雪旺细胞

摘要： 雪旺细胞(SCs)具有强大的可塑性.周围神经损伤后,雪旺细胞去分化为修复表型,主导了修复过程.c-Jun氨基末端激酶、有丝分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)等多种信号通路和转录调节因子参与调控雪旺细胞介导的修复程序.本综述讨论了雪旺细胞促进周围神经再生的主要信号通路与转录调节因子.

摘要： 听神经瘤(acoustic neuroma,AN)是起源于内听道前庭神经鞘膜雪旺细胞的良性肿瘤,也称前庭神经鞘瘤(vestibular schwannomas,VS),占桥小脑脚区肿瘤的80%。通常,VS多为单侧孤立性发生,双侧发病患者为2型神经纤维瘤病(neurofibromatosis type 2,NF2),大约5%~10%的VS患者会被确诊为NF2[1]。

摘要： 糖尿病周围神经病变(DPN)是糖尿病最常见的并发症,也是最常见的神经系统疾病。DPN患者有多种表现,包括大神经纤维损伤引起的感觉丧失和肌肉无力,小神经纤维损伤引起的感觉迟钝、疼痛、麻木和植物神经症状。严重时,DPN还会导致剧烈疼痛和皮肤溃疡,甚至威胁患者生命。然而目前尚无批准用于治疗DPN的药物。

摘要： 目的分析柚皮素缓解高糖对雪旺细胞损伤的作用机制。方法使用Bockes改良法从新生3 d的Wistar乳鼠的坐骨神经组织内分离纯化雪旺细胞,将其随机分为5组,A组细胞使用DMEM培养基培养72 h,B组细胞使用含5.6 mmol/L葡萄糖的DMEM培养基培养72 h,C组细胞使用含5.6 mmol/L葡萄糖和20μmol/L柚皮素的DMEM培养基培养72 h,D组细胞使用含5.6 mmol/L葡萄糖和40μmol/L柚皮素的DMEM培养基培养72 h,E组细胞使用含5.6 mmol/L葡萄糖和80μmol/L柚皮素的DMEM培养基培养72 h。对各组细胞培养不同时间的细胞活力和细胞凋亡率、培养72 h后培养液内炎症因子和氧化应激指标水平、培养72 h后NF-κB相关蛋白表达及其mRNA水平进行比较。结果与A组相比,B组、C组、D组、E组细胞培养24、48、72 h的吸光度(A)值均降低;与B组相比,C组、D组、E组细胞24、48、72 h的A值均升高;且随着柚皮素剂量的升高细胞24、48、72 h的A值升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与A组相比,B组、C组、D组、E组细胞培养24、48、72 h的凋亡率均升高;与B组相比,C组、D组、E组细胞24、48、72 h的A值均降低;且随着柚皮素剂量的升高细胞24、48、72 h的凋亡率降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与A组相比,B组、C组、D组、E组细胞培养72 h后培养液内白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-13、丙二醛水平均升高,超氧化物歧化酶(SOD)、基质金属蛋白酶(MMP)水平均降低;与B组相比,C组、D组、E组细胞培养72 h后培养液内IL-4、IL-5、IL-13、丙二醛水平均降低,SOD、MMP水平均升高;且随着柚皮素剂量的升高细胞培养72 h后培养液内IL-4、IL-5、IL-13、丙二醛水平均降低,SOD、MMP水平均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与A组相比,B组、C组、D组、E组细胞培养72 h后NF-κB p65、NF-κB p50相对表达及其mRNA水平均升高,IκBα相对表达及其mRNA水平均降低;与B组相比,C组、D组、E组细胞培养72 h后NF-κB p65、NF-κB p50相对表达及其mRNA水平均降低,IκBα相对表达及其mRNA水平均升高;且随着柚皮素剂量的升高细胞培养72h后NF-κB p65、NF-κB p50相对表达及其mRNA水平均降低,IκBα相对表达及其mRNA水平均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论柚皮素可能通过抑制NF-κB信号通路缓解高糖损伤雪旺细胞过程中的炎症反应和氧化应激反应,进而提高细胞活力,抑制细胞凋亡,且作用效果随剂量的升高而提升。

摘要： 雪旺细胞(SCs)的可塑性潜能因其在神经损伤后和周围神经系统疾病中发挥作用而备受关注。有关免疫细胞和雪旺细胞之间相互作用的研究表明雪旺细胞参与炎症过程。然而,人类雪旺细胞的免疫能力主要是从神经病变中推断出来的,但神经损伤后雪旺细胞是否直接调节适应性免疫反应尚不清楚。本研究对人类修复相关雪旺细胞(hrSCs)的免疫调节能力进行综合分析,hrSCs概括了雪旺细胞对体外神经损伤的反应。我们使用有效的人类周围神经原代hrSCs培养模型,分析了转录组、分泌组、以及细胞表面与先天免疫和适应性免疫相关的通路和标志物相关的蛋白;进行了吞噬作用测定,并监测了同种异体共培养细胞中的T细胞亚群激活。本研究结果表明hrSC具有吞噬作用,这与MHCⅡ的高表达一致。此外,hrSC表达协同调节蛋白,如CD40、CD80、B7H3、CD58、CD86和HVEM,释放过多的趋化因子、基质重塑蛋白、促炎及抗炎细胞因子,并在IFNγ进行促炎刺激后上调T细胞对PD-L1分子的抑制。与单核细胞相反,单独的hrSC不足以触发同种异体CD4+和CD8+T细胞,但会限制外源激活的T细胞的数量和激活状态。本研究表明,hrSCs具有体外专职抗原呈递细胞的典型特征和功能,并表明这些细胞在神经再生过程中作为T细胞免疫负调节剂的新作用。

摘要： 目的:探讨木丹颗粒通过miR-146a调控对糖尿病周围神经病变大鼠TLR4通路的影响。方法:1)动物实验。40只SD大鼠中,设10只为空白对照组,其余制备糖尿病模型大鼠后分为模型组,α-硫辛酸组和木丹颗粒组,每组10只。灌胃给予相应药物,12周后处死并收集坐骨神经。2)细胞实验。将RSC96细胞分为25、150 mM组,150 mM+α-硫辛酸组和150 mM+木丹颗粒(10%,1%和0.1%)组,分别给予相应含药血清孵育48 h后,收集细胞。3)RT-PCR法测定坐骨神经和RSC96细胞的miR-146a表达,RT-PCR法和Western blot法测定坐骨神经和RSC96细胞中TRAF6和IRAK1 mRNA及蛋白表达。结果:动物实验中,与空白对照组比较,模型组miR-146a表达显著降低(P<0.01),IRAK1和TRAF6 mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.01);与模型组比较,木丹颗粒组miR-146a表达显著升高(P<0.01),IRAK1和TRAF6 mRNA及蛋白表达均显著降低(P<0.01)。细胞实验中,与25 mM组比较,150 mM组miR-146a表达显著降低(P<0.01),IRAK1和TRAF6 mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.01);与150 mM组比较,木丹颗粒含药血清组miR-146a表达显著升高(P<0.01),10%和1%木丹颗粒含药血清组IRAK1和TRAF6 mRNA及蛋白表达均显著降低(P<0.01、P<0.05),0.1%木丹颗粒含药血清组IRAK1 mRNA表达显著降低(P<0.05)。结论:木丹颗粒通过促进miR-146a的表达,抑制IRAK1和TRAF6的表达,从而调控TLR4相关通路,抑制炎症反应,防治糖尿病周围神经病变。

摘要： 目的:观察丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)对高糖(high glucose,HG)诱导的雪旺细胞增殖的影响及其对凋亡和炎性相关基因表达的影响.方法:将体外培养的大鼠雪旺细胞(RSC96细胞)分为对照组(5.6 mmol/L葡萄糖)、HG组(125 mmol/L葡萄糖)、HG+Sal B组(125 mmol/L葡萄糖+1μmol/L Sal B).作用72 h后,MTT法检测细胞增殖;流式细胞仪检测ROS(reactive oxygen species,ROS)含量;Western blot法检测凋亡及炎性因子相关蛋白Bax(BCL2-Associated X,Bax)、B细胞淋巴瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、核因子κB P65(nuclear transcription factor kappaB-P65,NF-κB-P65)、白细胞介素1β(Interleu-kin-1β,IL-1β)的表达.结果:1)MTT结果显示:与对照组比较,HG组OD值明显降低(P<0.05),而HG+Sal B组OD值明显高于HG组(P<0.05),提示HG显著抑制雪旺细胞增殖活性,Sal B可以减轻HG导致的雪旺细胞增殖活性的降低.2)流式结果显示:与对照组相比,HG组ROS含量明显增高(P<0.05),HG+Sal B组ROS含量明显低于HG组(P<0.05),提示HG可显著上调ROS含量,丹酚酸B可下调HG导致的氧化应激过度激活.3)与对照组比较,HG组Bax,P65,IL-1β的蛋白表达水平明显增高,Bcl-2表达水平下调(P<0.05);与HG组比较,HG+Sal B组Bax,P65,IL-1β的蛋白表达降低,Bcl-2表达水平上调(P<0.05),这提示Sal B可抑制细胞凋亡及炎性相关蛋白的表达.结论:Sal B可能通过下调细胞凋亡及炎性损伤减轻HG对RSC96细胞的损伤.

摘要： 目的:观察丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)对高糖(high glucose,HG)诱导的雪旺细胞增殖的影响及其对凋亡和炎性相关基因表达的影响。方法:将体外培养的大鼠雪旺细胞(RSC96细胞)分为对照组(5.6 mmol/L葡萄糖)、HG组(125 mmol/L葡萄糖)、HG+Sal B组(125 mmol/L葡萄糖+1μmol/L Sal B)。作用72 h后,MTT法检测细胞增殖;流式细胞仪检测ROS(reactive oxygen species,ROS)含量;Western blot法检测凋亡及炎性因子相关蛋白Bax(BCL2-Associated X,Bax)、B细胞淋巴瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、核因子κB P65(nuclear transcription factor kappaB-P65,NF-κB-P65)、白细胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)的表达。结果:1)MTT结果显示:与对照组比较,HG组OD值明显降低(P<0.05),而HG+Sal B组OD值明显高于HG组(P<0.05),提示HG显著抑制雪旺细胞增殖活性,Sal B可以减轻HG导致的雪旺细胞增殖活性的降低。2)流式结果显示:与对照组相比,HG组ROS含量明显增高(P<0.05),HG+Sal B组ROS含量明显低于HG组(P<0.05),提示HG可显著上调ROS含量,丹酚酸B可下调HG导致的氧化应激过度激活。3)与对照组比较,HG组Bax,P65,IL-1β的蛋白表达水平明显增高,Bcl-2表达水平下调(P<0.05);与HG组比较,HG+Sal B组Bax,P65,IL-1β的蛋白表达降低,Bcl-2表达水平上调(P<0.05),这提示Sal B可抑制细胞凋亡及炎性相关蛋白的表达。结论:Sal B可能通过下调细胞凋亡及炎性损伤减轻HG对RSC96细胞的损伤。

摘要： 目的:观察NgR基因沉默的神经干细胞和雪旺细胞-PLGA支架共移植于创伤性脑损伤大鼠皮层损伤区的运动功能恢复情况.方法:建立大鼠创伤性颅脑损伤模型,分为正常组(Ⅰ组)、单纯PLGA移植组(Ⅱ组)、正常NgR基因的PLGA分子器件移植组(Ⅲ组)、沉默NgR基因的PLGA分子器件移植组(Ⅳ组),每组12只.于皮层损伤区分别植入对应的复合物,并于建模后1、2、3、4周进行改良BBB运动功能评定,并行HE染色观察神经干细胞的存活及分化情况.结果:改良BBB评分Ⅲ、Ⅳ组优于Ⅱ组(P<0.05);Ⅳ组优于Ⅲ组(P<0.05).建模后1个月,损伤区组织HE染色,Ⅲ组、Ⅳ组移植处的空洞较Ⅱ组少,但是Ⅳ组较Ⅲ组明显.结论:NgR基因沉默的NSC和SC-PLGA支架共移植能够明显促进损伤大鼠的神经元轴突再生,并有助于运动功能的恢复.

摘要： 周围神经损伤(peripheral nerves injury,PNI)是口腔临床常见病,极易造成患者功能丧失和美观异常,牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)结合组织工程在PNI修复中的应用是目前研究热点。DPSCs具有来源丰富、提取简单、免疫原性低以及体外增殖率高等优点,其可分化成雪旺细胞(Schwanncs,SCs),SCs具有诱导细胞自噬的能力,且能分泌关键的神经营养因子,如神经生长因子、脑源性神经营养因子、睫状神经营养因子、胶质细胞源性神经营养因子等,有利于神经损伤的修复。不同时期的DPSCs在免疫调节、抗炎作用、神经标志物的表达、血管生成等方面具有差异性,该差异性为神经修复提供了更加多样化的选择。目前,组织工程学的引入为DPSCs提供了更加可控的、可改良的微环境,有利于DPSCs在再生医学和组织工程中的应用发展;然而其仍面临着诸多问题亟待解决,例如干细胞的选择、功能链接的恢复阻碍、轴突再生方向不可控、周围神经系统的调节、修复作用机制尚未阐明等。

摘要： 目的：观察糖络宁对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠和雪旺细胞内质网应激RNA依赖的蛋白激酶样内质网激酶(PERK)通路相关蛋白和mRNA表达的影响. 方法：60只SD雄性大鼠,除空白组外,采用高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ,35mg·kg-1)复制DPN大鼠模型,随机分为模型组,氧化三甲胺组,糖络宁低、高剂量组,连续给药12周.采用苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠坐骨神经病理学改变,免疫荧光染色法检测大鼠坐骨神经中p-PERK,磷酸化的真核翻译起始因子2a(p-eIF2a)和转录活化因子4(ATF4)蛋白的表达;建立高糖诱导的雪旺细胞模型,分为25mmol·L-1葡萄糖组(control),150mmol·L-1葡萄糖组(model),150mmol·L-1葡萄糖+0.1％,1％和10％糖络宁组,分别干预24,48h.采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测细胞中PERK,核转录因子E2相关因子2(Nrf2),血红素加氧酶-1(HO-1),B淋巴细胞瘤-2相关的X蛋白(Bax)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA表达水平. 结果：坐骨神经病理学改变：空白组大鼠坐骨神经有髓神经纤维的髓鞘结构完整致密,形态规则,排列整齐.模型组出现严重脱髓鞘现象,结构松散,形态不规则,排列紊乱.糖络宁组有轻微脱髓鞘现象,结构近似完整,形态近似规则.经积分光密度统计,与空白组相比,模型组降低(P＜0.01);与模型组相比,糖络宁组升高(P＜0.01);坐骨神经中p-PERK,p-eIF2a和ATF4蛋白表达：与空白组比较,模型组表达增加(P＜0.01);与模型组比较,糖络宁组表达减少(P＜0.01).雪旺细胞PERK,Nrf2,HO-1,Caspase-3和Bax mRNA表达水平：与control组比较,同时相的model组中PERK,Bax和Caspase-3mRNA的表达升高(P＜0.05,P＜0.01),与model组比较,同时相的TLN组中表达降低,Nr和HO-1mRNA的表达升高(P＜0.05,P＜0.01). 结论：糖络宁能够减轻坐骨神经组织的病理损伤,其防治DPN的作用机制可能与调节内质网应激时PERK相关途径包括抑制PERK/eIF2a途径同时促进PERK/Nrf2途径有关.

摘要： 目的：观察糖络宁对高糖诱导RSC96细胞中Nrf2,HO-1,Caspase-3和Bax的mRNA表达的影响,从而探讨糖络宁对雪旺细胞细胞凋亡的影响机制,初步推测糖络宁治疗糖尿病周围神经病变可能的机制. 方法：体外建立高糖诱导的雪旺细胞模型,设立25mM葡萄糖组,150mM葡萄糖组,150mM葡萄糖组+10％a-硫辛酸组,150mM葡萄糖组+0.1％糖络宁组,150mM葡萄糖组+1％糖络宁组,150mM葡萄糖组+10％糖络宁组;分别用不同浓度糖络宁作用高糖诱导的RSC96细胞24h和48h后,Trizol法提取各组RSC96中总RNA,并采用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测各组细胞中HO-1,Nrf2,Bax和Caspase-3mRNA表达水平. 结果：作用24h后,与25mM葡萄糖组相比,150mM葡萄糖组中Nrf2,HO-1,Caspase-3BaxmRNA的相对表达量显著提高(P＜0.01);与150mM葡萄糖组相比,各给药组中Caspase-3,Bax和HO-1mRNA的相对表达量均有显著降低(P＜0.01),而Nrf2mRNA的相对表达量显著提高(P＜0.01).作用48h后,与25mM葡萄糖组相比,150mM葡萄糖组中HO-1,Caspase-3BaxmRNA的相对表达量显著提高(P＜0.05),而Nrf2mRNA的相对表达量显著降低(P＜0.01);与150mM葡萄糖组相比,各给药组中Caspase-3,Bax mRNA的相对表达量均有显著降低(P＜0.01),Nrf2mRNA的相对表达量显著提高(P＜0.01),150mM葡萄糖组+0.1％糖络宁组和1％糖络宁组中HO-1mRNA的相对表达量显著提高(P＜0.05,P＜0.01). 结论：结果表明,糖络宁可能通过抗氧化应激从而抗雪旺细胞凋亡,进一步说明糖络宁治疗糖尿病周围神经病变可能的机制为抗氧化应激.

摘要： 目的:研究猪小肠粘膜下层(small intestinal submucosa,SIS)与雪旺细胞RSC96的生物相容性;通过复合RSC96细胞,使SIS负载RSC96细胞分泌的胞外基质和神经生长因子.rn 方法:将RSC96细胞与SIS复合培养,扫描电镜和HE染色检测RSC96在SIS上的生长、增殖情况.复合培养7天后用反复冻融结合0.25％SDS溶液洗涤的方法(以下简称:F-T/SDS法)脱去SIS上的RSC96细胞,联合DAPI染色、DNA凝胶电泳、PicoGreen DNA含量三种方法检测脱细胞效果,扫描电镜观察脱细胞后的材料支架上负载的胞外基质.rn 结果:扫描电镜和HE染色显示RSC96细胞在SIS上生长增殖状态好，呈三维生长;DAPI染色结果显示F-T/SDS法处理的SIS无细胞核的阳性染色，DNA凝胶电泳未见明显的条带，PicoGreen DNA定量显示F-T/SDS法处理的SIS DNA残留量仅为7.85±3.85) ng/mg干重，扫描电镜显示SIS支架材料上负载有RSC96细胞分泌的基质。rn 结论:RSC%与SIS复合生长良好，经过F-T/SDS法处理脱细胞彻底，并保留有细胞外基质成分。

摘要： 目的:观察糖尿病周围神经病变时自噬、凋亡的改变及中药筋脉通的干预作用.方法:采用链脲佐菌素腹腔内注射大鼠和体外高浓度葡萄糖细胞培养的方法造模,Bielschowsky氏改良神经纤维轴索染色和Luxo1 fast blue中性红髓鞘染色观察病理形态,透射电子显徽镜观察起徽结构,MTT法检测细胞增殖活性,TUNEL法评价凋亡,免疫荧光法、Western blot法检测Beclin1、LC3B、磷酸化的Akt、磷酸化的mTOR、caspase-9活化的P35亚基、caspase-3活化的P20亚基的蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测Beclin1-mRNA和LC3B-mRNA的转录.结果:糖尿病时雪旺细胞病理形态改变,轴索皱缩或肿胀,髓鞘板层分离,自噬结构减少,Beclin1蛋白表达下调(P＜0.05),磷酸化的mTOR、P20、P35亚基表达增多(P＜0.05).筋脉通及其君要菟丝子的主要成分槲皮素能够减轻高糖所致雪旺细胞的病理损伤,上调Beclin1蛋白表达;槲皮素尚能够增加自噬体数量、减少凋亡、下调P20亚基(P＜0.05).抑制自噬后细胞死亡增多.结论:糖尿病时雪旺细胞自噬减少、凋亡增多可能是造成周围神经病变的原因之一.中药筋脉通防治糖尿病周围神经病变的分子机制可能与其君药菟丝子主要成分槲皮素增加自噬、减少凋亡、促进增殖有关.

摘要： 目的：通过不同途径移植自体激活雪旺细胞(autologous activated Schwann cells, AASCs),初步评价各种移植途径在修复大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)中的作用和疗效.方法：结扎Wistar成鼠双侧隐神经,一周后取下结扎处远端神经,在体外分离,培养,传代,纯化和鉴定后获得供实验用的AASCs.60只雌性Wistar大鼠用NYUImpactor-II打击器建立T10脊髓损伤模型后随机分为三组,每组20只,造模成功一周后将预先用Hoechst33342标记的AASCs分三种途径分别移植到上述三组大鼠体内:groupI:尾静脉移植.groupII:鞘内移植(经蛛网膜下腔).groupIII:局部损伤处移植.术后采用BBB评分对大鼠行为的功能恢复进行评价.3个月后,进行10％BDA皮质脊髓束(corticospinal tract,CST)顺行示踪标记,标记2周后处死动物,取出损伤处脊髓行10μm快速冰冻切片后,行Cy3荧光探针染色,NF200和HE染色.结果：AASCs在体外可稳定传4代以上并表达s-100抗原.从术后第4周开始,BBB评分在各组间差异具有统计学意义(p＜0.05). 至实验结束时,HE染色显示groupIII中损伤空洞明显小于其余两组,NF200免疫组化染色阳性面积占总面积百分比各组间差异具有统计学意义(p＜0.05).BDA神经示踪显示,groupIII中有较多的再生轴突通过脊髓损伤区,横断面上再生轴突的免疫组化阳性面积各组间差异有统计学意义(p＜0.05).结论：局部损伤处移植AASCs可以有效的保证移植细胞的数量,AASCs通过分泌多种营养因子和桥接损伤轴突再生的作用促进大鼠脊髓损伤后的功能恢复.

摘要： 周围神经损伤是临床上常见的疾病,一旦发生便会影响相应的神经支配区活动,表现为肌肉萎缩,运动障碍,感觉丧失等症状.以自体/异体移植修复的方法由于来源有限/免疫排斥反应等原因受到限制,近年来基于组织工程学发展研究的人工神经导管受到广泛关注.通过NaIO4氧化改性后的双醛细菌纤维素降解性明显提升，雪旺细胞能在较低氧化度的双醛细菌纤维素浸提液中正常生长，具有良好的生物相容性，有望作为神经支架材料。

摘要： 目的：针对糖尿病周围神经病变氧化应激的核心发病机制,以Keap1/Nrf2/Bcl-2途径为切入点,观察糖络宁对高糖环境下雪旺细胞的氧化应激和细胞凋亡的影响,探讨糖络宁防治糖尿病周围神经病变的可能作用机制. 方法：采用150mM葡萄糖培养的雪旺细胞,设立空白对照(Contro1)组,高糖(High Glucose)组,α硫辛酸含药血清(ALA)组,糖络宁含药血清(TLN)组.干预36h后,应用流式细胞仪检测高糖环境下雪旺细胞活性氧自由基和细胞凋亡,应用JC-1探针观察高糖环境下雪旺细胞线粒体膜电势(MMP),应用高内涵分析(HCA)法和Western Blot分析高糖环境下雪旺细胞Keap1/Nrf2通路中Keap1,Nrt2,HO-1和γGCS的蛋白表达的变化以及Bcl-2相关的细胞凋亡调节蛋白Bcl-2,Bax,Cyto C和Caspase-3的蛋白表达的变化. 结果：高糖干预36h后,与25mM Glucose组比较,150mM Glucose组细胞凋亡、ROS含量增加,MMP降低(P＜0.01);与150mM Glucose组比较,糖络宁含药血清能够降低细胞凋亡和ROS含量,增加MMP(P＜0.05或P＜0.01).HCA和Western Blot分析结果显示,与25mM Glucose组比较,150mM Glucose组Keap1,Nrf2,HO-1和γGCS增加(P＜0.01或P＜0.05);与150mM Glucose组比较,糖络宁含药血清能够进一步增加Keap1,Nrf2,HO-1和γGcS蛋白表达(P＜0.01或P＜0.05).与25mM Glucose组比较,150mM Glucose组Bcl-2,Bax,CytoC和Caspase-3蛋白表达增加(P＜0.01或P＜0.05);与150mM Glucose组比较,糖络宁含药血清能够增加Bc1-2蛋白表达,降低Bax,Cyto C和Caspase-3蛋白表达(P＜0.01或P＜0.05). 结论：糖络宁能够抑制高糖环境下雪旺细胞的氧化应激和细胞凋亡,与上调Keap1/Nrf2通路的蛋白表达对抗氧化应激,调控Bcl-2相关细胞凋亡通路的蛋白表达从而抑制细胞凋亡有关.

摘要： 雪旺细胞(schwann cell,Sc)因其在周围神经结构组成中的特殊地位和作用,一直是神经再生领域研究的重点.本实验通过观察Wistar大鼠的外周神经损伤前后雪旺细胞的细胞粘附性变化,对比分析二者的差异并进行DNA甲基化测序,找出细胞粘附性变化的相关基因.进一步揭示了雪旺细胞的细胞粘附性在促进轴突再生、促进再生轴突的髓鞘化以及复神经支配作用方面所起的重要作用.

摘要： 目的:本研究观察糖尿病周围神经病变时自噬表达的改变及中药筋脉通干预的作用. 方法:采用链脲佐菌素腹腔内注射大鼠和体外高浓度葡萄糖细胞培养的方法造模,Bielschowsky氏改良神经纤维轴索染色和Luxol fast blue中性红髓鞘染色观察病理形态,透射电子显微镜观察超微结构,免疫组织化学法和WesternBlot检测Beclin1蛋白表达,MTT检测细胞增殖活性. 结果:糖尿病时周围神经组织病理形态改变,自噬结构减少,Beclin1蛋白表达减少(P＜0.05,P＜0.01),自噬被抑制后体外培养的雪旺细胞的增殖活性减低(P＜0.05,P＜0.01),且随3-MA浓度提高抑制的作用更加明显(P＜0.05). 结论:糖尿病时雪旺细胞自噬表达减少可能是造成周围神经病变的原因之一,中药筋脉通可能通过增加自噬的表达而起到减轻糖尿病周围神经损伤的作用.

摘要： 目的:探讨槲皮素对高糖离体培养的RSC96细胞自噬变化规律的影响. 方法:RSC96细胞培养于含有槲皮素的高糖培养基中,超微结构应用透射电子显微镜观察,用免疫荧光法、Western blot法检测Beclin1、LC3Ⅱ、磷酸化的Akt及磷酸化的mTOR蛋白表达,用实时荧光定量PCR法检测Beclin1-mRNA和LC3B-mRNA的转录. 结果:高糖造成RSC96细胞Beclin1和LC3Ⅱ的表达下调,增加Akt和mTOR的磷酸化水平(P＜0.05,P＜0.01),造成病理形态改变,减少自噬体数量.槲皮素能够上调Beclin1和LC3Ⅱ的表达,下调Akt和mTOR的磷酸化水平(P＜0.05,P＜0.01),修复病理损伤,增加自噬体数量. 结论:槲皮素通过下调Akt-mTOR途径磷酸化水平而增加高糖培养RSC96细胞的自噬.

摘要： 本发明提供用于通过将多核苷酸特异性递送到施旺细胞并实现施旺细胞特异性表达来治疗和预防与施旺细胞相关的疾病的病毒载体。本发明在Charcot‑Marie‑Tooth疾病和其他脱髓鞘性神经病的治疗和预防中具有特别的应用。优选的载体是具有来自髓鞘蛋白零(Mpz，P0)或最小Mpz启动子的施旺细胞特异性启动子的腺苷相关载体(AAV)。

摘要： 本发明涉及一种雪旺细胞来源外泌体的用途、诱导剂和试剂盒，本发明研究发现，雪旺细胞来源外泌体能够用于诱导骨髓间充质干细胞分化为雪旺细胞。本发明证明雪旺细胞来源外泌体可有效诱导骨髓间充质干细胞分化为雪旺细胞，可用于制备诱导骨髓间充质干细胞向雪旺细胞分化的诱导剂和试剂盒。

摘要： 本发明涉及细胞生物学技术领域，特别涉及一种裸鼹鼠雪旺细胞的分离纯化和培养方法。本发明综合使用多种培养基从裸鼹鼠胎鼠脊髓DRG神经节中分离并纯化培养雪旺细胞，摸索出了适于变温的啮齿类哺乳动物裸鼹鼠雪旺细胞的合理培养方法。本发明方法能够简便、高效、经济的获得大量功能活性正常的裸鼹鼠雪旺细胞，低氧条件下的培养能够保证这种细胞在离体环境中依然能够保持在体状态下的生物学特性，从而便于直接在纯净的体外细胞培养模型中进一步研究裸鼹鼠雪旺细胞的特殊生理功能，从而为探索其中的生物学机制并应用于临床相关领域提供重要的理论依据。

摘要： 本发明公开了一种雪旺细胞的培养方法，包括如下步骤：S1.脐带血单个核细胞经MSCs培养基培养得到P1代脐带血MSCs；S2.P1代脐带血MSCs经神经球培养基培养收获P3代神经球；S3.P3代神经球经雪旺细胞培养基培养得到雪旺细胞。本发明的有益效果：本发明所述的雪旺细胞的培养方法，是经过nestin+神经球阶段的培养脐带血MSCs来源的雪旺细胞的方法。采用P1代脐带血MSCs诱导神经球形成，神经球形成率高达41%。本发明还提供了具体的神经球培养基，足以诱导脐带血MSCs形成nestin+神经球；提供了具体的nestin+神经前体细胞向雪旺细胞分化得培养方案，能显著促进nestin+神经前体细胞贴壁和迁移，防止细胞增殖过程中成团和多层生长。

摘要： 本发明提供包含5’端特定种子碱基序列的miR的应用、改良的雪旺细胞及其应用，涉及中枢神经系统损伤修复技术领域。包含5’端特定种子碱基序列的miR在促进雪旺细胞与星形胶质细胞相容整合中的应用，所述5’端特定种子碱基序列为UAAGGCAC或AAGGCAC。实验表明，雪旺细胞中人为提高包含5’端特定种子碱基序列的成熟体miR表达水平后，改良的雪旺细胞中胶质细胞相关基因表达显著降低，NT‑3和BDNF神经营养因子基因表达显著提高，且改良的雪旺细胞与星形胶质细胞相容整合。所述改良的雪旺细胞能够抑制星形胶质细胞的细胞，促进雪旺细胞和星形胶质细胞间相互整合，进而降低星形胶质细胞导致的胶质瘢痕形成。

摘要： 本发明公开了一种MSCs来源的雪旺细胞制备试剂盒，包括SCs无血清基础培养基、SCs培养添加剂1、SCs培养添加剂2及SCs培养表面包被液，其中，SCs无血清基础培养基为含有B27，无动物源成分血清替代品，人二氢睾丸酮，L‑谷氨酰胺的DMEM/F12；SCs培养添加剂1为含有重组人碱性成纤维细胞生长因子、重组人表皮生长因子、全反式维甲酸的DMEM/F12；SCs培养添加剂2为含有重组人碱性成纤维细胞生长因子、毛喉素、重组人血小板来源生长因子AA、重组人神经胶质细胞生长因子‑2的DMEM/F12；SCs培养表面包被液为含有重组人层黏连蛋白、重组人纤黏连蛋白、重组人调蛋白‑β1的DMEM/F12。本发明提出的雪旺细胞制备试剂盒，具有操作简单、无动物源成分的优势，获得的SCs均一性好、产率高。

摘要： 本发明公开了一种复合低温冻存体系冷冻雪旺细胞的方法。包括以下步骤：将氨基酸类凝胶因子加热溶于细胞培养基中，过滤、除菌，用含有凝胶因子的细胞培养基制备细胞悬浮液；在0‑4°C下向所述细胞悬浮液中滴加含有复合冷冻保护剂的细胞培养基，混合均匀；所述复合冷冻保护剂是由渗透性冷冻保护剂和非渗透性冷冻保护剂的混合；将冻存管放入程序冻存盒在‑80°C下冷冻24h后，再将冻存管移入液氮中冻存。氨基酸类凝胶因子自组装形成的超分子凝胶具有独特的三维网状结构，在滴加冷冻保护剂时，细胞被超分子凝胶所包裹，减小了冷冻保护剂的渗透损伤；在降温和复温过程中，因为超分子凝胶的三维网状结构限制了冰晶的生长和再结晶，从而减小了冰晶损伤。

摘要： 本发明涉及一种雪旺细胞与神经干细胞联合LC‑PLGA导管及其应用，所述雪旺细胞与神经干细胞联合LC‑PLGA导管的连接方法如下：首先将神经断端近心端套入LC‑PLGA导管内，套入长度为1mm，神经断端外膜与神经导管以10‑0缝合线缝合，然后将22.5μlmatrigel、3.75μl雪旺细胞和3.75μl神经干细胞混合物注入导管内，远心端以同样的方法处理，导管内神经断端间距为5mm。本发明还包括雪旺细胞与神经干细胞联合LC‑PLGA的应用，应用于神经修复。本发明制备的上述修复神经导管具有很好的生物相容性、可降解性；且应用时可很好地促进受损神经的修复，具有很好的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种体外诱导脂肪源性干细胞分化为雪旺细胞的方法，包括以下步骤：1）体外分离脂肪源性干细胞，用含10%胎牛血清的DMEM培养基培养；2）取传代至第3-5代的脂肪源性干细胞，消化，收集细胞；3）将收集的细胞放入含10%胎牛血清的DMEM培养基培养，待其长至70-80%融合时，加入外周神经浸出液诱导；4）诱导1-5d，脂肪源性干细胞分化为雪旺细胞。本发明利用外周神经浸出液来诱导脂肪源性干细胞向雪旺细胞分化，24h后可见大鼠脂肪源性干细胞由原来的扁平单层变化为具有双极的纺锤形。本发明所采用的方法不仅节约了诱导成本，缩短了诱导时间；且方法简便，不需再原代培养雪旺细胞。

摘要： 本实用新型公开了一种雪旺细胞移植用微型注射器，包括握力推板、防滑垫、注射组件、注射腔、固定背架、针管组件、卡接组件和注射端管，所述握力推板的底部端面中央固定安装有注射筒，所述注射筒的内部开设有注射腔，所述注射腔的内部设置有注射组件，且注射组件的一端贯穿握力推板，所述注射筒的外壁一侧安装有固定背架，所述固定背架的端面两侧均安装有卡接组件；该雪旺细胞移植用微型注射器，结构简单，体积小巧；在使用时，方便拿取，防滑效果好；而且，注射腔密封严实，细胞液抽取和注射效果好；同时，能够具有多个针头抽取的功能，从而满足不同的使用情况，而且，多个针头机箱注射液能够提高注射的效率。