组织表达

摘要： [目的]通过构建分离群体定位并克隆水稻雌雄不育基因OsFMA2,并对其在水稻育性调控中的功能进行探究.[方法]通过EMS诱变水稻宁粳4号得到稳定的不育突变体,对突变体进行表型及细胞学观察,利用精细定位和Mut-map相结合的方法克隆了水稻雌雄不育基因OsFMA2,通过实时荧光定量PCR检测其在各组织表达水平差异,利用水稻原生质体表达系统进行OsFMA2蛋白的亚细胞定位.[结果]细胞学观察发现突变体为雌雄不育.利用极端个体将其精细定位于水稻第6染色体长臂448 kb的区间内.结合全基因组重测序结果,最终确定OsFMA2为目标基因.该基因编码一个复制蛋白,在单子叶植物中高度保守.OsFMA2具有组织特异性,在幼穗中高表达.亚细胞定位结果显示OsFMA2蛋白定位于细胞核中.[结论]OsFMA2在幼穗中高表达,可能参与了水稻雄配子第一次减数分裂前期同源重组过程,同时,OsFMA2的表达对雌配子发育也产生了不利影响.

摘要： 为了探究褪黑激素受体(melatonin receptor,Mtnr1)基因在草鱼(Ctenopharyngodon idella)中的表达模式和功能,采用RACE技术从草鱼组织中克隆获得Mtnr1基因的6个亚型(Mtnr1Aa、Mtnr1Ab、Mtnr1Alike、Mtnr1Ba、Mtnr1Bb和Mtnr1C)的cDNA序列,采用ProtParam、TMpred、NetPhos、NetNGlyc、Singal4.1及Phyre2等在线软件对Mtnr1基因的6种亚型进行生物信息学分析.同时,通过实时荧光定量PCR检测6种亚型在不同组织中的表达.结果 显示,Mtnr1基因6个亚型cDNA全长分别为2045、2036、2031、2799、2535和2477 bp,分别编码350、351、344、356、347和361个氨基酸.6种亚型均由7个跨膜结构域、NRY结构域、CYICHS结构域和NAXXY结构域及G蛋白偶联受体结合位点组成,同时含有多个磷酸化位点和糖基化位点.Mtnr1基因6个亚型蛋白均由20种氨基酸组成,均属于稳定的亲水性蛋白.氨基酸序列比较分析发现,6种亚型与其他鱼对应的亚型同源性很高,分别为93.1％～99.4％、84.8％～95.2％、82.8％～96.8％、90.1％～97.5％、79.7％～98.3％和90.6％～95.6％.邻接法构建系统进化树显示,6种亚型均与鲤科(Cyprinidae)鱼类聚为一支,与鲤鱼(Cyprinus carpio)、鲫鱼(Carassius auratus)和斑马鱼(Danio rerio)亲缘关系最近.此外,6种亚型mRNA在草鱼肝脏、心脏、鳃、脑、肌肉、前肠、中肠、后肠和肾脏9个组织中均有表达,其中,Mtnr1Aa和Mtnr1Ba基因分别在脑和肾脏中表达量最高,表明Mtnr1Aa和Mtnr1Ba可能在草鱼的神经调节和免疫反应中发挥重要作用.

摘要： 为研究miR-144的靶基因与miR-144在牛不同组织中的表达规律,预测其对肌肉生长发育的调节机制,对miR-144在各物种间的保守性、潜在靶基因及其富集通路进行分析,通过qRT-PCR方法检测牛不同组织中miR-144的表达。结果表明,miR-144成熟序列在各物种间保守性较高;富集分析发现,靶基因显著富集于血管平滑肌收缩、cGMP-PKG、cAMP等与肌肉发育相关通路中。qRT-PCR结果显示,miR-144在肝中的表达量最高,在皮下脂肪中的表达量最低;miR-144在腿肌和心中的表达差异不显著(P>0.05),但在肝中的表达显著(P0.05)。

摘要： GeBP转录因子调控植物表皮毛的生长发育,并且参与控制植物叶片的发育。该文利用生物信息学方法,在大豆全基因组范围内搜索GeBP基因家族,并从氨基酸理化性质、基因结构、染色体的物理分布、系统进化、序列比对、功能结构域、组织表达情况等基本特征方面对GmGeBP基因家族进行分析。结果表明:(1)共获得9个GmGeBP转录因子基因家族成员,其中仅2个基因含有内含子,且都只有1个内含子,表明该家族成员基因构造比较简单但稳定。(2)GmGeBP编码的蛋白分子量为39.65~49.24 kD,理论等电点为4.65~9.08;这些成员基本上都是酸性氨基酸,属于亲水性、不稳定蛋白。(3)这9个基因不均匀的分布于7条染色体上,10和20号染色体上分别分布2个GeBP基因,3、5、13、15、19号染色体上各分布1个基因。(4)系统进化分析表明,大豆与拟南芥对应的GeBP成员亲缘关系较近,分别聚类到4个分支,而与水稻的距离较远。(5)结构域分析表明,9个GmGeBP成员都包含DUF573结构域,推测该部分在GeBP转录因子中很可能是与靶标基因顺式作用元件互作的结构域。(6)通过分析大豆GmGeBP转录因子基因家族的组织表达,发现不同基因在大豆不同组织的表达量不同,具有一定的特异性。该文对大豆GeBP转录因子基因家族的分析和鉴定为进一步研究大豆表皮毛发育的分子作用提供了理论基础。

摘要： 为研究视黄酸受体α(Retinoic Acid Receptor Alpha,RARA)、视黄酸受体β(Retinoic Acid Receptor Beta,RARB)与视黄酸受体γ(Retinoic acid receptor gamma,RARG)基因在黔北麻羊不同组织中的表达情况,本研究提取黔北麻羊心、肝、脾、肺、肾、下丘脑、垂体、子宫、输卵管、卵巢10个组织总RNA并逆转录合成cDNA第1链,随后采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测RARA、RARB与RARG基因在黔北麻羊10个组织中的表达水平。结果显示:RARA、RARB、RARG 3个基因在黔北麻羊10个组织中均有不同程度的表达,其中,RARA基因表达量由大到小依次为肝>心>下丘脑>脾>垂体>肺>输卵管>子宫>肾>卵巢,肝脏RARA基因表达量最高,卵巢RARA基因表达量最低,两者之间差异极显著。黔北麻羊RARB基因表达由大到小依次为输卵管>下丘脑>子宫>卵巢>肝>心>肺>肾>垂体>脾,其中,输卵管RARB基因的表达量极显著高于其余组织;而RARG基因表达顺序依次为下丘脑>卵巢>输卵管>肝>心>子宫>肾>肺>垂体>脾,RARG基因的表达量在下丘脑中极显著高于其余9个组织,除下丘脑外,卵巢RARG基因表达量也极显著高于其余8个组织。本研究探明了RARA、RARB与RARG在黔北麻羊不同组织中的表达规律,研究结果为今后进一步探明其功能及对黔北麻羊繁殖性状的调控机理奠定基础。

摘要： 【目的】探究鸡骨形态发生蛋白受体1B(bone morphogenetic protein receptor type 1B,BMPR1B)基因在家禽卵巢发育中的功能。【方法】利用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)扩增BMPR1B基因cDNA的序列,通过生物信息学软件对其所编码的蛋白理化性质及结构功能进行分析,利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术探究BMPR1B基因在鸡各个组织中的表达情况。【结果】鸡BMPR1B基因存在2种转录本,转录本T1长1925 bp,包含5’UTR 248 bp,编码序列1509 bp,3’UTR 168 bp;转录本T2长度为1754 bp,包含5’UTR 77 bp,编码序列1509 bp,3’UTR 168 bp,编码的蛋白包含502个氨基酸。进化分析表明,鸡BMPR1B基因在进化过程中与火鸡亲缘关系最近,保守性较高。理化性质分析显示,鸡BMPR1B基因编码蛋白属于不稳定、亲水性蛋白。结构域预测发现,该蛋白存在有1段跨膜结构和1个GS保守结构域,整个二级结构主要由无规卷曲组成,预测含有4个磷酸化位点和2个糖基化位点。组织表达分析显示,BMPR1B基因在鸡的心、肝、脾、肺、肾、胸肌、腿肌和卵巢8个组织中均有表达,且在卵巢组织中表达量最高。【结论】该研究结果为后续深入研究BMPR1B基因在鸡卵巢卵泡发育中的作用奠定基础。

摘要： 【目的】本研究旨在鉴定豌豆蚜Acyrthosiphon pisum触角转录组中化学感受蛋白(chemosensory protein,CSP)基因,明确触角中高表达的豌豆蚜CSP蛋白与蚜虫报警信息素、性信息素以及植物挥发物的分子结合特性。【方法】通过对豌豆蚜成蚜触角进行转录组测序,鉴定触角中候选CSP基因;采用RPKM值和半定量RT-PCR分别明确这些CSP基因在豌豆蚜成蚜触角以及不同组织(触角、口针、去除触角和口针的头、胸、腹、足和翅)中的表达谱;通过荧光竞争结合实验测定这些触角CSPs与蚜虫报警信息素和性信息素以及植物挥发物的结合特性。【结果】在豌豆蚜成蚜触角转录组中鉴定得到10个CSP基因。RPKM值和半定量RT-PCR分析结果表明ApisCSP2,ApisCSP4和ApisCSP5在豌豆蚜成蚜触角中表达量最高。荧光竞争结合实验表明ApisCSP4与报警信息素主要组分(E)-β-法尼烯[(E)-β-farnesene,EβF]和微量组分(-)-α-蒎烯结合力强,K_(i)值分别为2.2±0.8和4.9±0.7μmol/L;ApisCSP5与两种性信息素组分(+)-(4aS,7S,7aR)-荆芥内酯和(-)-(1R,4aS,7S,7aR)-荆芥醇结合力强,K_(i)值分别为4.8±0.9和2.6±0.6μmol/L。【结论】豌豆蚜成蚜触角转录组中鉴定到10个CSP基因,其中ApisCSP4和ApisCSP5可能分别参与了蚜虫报警信息素和性信息素的转运。

摘要： 为了探究膜联蛋白A2(ANXA2)基因单核苷酸多态性(SNP)及其在组织中的表达差异,以180日龄的藏猪、大约克猪作为试验对象,检测ANXA2基因在肝脏、腹脂和背脂组织上mRNA表达差异,并对ANXA2基因的5′侧翼区进行多态性分析。结果显示,在ANXA2基因5′侧翼区筛选到4个SNP位点,g.111574291G>A、g.111574499C>T、g.111574522G>C和g.111574638A>G,且藏猪与大约克猪等位基因频率差异显著(P<0.05)。在肝脏中,藏猪和大约克猪ANXA2基因的mRNA表达趋势基本一致;在背脂和腹脂中,藏猪ANXA2基因的mRNA表达量极显著低于大约克猪(P<0.01)。综上,ANXA2基因可能是调控脂肪沉积和脂肪代谢的重要候选基因。

摘要： 为探索基于高通量筛选抗性主效miRNA功能分子的方法应用于抗性草鱼(Ctenopharyngodon idellus)的选育,研究借助高通量测序鉴定分析感染GCRV前后的草鱼头肾组织中miRNAs。测序结果共鉴定出821个成熟miRNAs,其中118个在GCRV攻毒组特异表达,82个为未攻毒组特有;差异分析结果显示,GCRV处理后有88个miRNA显著下调表达、46个miRNA显著上调表达;qPCR结果显示miR-21在GCRV感染组中的头肾中表达量最高,miR-194a在两个比较组中的差异倍数最大,达到48倍之高;组织表达结果发现部分差异表达miRNA在脾脏、肾脏、头肾、皮肤和鳃等免疫相关器官中高表达;这些结果提示不同的miRNAs在草鱼的GCRV应答过程中发挥着不同的功能,为抗病草鱼的选育提供可参考的分子资源。

摘要： N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)是一种抗氧化剂,对动物的繁殖性能具有重要作用。本研究以努比亚山羊为研究对象,采用实时荧光定量PCR技术检测LIF和HOXA10基因在正常饲喂组(空白对照组)和0.07%NAC饲喂组(实验组)性腺组织卵巢、输卵管、下丘脑、子宫和垂体中的表达变化。结果表明:LIF和HOXA10基因在5个组织中均有表达;LIF基因在对照组下丘脑中表达量最高、输卵管中表达量最少,在实验组卵巢中表达量最高、下丘脑中表达量最少;实验组中卵巢LIF基因的表达量显著高于对照组,而下丘脑中LIF基因的表达量显著低于对照组;HOXA10基因在对照组下丘脑中表达量最高、输卵管和垂体中表达最少,在实验组卵巢中表达最高、垂体中表达最少;实验组中卵巢HOXA10基因的表达量显著高于对照组,垂体中HOXA10基因的表达量显著低于对照组。研究结果揭示0.07%NAC可促进努比亚母山羊妊娠前期LIF和HOXA10基因在卵巢、输卵管和子宫中的表达,下调LIF和HOXA10基因在下丘脑和垂体中的表达。本研究结论为进一步研究NAC对山羊繁殖性能的影响提供基础资料。

摘要： 目的：为了阐明水牛ELF5基因的结构、基因与水牛泌乳的相关性以及牛科物种ELF5基因的序列差异和群体遗传特征. 方法：本研究采用RT-PCR和电子克隆技术水牛ELF5基因进行了分离鉴定和组织表达谱分析,运用PCR-SSCp技术与DNA直接测序的方法对91份水牛、普通牛、牦牛和大额牛样品ELF5基因的编码区序列进行群体变异检测. 结果：水牛ELF5基因的CDS为768bp,编码255个氨基酸,各物种间的ELF5蛋白的氨基酸序列同源度较高;在水牛非泌乳期和泌乳期间,ELF5基因主要在水牛乳腺、胃、肺、脾、心和肝中表达,其在乳腺组织的表达量最高,且泌乳期的表达量是非泌乳期的1.8倍;在水牛ELF5基因的编码区共检测到11个SNp位点,其中SNP255和SNP461分别在河流型和沼泽型水牛中纯合,其他9个SNp为河流型和沼泽型水牛共享,SNP460和SNP461导致p.G154S和p.G154n氨基酸的异义替换,但对其蛋白功能无显著影响. 结论：研究结果提示,水牛ELF5基因在乳腺发育、生长及其泌乳活动中承担重要角色,ELF5蛋白在牛科物种间高度保守性,预示着水牛ELF5基因在生物体的发育和分化中可能承担着重要的功能.

摘要： 荣昌猪是世界八大优良种猪之一,已发展成为中国养猪业推广面积最大、最具有影响力的地方猪种之一.荣昌猪具有耐粗饲、适应性强、肉质好、瘦肉率较高、配合力好、遗传性能稳定等特点.长白猪原产于丹麦,主要优点是产仔数多,生长发育快,胴体瘦肉率高等,但抗逆性差,对饲料营养要求较高.BPI即杀菌通透性增强蛋白,主要存在于多形核白细胞的嗜苯胺蓝颗粒中,是哺乳动物和人的内源性阳离子蛋白质.它具有很强的杀菌活性、中和内毒素等作用.目前国内外对BPI的研究主要着眼于人类疾病的治疗,并取得了相关的一些成果.但将BPI运用于畜禽疾病的治疗的研究报道较少,将BPI运用于畜禽抗病育种的报道更少.而畜禽抗病育种具有巨大的、潜在的经济效益.本文分别选取0日龄、28日龄、120日龄的荣昌猪、长白猪各3头,运用实时荧光定量PCR技术,以β-actin内参基因,研究测定不同生长发育阶段荣昌猪和长白猪的各组织中BPI基因的表达水平,以揭示荣昌猪及长白猪BPI基因组织表达的差异性.为猪BPI功能研究、荣昌猪和长白猪抗病力的相关性、保种选育提供分子生物学依据,并且对畜禽育种生产具有重要理论意义和应用价值.

摘要： 马铃薯(Solanum tuberosum L.)是茄科茄属一年生作物,是仅次于小麦、玉米、水稻的第四大粮食作物,也是贫困地区实现脱贫的首选农作物之一.马铃薯在生长发育过程中易受到多种生物胁迫和非生物胁迫,其中干旱和盐碱胁迫尤为严重.泛素蛋白酶体系统是一种广泛存在于真核生物体内的蛋白质降解途径,其过程类似于磷酸化修饰,相关研究报道发现该过程广泛参与植物的生长发育,尤其在遭受生物胁迫和非生物胁迫过程中发挥重要作用.课题组在马铃薯泛素结合酶筛选时发现了一个干旱响应基因StUBC30,本研究对马铃薯泛素结合酶StUBC30基因进行了生物信息学分析, 并用qRT-PCR技术对在不同处理下基因表达水平和组织表达差异进行分析,旨在为后续马铃薯StUBC30基因功能解析奠定基础。

摘要： 目的：本次研旨在对鸡Myoz3基因的开放阅读框进行克隆,对时空表达特征进行分析,并对遗传标记进行筛选. 方法：利用直接扩增的方式克隆Myoz3基因的开放阅读框(ORF).利用RT-qPCR分析Myoz3基因mRNA在矮脚黄鸡以及艾维茵肉鸡两个品种中的时空表达规律,通过直接测序的方法分析Myoz3基因在不同品种中的多态性,并根据多态性位点筛选出适合的分子标记辅助育种. 结果：在本次研究中发现,Myoz3蛋白的分子质量大约为26KD,序列和火鸡Myoz3蛋白具有97％的相似性,并与野鸭有76％的相似性.Myoz3在胸肌和腿肌中表达量较高,而在心脏和肝脏中表达量较低(P＜0.05),同时性别一个影响Myoz3表达量的重要因素,Myoz3的表达在不同性别之间展现出了不同的时间表达变化趋势(P＜0.05).之后使用了直接测序的方法鉴定了Myoz3基因的多态性,并在矮脚黄鸡种发现了5个SNp位点,而在艾维茵中发现了3个.通过分析这些SNP位点对应的基因型和生产性状之间的关系,发现,c.516C＞T位点对生产性状有影响,拥有基因型AA的个体在胫骨长度以及胸肌的亮度(L*)上具有明显优势(P＜0.05).又根据这些SNp的连锁关系构建了单倍体基因型以及双倍体基因型,并发现具有双倍体基因型H1H3的个体有最长的胫骨围. 结论：在本次研究中鉴定的分子标记可以为育种工作提供帮助.

摘要： 为探索天然抗性相关巨噬蛋白Nramp基因在缢蛏组织免疫中的作用,本研究利用缢蛏转录组文库信息,设计引物采用SMART RACE技术克隆得到缢蛏天然抗性相关巨噬蛋白Nramp的cDNA全长序列,该基因的开放阅读框有1773bp,编码591个氨基酸,分子量为65.86kDa.对推导出的氨基酸序列进行结构分析,结果表明缢蛏Nramp基因具有Slc11蛋白家族的典型特征,包括有10个典型的跨膜结构,和2个糖基化位点.实时荧光定量PCR结果表明,缢蛏Nramp基因在缢蛏6个组织中均有表达,其中肝胰腺中的表达量最高,其次是鳃,与其他组织均有极显著性差异(P＜0.01).

摘要： 为研究AmyA基因的结构、功能及在缢蛏生长、发育过程中的调控作用,本实验利用SMARTRACE方法首次克隆得到缢蛏Amy(Sc-Amy A)基因的cDNA全长序列,对其生物信息学及氨基酸序列特征进行了研究分析.结果发现Sc-Amy A基因全长为2196bp,该基因的开放阅读框为2082bp,编码694个氨基酸,蛋白存在信号肽,没有明显的跨膜区域,是一个亲水性较强的蛋白.蛋白由A结构域和C结构域两个结构域组成;氨基酸序列对比发现,Sc-Amy A与河蚬的同源性最高,为78.6％.荧光定量PCR(qRT-PCR)结果表明,Sc-Amy A基因仅在内脏团中表达.

摘要： 目的：研究14-3-3蛋白在并发甲状腺癌的乳腺癌组织中表达,揭示其与两癌同时并发的潜在关系. 方法：选取本院2014-2016年间的36例乳腺癌并发甲状腺癌、30例乳腺癌合并甲状腺良性肿块及24例甲状腺正常的乳腺癌病例进行研究,术后经病理证实乳腺肿块全部为浸润性导管癌,甲状腺良性肿块为结节性甲状腺肿及甲状腺腺瘤,甲状腺恶性肿块均为甲状腺乳头状癌,并排除乳腺癌转移所致甲状腺癌.免疫组化检测乳腺肿块细胞内14-3-3蛋白的表达水平。 结果:免疫组化结果表明乳腺癌并发甲状腺癌组中乳腺肿块的14-3-3蛋白表达水平明显升高，高于其他两组。14-3-3蛋白家族是一种高度保守、分子量约为30KD的二聚体结构酸性蛋白质，参与调控细胞周期、细胞内信号传导、应激反应、细胞凋亡、细胞代谢等生命活动。14-3-3蛋白主要存在于脑组织中，在心、肝、肺、肾上腺、前列腺、甲状腺、乳腺和膀胱等组织中也有表达，与肿瘤浸润转移及对药物敏感性等多种特性的改变相关。一项体外细胞实验发现诱导14-3-3亚型高表达可加快细胞的癌变。14-3-3蛋白在乳腺癌患者中表达增高，其表达与淋巴结转移呈正相关，且高表达患者生存率低于表达低患者。进一步研究发现乳腺癌患者中14-3-3蛋白的表达与雌激素受体的表达呈负相关，与高TNM分期及阳性淋巴结转移呈正相关，与年龄、肿瘤大小、组织学分化程度无相关性。本研究发现其在乳腺癌合并甲状腺癌中也存在高表达，提示与乳腺癌、甲状腺癌同时并发密切相关。 结论:14-3-3蛋白表达水平在乳腺癌并发甲状腺癌中呈高表达，有可能成为新的肿瘤临床标记物，用于乳腺癌合并甲状腺癌的早期诊断。

摘要： 目的：研究14-3-3蛋白在并发甲状腺癌的乳腺癌组织中表达,揭示其与两癌同时并发的潜在关系. 方法：选取本院2014-2016年间的36例乳腺癌并发甲状腺癌、30例乳腺癌合并甲状腺良性肿块及24例甲状腺正常的乳腺癌病例进行研究,术后经病理证实乳腺肿块全部为浸润性导管癌,甲状腺良性肿块为结节性甲状腺肿及甲状腺腺瘤,甲状腺恶性肿块均为甲状腺乳头状癌,并排除乳腺癌转移所致甲状腺癌.免疫组化检测乳腺肿块细胞内14-3-3蛋白的表达水平。 结果:免疫组化结果表明乳腺癌并发甲状腺癌组中乳腺肿块的14-3-3蛋白表达水平明显升高，高于其他两组。14-3-3蛋白家族是一种高度保守、分子量约为30KD的二聚体结构酸性蛋白质，参与调控细胞周期、细胞内信号传导、应激反应、细胞凋亡、细胞代谢等生命活动。14-3-3蛋白主要存在于脑组织中，在心、肝、肺、肾上腺、前列腺、甲状腺、乳腺和膀胱等组织中也有表达，与肿瘤浸润转移及对药物敏感性等多种特性的改变相关。一项体外细胞实验发现诱导14-3-3亚型高表达可加快细胞的癌变。14-3-3蛋白在乳腺癌患者中表达增高，其表达与淋巴结转移呈正相关，且高表达患者生存率低于表达低患者。进一步研究发现乳腺癌患者中14-3-3蛋白的表达与雌激素受体的表达呈负相关，与高TNM分期及阳性淋巴结转移呈正相关，与年龄、肿瘤大小、组织学分化程度无相关性。本研究发现其在乳腺癌合并甲状腺癌中也存在高表达，提示与乳腺癌、甲状腺癌同时并发密切相关。 结论:14-3-3蛋白表达水平在乳腺癌并发甲状腺癌中呈高表达，有可能成为新的肿瘤临床标记物，用于乳腺癌合并甲状腺癌的早期诊断。

摘要： 目的：研究14-3-3蛋白在并发甲状腺癌的乳腺癌组织中表达,揭示其与两癌同时并发的潜在关系. 方法：选取本院2014-2016年间的36例乳腺癌并发甲状腺癌、30例乳腺癌合并甲状腺良性肿块及24例甲状腺正常的乳腺癌病例进行研究,术后经病理证实乳腺肿块全部为浸润性导管癌,甲状腺良性肿块为结节性甲状腺肿及甲状腺腺瘤,甲状腺恶性肿块均为甲状腺乳头状癌,并排除乳腺癌转移所致甲状腺癌.免疫组化检测乳腺肿块细胞内14-3-3蛋白的表达水平。 结果:免疫组化结果表明乳腺癌并发甲状腺癌组中乳腺肿块的14-3-3蛋白表达水平明显升高，高于其他两组。14-3-3蛋白家族是一种高度保守、分子量约为30KD的二聚体结构酸性蛋白质，参与调控细胞周期、细胞内信号传导、应激反应、细胞凋亡、细胞代谢等生命活动。14-3-3蛋白主要存在于脑组织中，在心、肝、肺、肾上腺、前列腺、甲状腺、乳腺和膀胱等组织中也有表达，与肿瘤浸润转移及对药物敏感性等多种特性的改变相关。一项体外细胞实验发现诱导14-3-3亚型高表达可加快细胞的癌变。14-3-3蛋白在乳腺癌患者中表达增高，其表达与淋巴结转移呈正相关，且高表达患者生存率低于表达低患者。进一步研究发现乳腺癌患者中14-3-3蛋白的表达与雌激素受体的表达呈负相关，与高TNM分期及阳性淋巴结转移呈正相关，与年龄、肿瘤大小、组织学分化程度无相关性。本研究发现其在乳腺癌合并甲状腺癌中也存在高表达，提示与乳腺癌、甲状腺癌同时并发密切相关。 结论:14-3-3蛋白表达水平在乳腺癌并发甲状腺癌中呈高表达，有可能成为新的肿瘤临床标记物，用于乳腺癌合并甲状腺癌的早期诊断。

摘要： 目的：研究14-3-3蛋白在并发甲状腺癌的乳腺癌组织中表达,揭示其与两癌同时并发的潜在关系. 方法：选取本院2014-2016年间的36例乳腺癌并发甲状腺癌、30例乳腺癌合并甲状腺良性肿块及24例甲状腺正常的乳腺癌病例进行研究,术后经病理证实乳腺肿块全部为浸润性导管癌,甲状腺良性肿块为结节性甲状腺肿及甲状腺腺瘤,甲状腺恶性肿块均为甲状腺乳头状癌,并排除乳腺癌转移所致甲状腺癌.免疫组化检测乳腺肿块细胞内14-3-3蛋白的表达水平。 结果:免疫组化结果表明乳腺癌并发甲状腺癌组中乳腺肿块的14-3-3蛋白表达水平明显升高，高于其他两组。14-3-3蛋白家族是一种高度保守、分子量约为30KD的二聚体结构酸性蛋白质，参与调控细胞周期、细胞内信号传导、应激反应、细胞凋亡、细胞代谢等生命活动。14-3-3蛋白主要存在于脑组织中，在心、肝、肺、肾上腺、前列腺、甲状腺、乳腺和膀胱等组织中也有表达，与肿瘤浸润转移及对药物敏感性等多种特性的改变相关。一项体外细胞实验发现诱导14-3-3亚型高表达可加快细胞的癌变。14-3-3蛋白在乳腺癌患者中表达增高，其表达与淋巴结转移呈正相关，且高表达患者生存率低于表达低患者。进一步研究发现乳腺癌患者中14-3-3蛋白的表达与雌激素受体的表达呈负相关，与高TNM分期及阳性淋巴结转移呈正相关，与年龄、肿瘤大小、组织学分化程度无相关性。本研究发现其在乳腺癌合并甲状腺癌中也存在高表达，提示与乳腺癌、甲状腺癌同时并发密切相关。 结论:14-3-3蛋白表达水平在乳腺癌并发甲状腺癌中呈高表达，有可能成为新的肿瘤临床标记物，用于乳腺癌合并甲状腺癌的早期诊断。

摘要： 本发明公开了一种植物维管组织特异表达启动子及其表达载体和应用，植物维管组织特异表达启动子为真菌诱导型启动子，核苷酸序列如SEQNO1所示。含有植物维管组织特异表达启动子的表达载体为pJIT166-pPeTLP2-GFP融合表达载体和pBin-pPeTLP2-GUS融合表达载体。该植物维管组织特异表达启动子可以驱动目的基因在转基因植株的维管部位高效特异表达，在其他部位不表达。应用本发明的启动子在杨树育种工程中，可用来培育抗真菌病杨树新品种。

摘要： 本发明公开了一种通过联合检测样本中YKL40和MASP2蛋白来提高样本分类准确性的方法，其包括：测定样本中YKL-40和MASP2的含量；以YKL40和MASP2蛋白含量的比值为变量，根据不同的阈值对癌症诊断的灵敏度和特异性绘制出ROC曲线，并计算曲线下面积AUC；按照AUC值、灵敏度和特异性将样本进行分类。本发明还公开了一种用于检测样本中YKL40和MASP2的试剂盒。

摘要： 本发明涉及携带编码人胰激肽释放酶成熟蛋白基因的分泌型和非分泌型重组载体以及转化的宿主细胞,本发明还涉及应用基因工程技术制备重组人激肽释放酶的方法。本发明的表达载体可高效表达具有胰腺激肽释放酶活性的蛋白产物,同时,本发明的表达载体中还融合了His亲和序列,包含该亲和序列的表达产物,在分离纯化时可利用His亲和树脂进行亲和层析纯化。本发明为开发人源组织激肽释放酶基因工程产品,开发人源组织激肽释放酶的基因药物奠定基础。

摘要： 本文尤其报道了一种产生三价双特异性抗体的方法，所述方法包括以下步骤：培养包含编码所述三价双特异性抗体的脱氧核糖核酸的哺乳动物细胞，并从细胞或培养基中回收所述三价双特异性抗体，其中编码所述三价双特异性抗体的所述脱氧核糖核酸稳定地整合到所述哺乳动物细胞的基因组中并且在5'至3'方向上包含编码第一重链的第一表达盒、编码第一重链的第二表达盒、编码第一轻链的第三表达盒、编码第一轻链的第四表达盒、编码第二重链的第五表达盒、编码第一轻链或第二重链或第二轻链的第六表达盒和编码第二轻链的第七表达盒，其中所述第一重链从N末端至C末端包含第一重链可变结构域、CH1结构域、铰链区、CH2结构域、CH3结构域、肽接头、第二重链可变结构域和CL结构域，所述第二重链从N末端至C末端包含第一重链可变结构域、CH1结构域、铰链区、CH2结构域和CH3结构域，所述第一轻链从N末端至C末端包含第一轻链可变结构域和CH1结构域，且所述第二轻链从N末端至C末端包含第二轻链可变结构域和CL结构域，其中所述第二重链可变结构域和所述第一轻链可变结构域形成第一结合位点，且所述第一重链可变结构域和所述第二轻链可变结构域形成第二结合位点。

摘要： 本文报道了一种用于产生二价双特异性抗体的方法，所述方法包括以下步骤：培养包含编码所述二价双特异性抗体的脱氧核糖核酸的哺乳动物细胞，以及从所述细胞或培养基中回收所述二价双特异性抗体，其中编码所述二价双特异性抗体的所述脱氧核糖核酸稳定地整合到所述哺乳动物细胞的基因组中并且在5’至3’方向上包含编码第一轻链的第一表达盒、编码第一重链的第二表达盒、编码第二轻链的第三表达盒以及编码第二重链的第四表达盒，或者包含编码第一轻链的第一表达盒、编码第二重链的第二表达盒、编码第二轻链的第三表达盒以及编码第一重链的第四表达盒，其中所述第一重链从N末端到C末端包含第一重链可变结构域、CH1结构域、铰链区、CH2结构域和CH3结构域，所述第二重链从N末端到C末端包含第一轻链可变结构域、CH1结构域、铰链区、CH2结构域和CH3结构域，所述第一轻链从N末端到C末端包含第二重链可变结构域和CL结构域，并且所述第二轻链从N末端到C末端包含第二轻链可变结构域和CL结构域，其中所述第一重链可变结构域和所述第二轻链可变结构域形成第一结合位点，并且所述第二重链可变结构域和所述第一轻链可变结构域形成第二结合位点。

摘要： 本文报道了一种用于产生三价抗体的方法，所述方法包括以下步骤：培养包含编码所述三价抗体的脱氧核糖核酸的哺乳动物细胞，以及从细胞或培养基中回收所述三价抗体，其中编码所述三价5抗体的所述脱氧核糖核酸稳定整合到所述哺乳动物细胞的基因组中，并在5'至3'方向包含编码第一重链的第一表达盒、编码第一轻链的第二表达盒、编码第一轻链的第三表达盒、编码第二重链的第四表达盒、编码第二轻链的第五表达盒和编码第二轻链的第六10表达盒，其中所述第一重链从N末端到C末端包含第一重链可变结构域、CH1结构域、第一轻链可变结构域、CH1结构域、铰链区、CH2结构域和CH3结构域，所述第二重链从N末端到C末端包含第一重链可变结构域、CH1结构域、铰链区、CH2结构域和15 CH3结构域，所述第一轻链从N末端到C末端包括第二重链可变结构域和CL结构域，并且所述第二轻链从N末端到C末端包含第二轻链可变结构域和CL结构域，其中所述第一重链可变结构域和所述第二轻链可变结构域形成第一结合位点且所述第二重链可变结构域和所述第一20轻链可变结构域形成第二结合位点。

摘要： 本文报道了一种用于产生多价双特异性抗体的方法，所述方法包括以下步骤：培养包含编码所述多价双特异性抗体的脱氧核糖核酸的哺乳动物细胞，并从所述细胞或培养基中回收所述多价双特异性抗体，其中编码所述多价双特异性抗体的所述脱氧核糖核酸稳定地整合到所述哺乳动物细胞的基因组中，并在5'至3'方向上包含编码第一重链的第一表达盒、编码第一轻链的第二表达盒、编码第一轻链的第三表达盒、编码第二重链的第四表达盒、编码第一轻链的第五表达盒和编码第一轻链的第六表达盒，其中所述第一重链从N末端到C末端包含第一重链可变结构域、CH1结构域、第一重链可变结构域、CH1结构域、铰链区、CH2结构域、CH3结构域和第一轻链可变结构域，所述第二重链从N末端到C末端包含第一重链可变结构域、CH1结构域、第一重链可变结构域、CH1结构域、铰链区、CH2结构域、CH3结构域和第二重链可变结构域，并且所述第一轻链从N末端到C末端包含第二轻链可变结构域和CL结构域，其中所述第一重链可变结构域和所述第二轻链可变结构域形成第一结合位点，并且所述第二重链可变结构域和所述第一轻链可变结构域形成第二结合位点。

摘要： 本文报道了用于生产C末端生物素化FcRn的方法，其包括以下步骤：在含生物素的培养基中培养包含编码FcRn和大肠杆菌生物素‑[乙酰辅酶A羧化酶]连接酶(BirA)的脱氧核糖核酸的哺乳动物细胞，以及从细胞或培养基回收C末端生物素化FcRn，其中编码FcRn和大肠杆菌BirA的脱氧核糖核酸稳定整合到哺乳动物细胞的基因组中并在5’至3’方向上包含：编码在C末端包含HisAvi标签的I类主要组织相容性复合物样蛋白质(α‑FcRn)的第一表达盒；编码β2‑微球蛋白(β2m)的第二表达盒；编码在C末端包含HisAvi标签的I类主要组织相容性复合物样蛋白质(α‑FcRn)的第三表达盒；编码β2‑微球蛋白(β2m)的第四表达盒；和编码大肠杆菌生物素‑[乙酰辅酶A羧化酶]连接酶的第五表达盒。

摘要： 本发明公开了一种通过瞬时表达对植物基因进行定点插入的方法及获得的瞬时表达细胞、组织和突变植株，以目的植物的细胞或组织为瞬时表达对象，在目的植物的细胞或组织中瞬时表达序列特异性核酸酶及一段供体DNA序列，在特异性核酸酶的作用下，目的基因被剪切并产生双链断裂，供体DNA序列插入到双链断裂处，完成对基因的定点插入。本发明可以实现定点转基因，消除随机整合带来的负效应。可以实现基因叠加，将多个优良性状结合在一起。通过分子标记的定点插入，可以标记特定基因。通过基因调控元件的定点插入，可以调控特定基因的表达。

摘要： 本发明提供了一种人重组组织因子及其基因、表达载体、宿主菌和表达方法，属于蛋白质工程技术领域。本发明提供的人重组组织因子蛋白，具有较好的生物活性；通过表达载体连接表达该组织因子的目的基因在宿主菌种中表达组织因子，可以快速的、高效的获得大量的组织因子，人重组组织因子的表达效率更高，活性也更高。提供的组织因子的表达方法，操作步骤简单，操作简便，反应条件温和，方便简洁；有利于大量的获得人重组组织因子。