凋亡蛋白

摘要： 目的观察清肝利水方(QGLS)在慢性高眼压大鼠视网膜神经节细胞(RGC)凋亡中的抑制效果,并探讨其作用机制与瞬时受体电位阳离子通道6(TRPC6)/Ca^(2+)信号通路的关系。方法制备大鼠QGLS含药血清,进行细胞毒性试验,确定合适的干预浓度。用CoCl_(2)和无糖DMEM建立RGC-5细胞缺氧缺糖-复氧复糖损伤模型,CCK-8检测正常对照组(CG)、模型组(MG)和低、中、高浓度清肝利水方含药血清组(LQGLS、MQGLS、HQGLS)的细胞增殖力,细胞凋亡试验检测细胞凋亡水平,Western Blot检测各组TRPC6、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bax)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达,Fluo-3 AM荧光探针检测细胞内钙离子浓度。结果(1)实验条件筛选:筛选出QGLS含药血清干预浓度为5%,CoCl_(2)造模浓度与时间为600μM处理24 h。(2)细胞存活率:LQGLS、MQGLS可显著提高缺氧缺糖-复氧复糖损伤的细胞存活率,与MG比较有统计学意义(t_(LQGLS)=25.401,t_(MQGLS)=11.805,均P=0.000)。(3)TRPC6表达:MQGLS、HQGLS较MG显著降低,差异均有统计学意义(t_(MQGLS)=7.365,t_(HQGLS)=9.075,均P=0.000)。(4)凋亡因子:①Caspase-3表达,3个QGLS剂量组较MG均显著下降,差异均有统计学意义(t_(LQGLS)=4.816,P=0.001;t_(MQGLS)=35.131,P=0.000;t_(HQGLS)=28.227,P=0.000);②Bax表达,3个QGLS剂量组较MG均显著下降,差异均有统计学意义(t_(LQGLS)=14.912,t_(MQGLS)=10.194,t_(HQGLS)=12.838,均P=0.000);③Bcl-2表达,3个QGLS剂量组较MG均显著升高,差异均有统计学意义(t_(LQGLS)=8.871,t_(MQGLS)=12.729,t_(HQGLS)=9.298,均P=0.000)。(5)细胞内Ca^(2+)荧光强度:MG及3个QGLS剂量组较CG均显著升高,差异具有统计学意义(t_(MG)=13.960,P=0.000;t_(LQGLS)=5.889,P=0.001;t_(MQGLS)=7.877,P=0.000;t_(HQGLS)=17.815,P=0.000)。LQGLS、MQGLS较MG细胞内Ca^(2+)浓度显著下降,差异具有统计学意义(t_(LQGLS)=7.881,t_(MQGLS)=6.204,均P=0.000),HQGLS较MG差异无统计学意义(P>0.05)。结论QGLS可降低RGC-5中Caspase-3、Bax表达,提高Bcl-2表达,抑制RGC凋亡,保护视神经,其作用机制可能与降低TRPC6表达以减少Ca^(2+)内流相关。

摘要： 目的探究培土清热解瘀方(PQJ)对糖尿病视网膜病变(DR)大鼠炎症反应、血管生成和细胞凋亡的影响。方法给予40只SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素构建DR模型,随机分为模型组(MG)、低剂量PQJ组(LPQJ)、中剂量PQJ组(MPQJ)和高剂量PQJ组(HPQJ),每组各10只,另设正常对照组(CG)大鼠10只。连续灌胃给药3个月后,酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的水平,实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)和Western Blot检测视网膜组织中的血管内皮生长因子(VEGF)、VEGF受体2(VEGFR2)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)的表达量。结果(1)TNF-α:与MG比较,MPQJ和HPQJ大鼠血清TNF-α表达降低(t_(MPQJ)=3.081,P=0.006;t_(HPQJ)=4.624,P=0.000),差异均有统计学意义;(2)IL-6:与MG比较,HPQJ大鼠血清IL-6表达降低(t=4.219,P=0.001),差异具有统计学意义;(3)VEGF表达:(1)VEGF mRNA,与MG比较,MPQJ和HPQJ大鼠视网膜VEGF mRNA表达降低,差异均有统计学意义(t_(MPQJ)=4.414,t_(HPQJ)=5.084,均P=0.000);(2)VEGF蛋白,与MG比较,HPQJ大鼠视网膜VEGF蛋白表达降低(t=7.117,P=0.000),差异具有统计学意义;(4)VEGFR2:(1)VEGFR2 mRNA,与MG比较,MPQJ和HPQJ大鼠视网膜VEGFR2 mRNA表达降低(t_(MPQJ)=3.625,P=0.002;t_(HPQJ)=4.228,P=0.000),差异均有统计学意义;(2)VEGFR2蛋白:与MG比较,LPQJ、MPQJ和HPQJ大鼠视网膜VEGFR2蛋白表达降低(t_(LPQJ)=4.312,t_(MPQJ)=4.656,t_(HPQJ)=7.736,均P=0.000),差异均有统计学意义;(5)Caspase-3表达:与MG比较,HPQJ大鼠视网膜Caspase-3表达降低(t=7.370,P=0.000),差异具有统计学意义;(6)Caspase-9表达:与MG比较,MPQJ和HPQJ大鼠视网膜Caspase-9表达降低,差异均有统计学意义(t_(MPQJ)=7.251,t_(HPQJ)=9.161,均P=0.000)。结论PQJ可以降低DR大鼠血清TNF-α、IL-6及视网膜组织中VEGF、VEGFR2、Caspase-3和Caspase-9的表达水平,进而达到改善DR的目的。

摘要： 该研究旨在考察灵芝孢子油番茄红素复合物(LZFQ)体内外抗肿瘤活性,探讨其对肿瘤细胞的作用机制。用MTT法对人非小细胞肺癌细胞(A549)、人胃癌细胞(BGC823)、人乳腺癌细胞(MCF-7)和人结肠癌细胞(HCT116)细胞活力进行检测,建立裸鼠移植瘤模型研究LZFQ的体内抑瘤作用,通过流式细胞术检测细胞凋亡变化及凋亡相关蛋白的表达,对其抗肿瘤机制进行初步探讨。体外细胞活力实验表明LZFQ对4种肿瘤细胞的生长均具有一定抑制作用,对A549细胞的抑制最明显(IC50=0.49 mg/mL)。流式细胞术实验表明,LZFQ可以浓度依赖性的诱导细胞凋亡。Western blot实验表明,LZFQ浓度依赖性地降低抑凋亡蛋白Bcl-2的水平、并提高促凋亡蛋白Bax及Caspase-3的水平。裸鼠移植瘤实验中,LZFQ给药剂量为2.00 g/kg(高剂量组)、1.00 g/kg(中剂量组)和0.50 g/kg(低剂量组)时,对裸鼠移植瘤的抑制率分别为60.58%、51.92%和43.27%,其中高、中、低剂量组与模型组比较均有显著差异(p<0.01)。机制研究表明,LZFQ可以浓度依赖性诱导细胞凋亡,并通过影响凋亡相关蛋白的表达诱导细胞凋亡。该研究结果表明LZFQ具有一定的抗肿瘤作用,可为灵芝孢子油类产品的研发提供实验依据。

摘要： 目的探讨长期低浓度七氟醚暴露对成年小鼠肝、肾功能的影响,为麻醉医生及手术室工作人员职业暴露安全性提供参考。方法8周龄KM小鼠24只,随机均分为对照组、0.1%七氟醚组和0.3%七氟醚组,分别暴露于空气、0.1%七氟醚和0.3%七氟醚环境中,1 h/d,5 d/周,共12周。计算肝肾系数,检测血清中肝、肾功能生化指标,检测胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平,检测肝脏组织中凋亡蛋白的表达,观察肝肾组织细胞病理学改变。结果3组小鼠体质量、肝肾系数、肝肾功能及凋亡蛋白比值差异均无统计学意义(P>0.05);IGF-1表达水平随着吸入七氟醚浓度的增加而下降(P0.05)。结论长期暴露于低浓度七氟醚环境会导致成年小鼠肝脏产生一定的损伤而未对肾脏产生影响。

摘要： 凋亡蛋白与人类的一些疾病密切相关。准确的获得凋亡蛋白的亚细胞位置对理解疾病的发病机制和药物研发有至关重要的作用。目前,研究者们主要是通过蛋白质序列获取特征信息,从而对蛋白质亚细胞位置进行预测定位并获得了较好的结果。在本文中,我们首先改进了PSSM特征提取方法,对PSSM按行分块以获得凋亡蛋白序列的局部信息,我们称之为SePSSM,其次加入7种物理化学性质对氨基酸分类获取凋亡蛋白序列的全局信息。最终将得到的两种特征融合输入到使用不同核函数的SVM中进行预测定位,预测结果通过Jackknife检验得到。实验结果表明,对PSSM进行分割要优于无分隔,RBF核函数要优于其他核函数,融合特征在ZD98和ZW225数据集上获得了较好的效果,这表明我们的方法是有效的。

摘要： 目的 通过七氟醚诱导肝损伤大鼠模型探讨七氟醚对肝脏凋亡、炎症因子的影响及其可能作用机制.方法 将16只SD大鼠随机分为对照组和七氟醚组,采用RT-PCR检测七氟醚组肝脏组织中microRNA-214(miR-214)的表达水平.应用Olympus自动化学分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的水平;应用RT-PCR检测TNF-α、IL-4、IL-6、MCP-1在肝脏组织中的表达.Western blotting检测Bax和Bcl-2的表达.应用生物信息学方法对miR-214进行靶基因预测及信号通路分析.结果 七氟醚组与对照组miR-214表达水平比较,七氟醚组高于对照组(P0.05);与对照组比较,七氟醚处理组Bcl-2/Bax比值下降(P<0.05);通过miRanda和TargetScan数据库预测miR-214的靶基因结果显示,两数据库靶基因数量分别是4652和395个.通过韦恩图对2个数据库靶基因进行交集选取,结果共有319个相同的基因开展后续研究;DAVID平台的KEGG通路数据库分析miR-214的靶基因信号通路预测,利用P值进行排序选择,结果排在首位的为Natural killer cell mediated cytotoxicity通路.结论 七氟醚处理会使肝脏出现一定程度的损伤,而miR-214在这一过程中发挥着重要作用.

摘要： 目的 探讨Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路对大鼠脑缺血-再灌注后神经功能及凋亡蛋白的作用.方法 将72只SD大鼠随机均分为AG490组、模型组和假手术组.AG490组和模型组采用线栓法制备局灶性大脑中动脉阻塞模型,颈内动脉插线深度18～20mm,2h后拔出;假手术组颈内动脉插线深度控制在8～10 mm.AG490组腹腔注射JAK2特异性抑制剂AG490溶液4mL/kg,24 h后再腹腔注射AG490溶液4mL/kg.假手术组、模型组在相同时间点腹腔注射无菌生理盐水4 mL/kg.术后2h以及再灌注后6、12、24、72 h进行神经功能缺损评分,再灌注后6、12、24、72 h检测JAK2、STAT3、Bax、Bcl-2蛋白表达.结果 AG490组神经功能缺损评分在再灌注后24、72 h低于模型组(P＜0.01或P＜0.05).AG490组和模型组JAK2、STAT3、Bax、Bcl-2蛋白表达在再灌注后6、12、24、72 h均高于假手术组(P＜0.01),AG490组JAK2、STAT3、Bax蛋白表达低于模型组(P＜0.01),而AG490组Bcl-2蛋白表达高于模型组(P＜0.01).结论 大鼠脑缺血-再灌注后激活JAK2/STAT3信号通路,神经功能缺损严重,Bax、Bcl-2蛋白表达增加.AG490能抑制Bax蛋白表达,促进Bcl-2蛋白表达,恢复缺损神经功能.

摘要： 目的 探讨丙戊酸钠(VAP)联合甲强龙(MP)在大鼠脊髓损伤(SCI)后神经功能恢复中的作用及其机制.方法 选取8～10周龄雄性健康SD大鼠60只,按照数字表法随机分为假手术组、SCI组、VAP组、MP组和VAP+MP组,每组12只;各组大鼠再按照数字表法随机分为A组、B组2个亚组,每组6只.假手术组仅暴露脊髓、不做SCI处理,其余4组均采用改良Allen法进行大鼠SCI模型制备.假手术组、SCI组术后30 min、6 h、8 h和24 h腹腔注入生理盐水(剂量为30 mg/kg),24 h后每天腹腔注入相同剂量生理盐水,持续28 d;VAP组:分别于术后于30 min、6 h和24 h腹腔注入生理盐水(30 mg/kg),术后8 h腹腔注入VAP(30 mg/kg),24 h后每天腹腔注入相同剂量VAP,持续28 d;MP组:分别于术后30 min、6 h和24 h腹腔注入MP(30 mg/kg),术后8 h腹腔注入生理盐水(30 mg/kg),24 h后每天腹腔注入相同剂量生理盐水,持续28 d;VAP+MP组:分别于术后30 min、6 h和24 h腹腔注入MP(30 mg/kg),术后8 h腹腔注入VAP(30 mg/kg),24 h后每天腹腔注入相同剂量VAP,持续28 d.选取各组A亚组大鼠:术后第1、3、7、14、28天,分别采用脊髓损伤行为学运动功能(BBB)评分标准和改良Rivlin斜板试验评价SCI后各组大鼠肢体运动功能的恢复情况.选取各组B亚组大鼠:术后第7天手术切取SCI区域脊髓组织,HE染色观察各组大鼠脊髓组织形态变化,Nissl染色观察脊髓运动神经元情况并计算凋亡运动神经元数目,免疫组织化学染色半定量分析肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白的相对表达情况,Western blot法检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关的X因子(Bax)、caspase-3的相对表达情况.结果 (1)组内比较:与术前相比,假手术组术后第1、3、7、14、28天BBB评分和Rivlin斜板试验结果差异均无统计学意义(P值均＞0.05);SCI组、VAP组、MP组、VAP+MP组术后不同时间点BBB评分和Rivlin斜板试验结果均明显降低,但随着时间延长,BBB评分和Rivlin斜板试验结果逐渐升高,差异均有统计学意义(P值均＜0.05).组间比较:SCI组、VAP组、MP组、VAP+MP组SCI后BBB评分和Rivlin斜板试验结果均显著低于假手术组,VAP组、MP组、VAP+MP组的BBB评分和Rivlin斜板试验结果均高于SCI组,VAP+MP组BBB评分和Rivlin斜板试验结果均高于VAP组、MP组,差异均有统计学意义(P值均＜0.05).(2)假手术及造模后第7天,HE染色观察组织学特征:假手术组脊髓组织形态正常;SCI组脊髓组织可见脊髓灰质出现大量炎性细胞因子浸润,细胞出血、水肿,运动神经元坏死、凋亡明显;VAP组、MP组、VAP+MP组较SCI组大鼠脊髓组织可见出血水肿显著减轻,炎性细胞因子浸润显著减少,运动神经元溶解、凋亡减轻,其中VAP+MP组效果更加显著.SCI组、VAP组、MP组、VAP+MP组脊髓空洞面积均明显大于假手术组,VAP组、MP组、VAP+MP组脊髓空洞面积均明显小于SCI组,VAP+MP组脊髓空洞面积均小于VAP组和MP组,差异均有统计学意义(P值均＜0.05).(3)假手术及造模后第7天,Nissl染色观察脊髓运动神经元数目:SCI组、VAP组、MP组、VAP+MP组大鼠脊髓组织正常运动神经元数目明显少于假手术组,VAP组、MP组、VAP+MP组正常运动神经元数目均高于SCI组,VAP+MP组正常运动神经元数目均高于VAP组、MP组,差异均有统计学意义(P值均＜0.05).(4)假手术及造模后第7天,免疫组织化学检测TNF-α、IL-1β表达情况:SCI组、VAP组、MP组、VAP+M组TNF-α、IL-1β表达明显高于假手术组,VAP组、MP组、VAP+MP组TNF-α、IL-1β表达水平显著低于SCI组,VAP+MP组TNF-α、IL-1β表达明显低于VAP组和MP组,差异均有统计学意义(P值均＜0.05).(5)假手术及造模后第7天,Western blot法测试大鼠脊髓组织中凋亡蛋白表达情况:与假手术组比较,SCI组、VAP组、MP组、VAP+MP组凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和caspase-3的相对表达量明显增加;与SCI组比较,VAP组、MP组、VAP+MP组Bcl-2的相对表达量明显增加,Bax、caspase-3的相对表达量明显减少;VAP+MP组Bcl-2的相对表达量明显高于VAP组、MP组,Bax、caspase-3的相对表达量明显低于VAP组、MP组:差异均有统计学意义(P值均＜0.05).结论 VAP联合MP能够显著改善大鼠SCI后神经运动功能,其机制可能与抑制局部炎性反应、促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达和减少凋亡蛋白Bax、caspase-3的表达有关.

摘要： 目的 探讨松龄血脉康胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其对内质网应激细胞凋亡的影响.方法 从50只雄性SD大鼠中随机选取11只为假手术组,其余大鼠采用大脑中动脉栓塞法制备脑缺血再灌注损伤模型,造模成功的33只大鼠随机分为模型组、松龄血脉康组及依达拉奉组,每组11只,分别予蒸馏水[10 mL/(kg?d)]、松龄血脉康胶囊溶液[10 mL/(kg?d)]及依达拉奉注射液[3.15 mL/(kg?d)]干预5 d.神经功能评分检测造模后24 h及给药5 d后的神经功能;错步实验检测错步次数;HE染色观察大鼠大脑缺血区形态结构;TUNEL染色法观察细胞凋亡;Western blot法检测Cleaved Caspase-3及内质网应激促凋亡蛋白CHOP、Caspase-12的表达.结果 神经功能评分显示,造模24 h后,与假手术组相比,造模组评分显著降低(P<0.01),表示造模成功.造模5 d后,模型组神经功能评分仍低于假手术组(P<0.01);松龄血脉康组与依达拉奉组神经功能评分显著高于模型组(P<0.05),且分别显著高于本组造模后24 h评分(P<0.01或P<0.05).错步实验检测发现,模型组的错步次数显著高于假手术组(P<0.01);松龄血脉康组及依达拉奉组错步次数显著低于模型组(P<0.01).HE染色结果发现,与模型组相比,松龄血脉康组及依达拉奉组缺血区脑组织形态结构显著改善.TUNEL染色结果显示,模型组阳性细胞百分比较假手术组显著增加(P<0.01);松龄血脉康组及依达拉奉组阳性细胞百分比较模型组显著减少(P<0.01).Western blot检测结果显示,模型组Cleaved Caspase-3与CHOP、Caspase-12相对蛋白表达量较假手术组显著增高(P<0.01);松龄血脉康组及依达拉奉组Cleaved Caspase-3及CHOP、Caspase-12相对蛋白表达量较模型组明显减少(P<0.05或P<0.05).结论 松龄血脉康胶囊可能是通过降低内质网应激促凋亡蛋白CHOP、Caspase-12的表达减少细胞凋亡,减轻脑缺血再灌注损伤,发挥神经保护作用.

摘要： 目的 以PC12细胞为研究对象,探讨氟西汀对体外培养细胞缺氧损伤的保护作用.方法 将PC12细胞随机分为常氧对照组、缺氧模型组和缺氧+盐酸氟西汀组(盐酸氟西汀组).将后两组一同放入缺氧培养盒中培养18 h后,观察细胞状态,CCK-8法检测细胞活力,DCFH-DA荧光染色法检测活性氧(ROS)含量、酶标仪法检测丙二醛(MDA)水平和乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性;Western blot法检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2和caspase-3等的表达.结果 与常氧对照组相比,缺氧导致PC12细胞出现明显损伤,盐酸氟西汀在10-6 mol·L-1对PC12细胞缺氧损伤有最大保护作用;与正常对照组相比,缺氧导致PC12细胞LDH、ROS和MDA含量显著升高,SOD和CAT活性降低,盐酸氟西汀处理能逆转这些变化;盐酸氟西汀还能够下调Bax和caspase-3蛋白的表达,上调Bcl-2的表达.结论 盐酸氟西汀对缺氧致PC12细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与缓解氧化应激、抑制细胞凋亡有关.

摘要： 本实验通过在运动前分别给与大鼠3-MA、Z-VAD-fmk以及二者的合剂，旨在研究急性运动后不同时刻（0h、3h、24h）大鼠心肌Bcl-2及与之相关的自噬蛋白LC3-II、凋亡蛋白Bax、Caspase-3在心肌中的表达与变化，探讨两种药物对运动引起的心肌自噬和凋亡的预防意义，从而为进一步研究长期耐力训练引起自噬和凋亡的变化规律，使用自噬、凋亡抑制剂的作用效果，防治大负荷运动训练造成的心肌损伤，提供一个新途径。一次急性有氧运动可增强大鼠心肌自噬水平，但对凋亡无明显影响；3-MA、Z-VAD-fmk对运动引发的心肌自噬和凋亡均具有防治意义。

摘要： 目的：观察火针改善脊髓损伤大鼠凋亡蛋白相关基因的表达情况，为临床治疗脊髓损伤提供实验依据。方法：本研究以随机对照盲法进行动物分组，采用改良的Allen's法制备脊髓损伤模型，以火针、毫针分别进行干预，采用荧光定量PCR法观察大鼠IL-1β、Caspase3蛋白的基因表达；结果：治疗手段干预后，与模型组比较，火针组.72h、1W的1L-1β表达量存在显著性差异(P<0.05)，毫针组1w的IL-1β表达量存在显著性差异(P<0.05)。火针组、毫针组72h、1w的Caspase-3表达量存在显著性差异(P<0.05)；结论：火针能较好的减少凋亡蛋白的表达数量，与火针能改善脊髓损伤大鼠凋亡蛋白相关基因的表达相关。

摘要： 目的：探讨重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)对慢性应激抑郁模型大鼠抑郁样行为的改善作用及对海马神经元凋亡的影响. 方法：40只雄性SPF级SD大鼠经过筛选后随机分为2组,分别为对照组(n=8)和造模组(n=30),造模组应用孤养联合慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)方法建立大鼠抑郁模型,剔除造模不成功的大鼠,将造模组分为三组：模型组(n=8,不给予任何处理)、rTMS组(n=8,给予10Hz的rTMS干预)和伪刺激组(n=8,模拟rTMS环境而没有rTMS刺激发出).各组大鼠分别于造模前、造模后和干预后采用体质量测量、蔗糖水消耗实验和旷场试验检测大鼠行为学的改变,采用尼氏染色法检测大鼠海马神经元的大小、形态和数目的变化,采用免疫组织化学方法检测大鼠海马神经元凋亡蛋白Bax的表达变化. 结果：(1)行为学结果显示：应激可以使大鼠行为学评分显著降低(均P＜0.05),rTMS干预可以显著改善其行为学评分(均P＜0.05);与模型组相比,rTMS组大鼠体质量减分率(0.32±0.05)、蔗糖水消耗实验评分(7.03±1.02)、旷场实验的水平运动评分(8212.41±1416.15)以及垂直运动评分(8.75±1.58)均显著增高,差异具有统计学意义(均P＜0.05).(2)尼氏染色结果显示：应激21d导致大鼠海马CA3区神经元损伤,细胞形态差,尼氏小体数目减少;rTMS干预可以阻止海马神经元受损,使细胞形态饱满,尼氏小体数目增多.(3)免疫组织化学结果显示：应激导致大鼠海马CA3区Bax蛋白表达显著增高(P＜0.05),rTMS干预可以显著降低Bax蛋白表达(P＜0.05). 结论：rTMS干预可以改善慢性应激抑郁模型大鼠的抑郁行为及海马神经元细胞的凋亡情况,可能与海马神经元凋亡蛋白Bax的表达下调有关.

摘要： 本文观察消栓肠溶胶囊对大脑中动脉栓塞大鼠丘脑神经元损伤以及凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(cystein-aspartate protease3,Caspase-3)、淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)、β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)表达的影响.用线栓法建立大脑中动脉栓塞模型，雄性大鼠随机分成假手术组、模型组、消栓肠溶胶囊组、阳性对照药银杏叶提取物组，连续灌胃给药15d，每天给药1次。术后15d采用HE染色法观察神经元损伤;采用免疫荧光染色结合图像分析技术检测Caspase-3的表达;采用免疫组织化学染色结合图像分析技术检测APP、Aβ42的表达。得出结论：消栓肠溶胶囊可通过保护丘脑区神经元，抑制Caspase-3信号分子激活，抑制APP表达、减少Aβ形成，从而保护缺血丘脑区。

摘要： 本文为了研究枸杞多糖(LBP)对己烯雌酚(DES)致成年雄性仓鼠生殖损伤凋亡相关蛋白表达的影响.采用皮下注射己烯雌酚复制成年雄性仓鼠生精损伤模型,通过灌胃给予不同浓度的拘杞多糖,连续给药7天,同时设立正常对照组和生精损伤模型组,于末次给药24h后,乙醚麻醉致死仓鼠,取睾丸进行免疫组化检测,确定Fas、FasL及Caspase-3的表达.试验结果表明DES提高Fas、FasL及Caspase-3的表达(P＜0.05);给予不同剂量的LBP后,Fas、FasL及Caspase-3的表达呈LBP剂量依赖性降低,以50.0mg/kgLBP组表达最低(P＜0.01);与维生素组相比,50.0mg/kgLBP对凋亡蛋白的调节作用差异不显著.结论:枸杞多糖可以降低己烯雌酚所致成年仓鼠生精细胞中凋亡蛋白Fas、FasL及Caspase-3的表达,且以50.0mg/kg剂量作用最为显著.

摘要： 随着糖尿病发病率的逐年增加，糖尿病导致的学习记忆功能障碍日益受到人们的重视。一方面，糖尿病可明显增加痴呆的发生风险，包括血管性痴呆(VaSClJlar。Demerltia，VD)和阿尔茨海默病(Alzheimer's Disease，AD);另～方面，糖尿病可以导致患者轻、中度认知功能的下降，表现为轻、中度学习、记忆和执行能力的下降。多种因素参与糖尿病认知功能下降的复杂病理过程，其中高血糖对脑神经元的影响是不可忽略的重要因素，而与学习记忆活动关系密切的海马更容易受到血糖水平的影响。中药筋脉通胶囊是北京协和医院的内部制剂，长期应用于临床，对糖尿病及其周围神经病变等慢性并发症具有较好的疗效。因此，本实验以原代培养海马神经细胞为靶细胞，观察高糖培养对海马神经细胞相关凋亡蛋白Bax、Bcl-2、Caspase一3表达的影响以及筋脉通含药血清的干预作用，以期探讨中药筋脉通对高糖培养海马神经细胞的保护作用。

摘要： 线粒体渗透性转换孔(MPTP)又称线粒体巨型通道，是横跨线粒体内外膜之间的非选择性高导电性通道，由多种蛋白质复合组成。作为线粒体上的一个特殊孔道，MPTP开放导致的线粒体膜通透性转换(MPT)被认为是线粒体导致细胞死亡的众多途径中关键的一个。MEPTP限制性地允许小分子通过，可调节线粒体内Ca2+平衡和减少其内自由基的产生，维持细胞的正常生理功能。当MPTP呈不可逆性高水平少量开放状态时，可导致线粒体水肿破裂，释放凋亡诱导因子和细胞色素C等凋亡蛋白，启动细胞编程性死亡。当MPTP呈不可逆性高水平广泛开放状态时，则抑制ATP合成，引起细胞坏死。本文介绍了线粒体通透性转换孔的结构与作用，并就线粒体通透性转换孔的调控进行浅谈。

摘要： 目的：观察新加良附方对人胃癌细胞(BGC-823)裸鼠移植瘤生长抑制作用及其对肿瘤组织中Bcl-2及Bax蛋白表达的影响。rn 方法：建立人胃癌细胞(BGC-823)裸鼠移植瘤模型，并将动物模型随机分为模型对照、5-氟脲嘧啶(5-Fu)及新加良附方高、中、低剂量5组。新加良附高、中、低剂量组给药剂量分别为10g·d-1·kg-1、5g·d-1·kg-1、2.5g-1·kg-1；5-Fu组给药剂量为17 mg·d-1·kg-1，腹腔注射，每周2次；模型对照组给予等量无菌生理盐水。连续给药、给水14天，处死裸鼠，剥取瘤块，称重计算肿瘤抑制率，并将肿瘤组织切片，免疫组化法检测Bel-2和Bax蛋白。rn 结果：新加良附高剂量组肿瘤抑制率为54.3％，其瘤重与模型对照组比较，有统计学意义(P＜0.05)；新加良附高剂量组可降低肿瘤组织中Bcl-2蛋白表达，升高Bax蛋白表达，与模型对照组比较，有统计学意义(P＜0.05，P＜0.01)。rn 结论：新加良附方可抑制胃癌裸鼠移植瘤的生长，并能下调Bel-2蛋白、上调Bax蛋白表达，推测诱导肿瘤细胞凋亡可能是新加良附方抗肿瘤机制之一。

摘要： 目的：探讨养阴扶正方抑制肺癌生长的分子机制.方法：建立Lewis肺癌移植瘤模型,造模成功后,10天后,处死荷瘤鼠,计算抑瘤率,免疫组化法检测瘤组织中bcl-2、bax、野生型p53的表达.结果：养阴扶正汤能够可抑制Lewis肺癌的生长,抑瘤率52.48％,联合组的抑瘤率达62.73％;养阴扶正汤组、顺铂组和联合组bcl-2蛋白表达下降,bax、野生型p53蛋白表达增加.结论：养阴扶正汤通过抑制bcl-2蛋白的表达,促进bax、野生型p53蛋白的表达,发挥了抗肺癌的作用.

摘要： 目的：探讨养阴扶正方抑制肺癌生长的分子机制.方法：建立Lewis肺癌移植瘤模型,造模成功后,10天后,处死荷瘤鼠,计算抑瘤率,免疫组化法检测瘤组织中bcl-2、bax、野生型p53的表达.结果：养阴扶正汤能够可抑制Lewis肺癌的生长,抑瘤率52.48％,联合组的抑瘤率达62.73％;养阴扶正汤组、顺铂组和联合组bcl-2蛋白表达下降,bax、野生型p53蛋白表达增加.结论：养阴扶正汤通过抑制bcl-2蛋白的表达,促进bax、野生型p53蛋白的表达,发挥了抗肺癌的作用.

摘要： 本发明属生物制药领域，具体涉及一种TRAIL变体蛋白表达、纯化，自组装。该重组蛋白由含有TRAIL融合蛋白基因的质粒在大肠杆菌表达，产生活性很高的该重组蛋白。该重组蛋白采用离心的方式进行简单、快速地纯化。纯化的蛋白在生理条件下自组装成为200纳米的微粒。静脉注射肿瘤移植小鼠后，该重组蛋白有效地在小鼠的肿瘤部位聚集。该重组蛋白腹腔注射肿瘤移植小鼠，有效抑制肿瘤生长。经简单工艺纯化后的该重组蛋白，用于肿瘤治疗。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体涉及本发明涉及的一种凋亡素-EC-SOD羧基末端蛋白转导域融合蛋白、基因、重组载体、转化体及其用途和制备方法。本发明公开了一种凋亡素-EC-SOD羧基末端蛋白转导域融合蛋白，其特征在于该融合蛋白含有与氨基酸序列如SEQ ID NO.1所述EC-SOD羧基末端蛋白转导域或其突变体融合的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所述凋亡素或其突变体。同时也公开了其基因、重组载体、转化体及其用途和制备方法。本发明所述凋亡素-EC-SOD羧基末端蛋白转导域融合蛋白具有很强的诱导肿瘤细胞凋亡的能力，可以用来制备治疗肿瘤的药物。

摘要： 本发明涉及式(I)的XIAP抑制剂化合物：其中的取代基如说明书中所述。本发明的化合物可用作治疗包括癌症在内的增殖性病症的治疗剂。

摘要： 本发明提供了人前列腺凋亡反应蛋白4(Par4)或其选择性凋亡癌细胞区(SAC)，与凋亡素2配体(Apo2L)融合的蛋白，即Par4-Apo2L、SAC-Apo2L融合蛋白，以及编码这些蛋白的DNA序列，含编码这些DNA序列的载体，含这些载体的宿主细胞，用基因工程制备这些蛋白的方法，以及含这些蛋白的药物组合物。本发明的Par4或SAC、Apo2L具有选择性诱导肿瘤细胞凋亡的作用，所以融合蛋白可以用于制备治疗如肿瘤等疾病的药物。

摘要： 本发明属生物制药领域，具体涉及一种TRAIL变体蛋白表达、纯化，自组装。该重组蛋白由含有TRAIL融合蛋白基因的质粒在大肠杆菌表达，产生活性很高的该重组蛋白。该重组蛋白采用离心的方式进行简单、快速地纯化。纯化的蛋白在生理条件下自组装成为200纳米的微粒。静脉注射肿瘤移植小鼠后，该重组蛋白有效地在小鼠的肿瘤部位聚集。该重组蛋白腹腔注射肿瘤移植小鼠，有效抑制肿瘤生长。经简单工艺纯化后的该重组蛋白，用于肿瘤治疗。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体涉及本发明涉及的一种凋亡素-EC-SOD羧基末端蛋白转导域融合蛋白、基因、重组载体、转化体及其用途和制备方法。本发明公开了一种凋亡素-EC-SOD羧基末端蛋白转导域融合蛋白，其特征在于该融合蛋白含有与氨基酸序列如SEQ ID NO.1所述EC-SOD羧基末端蛋白转导域或其突变体融合的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所述凋亡素或其突变体。同时也公开了其基因、重组载体、转化体及其用途和制备方法。本发明所述凋亡素-EC-SOD羧基末端蛋白转导域融合蛋白具有很强的诱导肿瘤细胞凋亡的能力，可以用来制备治疗肿瘤的药物。

摘要： 本发明涉及鉴定程序性细胞死亡的调节剂的方法，其包括Beclin蛋白质基序与BCL－2蛋白质家族的抗细胞凋亡成员发生相互作用及通过荧光偏振方法鉴定所述相互作用。可向癌症患者施用基于该方法鉴定的调节剂以诱导细胞凋亡型和/或自体吞噬型程序性细胞死亡。本发明也涉及与BCL－2蛋白质家族的抗细胞凋亡成员相互作用的Beclin蛋白质基序及其在癌症患者中诱导程序性细胞死亡的用途。

摘要： 一种Au与抗凋亡蛋白拮抗肽的复合物制备以及协同诱导肿瘤细胞凋亡的应用，涉及抗肿瘤药物领域。将金盐溶液与含有巯基的抗凋亡蛋白拮抗肽混合；在一定温度及pH条件下，发生氧化还原反应，将高价Au离子还原为Au原子或一价Au离子，Au通过作用于多肽的巯基，形成复合物AuP；含巯基抗凋亡蛋白拮抗肽选自具有拮抗细胞内抗凋亡蛋白功能的多肽。本发明的AuP复合物具有广谱的抗肿瘤活性，相较普通的肽金复合物或金化合物，可抑制硫氧还蛋白还原酶的活性，同时拮抗高表达的抗凋亡蛋白的功能，实现单药双靶的协同增效作用，显著提高疗效。可用于治疗慢性淋巴细胞白血病、急性单核细胞性白血病和非霍奇金淋巴瘤等多种恶性肿瘤。

摘要： 本发明提供了一种靶向抗凋亡蛋白BFL‑1的稳定多肽类蛋白共价抑制剂，其氨基酸序列是：Ac‑cyclic(MIAQC)LR(Aib)IGD(Aib)FNAYYARR。本发明还提供了上述的稳定多肽类蛋白共价抑制剂在制备用于靶向抗凋亡蛋白BFL‑1的药物中的用途。还提供了上述的稳定多肽类蛋白共价抑制剂在制备用于治疗BFL‑1高表达黑色素瘤或者胰腺癌的药物中的用途。本发明采用了多肽上甲硫氨酸‑半胱氨酸与双烷基化试剂反应形成单个锍盐的方法来稳定靶向BFL‑1的锍盐环肽。细胞增殖实验和凋亡实验也证明该多肽通过凋亡途径杀死高表达BFL‑1的肿瘤细胞如黑色素瘤细胞A375和胰腺癌细胞Miapaca‑2。

摘要： 本发明提供一种抗凋亡蛋白PTD‑FNK蛋白及其制备方法。以大鼠肝脏总RNA为模板，通过分子克隆技术及基因点突变技术，构建PTD‑FNK蛋白的原核表达载体pET28a(+)‑PTD‑FNK质粒，并将其转化入大肠杆菌BL21(DE3)中低温诱导PTD‑FNK的可溶性表达并分别从上清和沉淀中提取蛋白。