵茶叶的生产工艺，特别是利用蜜环菌发酵生产茶以及它的生产工艺。其制备方法包括以下步骤：培养基制备、一级种子培养、二级种子的扩大培养、接种发酵、烘干。本发明具有的有益效果是：利用蜜环菌发酵茶叶，得到的发酵茶具有天麻的药理活性和茶叶饮用的双重生理功效，易于冲泡、吸收，可以充分汲取有发酵产物的效成分，使发酵产物的资源功效得到充分利用，在提高人体免疫力方面有良好的辅助和保健作用。

摘要： 本发明涉及一种蜜环菌食品,确切地说是蜜环菌面条及蜜环菌菌株工业液体发酵生产工艺。其特征在于:一、在面条的配方中加入30%的蜜环菌发酵液;二、其蜜环菌菌株工业液体发酵生产工艺分为四大工序,即菌种分离、斜面种子培养、液体种子培养及液体发酵生产,在液体发酵生产中又分为一、二级种子罐、三级发酵罐生产。蜜环菌营养丰富,其中含有18种氨基酸、人体必须的4种常量元素含量最高,人体所需的6种微量元素等。同时具有镇静、抗惊撅、增强免疫功能等药理作用。菌株的工业液体发酵生产工艺生产周期短、产量高、质量稳定、生产效益高。

摘要： 本发明公开了一种基于油茶枝粉的蜜环菌培养基，包括以下重量份组分：油茶枝粉、麸皮、可溶性淀粉、花椒籽提取物、纳米级电气石粉、细菌纳米纤维素等。本发明采用主料油茶枝粉、麸皮、黄豆粉、可溶性淀粉等为培养基制备蜜环菌液体菌种，实现了油茶枝粉在蜜环菌液体菌种培养中的营养，有利于增强蜜环菌液体菌种的抗氧化性；加入了纳米细菌纤维素，通过纳米细菌纤维素改善液体培养基的均匀性、稳定性，为液体菌种菌丝球的生长发育提供了良好的空间，使得菌丝球分布均匀，大小合适，可以满足移栽需要，而无需进一步的机械破碎；通过采用纳米细菌纤维素对具有抑制杂菌功效的花椒提取的包埋处理，为菌丝球向子实体转化替换了良好的生存空间。

摘要： 本发明的课题在于，缩短猪苓菌的栽培时间。一种猪苓菌与蜜环菌的共生方法，所述方法包括：在含有来自阔叶树的木材粉碎物的菌床上接种蜜环菌，蜜环菌形成根状菌索之后，在该根状菌索形成部位的上部接种猪苓菌，在其上部覆盖来自阔叶树的木材粉碎物并进行培养；一种猪苓菌与蜜环菌的共生方法，所述方法包括：在含有来自阔叶树的木材粉碎物的菌床上接种蜜环菌，蜜环菌形成根状菌索之后，在该根状菌索形成部位的上部接种与来自阔叶树的木材粉碎物混合的猪苓菌并进行培养；及一种猪苓菌的栽培方法，所述方法包括将通过所述共生方法共生的猪苓菌和蜜环菌与阔叶树原木粘附，一同埋设于土壤中并进行栽培。