固定化细胞

摘要： 以海藻酸钠为载体,包埋法固定化短乳杆菌,催化L-谷氨酸钠合成γ-氨基丁酸,通过正交试验对细胞固定化条件进行优化,并对固定化细胞的酶学性质及操作稳定性进行研究。确定最佳固定化条件为海藻酸钠浓度2.5%、CaCl2浓度3.0%、固定化细胞平均粒径3.2 mm、硬化时间4 h。在此条件下制备的固定化细胞最适酶反应pH值为4.5,最适温度为35°C,且表现出较好的操作稳定性,重复利用至第7次后仍保持53.2%的相对酶活力。

摘要： 发酵型果酒是指以水果为主要原材料酿制而成的低度酒,营养丰富,风格独特。而发酵果酒一般采用两种发酵方式,传统游离型酵母发酵和固定化酵母发酵。综述了固定酵母细胞发酵果酒研究进展。主要从酵母细胞固定方法,固定化酵母发酵果酒的特点以及此方法在果酒上的应用等方向进行阐述。

摘要： 功能糖具有热量低、改善肠道菌群、防龋齿、降血糖等特殊功效,在我国消费量占比约24%。因此,发展功能糖绿色制造技术,对人民生命健康和国民经济发展有重要意义。为解决采用生物法合成功能糖过程中酶或细胞难以循环利用、稳定性差的问题,诸多固定化技术被开发应用于功能糖生物制造。该文系统介绍用于合成功能糖的固定化酶和固定化细胞技术,以期为绿色生物制造关键技术的研发和推广提供参考。

摘要： 目的利用细菌表面展示技术,以冰晶核蛋白INaA、INaK为锚定蛋白,将负电荷的氨基酸(天冬氨酸、谷氨酸)锚定在大肠杆菌表面(Escherichia coli),增加细胞膜表面携带的负电荷,与改性后带正电荷的生物炭吸附以强化生物炭固定化细胞的功能。利用2 mol·L-1的FeCl 3改性玉米秸秆生物炭使其呈正电性,将改性生物炭与细胞表面负电荷增加的重组菌株进行静电吸附,重组菌株EPA03与对照菌株相比吸附率提高31.75%。将此策略应用在固定化细胞高效生产IAA的菌株中,在全细胞催化连续循环中,菌株EPA03连续循环中能连续反应6个循环,IAA积累量比对照菌株提高了42.85%。

摘要： α-酮异己酸是重要的有机合成和药物合成中间体,在食品、医药和化工行业中应用广泛.目前,α-酮异己酸的合成以化学法为主,需要高成本的催化剂或特殊的起始结构,导致α-酮异己酸生产成本较高.首次在食品安全性菌株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)168中异源表达了普通变形杆菌(Proteus vulgaris)来源的L-氨基酸脱氨酶,以重组枯草芽孢杆菌作为全细胞催化剂、L-亮氨酸为底物实现了α-酮异己酸的一步法生物合成.其次,针对全细胞催化条件进行优化,最优条件(全细胞催化剂20 g/L、L-亮氨酸浓度100 mmol/L、反应温度45°C、pH 10.0、MgCl2浓度5 mmol/L)下,转化24 h,可获得3.66 g/L的α-酮异己酸,且重复转化3次后,固定化细胞比游离细胞的再利用率提高了37.3％.该研究成功实现了以食品安全菌株B.subtilis 168为宿主一步法生物合成α-酮异己酸,为α-酮异己酸以及其他重要α-酮酸的工业化安全合成提供了新策略.

摘要： D-阿洛酮糖3-差向异构酶(D-allulose-3-epimerase)是异构化D-果糖生成D-阿洛酮糖(D-allulose)的关键酶.为提高D-阿洛酮糖3-差向异构酶的热稳定性并获得可重复使用的D-阿洛酮糖3-差向异构酶重组枯草芽孢杆菌固定化细胞,N端融合双亲短肽,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,异源D-阿洛酮糖3-差向异构酶在枯草芽孢杆菌中正确折叠,蛋白大小为33 kDa.40°C孵育48 h,SAP1-DSDPEase残余酶活仍保持在58％.固定化细胞最优条件为海藻酸钠浓度2％、二氧化钛添加量1∶4(二氧化钛∶海藻酸钠)、氯化钙溶液浓度2％、戊二醛0.02％作为交联剂.该条件下固定化细胞酶活回收率高达82％,固定化细胞与游离细胞相比,最适反应温度不变均为80°C,热稳定性提高,连续10次操作使用,酶活回收率仍保留58％,机械强度仍保持100％,转化率仍保持在28.8％,残余酶活保持在70.5％.在海藻酸钠溶液中加入二氧化钛可减少固定化细胞的细胞泄露,增大了机械强度.

摘要： 本文以海藻酸钠-聚乙烯醇-木质素为复合载体、自行筛选的高效降解菌Bacillus siamensis L5为目标菌制备固定化细胞,探究了pH、培养时间、投加量等因素对固定化细胞降解高效氯氰菊酯的影响,并评价了固定化细胞的重复使用性.通过单因素试验分析,结果表明,固定化细胞在30°C、pH为7.0、投加量为1g、培养7d的条件下对200 mg/L的高效氯氰菊酯降解率为96.92％.固定化细胞经过3次重复培养仍保持着81.26％的降解率.

摘要： 分枝杆菌全细胞催化的选择性植物甾醇侧链降解反应可用于生产甾体药物重要中间体雄烯二酮(AD),由于存在底物低水溶解度和产物抑制与降解等问题,该反应的转化效率较低。深共熔溶剂(DESs)是一种新型的绿色溶剂,可以作为助溶剂有效促进底物溶解。本研究在甜菜碱(Bet)与麦芽糖(Mal)或半乳糖(Gal)组成的2种DESs构成的转化体系中,以甲基丙烯酸羟乙酯和甲基丙烯酸正丁酯聚合的晶胶微球为基质,研究了固定化分枝杆菌细胞降解植物甾醇侧链生产AD的过程。结果表明:晶胶微球能够有效分散细胞,提高了细胞利用率,固定化后单位细胞AD产量提高了6.8倍。DESs可缓解AD降解和减少AD在晶胶微球内的累积,经过3批次半连续转化后,在含10%体积分数Bet/Mal体系中的单位细胞干重(DCW)的总AD产量可达401.4 mg/g,是缓冲液体系悬浮培养细胞的12倍。在含DESs体系中晶胶微球固定化分枝杆菌能促进植物甾醇降解从而提高AD产量,具有潜在的工业应用前景。

摘要： 本文针对玉米芯等生物质资源利用的问题，通过表达载体pGAPZB将来源 于热带假丝酵母的木糖还原酶基因(XYL1)引入巴斯德毕赤酵母X-33，进行成功表 达，总酶活达到1.64U/mg。采用海藻酸钙凝胶包埋法固定该重组菌，研究固定化 条件下玉米芯水解液的发酵特性。结果表明，木糖醇转化率在pH 6.0、30°C、接 种量20%、装液量24%、转速130 rpm时达到最高，为37.5%。本文首次在毕赤酵 母成功表达XYL1，并研究固定化细胞发酵条件，以期为生物转化法大规模生产木 糖醇以及乙醇提供新的选择途径。

摘要： 以聚乙烯醇(PVA)与海藻酸钠这两种载体复合包埋热带假丝酵母细胞，制备成固定化细胞颗粒，研究了PVA的浓度对细胞颗粒的形貌及木糖醇发酵性能的影响。扫描电镜分析表明，发酵后的细胞颗粒表面出现破裂或小孔，致使产生游离细胞，但游离细胞的量并非随颗粒机械强度的增加而减少。PVA浓度变化对细胞在颗粒中的分布、形态和木糖醇发酵性能影响很大。PVA浓度较低时，固定化细胞颗粒外层细胞密布，颗粒中心也有较多细胞，细胞呈饱满的卵圆形。随PVA浓度增加，颗粒内部的细胞逐渐减少。PVA浓度达到60 g／L以上时，细胞主要分布在颗粒外层，且呈现聚集生长的现象，部分细胞发生变形。PVA浓度在40～60g／L范围内时，获得了较高的木糖醇得率，约0.6 g／g，但是木糖消耗较慢。

摘要： 固定化细胞技术(Immobilized cells technology)作为生物工程的一个重要组成部分，本文介绍了固定化细胞所采用的主要技术原理和在应用研究方面取得的成绩，并提出了未来在固定化细胞基础研究方面的重点。

摘要： 本文采用载体pGAPZB首次将来源于C.tropicalis木糖还原酶基因(XYL(l))在Pichia pastorisX-33中成功表达,进行固定化细胞发酵特性研究.以期为生物转化法大规模生产木糖醇提供新的选择途径.

摘要： 以海藻酸钠、壳聚糖为载体材料,以纳米Fe3O4粉末为磁性材料,以地衣芽孢杆菌为细胞模型,采用脉冲电场液滴制备工艺,制备具有超顺磁性的微尺度载细胞微胶囊。以地衣芽孢杆菌的生长特性为考察指标,考察了不同磁含量,磁场引力,粒径,初始菌浓等因素的影响。实验结果表明,微囊化培养体系对地衣芽孢杆菌的生长没有影响。制备磁性固定化地衣芽孢杆菌微胶囊的最适条件为:Fe3O4 含量0.003g/ml,初始接种密度为1.5 倍菌浓，粒径为350μm,磁场的引入对地衣芽孢杆菌的生长及微胶囊的磁响应性无明显影响。证明了磁性壳聚糖/海藻酸钙微胶囊固定化细胞的可行性。

摘要： 本文利用固定化粘红酵母细胞，以苯丙氨酸解氨酶(PAL)/肉桂酸途径制备 L-Phe。并对固定化条件、固定化细胞部分酶活性质、效应因子和戊二醛化学修饰对固定化细胞酶活的影响、酶反应条件以及固定化细胞批式反应制备L-Phe进行了研究。并通过对固定化细胞酶反应条件的优化，确定最优的酶反应条件。

摘要： 从富油土壤中分离到9株产脂肪酶杆菌,其中BD3菌株产脂肪酶能力较强.通过测定其生理生化特征,初步鉴定该菌为假单胞菌属.我们利用聚乙醇(PVA)和硼酸交联作为固定化BD3菌株细胞的载体,并进行了转酯化的初步研究,发现低浓度PVA制成的固定化细胞首批催化效率明显高于浓度PVA制成的固定化细胞.而且固定化细胞之后的酶活力与固定化细胞前的酶活力相比有所下降,但固定化细胞可重复使用多批次仍然有活性。

摘要： 本文针对表面吸附细菌成膜的平板式光生物制氢反应器，实验研究了不同光波长对光合细菌生物膜生长及产氢性能影响。结果表明：在相同条件下，波长为590nm时培养形成的生物膜具有最大的细菌覆盖率和生物膜密度、以及较高的产氢性能。不同光波长条件下形成的生物膜均在运行入射光照波长为590 nm时产氢速率达到最大。在最佳光波长条件下，存在对应于最大产氢速率的最佳底物浓度60 mmol/l，过高或过低的底物浓度均会对产氢产生抑制作用。光合细菌生物膜最大产氢速率为11.20mmol/(m2·h)。

摘要： 本文针对表面吸附细菌成膜的平板式光生物制氢反应器，实验研究了不同光波长对光合细菌生物膜生长及产氢性能影响。结果表明：在相同条件下，波长为590nm时培养形成的生物膜具有最大的细菌覆盖率和生物膜密度、以及较高的产氢性能。不同光波长条件下形成的生物膜均在运行入射光照波长为590 nm时产氢速率达到最大。在最佳光波长条件下，存在对应于最大产氢速率的最佳底物浓度60 mmol/l，过高或过低的底物浓度均会对产氢产生抑制作用。光合细菌生物膜最大产氢速率为11.20mmol/(m2·h)。

摘要： 本文针对表面吸附细菌成膜的平板式光生物制氢反应器，实验研究了不同光波长对光合细菌生物膜生长及产氢性能影响。结果表明：在相同条件下，波长为590nm时培养形成的生物膜具有最大的细菌覆盖率和生物膜密度、以及较高的产氢性能。不同光波长条件下形成的生物膜均在运行入射光照波长为590 nm时产氢速率达到最大。在最佳光波长条件下，存在对应于最大产氢速率的最佳底物浓度60 mmol/l，过高或过低的底物浓度均会对产氢产生抑制作用。光合细菌生物膜最大产氢速率为11.20mmol/(m2·h)。

摘要： 本发明提出了一种廉价的可用于细胞固定化的无机多孔吸附载体。该载体利用粘土烧制而成，具有多孔性、对微生物细胞无毒、机械强度大、性质稳定、可反复使用，价格低廉、细胞固定操作简单、细胞固定量大等特点，可用于工业化规模的细胞固定化。用该载体固定硝化细菌，制备用于将水体中铵转化为硝酸盐的固定化硝化细菌，所得固定化硝化细菌对铵的转化速度快、效率高。固定化硝化细菌转化氨的方法：将固定化硝化细菌置于网状容器内，并将网状容器置于硫酸铵溶液中或含铵水体中，经过一定时间，固定化硝化细菌就可以将铵转化为硝态氮。网状容器内的固定化硝化细菌可以重复使用。将固定化硝化细菌置于5g/L、20g/L两种浓度的硫酸铵溶液中，4h后，铵态氮的平均转化率分别为79.7％-83.6％、86.5％-86.7％。在4°C低温下保存半年，固定化硝化细菌的硝化能力未下降。

摘要： 本发明公开了一种生产固定化酶或细胞的固定化装置及其固定化方法，该装置由混合器、物料分配器、滴定器和固化箱四个主要部分组成，集交联固化剂溶液制备、固定化载体与微生物细胞（或酶）混合溶液制备、固定化酶滴定与固化等功能于一体，批量生产固定化酶。

摘要： 本发明公开一种开孔有机泡沫材料作为固定化酶/固定化细胞的载体以及相关的固定化酶/固定化细胞的制备技术。本发明采用凝絮交联的方法将酶蛋白/固定化细胞固定在开孔有机泡沫材料上，制成的固定化产品比表面积大，比活性高，并可制成形态多样的产品。

摘要： 本发明公开了一种拆装式固定化酶或固定化细胞模型教具，其包括圆盘形的盆体、活动设置在所述盆体上方的盖体、第一连接体、第二连接体、第三连接体、第四连接体，所述盖体顶面为镂空网，所述第一连接体为球体，所述第二连接体为底部设置有连接杆的球体，所述第三连接体为底部设置有倒T形的连接体的球体，所述第四连接体为结点圆球底部设置有连接杆的环形珠串。本发明结构简单，能生动形象的演示酶或细胞的多种固定化方式。

摘要： 本发明公开了一种磁固定床快速固定化细胞的方法，具有过程简单、耗能小、耗时短、设备简单、可连续操作、对固定化的细胞活性影响较小、方便装载和卸载细胞等一系列优点，在生物催化等领域有着广泛的应用前景。

摘要： 本发明提供一种制备固定化蛋白质、酶或细胞的装置及固定化方法。本发明提供的制备固定化蛋白质/固定化酶/固定化细胞的装置，可以将蛋白质/酶/细胞固定在载体上，从而可以实现固定化蛋白质/酶/细胞的批量和工业化生产。

摘要： 本发明公开一种开孔有机泡沫材料作为固定化酶/固定化细胞的载体以及相关的固定化酶/固定化细胞的制备技术。本发明采用凝絮交联的方法将酶蛋白/固定化细胞固定在开孔有机泡沫材料上，制成的固定化产品比表面积大，比活性高，并可制成形态多样的产品。

摘要： 本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种耐受有毒产物的细胞固定化方法及该固定化细胞转化生产1,5‑戊二胺的连续化生产工艺。本申请对聚乙烯醇与海藻酸钠配比及相应的成胶方法进行了研发优化，制备的固定化细胞具有可耐受高浓度1,5‑戊二胺对菌体细胞的损伤、有较好的膨胀性能、可耐受转化过程中大量二氧化碳气体的释放对结构的影响、机械强度高、使用寿命长等优点；并且分批使用6次以后活力保持在98%以上，连续使用12h后活力保持在70%以上。本发明所提供的连续化生产工艺所需设备少，便于操作，生产规模放大容易，自动化程度高。生产过程不添加任何中和剂；产品澄清，分离纯化容易。

摘要： 本发明公开了一种拆装式固定化酶或固定化细胞模型教具，其包括圆盘形的盆体、活动设置在所述盆体上方的盖体、第一连接体、第二连接体、第三连接体、第四连接体，所述盖体顶面为镂空网，所述第一连接体为球体，所述第二连接体为底部设置有连接杆的球体，所述第三连接体为底部设置有倒T形的连接体的球体，所述第四连接体为结点圆球底部设置有连接杆的环形珠串。本发明结构简单，能生动形象的演示酶或细胞的多种固定化方式。

摘要： 本实用新型公开了一种拆装式固定化酶或固定化细胞模型教具，其包括圆盘形的盆体、活动设置在所述盆体上方的盖体、第一连接体、第二连接体、第三连接体、第四连接体，所述盖体顶面为镂空网，所述第一连接体为球体，所述第二连接体为底部设置有连接杆的球体，所述第三连接体为底部设置有倒T形的连接体的球体，所述第四连接体为结点圆球底部设置有连接杆的环形珠串。本实用新型结构简单，能生动形象的演示酶或细胞的多种固定化方式。