氧糖剥夺

摘要： 背景:人参皂苷Rg3在脑缺血疾病中具有一定的神经保护作用,但其对氧糖剥夺/复糖复氧损伤的PC12细胞是否也有保护作用,目前尚不明确。目的:研究人参皂苷Rg3对氧糖剥夺/复糖复氧损伤的PC12细胞是否有保护作用以及相关机制。方法:构建高分化PC12细胞的氧糖剥夺/复糖复氧损伤模型,采用MTT、乳酸脱氢酶、Calcein-AM/PI染色、Western blot、流式检测氧糖剥夺/复糖复氧损伤后对PC12细胞的影响,以及不同浓度人参皂苷Rg3处理PC12细胞后的保护作用,并且使用PI3K/AKT通路抑制剂LY294002和AKT激活剂SC79从PI3K/AKT信号通路研究其作用机制。结果与结论:①氧糖剥夺/复糖复氧损伤模型能随着缺糖缺氧时间的延长从而降低PC12细胞的存活率,促进细胞凋亡,上调p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白比值,促进NLRP3炎性小体、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、BAX蛋白的表达,促进乳酸脱氢酶的释放;②人参皂苷Rg3在一定浓度范围内能提高氧糖剥夺/复糖复氧损伤的PC12细胞存活率、减少乳酸脱氢酶的释放,抑制细胞凋亡,降低p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT蛋白比值,下调NLRP3炎性小体、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、BAX蛋白的表达,还会降低活化的caspase-9蛋白表达,促进活化的caspase-3蛋白表达;③LY294002对氧糖剥夺/复糖复氧损伤的PC12细胞的保护作用与人参皂苷Rg3相当,而SC79可以减轻人参皂苷Rg3对PC12细胞的保护效果。因此,人参皂苷Rg3可以通过抑制PI3K/AKT信号通路,抑制PI3K和AKT的磷酸化,发挥抗炎、抗凋亡的作用,减轻氧糖剥夺/复糖复氧对PC12细胞造成的损伤。

摘要： 目的 通过氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)体外模拟细胞缺血缺氧,观察人牙髓细胞(hu-man dental pulp cells,hDPCs)内质网应激变化,为缺血缺氧条件调控hDPCs的机制研究提供依据.方法 应用无糖DMEM培养液联合低氧培养(体积分数2％O2)构建hDPCs OGD模型,体外模拟hDPCs缺血缺氧,设置对照组和实验组.对照组:常规培养;实验组:OGD处理0、2、4、8 h.MTT检测hDPCs OGD处理0、2、4、8 h后细胞存活率;qRT-PCR检测hDPCs内质网应激关键分子:剪切X盒结合蛋白1(splicing x-box binding protein 1,sXBP1)、活化转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,chop)mRNA水平,Western blot检测内质网应激关键蛋白:磷酸化蛋白激酶样内质网激酶(phosphorylated RNA-activated protein kinase-like ER-resident kinase,p-perk)、磷酸化真核起始因子-2α(phosphorylated eukaryotic initia-tion factor-2α,p-eIF2α)表达水平.结果 相较于OGD处理0 h,OGD培养hDPCs 2、4、8 h后,死亡细胞增多,细胞存活率显著下降(P<0.05).与对照组相比,OGD处理4 h后,hDPCs内质网应激关键信号分子sXBP1、ATF4、CHOP mRNA表达水平升高;内质网应激关键蛋白p-perk、p-eIF2α表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 hDPCs OGD培养条件下内质网应激水平明显升高.

摘要： 目的探讨多核糖核苷酸核苷转移酶1(PNPT1)对氧糖剥夺(OGD)诱导心房肌细胞凋亡的影响和作用机制。方法体外培养HL-1心房肌细胞,PNPT1-siRNA转染HL-1细胞。实验分组为:正常组(Control)、OGD组、NC-siRNA组(转染乱码RNA)、PNPT1-siRNA组、OGD+NC-siRNA组和OGD+PNPT1-siRNA组。通过CCK-8检测细胞存活率,qPCR检测ACTB mRNA和TUBA mRNA的含量,Western blot检测PNPT1蛋白水平,流式细胞术检测HL-1细胞凋亡率,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,透射电镜观察线粒体形态。结果随OGD诱导时间延长,HL-1细胞质中PNPT1的蛋白表达水平呈上升趋势(P<0.05)。与NCsiRNA相比,PNPT1-siRNA明显减少细胞内PNPT1表达。OGD条件下,ACTB mRNA和TUBA mRNA降解增加(P<0.05),HL-1心房肌细胞凋亡率增加(P<0.05);相反地,PNPT1-siRNA则抑制ACTB mRNA和TUBA mRNA降解(P<0.05),同时降低HL-1心房肌细胞凋亡率(P<0.05),并且改善线粒体膜电位以及线粒体形态。结论抑制PNPT1可改善线粒体损伤并减少凋亡相关mRNA的降解,从而减轻OGD诱导的HL-1心房肌细胞凋亡损伤。

摘要： 目的:探讨活血定眩胶囊(HXDX)对氧糖剥夺(OGD)诱导小鼠脑微血管内皮细胞株bEnd.3铁死亡的影响。方法:将bEnd.3细胞分为空白对照(control)组、OGD组、OGD+铁死亡抑制剂ferrostatin-1(Fer-1)组及OGD+HXDX组,control组细胞正常培养,其他组建立OGD模型,OGD+Fer-1组和OGD+HXDX组分别加入1μmol/L Fer-1和10%HXDX含药血清后OGD处理6 h。FerroOrange探针测定细胞内Fe^(2+)水平,DCFH-DA探针检测活性氧(ROS)含量,试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)水平,Western blot检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、铁蛋白重链1(FTH1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、环加氧酶2(COX2)和NADPH氧化酶1(NOX1)蛋白表达。结果:与control组比较,OGD组bEnd.3细胞内Fe^(2+)荧光强度与ROS含量显著增加;SOD活性降低,GSH表达下降,MDA含量显著增高(P<0.05);FTH1和GPX4表达降低,ACSL4、COX2和NOX1表达升高(P<0.05),Nrf2无显著差异。HXDX含药血清处理后,Fe^(2+)水平和ROS含量显著降低(P<0.05);SOD活性和GSH含量显著升高,MDA水平显著降低(P<0.05);Nrf2、FTH1与GPX4蛋白的表达显著增高(P<0.05),COX2和NOX1蛋白表达降低(P<0.05),ACSL4无显著差异。结论:活血定眩胶囊可抑制体外OGD诱导的bEnd.3细胞铁死亡,其机制与降低细胞内Fe^(2+)和ROS含量、减轻脂质过氧化及调控铁死亡相关蛋白表达有关。

摘要： 目的 观察大鼠原代神经元氧糖剥夺损伤后,脑泰方通过调节二价金属离子转运体1(divalent metal transporter 1,DMT1)、转铁蛋白受体(transferrin receptor,TfR)、铁调素(hepcidin,Hep)及膜铁转运蛋白(ferroportin,FPN)表达变化,探讨脑泰方对氧糖剥夺损伤神经元保护机制。方法 将原代培养大鼠神经元随机分为对照(CG)组、氧糖剥夺模型(OGD)组、脑泰方干预氧糖剥夺模型(NTF)组。MTT法检测各组神经元细胞存活率;荧光探针检测各组神经元细胞内二价铁离子(Fe^(2+))、活性氧(reactive oxygen species,ROS)浓度;Western blot法检测各组神经元细胞Hep、DMT1、TfR、FPN蛋白表达。结果 与CG组比较,OGD组、NTF组神经元细胞存活率均明显降低(P<0.01);与OGD组比较,NTF组神经元细胞存活率明显升高(P<0.01)。与CG组比较,OGD组、NTF组神经元细胞内Fe^(2+)、ROS浓度均明显升高(P<0.01);与OGD组比较,NTF组神经元细胞内Fe^(2+)、ROS浓度均显著降低(P<0.01)。与CG组比较,OGD组、NTF组神经元细胞Hep表达均明显降低(P<0.01),DMT1、TfR、FPN表达均明显升高(P<0.01);与OGD组比较,NTF组神经元细胞Hep表达明显升高(P<0.01),DMT1、TfR、FPN表达均明显降低(P<0.01,P<0.05)。结论 脑泰方通过促进神经元细胞Hep的表达,抑制神经元细胞DMT1、TfR、FPN表达,减少氧糖剥夺损伤后神经元细胞内Fe^(2+)及ROS聚积,起到保护神经元,减轻氧糖剥夺损伤的作用。

摘要： 目的探讨人胎盘间充质干细胞诱导的神经干细胞条件培养基对氧-糖剥夺后的海马神经干细胞的保护作用。方法建立将人胎盘间充质干细胞诱导成神经干细胞的方法,检测诱导后的神经干细胞的生物学特性;收集诱导的神经干细胞的条件培养基;原代培养小鼠海马神经干细胞并鉴定其神经干细胞相关分子的表达;建立原代海马神经干细胞氧-糖剥夺模型;采用EdU染色比较正常组(Normal组)、氧-糖剥夺组(OGD组)和氧-糖剥夺+条件培养基组(OGD+CM组)神经干细胞的增殖能力;采用免疫荧光染色法检测不同组凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase-3的表达;采用Western blot法检测不同组SOD蛋白的表达;采用流式细胞术检测不同组ROS水平情况。结果荧光染色结果显示,与Normal组相比,OGD组神经干细胞EdU阳性细胞数减少,Cleaved-Caspase-3阳性细胞数目增加(P均<0.05);与OGD组相比,OGD+CM组神经干细胞的EdU阳性细胞数增多,Cleaved-Caspase-3阳性细胞数目减少(P均<0.05)。Western blot结果显示,与Normal组相比,OGD组SOD蛋白表达下降(P<0.05);与OGD组相比,OGD+CM组SOD蛋白表达升高(P<0.05)。流式细胞术结果显示,与Normal组相比,OGD组ROS表达升高(P<0.05);与OGD组相比,OGD+CM组ROS表达降低(P<0.05)。结论人胎盘间充质干细胞诱导的神经干细胞条件培养基能够提高氧-糖剥夺损伤的海马神经干细胞的增殖能力,减少细胞凋亡并促进细胞内的抗氧化能力恢复。

摘要： 目的探究干扰素-lambda(interferon-lambda,IFN-λ)对氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)诱导的血脑屏障(blood brain barrier,BBB)模型通透性的影响及机制。方法通过Transwell共培养模型,将b.End3细胞在Transwell的上腔室培养,星形胶质细胞在下腔室培养,构建BBB模型。将BBB模型分为对照组、OGD/R处理组、IFN-λ干预组,每组设3个复孔。OGD/R处理组给予OGD/R处理,IFN-λ干预组在给予OGD/R处理的基础上给予IFN-λ干预。采用qRT-PCR检测IFN-λ在OGD/R模型中是否发挥作用;通过qRT-PCR实验确定构成Transwell共培养模型的星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞(b.End3)能否表达IFN-λ的受体;根据Transwell渗透性实验FITC-dextran-10000渗透情况,评估IFN-λ处理后对OGD/R模型BBB通透性的影响;通过qRT-PCR、Western blot和荧光共聚焦实验检测b.End3细胞紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-5 mRNA及蛋白表达水平。结果qRT-PCR检测结果显示,与对照组相比,OGD/R处理组星形胶质细胞和b.End3细胞IFN-λ2和IFN-λ3表达增加(P0.05);Transwell渗透性实验结果显示,与OGD/R处理组相比,IFN-λ干预组FITC-dextran-10000渗透量明显降低(P<0.05);qRT-PCR检测结果显示,与OGD/R处理组相比,IFN-λ干预组b.End3细胞紧密连接蛋白mRNA表达增加(P<0.05);Western blot检测结果显示,与OGD/R处理组相比,IFN-λ干预组b.End3细胞紧密连接蛋白表达增加(P<0.05);免疫荧光共聚焦检测结果显示,IFN-λ干预组b.End3细胞紧密连接蛋白平均荧光强度高于OGD/R处理组(P<0.05)。结论IFN-λ能够促进紧密蛋白表达和连接性,降低OGD/R诱导的BBB的通透性。

摘要： 目的:通过肠吸收液-体外药理活性结合拆方研究蛭蛇通络胶囊抗氧化和抗凝的主要组分。方法:根据制备工艺路线将蛭蛇通络胶囊进行拆方,得到全方和3个组分,分别制备相应的肠吸收液。通过DPPH自由基清除实验观察抗氧化作用,通过凝血四项和ADP诱导血小板凝集实验观察抗凝作用。构建氧糖剥夺SH-SY5Y细胞模型,验证蛭蛇通络胶囊全方及拆方组分通过抑制氧化应激发挥神经保护作用。结果:蛭蛇通络胶囊能清除DPPH自由基,最强的成分为含人参、黄芪、天麻、丹参和葛根的组分1;降低纤维蛋白原(FIB)水平、延长凝血酶时间(TT)并抑制ADP诱导的血小板凝集最强的成分为含水蛭、乌梢蛇和红花的组分2。蛭蛇通络胶囊全方和含人参、黄芪、天麻、丹参和葛根的组分1均能抑制氧糖剥夺SH-SY5Y细胞内乳酸脱氢酶(LDH)释放,升高超氧化物歧化酶(SOD)活性,降低丙二醛(MDA)水平,抑制神经细胞损伤,提高细胞生存率。结论:通过制备工艺路线将蛭蛇通络胶囊进行快速拆解,寻找并定位全方中发挥抗氧化和抗凝的主要组分。结果证实蛭蛇通络胶囊清除DPPH自由基,发挥抗氧化作用以含人参、黄芪、天麻、丹参和葛根的组分为最佳;抗凝血作用以含水蛭、乌梢蛇和红花的组分最佳。本研究为中药复方的功效物质基础提供了实验证据,但其有效成分和具体机制仍需深入研究。

摘要： 目的探讨miRNA-320对氧糖剥夺后P12细胞影响及机制.方法将P12细胞分为4组,正常对照组,模型组,miRNA-320拟似物组以及miRNA-320抑制剂组,氧糖剥夺4 h后,P12细胞恢复到正常氧糖环境中,24 h后收集细胞.采用MTT测定细胞增殖存活率,TUNEL检测细胞凋亡qRT-PCR检测miRNA-320、IGF-1 mRNA水平,WB测定IGF-1蛋白表达水平.结果与对照组比较,模型组细胞增殖力减弱、细胞凋亡增加(P<0.01)、miRNA-320表达上调(P<0.01),IGF-1 mRNA及IGF-1蛋白表达下降(P<0.01).与模型组比较,miRNA-320拟似物组细胞增殖显著下降、细胞凋亡增加、miRNA-320表达上调、IGF-1 mRNA及IGF-1蛋白表达下降,差异有统计学意义(P<0.05),而抑制剂组与之相反.结论miRNA-320通过作用于IGF-1发挥其促凋亡、抗增殖作用.

摘要： 目的:通过OGD/R处理PC12细胞,证明NaAc在人类缺血性脑卒中中的作用和意义。方法:OGD模型的建立:用无氧糖培养液处理PC12细胞作为脑缺血再灌注损伤的体外模型;使用CCK-8比色法检测OGD损伤后NaAc对PC12细胞的保护状况;使用免疫印迹法Western blot检测OGD损伤后的NaAc对PC12中ATF-6蛋白水平的影响。结果:OGD损伤后,补充浓度为6 mM的NaAc可增加PC12的存活率(n = 6, F = 70.10, P < 0.05);OGD损伤后,PC12中ATF-6的表达升高(t = 2.98, P < 0.05);向正常的PC12细胞补充NaAc后ATF-6表达降低(t = 3.11, P < 0.05);在损伤后的PC12细胞中添加浓度为6 mM的NaAc后,ATF-6的表达水平降低(n = 6, F = 2.09, P < 0.05)。结论:OGD损伤后,PC12中添加浓度为6 mM的NaAc是通过抑制ATF-6的表达来发挥神经保护作用。

摘要： 目的：探讨人参皇苷Rg1(Rg1)对PC12细胞氧糖剥夺后再复糖复氧(OGD/R)诱导的细胞自噬性损伤的作用及作用机制. 方法：以PC12细胞建立OGD/R自噬性损伤模型,观察Rg1抗OGD/R后细胞自噬性损伤的作用,并从PI3KⅠ/Akt/m-TOR和PI3KⅢ/Becline-1/Bcl-2信号通路研究其作用机制. 结果：Rg1能增加OGD/R诱导的PC12细胞存活、减少乳酸脱氢酶(LDH)漏出;同时抑制细胞自噬体的形成,降低胞浆LC3-Ⅱ阳性斑片的数量、下调LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白比值而上调p62蛋白表达.机制研究结果表明,Rg1提高了PI3KⅠ、Akt、m-TOR蛋白磷酸化水平,对PI3KⅢ、Berline-1和Bcl-2蛋白表达没有影响. 结论：在缺糖缺氧2h再复糖复氧24h,细胞出现过度噬和损伤,Rg1均能减轻OGD/R诱导的PC12细胞自噬性损伤,其机制可能与激活PI3KⅠ/Akt/m-TOR信号通路有关.

摘要： 目的：观察氧糖剥夺/再灌注(OGD/OGD-R)诱导大鼠嗜铬细胞瘤细胞PC12自噬和凋亡的发生及进展.方法：PC12细胞经氧糖剥夺及再灌注处理建立OGD/OGD-R模型,在处理不同时间点,应用GuavaNexin法检测OGD组及OGD-R组细胞活性和凋亡率;WesternBlot法检测自噬相关蛋白LC3II、Beclin1及凋亡相关蛋白Bax、aCaspase3表达变化;免疫荧光法观察自噬小体;分别使用自噬上下游抑制剂(3-甲基腺嘌呤、E64d+pepstatinA)进行调控,观察自噬的波动;透射电子显微镜法直接观察自噬相关超微结构改变.结果及结论：OGD/OGD-R均能激活PC12细胞自噬和凋亡,可为进一步探索脑缺氧/再灌注损伤病理生理过程中自噬与凋亡间潜在的串流奠定基础.

摘要： 目的：研究原代大鼠星形胶质细胞对氧糖剥夺培养的增殖性应答反应,探讨建立良好模拟新生期缺氧缺血脑损伤后星形胶质细胞增殖的体外模型.方法：采用CCK-8(CellCounting Kit-8)法、EdU(Ethynyl deoxyuridine)掺入法和PCNA(Proliferating cellnuclearantigen)免疫组织化学染色法检测原代大鼠星形胶质细胞在氧糖剥夺(1％O2、无糖含血清培养基)培养不同时间(0、3、6、9小时)的增殖情况.结果：CCK-8检测结果显示随氧糖剥夺培养时间延长原代大鼠星形胶质细胞活力逐渐增强,6小时达高峰,与相应时间点正常培养的对照组比较有统计学差异;随后减弱,9小时已接近对照组水平.结论：氧糖剥夺(1％O2、无糖含血清培养基)培养6小时显著的诱导了原代大鼠星形胶质细胞的增殖,成功模拟了体内缺氧缺血后星形胶质细胞增殖改变,为进行缺氧缺血性脑损伤后星形胶质细胞过度增殖的相关研究提供了稳定可靠的体外实验模型和理论依据.

摘要： 缺氧缺血导致的钙内流致钙超载是神经元凋亡的重要途径,AMPA受体在调控钙内流中发挥着重要作用,以GluR2亚基最为重要。衔接蛋白AP4可选择性的介导AMPA受体的运输,AP4M1基因编码的AP4蛋白的μ亚基的缺失可导致多种严重神经功能障碍,该亚基与GluR2结合参与突触可塑性的调控。本研究旨在探讨氧糖剥夺(Oxygen glucose deprivation,OGD)对海马神经元内AP4M1表达的影响,从而探寻神经元损伤的机制。研究结果表明，AP4M1的mRNA及蛋白在氧糖剥夺的原代海马神经元中表达下调，可能是神经元损伤过程中的重要途径。

摘要： 目的:观察血府逐瘀口服液干预氧糖剥夺(OGD)及SIRT1转染H9c2大鼠心肌细胞模型,通过调节SIRT1观察细胞活性的变化.rn 方法:将H9c2大鼠心肌细胞分为6组:正常组,OGD组,SIRT1转染模型组,OGD+SIRT1转染模型组,OGD+血府逐淤口服液给药给药组,OGD+SIRT1转染模型+给药组.采用CCK-8试剂盒绘制细胞生长曲线,进行SIRT1细胞转染并对分组进行血府逐瘀口服液干预,通过吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双重荧光染色在光镜下观察细胞形态;荧光定量PCR检测SIRT1浓度与蛋白质表达情况,得出结论.rn 结果:RT-PCR测得SIRT1在OGD组、SIRT1转染组、OGD+SIRT1转染组、OGD+给药组与OGD+SIRT1转染模型+给药组中较正常组表达显著降低.SIRT1在OGD+给药组与正常组的表达差异是各组最小的,在OGD+SIRT1转染模型+给药组与正常组比较差异最为显著.rn 结论:本研究结果证明了SIRT1在体外氧糖剥夺心肌细胞中的抗凋亡作用,揭示SIRT1可能是血府逐瘀口服液抗心肌细胞凋亡功能的作用靶点之一.

摘要： 目的：构建PC12细胞OGD/OGD-R模型,观察处理不同时间点自噬现象的发生及进展.了解mTOR/p70S6K信号通路的激活状态并探讨其与Beclin 1介导参与的自噬信号通路间是否存在相关性;判断PC12细胞凋亡与自噬时程联系.探讨进一步药物激活或抑制自噬后对PC12细胞的促存活/死亡的效应.方法：建立PC12细胞OGD/OGD-R模型,Western Blot法检测自噬相关蛋白LC311、Beclin 1,凋亡相关蛋白Bax、aCaspase 3,mTOR(Ser2448)及其下游p70S6k(Thr389)磷酸化水平表达;LC3ll Turnover实验评价自噬潮;免疫荧光、透射电镜法观察自噬体.Rapamycin、3-MA分别干预OGD/OGD-R损伤过程后CCK-8法检测细胞活性,Guava Nexin法检测细胞凋亡.结果:OGD/OGD-R处理均可引起PC12细胞损伤，OGD 3h时达到轻一中度的损伤并作为再灌注起始时间。自噬相关蛋白LC3II,Beclin1表达变化具有一定的时间规律性;LC3II免疫荧光显示正常对照组只有极弱的荧光，OGD 3h时呈点状聚集，R12h时进一步增强并融合呈片状;OGD 3h联合3-MA抑制细胞自噬，LC3II表达减少且点状聚集趋势不明显;E64d+pepstatin A阻断自噬溶酶体降解导致LC3II的积聚;电镜显示OGD 3h,R12h,OGD 3h联合E64d+pepstatin A处理组胞浆内均出现明显双层膜自噬体结构，而OGD3h联合3-MA处理组自噬泡数量明显减少;OGDlOGD-R处理均可上调各时间点自噬流量，其中OGD3-4h及再灌注晚期R12-24h是自噬的高活性期。结论:OGD/OGD-R均能激活PC12细胞自噬和凋亡。Beclin1和mTOR分别介导的自噬相关信号通路在不同应激环境下具有潜在交互调控机制且自噬活性的变化与凋亡进程具有相关性。调控自噬一溶酶体途径在决定OGD/OGD-R损伤应激中PC12细胞命运具有双重作用。

摘要： 目的 观察钾通道阻断剂TEA对缺氧缺血损伤整体、离体模型的保护作用，阐明介导延迟整流钾电流的电压依赖性钾通道Kv2.1在缺氧缺血细胞损伤中发挥的作用。方法 应用大鼠tMCAO模型验证TEA对脑缺血损伤的保护作用；采用膜片钳技术观察氧糖剥夺（OGD）对Kv2.1-HEK293细胞膜电位以及TEA对OGDKv2.1-HEK293细胞钾电流的影响。MTT法观察OGD对Kv2.1-HEK293的损伤及TEA的保护作用。结果 TEA(5ug?kg-1)可以减小tMCAO大鼠的脑根死体积；与载体细胞株相比，Kv2.1-HEK293对OGD损伤的敏感性明显提高；OGD可以降低Kv2.1-HEK293细胞膜电位；TEA(10mM)能在显著降低OGDKv2.1-HEK293钾电流密度的同时使其所受的细胞损伤降低。结论 钾通道阻断剂TEA对整体和离体缺氧缺血损伤模型发挥细胞保护作用，并且这种保护作用同对Kv2.1的阻断密切相关；提示Kv2.1是抗脑缺血药物开发的潜在作用靶点。

摘要： 目的：观察通络救脑注射液对培养的正常及缺血脑微血管内皮细胞的活性影响,揭示其通络作用的效应靶点与特征。方法 原代培养大鼠脑皮质微血管内皮细胞,传至第三代,分为正常及拟缺血组,采用培养基氧糖剥夺(OGD)法建立拟缺血模型。通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析法测定不同浓度的通络救脑注射液对正常及OGD内皮细胞的活性影响。结果 通络救脑注射液作用于正常脑微血管内皮细胞,与未加药组比较,小剂量药物抑制细胞活性,大剂量促进细胞活性,剂量总趋势呈反抛物线形;通络救脑注射液作用于OGD组脑微血管内皮细胞,小剂量范围促进内皮细胞的增殖活性,呈显著和极显著差异,而大剂量组则抑制细胞活性,剂量总趋势呈抛物线形。结论 通络救脑注射液对正常及缺血脑微血管内皮细胞具有双向调节作用,药物剂量与细胞增殖活性呈非线性关系。大剂量与小剂量可能是不同的作用机制,反映了中药复方药效的多维性。

摘要： 本发明涉及一种氧糖双抗的组合物及其应用和氧糖双抗的产品，属于化学技术领域。研究发现抗坏血酸葡糖苷和α‑熊果苷的组合物具有良好的抗氧化和美白保湿作用，抗坏血酸葡糖苷和α‑熊果苷的组合物可抑制荧光性的AGEs生成且抑制率高达83.92±0.718％，具有良好的抗糖化作用，在制备氧糖双抗的产品中具有极高的应用前景。

摘要： 本发明提供了一种新型的糖硅氧烷共聚物，与某些以前已知的糖硅氧烷相比,所述糖硅氧烷共聚物在水存在的情况下具有改善的稳定性。所述糖硅氧烷共聚物可用于个人护理组合物。

摘要： 本发明涉及生物医药领域，特别是涉及一个在海马切片上氧-葡萄糖剥夺的体外缺血模型的建立。细胞死亡和脑损伤导致局部缺血的主要原因是由Ca

摘要： 本发明涉及一种氧糖双抗的组合物及其应用和氧糖双抗的产品，属于化学技术领域。研究发现抗坏血酸葡糖苷和α‑熊果苷的组合物具有良好的抗氧化和美白保湿作用，抗坏血酸葡糖苷和α‑熊果苷的组合物可抑制荧光性的AGEs生成且抑制率高达83.92±0.718％，具有良好的抗糖化作用，在制备氧糖双抗的产品中具有极高的应用前景。

摘要： 本发明提供了一种新型的糖硅氧烷共聚物，与某些以前已知的糖硅氧烷相比,所述糖硅氧烷共聚物在水存在的情况下具有改善的稳定性。所述糖硅氧烷共聚物可用于个人护理组合物。

摘要： 本发明公开一种氧糖剥夺共PM2.5染毒模型的构建方法及应用。采用自制的氧糖剥夺装置对神经细胞进行氧糖剥夺造模，其次用不同剂量的PM2.5对氧糖剥夺的细胞进行染毒建立氧糖剥夺共PM2.5染毒模型，用于评估外源污染物暴露对缺氧缺糖损伤的神经细胞毒性的影响，从而反应对缺血性脑卒中的影响。本发明体外模型操作简便、建模成功率高，所需样本量小，基于酶标仪的数据获得方便快速，具有重复性好等优点。

摘要： 本发明公开了一种衰老SH‑SY5Y细胞氧糖剥夺再灌注模型及其构建方法和应用，涉及生物医药技术领域。该构建方法包括以下步骤：(1)利用D‑半乳糖使SH‑SY5Y细胞致衰老，构建得到衰老SH‑SY5Y细胞；(2)所述衰老SH‑SY5Y细胞先经过缺糖缺氧处理，再经复氧处理，得到所述衰老SH‑SY5Y细胞氧糖剥夺再灌注模型。本发明成功构建了SH‑SY5Y细胞氧糖剥夺再灌注模型，该模型可以模拟老龄脑缺血缺氧损伤过程的病理生理过程，为后续研究药物的神经保护作用奠定了基础。

摘要： 本发明公开了西青果多酚提取物在制备降低氧糖剥夺/复氧诱导损伤药物中的应用，其中所述西青果多酚提取物为西青果多酚乙酸乙酯提取物(TPE)和/或西青果多酚正丁醇提取物(TPB)。本发明对西青果多酚提取物TPE和TPB的具体应用进行了研究，并首次发现TPE和TPB可保护BV2细胞免受氧糖剥夺/复氧模型(OGD/R模型)诱导的损伤，进一步研究发现TPE和TPB是通过减少OGD/R模型中细胞的早期凋亡、维持细胞的线粒体膜电位和调控氧化应激相关酶活，达到抵抗OGD/R诱导的损伤，因此可将西青果多酚提取物TPE和TPB用于制备由OGD/R诱导的疾病如缺血性脑中风药物，达到有效预防和治疗缺血性脑中风和修复脑损伤的目的。

摘要： 本发明公开了一种离体氧糖剥夺模型的建立方法，包括以下步骤：S1：首先设置雌雄小鼠进行配对，在雌雄小鼠交配成功后，再将雌雄小鼠进行分离；S2：在雌性小鼠怀孕13‑15天时，雌性小鼠在用多聚赖氨酸涂层培养板上进行过夜；S3：在用多聚赖氨酸涂层培养板上11‑13h后，移除多聚赖氨酸，然后雌性小鼠在应用层粘连蛋白涂层培养板上；S4：雌性小鼠在应用层粘连蛋白涂层培养板2‑4h后，移除层粘连蛋白后，用消毒蒸馏水对培养板进行冲洗。本发明能够精确，快速，有效地模拟细胞应激，细胞自噬及脑缺血缺氧休克等病理状态，且小鼠原代大脑皮层神经元细胞十分容易达到氧耗竭的目标。

摘要： 本实用新型提供了一种细胞氧糖剥夺造模实验仪器，包括：盒体，所述盒体的一端设置有气门芯，所述盒体的另一端开设有两个通气孔，所述通气孔活动地穿设有橡胶管；盒盖，所述盒盖活动地安装在所述盒体上，所述盒盖的内沿设置有橡胶密封条，所述橡胶密封条设置在所述盒盖与所述盒体顶端的结合处；氧气探测仪，所述氧气探测仪设置在所述盒体的内部。本实用新型具备氧气监测功能，仪器整体采用透明亚力克板制成操作人员能够实时监测盒内细胞以及氧气情况，仪器结构设计合理，安装拆卸快捷、运输方便。