表面蛋白

摘要： 金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌是留置医疗器械生物膜相关感染最重要的病原菌。金黄色葡萄球菌表面蛋白Ebh、SasF、SasG、聚集因子B(ClfB)、生物膜相关蛋白(Bap)和纤维连接蛋白/纤维蛋白原结合蛋白等分别参与生物膜基质的形成。这种大量的蛋白质在生物膜形成的不同阶段进行干预,其中细胞膜基质和主要细胞壁自溶素在生物膜发育的初级附着阶段起重要作用,而细胞表面生物膜相关蛋白和积累相关蛋白能够介导细胞间的积累。本文针对表面蛋白在金黄色葡萄球菌生物膜形成中的作用和调控机制作一综述,旨在为生物膜感染的防治提供理论依据。

摘要： 乳杆菌与致病菌的共聚集可以减少病原体在体内的定殖。已有研究表明,通过特定细菌共聚集幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)从而降低其在胃内的载量是一种有效拮抗H.pylori的新方法。该研究首先构建体外筛选模型,评价56株乳杆菌与H.pylori的共聚作用,使用扫描电子显微镜和激光共聚焦显微镜观察聚集体的结构组成,进一步探究了时间、温度、pH、孵育转速、超声波和表面疏水性等因素对聚集作用的影响,最后利用比较基因组学分析具有不同聚集能力菌株的功能基因差异。结果表明,筛选得到的北酸乳杆菌(Lactobacillus kitasatonis)Guxi82GMM和罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)984共聚率在10 min内可达42%~59%,共聚率与pH值、菌株表面疏水性之间存在显著相关性,但是与温度、孵育转速和超声处理等无关。比较基因组显示,不同聚集能力的菌株氨基酸表达水平存在显著差异,由此推测乳杆菌共聚集H.pylori的物质基础可能是其表面的蛋白分子。乳杆菌与H.pylori的共聚集能力是靶向性筛选缓解H.pylori感染益生菌的有效途径。

摘要： [目的] 明确山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV-2)SU蛋白的功能.[方法] 采用RT-PCR方法从ENTV-2FJ分离株中扩增获得SU基因片段,将其克隆到Pmd-19T载体;测序验证后,再亚克隆到PET-32a(+)上,在RosettagamiB(DE3) 感受态细胞进行表达,采用SDS-PAGE 、Western-blot和ELISA对重组蛋白进行鉴定及抗原性分析.[结果] 结果显示,表达的重组菌融合蛋白大小约64.38 Kd,在IPTG终浓度0.4 mmol·L-1、37 °C诱导4 h表达效果最好.用纯化的ENTV-2进行SDS-PAGE,SU重组蛋白免疫小鼠制备的多克隆抗体作为一抗,进行Western-blot,结果显示鼠抗SU蛋白多克隆抗体能与ENTV-2抗原进行特异性的反应.[结论] 表达的SU蛋白有较好的抗原性,为制备ENTV-2特异性单克隆抗体及建立ENTV-2特异性血清学方法奠定了基础.

摘要： 美国科研团队发现一种能"嵌入"流感病毒表面蛋白的抗体,未来有望开发为通用型流感疫苗。血凝素(H蛋白)和神经氨酸酶(N蛋白)是流感病毒表面的两种蛋白,它们将流感病毒分为不同的亚型。目前开发的流感疫苗主要靶向血凝素。美国华盛顿大学病理学和免疫学助理教授阿里·艾利贝迪发现一个流感患者的血样不仅含有靶向血凝素的抗体,还含有可靶向其他蛋白的抗体。

摘要： 无乳链球菌隶属于链球菌范畴,新生儿严重感染性疾病主要是感染无乳链球菌引发的。乳链球菌在女性的阴道内长期存在,属于常驻菌群之一,新生儿侵袭性感染的主要致病菌也是乳链球菌。本文将对无乳链球菌表面蛋白的研究现状及进展进程深入分析。

摘要： 以戊糖片球菌( Pediococcus pentosaceus) F28-8为研究对象,菌株的生长情况与产酸能力分析表明,F28-8具有良好的酸适应能力,透射电镜( TEM)观察表明其存在蛋白层结构.应用5 mol/L LiCl提取菌株表面蛋白并进行SDS-PAGE和MALDI-TOF-MS分析,发现该菌株表面含有主要组分为分子量83. 5 kDa的N-乙酰基胞壁酰-L-丙氨酸酰胺酶和分子量51. 1 kDa的LysM肽聚糖结合域蛋白.进一步的菌株表面性质测试、胶原蛋白黏附实验以及抑菌实验结果显示,表面蛋白的剥离显著降低了菌株F28-8 的表面性质(自动聚集能力、表面疏水性和表面电荷) ,降幅达到19. 0% ～56. 1% ;LiCl 提取的F28-8表面蛋白能显著降低沙门氏菌(Salmonella enterica subsp. CICC 21513)和金黄色葡萄球菌( Staphylococcus aureus CICC 21600)对胶原蛋白的黏附力,降幅分别为74. 59%和81. 16% ;LiCl 提取的F28-8表面蛋白对沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌率分别达到31. 5%和15. 6% .研究结果表明,戊糖片球菌F28-8表面蛋白能改变菌体表面性质,增强其抑制致病菌黏附的能力并表现出一定的抑菌能力,在抗菌剂开发领域具有一定的应用潜力.

摘要： 肿瘤外泌体是由肿瘤细胞释放到细胞外环境的微小囊泡,其直径约为30～ 150 nm,主要存在于血液、尿液、唾液等多种体液中,是早期肿瘤诊断的标志物之一.肿瘤外泌体具有较好的稳定性且含量丰富,因此是液体活检标志物的研究热点.肿瘤外泌体携带母细胞相关的蛋白、脂质和核酸等生物活性物质,为生物检测提供了多种特征标志物.本文就肿瘤外泌体的生成、分离、表征及分析检测进行了论述,重点讨论了肿瘤外泌体检测的研究进展.

摘要： 现用的流感病毒疫苗主要通过诱发针对表面蛋白血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuroaminidase,NA)的中和抗体发挥保护作用.由于HA和NA型多易变,疫苗株与流行毒株不匹配的现象时有发生,导致疫苗的保护效力明显降低.利用相对保守的HA茎部诱发针对异源流感病毒的交叉保护性抗体已获得较大进展,这将为流感大流行的防控奠定坚实基础.

摘要： 病毒识别细胞表面的受体是病毒感染的第一步,为了筛选兔出血症病毒(RHDV)的肝脏细胞表面受体,成年兔肝脏组织经胰酶消化及300目铜网过滤,得到完整的兔肝脏细胞,用生物素对细胞表面蛋白进行标记和分离;采用病毒铺覆蛋白技术(Virus overlay protein blot assay,VOPBA)分析兔肝脏细胞表面蛋白,结果表明在130 ku-170 ku的位置上存在与RHDV相互作用的特异性蛋白条带,利用液相色谱联合质谱技术(LC MS/MS)对特异蛋白条带进行shotgun分析,鉴定得到39个候选蛋白,其中3种蛋白在病毒感染过程中具有重要作用.本研究将为RHDV受体的进一步探索奠定基础.

摘要： 病原菌与宿主蛋白质之间的相互作用参与着病原菌所有的感染过程。研究病原菌与宿主之间的相互作用能够我们全面理解细菌病的致病机理。尽管目前这个领域已有少量的研究，但仍有待于全面的系统鉴定病原菌与宿主之间的蛋白质相互作用过程。在本研究中，我们建立了一种名为基于亲和层析的表面蛋白质组学(Affinity Chromatography-based Surface Proteomics;ACSP)的新研究方法，该方法将亲和层析技术和shotgun蛋白质组学技术(LC-MS／MS)相结合，可以用来大尺度系统的研究病原与宿主之间的相互作用。为了完成ACSP实验，我们以锚定了天然的Hep-2细胞表面分子的树脂为诱饵，用来从S．suis表面蛋白中捕获潜在的互作分子。随后，我们利用LC-MS／MS技术从捕获物中鉴定出40个潜在的表面互作蛋白，这些蛋白中有3个蛋白已在前期的研究中被证实。我们选取了8个重要的表面互作蛋白，并证实了其与Hep-2细胞的粘附作用。另外，3个新鉴定的表面互作蛋白的重组蛋白以及多克隆抗体能够显著的抑制S．suis与Hep-2细胞的粘附过程，因此这3个蛋白极有可能在S．suis与Hep-2细胞的相互作用过程中发挥着重要的作用。通过使用这个例子，我们证实了ACSP技术是一个非常有价值的研究病原菌与宿主相互作用的实验工具。

摘要： 弓形虫是一种专性细胞寄生原虫，具有广泛的宿主群并在世界范围内流行，引起人兽共患寄生虫病。早发现早治疗以及提前进行预防是使弓形虫病危害最小化的最有效措施，因此建立特异、快速、灵敏的弓形虫病诊断方法和研制有效预防弓形虫病的疫苗成为迫切需要解决的问题。由于弓形虫抗原成分较复杂，各种抗原在体内诱导的免疫反应不同，实验表明，单一抗原疫苗免疫效果和诊断试剂检测效果均不理想，研制多表位疫苗和诊断试剂必然是一个新的发展趋势。本研究在弓形虫代谢分泌抗原和多表位抗原免疫保护研究基础之上，对主要抗原的线性B细胞表位(来自表面蛋白1(SAG1)保守区域)进行了鉴定，为制备弓形虫B细胞表位抗原奠定基础。

摘要： 近年来乳品安全越来越受到人们的重视，随着“三鹿”三聚氰胺等一系列乳品事件的发生，人们对牛乳中添加的有害化学物质有了更多有效的检测方法。然而牛乳中存在着大量的有害微生物，尤其奶牛乳腺炎一直影响着牛奶的品质，困扰着奶牛业的健康发展，并对人类健康造成危害。作为奶牛乳腺炎的主要致病菌无乳链球菌，有必要对其进行更加深入的研究，包括对其表面蛋白的研究。本文就无乳链球菌的公共卫生意义、表面蛋白及其pgk基因的研究状况进行综述，为以后同行检测发生乳房炎的病乳提供科学的参考资料，从而保证人们喝到安全健康的牛奶。

摘要： @@应用PCR方法扩增出胎儿弯杆菌表面蛋白基因(SapA)的2个基因片段SapA-N(1390bp)和SapA-C(1403bp)，采用DNA重组技术，将2个基因片段分别连于表达载体pET32a(+)，并在大肠杆菌中诱导表达(rSapA-N和rSapA-C)，用金属鳌合层析的方法纯化蛋白。Western blot 分析了重组蛋白的免疫学活性，ELISA 试验探讨了2 种蛋白用于胎儿弯杆菌病血清学诊断的可能性。

摘要： 金黄色葡萄球菌是引起全世界范围内奶牛乳房炎的主要原因之一,研制针对金黄色葡萄球菌的疫苗成为防控奶牛乳房炎的重要措施之一.基因工程疫苗与全菌体灭活疫苗相比有高安全性、高稳定性、低副作用等优势,其研究重点是选择高效的免疫抗原靶位,而金黄色葡萄球菌细表面蛋白在金黄色葡萄球菌感染过程中发挥着重要作用,因此本文对表面蛋白的结构与功能,以及其相关疫苗的研究进行了综述.

摘要： 为观察细胞因子和CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)对隐孢子虫核酸疫苗的免疫佐剂效应，将牛IL-18、IFN-γ单独或和CpG-OND序列组合，与隐孢子虫鼠基因型(Cryptosporidium mousegenotype)子孢子表面蛋白CPl5基因串联并克隆到真核载体pVAX-1中，构建了4个核酸疫苗，加上pVAX1-CP15和含CpG-OND的重组质粒pVAX1-C-CP15，分别免疫BALB／c小鼠，检测其诱导的体液和细胞免疫水平，观察对隐孢子虫鼠基因型感染的免疫保护效果。结果显示，6个核酸疫苗免疫BALB／c小鼠后，小鼠血清特异性抗体IgG滴度随免疫次数增加而升高，极显著高于对照组(P<0.01)。CD4+和CD8+T淋巴细胞百分率、T淋巴细胞增殖反应、细胞因子IL-18和IFN-γ的分泌水平均显著升高，其中，串联有分子免疫佐剂的核酸疫苗免疫组小鼠上述各项指标均显著高于不含分子佐剂的核酸疫苗组(P<0.05);双分子佐剂组与单分子佐剂组相比能诱导小鼠产生更强的体液和细胞免疫反应(P<0.05)。感染小鼠粪便中卵囊的realtime PCR检测显示，与对照组相比，试验组小鼠隐孢子虫卵囊首次排出时间延后、持续时间缩短、排出的总卵囊量极显著减少(P<0.01)，减卵率达到87％～100％，其中串联有分子佐剂疫苗组小鼠的减卵率极显著高于不含佐剂疫苗组(P<0.01);串联有双分子佐剂疫苗组小鼠的减卵率更高达100％，极显著高于单分子佐剂疫苗组(P<0.01)。表明上述3种分子佐剂与隐孢子虫CP15抗原基因串联后制备的核酸疫苗免疫小鼠后，诱导产生了良好的体液和细胞免疫反应，对小鼠隐孢子虫人工感染具有良好的保护效果，两种分子佐剂的免疫增强效果又好于单种分子佐剂的作用。

摘要： 本研究提取牛源犬新孢子虫基因组DNA，应用PCR技术扩增犬新孢子虫表面蛋白基因NcSRS2和致密颗粒蛋白基因NcGRA7，SOE-PCR技术拼接NcSRS2和NcGRA7基因，构建重组克隆质粒pMD18-NcSRS2-NcGRA7、重组腺病毒穿梭质粒pCR259-NcSRS2.NcGRA7及重组腺病毒表达质粒Transpose-Ad-NcSRS2-NcGRA7，脂质体介导转染QBI-HEK293细胞，包装重组腺病毒Ad5-NcSRS2-NcGRA7，PCR检测重组腺病毒NcSRS2-NcGRA7融合基因，IFAT和Western blotting检测NcSRS2-NcGRA7融合基因在QBI-HEK293细胞中的表达，TCID50法测定病毒滴度后，接种BALB／c小鼠，间接ELISA检Nd,鼠血清IgG抗体水平，细胞因子ELISA试剂盒检测小鼠血清IFN-γ、IL-4水平。结果，拼接的牛源犬新孢子虫NcSRS2-NcGRA7融合基因大小为1463bp，与GenBank中发表的序列(AF061249、AF176649)同源性为99％;重组腺病毒Ad5-NcSRS2-NcGRA7在QBI-HEK293细胞中包装成功，表达融合蛋白的分子量约为51ku，具有较好的反应原性;测得重组腺病毒Ad5-NcSRS2-NcGRA7滴度为109TCID50／mL;ELISA检测三免后3周的BALB／c小鼠血清中IgG抗体效价达1：4096，细胞因子IFN-γ、IL-4水平与对照组比较差异极显著(p<0.01)。本研究为牛源犬新孢子虫NcSRS2-NcGRA7融合基因重组腺病毒载体疫苗的研制奠定了基础。

摘要： 为探讨寄主变化对东方蜂微孢子虫的影响，本实验用中蜂来源的东方蜂微孢子虫(Nc)连续感染意大利蜜蜂18次后，获得传代孢子Nca18，对传代前后的孢子形态和蛋白进行了比较。结果表明，Nca18成熟孢子较Nc孢子显著短粗。SDS-PAGE显示，Nc与Nca18两种成熟孢子表面蛋白的带型基本一致，均有2条主要蛋白带(31kD和28kD)，另有一34kD的次要蛋白，但Nca18的蛋白量略有减少。

摘要： 本发明涉及重构的肺表面活性剂，其包含脂质载体、天然表面活性剂蛋白质SP-C的多肽类似物与天然表面活性剂蛋白质SP-B的特定的多肽类似物的组合。本发明还涉及其药物制剂及其在治疗或预防RDS和其他呼吸病中的应用。

摘要： 本发明涉及在微生物中异源产生表面活性剂蛋白Lv‑ranaspumin‑1(Lv‑Rsn‑1)预测同种型的经修饰形式，所述表面活性剂蛋白Lv‑Rsn‑1预测同种型的序列是从对来自东北胡椒蛙(Leptodactylus vastus)巢的泡沫蛋白质提取物进行的分析中推理而来。更具体地，本发明涉及以下：两种表面活性剂蛋白，其由Lv‑Rsn‑1预测同种型的经修饰形式组成；两种合成基因，其各自编码Lv‑Rsn‑1预测同种型的所述经修饰形式之一；两种表达盒，其各自包含编码Lv‑Rsn‑1预测同种型的经修饰形式之一的合成基因之一；两种表达载体，其各自包含编码Lv‑Rsn‑1预测同种型的经修饰形式的合成基因之一；以及两种转基因微生物(细菌和酵母)，其各自被所述合成基因之一转化并异源产生Lv‑Rsn‑1预测同种型的经修饰形式之一。Lv‑Rsn‑1尤其具有表面活性剂特性、乳化和分散特性，并且其异源产生使得其能够用于多种应用和工业产品，而无需从来自蛙巢的泡沫中提取。

摘要： 本发明涉及重构的肺表面活性剂，其包含脂质载体、天然表面活性剂蛋白质SP-C的多肽类似物与天然表面活性剂蛋白质SP-B的特定的多肽类似物的组合。本发明还涉及其药物制剂及其在治疗或预防RDS和其他呼吸病中的应用。

摘要： 本申请涉及一种用于确定使用者的角蛋白表面的至少一个物理和/或化学特性的方法和系统，所述方法包括以下步骤：‑接收与所述角蛋白表面的至少一个图像相对应的数据，‑通过对所述图像应用至少一个机器学习模型来处理所述图像，‑返回与所述角蛋白表面的要确定的特性的评分等级相对应的至少一个数值。

摘要： 本发明涉及一种使用源自乳杆菌的两种启动子能够在微生物表面上共表达两种不同的靶蛋白的载体和使用该载体在微生物表面上表达靶蛋白的方法。将包含插入其中的外源基因的载体转化到微生物中，并使不同的外源蛋白在该微生物的表面上稳定地表达。此外，本发明涉及一种包含编码聚‑γ‑谷氨酸合成酶复合物的基因pgsA的表面表达载体以及使用该载体在微生物表面上表达靶蛋白的方法。将包含插入其中的外源基因的载体转化到微生物中，并使外源蛋白在该微生物的表面上稳定地表达。

摘要： 基于蛋白质表面低熵水合层识别的蛋白质‑蛋白质对接方法及装置，涉及蛋白质‑蛋白质对接结构的预测方法及装置。为了解决目前的蛋白质结构预测方法存在蛋白质对接位点预测不准确的问题。本发明将蛋白质表面疏水基团和含少量氧原子、氮原子的疏水基团以及蛋白质表面形成分子内氢键的某些亲水基团识别为低熵区域。在计算机程序里根据蛋白质表面低熵水合层理论改变蛋白质某些氮、氧亲水原子为疏水碳原子，然后将蛋白质表面切割为多个平面，在每个平面内选出处于疏水连通区域的原子，分别计算每个疏水连通区域表面原子的面积和形状，选出疏水连通面积最大的平面，将该连通区域作为可能的对接位置，对蛋白质‑蛋白质对接位点进行预测。

摘要： 本发明涉及一种解析球虫子孢子表面蛋白指纹图谱的方法及球虫子孢子表面蛋白指纹图谱的应用，属于兽医技术领域。本发明采用生物素标记试剂Sulfo‑NHS‑SS‑Biotin标记子孢子，后用细胞裂解液裂解子孢子，并提取子孢子细胞膜蛋白，将获得蛋白利用链霉亲和素‑琼脂糖亲和纯化，后进行质谱鉴定分析，建立一种有效分离子孢子表面蛋白方法，并阐明子孢子表面蛋白谱组成，为筛选有效表面蛋白抗原，获得具有应用潜力的疫苗候选分子组合奠定基础。

摘要： 本发明涉及一种解析球虫子孢子表面蛋白指纹图谱的方法及球虫子孢子表面蛋白指纹图谱的应用，属于兽医技术领域。本发明采用生物素标记试剂Sulfo‑NHS‑SS‑Biotin标记子孢子，后用细胞裂解液裂解子孢子，并提取子孢子细胞膜蛋白，将获得蛋白利用链霉亲和素‑琼脂糖亲和纯化，后进行质谱鉴定分析，建立一种有效分离子孢子表面蛋白方法，并阐明子孢子表面蛋白谱组成，为筛选有效表面蛋白抗原，获得具有应用潜力的疫苗候选分子组合奠定基础。

摘要： 本发明属于生物医学技术领域，具体公开了基于表面等离子共振成像技术检测非小细胞肺癌外泌体表面蛋白的方法及其应用。所述方法包括：将非小细胞肺癌细胞外泌体注入双通道流动池中，与修饰非小细胞肺癌相关蛋白抗体的SPRi芯片靶向识别与结合；随后加入功能化金纳米颗粒修饰的外泌体特异性抗体，靶向结合SPRi芯片上吸附的外泌体，在芯片表面形成特异性抗体/外泌体/金纳米颗粒的“三明治”结构，通过SPRi分析仪检测非小细胞肺癌外泌体表面蛋白的表达差异性。本发明通过SPRi生物传感平台确定NSCLC来源的外泌体的群体和亚型，在临床应用中具有高灵敏度、免标记和多组分检测的优势。

摘要： 本发明公开了钝齿棒杆菌表面蛋白ProH及其在表面展示系统中的应用。钝齿棒杆菌表面蛋白ProH的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，通过过表达载体pXMJ19在钝齿棒杆菌中表达量高，可将其用于构建高展示效率的钝齿棒杆菌表面展示系统。是以绿色荧光蛋白的编码基因与钝齿棒杆菌表面蛋白ProH编码基因pgsA融合后表达在细胞中，绿色荧光蛋白通过膜结合蛋白ProH展示在细胞的表面。